人教版高中生物选修1专题二微生物的实验室培养(课件18张(共18张PPT)

1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算：根据配方比例，计算100mL培养基各成分用量。 称量：准确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时动
作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。 溶化：①加水加热熔化牛肉膏；②加入蛋白胨和氯
化钠继续加热；③加入琼脂；④用蒸馏水定容到100mL。 整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致 烧杯破裂。
培养乳酸杆菌时需要添加 维生素 ， 培养霉菌时需要将培养基pH调节为 酸性 ， 培养细菌时需要将pH调节为 中性或微碱性 。
（2）获得纯净培养物的关键是什么？ （3）避免杂菌污染的方法主要包括哪四个方面 （4）什么是消毒、灭菌，常用方法有哪些？
无菌技术包括： （1）对实验操作空间、操作者的衣着 和手进行 清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基 等器具进行 灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操 作应在 酒精灯火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品 相接触。
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形 瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手 时，就可以进行倒平板了。
2、为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微 生物污染培养基。
3、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固 后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置， 既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
灭菌的方法：
1、灼烧灭菌 2、干热灭菌：160-170 ℃ 下加热1-2h。 3、高压蒸汽灭菌：100kPa、 121 ℃下维持15-30min.
6、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤 7、如何倒平板？
三、实验操作

专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
1
（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及 氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需 添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱 性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白 胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
3
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
5
于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
35
㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌

B.石油
C.二氧化碳
D.花生粉饼
解析 自养微生物能利用无机碳源。
12345
解析答案
12345
3.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者
阻止其他种类微生物生长的培养基称做( C )
A.鉴别培养基
B.加富培养基
C.选择培养基
D.基础培养基
解析 选择培养基可选择目标微生物，同时抑制或杀死其他微生物。
灭 干热灭菌 160～170 ℃条件下， 玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属
菌
加热1～2 h
用具等
高压蒸 汽灭菌
在高压蒸汽灭菌锅内， 121 ℃，100 kPa， 灭菌15～30 min
培养基等
紫外线灭菌 30 W照射30 min
小型接种室、接种箱等
活学活用
3.防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。 下列叙述错误的是( B ) A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒 B.接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌 C.在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止
问题导析
解析答案
返回
二 无菌技术
要防止外来的杂菌污染培养物，离不开无菌技术，要防止培养物污染 人体和环境，也离不开无菌技术。 1.目的：防止外来杂菌 的污染。 2.方法：消毒 和 灭菌 。
知识梳理
项目
消毒
灭菌
概念
使用较为温和的 物理或化学方法 杀 死物体表面 或 内部 的部分微生物(不 包括 芽孢 和 孢子)
解析答案
12345
4.不同的微生物对营养物质的需要各不相同，但一般都需要水、碳源、 氮源和无机盐。下列有关微生物所需营养物质的描述，正确的是( ) A.氮源物质只能为该微生物提供必要的氮元素 B.有些碳源也可以给微生物的生长提供能源 C.无机盐是微生物不可缺少的营养物质，所以无机盐越多越好 D.固体培养基中不含水分

课题目标：
a.了解有关培养基的基础知识； b.进行无菌技术的操作； c.进行微生物的培养。
一、基础知识
（一）培养基
1.概念：由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营
养基质。
2.种类
主要用于微生物的
分离、计数等
需加入凝固 剂，如琼脂
固体培养基
主要用于工业生产
液体培养基
半固体培养基 主要用于观察微生物
(2)灭菌的方法：
①灼烧灭菌：接种环、接种针、试管口、瓶口
• 1、所有高尚教育的课程表里都不能没有各种形式的跳舞：用脚跳舞，用思想跳舞，用言语跳舞，不用说，还需用笔跳舞。 • 2、一切真理要由学生自己获得，或由他们重新发现，至少由他们重建。 • 3、教育始于母亲膝下，孩童耳听一言一语，均影响其性格的形成。 • 4、好的教师是让学生发现真理，而不只是传授知识。 • 5、数学教学要“淡化形式，注重实质.
问题讨论：
待酒精燃尽后 冷却8～10s
用涂布器将菌液均匀 地涂布在培养基表面。 涂布时可转动培养皿， 使涂布均匀
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀 释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？
应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要 合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等。
③左手将培养 皿打开一条缝隙 ，右手将培养基 倒入培养皿，立 刻盖上皿盖。
④待平板 冷却凝固后 ，将平板倒 过来放置。
（二）纯化大肠杆菌 最常用的接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法。 1.平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作, 将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面。
在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见 的子细胞群体,这就是菌落。