实验三 茎尖培养技术
- 格式:ppt
- 大小:3.92 MB
- 文档页数:13
植物的茎尖培养姓名: 李希东专业: 植物学学号: 200808201 日期: 2009.4.25 成绩:一、实验目的:1. 掌握茎尖培养的原理和方法;2. 练习使用实体显微镜剥离茎尖;二、实验原理:植物细胞具有全能性,即每个植物细胞含能产生完整植株的全部遗传基因。
理论上讲,只要条件合适,含全部遗传基因的细胞都能分裂分化,产生完整植株。
在茎尖和根尖的分生组织中一般是无毒或仅含极低浓度的病毒粒子,而较老的组织中,病毒含量随离茎尖距离的增加而提高。
据此原理采用茎尖组织培养可获得无毒植株。
三、实验材料、器皿:实验材料:冬青顶芽实验器皿:高压蒸汽灭菌锅、电子天平、微波炉、三角瓶、培养皿、超净工作台、实体显微镜、酒精灯、烧杯、量筒、移液器、pH试纸、橡皮筋、解剖针、滤纸、剪刀、容量瓶、长柄镊子、酒精四、实验步骤:1.培养基配制配制母液:(按照培养基配方,配置不同扩大倍数的培养基母液)大量元素:母液扩大20倍;微量元素:母液扩大1000倍;CaCl2·2H2O:母液扩大100倍;铁盐:母液扩大200倍。
培养基配制方案:1. MS2. MS+BA 0.5 mg/L3. MS+BA 0.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L4. MS+BA 1.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L5. MS+BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L6. MS+BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L按方案依次加入大量元素、微量元素、铁盐和有机物质,加入蔗糖30g/L,琼脂6.0g/L,肌醇50mg/L,水解乳清蛋白300 mg/L,和不同浓度的激素,定容到400ml,混合后微波炉加热溶解,再按配方加入各种激素,调节pH值为5.8-6.0,分装到锥形瓶中,每瓶20-25ml,用锡箔纸封口。
本实验选取1,4,6号培养基。
2. 灭菌:高压锅灭菌,121℃,保温20min,冷却,凝固,用于实验。
3. 接种(实体显微镜剥离茎尖-接种)(1)材料表面消毒:植物茎尖(顶芽或侧芽)用自来水水冲净,70%的酒精漂洗材料半分钟,然后放入0.1%的升汞中进行表面消毒8-10min,用无菌水冲洗材料3-5次。
茎尖培养脱毒的原理茎尖培养是将植物茎尖作为外植体在无菌条件下进行培养的技术。
这种技术可以用于脱毒、繁殖、遗传改良等方面。
在进行茎尖培养时,需要采用无菌的培养基,包括营养盐和植物生长因子,以支持植物的生长和分化。
虽然茎尖培养可以提高植物繁殖率,促进遗传改良,但植物在自然环境中存在各种病毒和微生物的感染,如果不加以处理,这些感染会对植物生长产生不良影响。
因此,为了保证繁殖的品质和数量,需要进行脱毒处理。
茎尖培养脱毒的原理是通过对植物进行体细胞培养和细胞选择,帮助植物去除体内的病毒和微生物。
茎尖培养可以分为四个步骤:外植物质的选择、外植物的消毒、外植物体的消化和茎尖的培养。
第一步是外植体的选择。
首先需要选择健康的植物组织作为外植体进行培养,最好是从没有感染过病毒和微生物的植株中选取。
要选择完整、无损伤、新生的芽或茎尖,以保证外植体的健康和完整性。
第二步是外植体的消毒。
在消毒前需要将外植体剪成适当大小并于无菌实验室中进行操作。
将外植体浸泡于含有消毒剂的溶液中,如70%酒精、0.1%汞溴素、0.1%过氧化氢等,在消毒前也需要去除外植体的表层污垢。
消毒的目的是避免残留的病毒和微生物在培养培养过程中再次感染植株,从而保证培养过程的无菌。
第三步是外植体的消化。
在消毒后,外植体的细胞壁依然存在,需要进行消化,使得细胞易于分离和重新生长。
可采用不同的消化酶,如植物生长调节剂,酶解作用可以促进外植体的细胞分离。
这种操作可以改变细胞壁的结构,使得外植体的细胞容易分离和重新生长。
消化过程中要慎重,避免过度消化。
第四步是茎尖的培养。
在消化完成后,取出外植体中的营养组织或茎尖,置于培养基上进行培养和分化。
在培养的过程中要注意维护培养基的无菌和营养条件,以支持茎尖生长和分化。
茎尖要发生新的细胞分化,从而产生更多的细胞,从而最终保证植株生长健康。
总之,茎尖培养脱毒是一种重要的技术。
它可以将健康的植物组织进行体细胞培养和细胞选择,清除体内的病毒和微生物。
第1篇一、实验目的1. 掌握茎段培养的方法和技术,理解茎段培养形成幼苗的基本原理。
2. 学习并操作茎尖剥离的技巧,认识茎尖生长点的形态特征。
3. 了解不同植物激素对茎段生长的影响。
