紫外分光光度法测定苯酚滴耳液中苯酚的含量摘要目的：探讨苯酚滴耳液中苯酚含量测定的简便方法。
方法：采用称量法取样和紫外分光光度测定法。
结果：标准曲线在15~45mg/L范围内线性关系良好（r=0.9999），测得8批的平均回收率为100.42%，RSD为0.68%。
结论：方法准确可靠，简便易行，回收率高，适用于该制剂的快速测定。
关键词苯酚滴耳液；苯酚；紫外分光光度法苯酚滴耳液是医院常用制剂，具有消炎、止痛的作用。
临床上主要用于中耳炎和外耳道炎的治疗。
中国药典和中国医院制剂规范规定，其含量测定采用溴量法[1,2]，但该法操作较为繁琐，测定结果易受一些因素的干扰，不能完全满足制剂快速检验的需要。
本文采用紫外分光光度法测定苯酚的吸收度，用吸收系数计算苯酚含量，方法简便可行，结果准确，现报告如下。
1仪器和试剂SP-752双光束紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司），苯酚滴耳液（本院制剂室自制），苯酚（分析纯，石家庄有机化工厂），甘油（医药用，浙江遂昌惠康药业有限公司）2处方和制备2.1处方苯酚20g,甘油适量[3]。
2.2制备取本分加入适量甘油中，搅拌至溶解，再加甘油使成1000ml。
摇匀，即得。
3试验方法3.1紫外吸收光谱精密称取苯酚3.2mg，置于100ml量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，得溶液⑴；精密量取甘油4ml，同法得溶液⑵。
以水为空白，在分光光度计上于200~400nm波长范围内扫描，得溶液⑴⑵的UV吸收曲线（图1），结果苯酚在270±1nm处有最大吸收，而甘油在此处吸收度很小，与有关文献报道[4]一致。
图13.2精密量取样品10ml，置250ml量瓶中，用蒸馏水洗涤移液管数次，合并洗涤液置容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为储备液。
精密量取储备液4ml，置100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
以甘油同法稀释的溶液做空白，在270±1nm波长处测定吸收度，以苯酚溶液吸收度对浓度的回归方程计算苯酚含量。
一、实验目的1. 熟悉紫外分光光度法的基本原理和操作方法。
2. 掌握苯酚在紫外光区域的吸收特性。
3. 通过紫外分光光度法测定水样中苯酚的含量。
二、实验原理紫外分光光度法是一种利用物质在紫外光区域吸收特定波长的光而进行定量分析的方法。
苯酚分子中含有共轭双键，在紫外光区域具有特定的吸收峰，通过测定苯酚溶液在特定波长下的吸光度，可以计算出苯酚的浓度。
实验原理如下：1. 根据比尔定律，吸光度A与溶液的浓度c和光程L成正比，即A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数。
2. 通过绘制苯酚标准溶液的吸光度-浓度曲线，得到苯酚的摩尔吸光系数。
3. 测定水样中苯酚的吸光度，根据吸光度-浓度曲线计算苯酚的浓度。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外可见分光光度计、石英比色皿、移液管、容量瓶、烧杯、玻璃棒等。
2. 试剂：苯酚标准溶液（浓度为 1.00mg/mL）、蒸馏水、无水碳酸钠、氢氧化钠、硫酸、盐酸等。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制（1）取6个50mL容量瓶，分别加入0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度线。
（2）将标准溶液置于石英比色皿中，在270-295nm波长范围内，每隔10nm测定一次吸光度。
（3）以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-浓度曲线。
2. 样品测定（1）取适量水样于50mL容量瓶中，加入适量无水碳酸钠和氢氧化钠，使水样pH 值调节至碱性。
（2）加入适量硫酸，使水样pH值调节至酸性。
（3）加入适量盐酸，使水样pH值调节至中性。
（4）按照标准曲线绘制步骤，测定水样中苯酚的吸光度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-浓度曲线，得到苯酚的摩尔吸光系数为ε = 1.85×10^4 L·mol^-1·cm^-1。
2. 样品测定测定水样中苯酚的吸光度为0.576，根据吸光度-浓度曲线计算得到苯酚浓度为0.012mg/L。
3.紫外分光光度法测定苯酚实验四紫外分光光度法测定苯酚1.⽬的要求⒈学会使⽤UV-2102PC型紫外可见分光光度计。
⒉掌握紫外光谱法定量分析⽅法与原理。
2．基本原理苯酚在220-380nm处具有特征吸收，因此其含量可⽤紫外分光光度计作测定，不需进⾏显⾊反应，⽅法简便，快速，且准确度⾼。
3. 仪器与试剂⒈仪器：UV-2102PC型紫外可见分光光度计； 10mL吸量管1只； 50mL容量瓶7个； 100mL容量瓶5个。
2.试剂：0.250g/L苯酚标准溶液准确称取25.0mg分析苯酚，溶于适量⽔中，全部转移⾄100mL容量瓶中，⽤纯⽔稀释⾄刻度，摇匀。
4. 实验步骤⒈绘制吸收光谱图和选择测量波长⽤吸量管取4mL0.250g/L苯酚标准溶液于50ml容量瓶中，⽤纯⽔稀释⾄刻度，摇匀。
此溶液在UV-2102PC型紫外可见分光光度计上，⽤1cm⽯英液槽，以纯⽔为参⽐溶液，于波长220-380nm范围内，分辨精度1nm，绘制吸收光谱图，并选择测量波长λmax.⒉绘制标准曲线取5只50mL容量瓶，由吸量管分别加⼊ 2.00、4.00、6.00、8.00、10.0mL0.250g/L苯酚标准溶液，以纯⽔稀释⾄刻度。
摇匀。
得⼀系列苯酚标准溶液。
⽤1cm⽯英液槽，以纯⽔为参⽐溶液，在选定波长处测上列各标准溶液的吸光度。
绘制标准曲线。
⒊试样溶液的测定⽤移液管取适量试样溶液于50mL容量瓶中,按上述步骤2配制溶液并测定吸光度。
平⾏测定⼆份。
（⿊体字部分实验报告中请按⾃⼰实际操作撰写）5．数据处理⒈根据实验所苯酚吸收光谱曲线，运⽤理论知识根据吸收谱带的位置形状及吸收强度（摩尔吸光系数），对所做谱图进⾏解析，判断苯酚紫外光谱的吸收带与跃迁类型。
2绘制标准曲线，并由曲线求算试样溶液中苯酚量（mg/L）. 6．问题讨论本实验测定时能否⽤玻璃液槽代替⽯英液槽盛放溶液，为什么？紫外光谱实验参考⽂献紫外及可见光谱包括有⼏个谱带系，不同的谱带系相当于不同电⼦能级的跃迁。