二、实验材料与仪器1. 材料:某植物幼嫩茎段、茎尖、愈伤组织诱导培养基、再生培养基、植物激素(生长素、赤霉素等)。
2. 仪器:无菌操作台、剪刀、镊子、解剖针、显微镜、培养箱、天平、酒精灯、高压灭菌锅等。
三、实验方法1. 茎段培养(1)选取健康的某植物幼嫩茎段,剪成约1-2cm长的切段。
(2)将切段放入75%酒精中消毒30秒,再用无菌水冲洗3次。
(3)将切段接种到愈伤组织诱导培养基中,置于培养箱中培养。
(4)观察并记录愈伤组织的形成和生长情况。
2. 茎尖剥离(1)选取健康的某植物茎尖,用解剖针剥离出茎尖生长点。
(2)将茎尖生长点放入75%酒精中消毒30秒,再用无菌水冲洗3次。
(3)将茎尖生长点接种到再生培养基中,置于培养箱中培养。
(4)观察并记录茎尖生长点的生长情况。
3. 植物激素对茎段生长的影响(1)将茎段接种到含有不同浓度生长素和赤霉素的培养基中。
(2)置于培养箱中培养,观察并记录茎段生长情况。
四、实验结果与分析1. 茎段培养结果经过一段时间的培养,愈伤组织诱导培养基中的切段逐渐形成愈伤组织,并逐渐生长。
2. 茎尖剥离结果经过一段时间的培养,再生培养基中的茎尖生长点逐渐生长,形成新的植株。
3. 植物激素对茎段生长的影响(1)生长素对茎段生长的影响:低浓度生长素能促进茎段生长,高浓度生长素则抑制茎段生长。
(2)赤霉素对茎段生长的影响:赤霉素能促进茎段生长,其促进作用随浓度增加而增强。
五、实验结论1. 通过茎段培养实验,掌握了茎段培养的方法和技术,理解了茎段培养形成幼苗的基本原理。
2. 通过茎尖剥离实验,学习了茎尖剥离的技巧,认识了茎尖生长点的形态特征。
3. 通过植物激素对茎段生长的影响实验,了解了生长素和赤霉素对茎段生长的促进作用及其浓度依赖性。
实验名称:茎尖培养实验课程名称:植物组织培养学学院:生命科学学院专业班级:植物科学专业姓名:[你的姓名]小组成员:[小组成员姓名]日期:[实验日期]指导老师:[指导老师姓名]一、实验目的1. 掌握植物组织培养技术的基本原理和方法。
2. 熟悉无菌操作技术,提高实验操作技能。
3. 观察茎尖在培养基上的生长和分化过程,了解植物细胞全能性及再生机制。
4. 分析影响茎尖培养的因素,为植物繁殖和育种提供理论依据。
二、实验原理1. 植物组织培养技术:通过在无菌条件下,将植物器官、组织或细胞等在人工培养基上进行培养,使其再生出完整植株的过程。
2. 茎尖培养:利用茎尖细胞的全能性,将其接种到含有植物激素的培养基上,诱导其分化成完整植株。
3. 植物激素:植物激素在植物生长和发育过程中起着重要作用,如生长素、细胞分裂素等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜植物茎尖、无菌水、70%酒精、无菌滤纸、无菌手术刀、镊子、培养皿、培养箱、显微镜等。
2. 试剂:MS培养基、生长素、细胞分裂素、琼脂、葡萄糖等。
四、实验步骤1. 材料准备:选取新鲜植物茎尖,用70%酒精消毒后,用无菌滤纸吸干水分。
2. 茎尖接种:将消毒后的茎尖用无菌手术刀切成约0.5cm长的小段,接种到含有生长素和细胞分裂素的MS培养基中。
3. 培养条件:将接种后的培养基放入培养箱中,保持温度25℃、光照12小时/天。
4. 观察记录:定期观察茎尖的生长和分化情况,记录生长速度、叶片颜色、根系发育等。
5. 数据分析:对实验数据进行统计分析,分析不同处理对茎尖培养的影响。
五、实验结果与分析1. 茎尖生长:接种后3-5天,茎尖开始生长,出现明显的芽点;接种后7-10天,芽点逐渐增多,茎尖高度达到1-2cm。
2. 茎尖分化:接种后10-15天,茎尖分化出叶片,叶片颜色逐渐变绿;接种后20-25天,茎尖分化出根系,根系发达。
3. 影响因素分析:生长素和细胞分裂素浓度对茎尖培养有显著影响。
利用茎尖培养脱毒苗的原理
利用茎尖培养脱毒苗的原理是通过在无菌环境中培养植物的茎尖,去除植物体内的病毒和细菌,最终得到健康的植株。
这项技术在植物繁殖、育种和保护植物健康方面有着广泛的应用。
这一过程主要包括以下几个步骤:
1.选择健康的母株:选择生长健康、没有病害和病毒感染的母株作为培养材料。
这是确保后续培养的脱毒苗质量的重要一步。
2.表面消毒:采用适当的消毒剂对所采集的茎尖进行表面消毒,以去除表面的微生物污染。
通常使用含氯或含醇的消毒液,例如漂白水或酒精。
3.茎尖切割:在无菌条件下,使用无菌工具对茎尖进行切割。
茎尖是植物生长点的组织,含有高度分化的细胞,有助于培养成新植株。
4.培养基的准备:准备无菌培养基,包括植物生长所需的营养元素、植物激素等。
培养基要保持无菌状态,通常在高温高压条件下灭菌。
5.茎尖培养:将消毒过的茎尖放置在培养基上,利用培养基中的营养物质和植物激素促使茎尖分化和生长。
这个阶段需要严格的无菌操作,以防止外界微生物的污染。
6.分化和生长:在培养基上,茎尖逐渐分化为新的组织,形成新的植株。
这个过程可能需要一段时间,具体取决于植物的种类和培养条件。
7.脱毒:通过检测新植株是否含有病毒和细菌,筛选出脱毒的植株。
通常采用生物学检测或分子生物学方法,例如酶联免疫吸附测定(ELISA)等。
8.移栽:将脱毒的植株从培养基中移植到土壤中,使其继续生长并发育为正常植株。
茎尖培养脱毒
茎尖培养脱毒是一种植物组织培养技术,用于去除植物中的病毒,以获得无病毒的健康植株。
该技术的基本原理是利用植物茎尖生长点的分生组织具有较高的分裂能力和较低的病毒感染率的特点,将茎尖组织切下并进行培养,使其分化成新的植株。
在培养过程中,病毒无法复制,从而达到脱毒的目的。
茎尖培养脱毒的具体步骤如下:
1. 选择健康的植株:选择生长健康、无病虫害的植株作为培养材料。
2. 消毒处理:将植株进行消毒处理,以避免外部病菌的污染。
3. 切取茎尖:用解剖刀或显微镜下的微切割工具切取植株的茎尖生长点。
4. 培养茎尖:将切取的茎尖组织放在适宜的培养基上进行培养,提供适当的营养和环境条件,促使其分化成新的植株。
5. 鉴定和筛选:对培养出的植株进行病毒检测,筛选出无病毒的健康植株。
茎尖培养脱毒技术已广泛应用于果树、蔬菜、花卉等植物的脱毒和育种工作中,是一种有效的植物病毒防治方法。
茎尖培养脱毒法概述茎尖培养脱毒就是采取茎尖分生组织离体培养的方法获取无病毒试管苗,其方法是在解剖镜下,用锋利的解剖刀进行迅速准确地茎尖剥离,因为茎尖分生组织基本不带病毒,利用植物茎尖分生组织进行离体培养,再结合病毒检测,就可以获得无病毒的植株。
茎尖培养中最主要的影响因素就是切取茎尖的大小,一般要求茎尖长度小于1mm。
技术上通常切取茎尖越小,脱毒效果越好,但是茎尖培养成活率变低。
曹为玉等研究发现葡萄茎尖长度与存活率成正相关,与脱毒率成反相关。
当切取茎尖长度为0.2~0.3mm时,存活率为21%~38%,脱毒率为91.4%~97%;当切取0.5mm以上时,存活率为75%~83%,脱毒率仅为70.6%~76.5%。
茎尖培养脱毒法脱毒率高,脱毒速度快,能在较短的时间内得到较多的原种繁殖材料,但这种方法存在的缺点是植物的存活率低。
为了克服这一缺点,现在经常是将茎尖培养与热处理相结合来使用。
茎尖培养与热处理相结合之所以能够提高脱毒效果,是由于热处理可使植物生长本身所具有的顶端免疫区得以扩大,有利于切取较大的茎尖(在1mm左右),从而能够提高培养或嫁接的成活率。
如大樱桃置于45℃的恒温培养室内,培养35天,再切取0.2~0.4mm的茎尖培养,平均脱毒率为98%。
原理茎尖培养脱毒的原理是植物体内病毒靠维管束系统移动,分生组织中没有维管束存在,病毒只靠胞间连丝移动,速度很慢,难以追上生长活跃的分生组织,所以旺盛生长的根尖、茎尖一般都无病毒或很少有病毒分布。
Shoot tip culture of virus-free method OverviewShoot tip culture of virus-free is to take tip meristem in vitro culture methods to obtain virus-free in vitro, and its approach is endoscopic anatomy, with a sharp scalpel to the tip to divest quickly and accurately as meristem tip basic non-virus, use of plant shoot tip meristem culture in vitro, combined with virus detection, it can be virus-free plants.Shoot tip culture in the most important factor is the impact of the cut tip size, tip length is less than the general requirements of 1mm. Technical tip is usually the smaller the cut, the effect of virus-free as possible, but low survival rate of shoot tip culture. Yu Cao, such as for the study found that grape shoot tip length was positively correlated with survival, and virus-free rate as the anti-related. When the cut tip length of 0.2 ~ 0.3mm, the survival rate was 21% ~ 38%, virus-free rate was 91.4% ~ 97%; when cut more than 0.5mm, the survival rate was 75% ~ 83%, virus-free rate only 70.6% ~ 76.5%.Shoot tip culture of the high rate of virus-free method of virus-free, virus-free high speed in a short period of time most of the original species of breeding material,but the existence of the shortcomings of this approach is the low survival rate of plants. In order to overcome this shortcoming, the tip is now often a combination of training and heat treatment to use. Shoot tip culture with a combination of heat treatment have been able to increase the detoxification effect of plant growth as a result of heat treatment can have their own area of the top of the expansion of immunization and is conducive to a larger cut of the tip (in 1mm or so) in order to improve the training or graft survival rate. Such as Cherry thermostat at 45 ℃for indoor training, training for 35 days, and then cut 0.2 ~ 0.4mm of shoot tip culture, with an average rate of 98% virus-free.PrincipleShoot tip culture is the principle of detoxification plant vascular system by mobile viruses, sub-vascular Health Organization does not exist, the virus only plasmodesma moving very slow, it is difficult to catch up with the growth of active meristematic tissue, so strong root growth, shoot tip is generally little or no virus, the virus distribution.。
简述茎尖培养脱毒的操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改,请根据实际需要进行相应的调整和使用,谢谢!并且,本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,如想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!茎尖培养脱毒是一种植物病毒防治方法,通过对茎尖进行无菌操作,培养出无病毒的植株。
茎尖培养的基本原理
嘿,让我们来聊聊茎尖培养的基本原理吧!想象一下,植物就像一个小小的王国,而茎尖呢,就是这个王国里超级重要的一部分。
茎尖培养的原理其实就像是给植物王国进行一次特别的“升级改造”。
我们都知道,植物的茎尖有着非常神奇的力量,那里藏着植物生长和发育的关键信息。
就好像是一个宝藏盒子,里面有着各种让植物茁壮成长的秘密。
通过茎尖培养,我们可以把这个小小的茎尖取出来,放在一个特别的“培养皿家园”里。
这就像是给它提供了一个专属的小天地,让它可以安心地生长和发展。
在这个过程中,茎尖会展现出它强大的生命力,开始分裂、生长,逐渐形成新的植物组织和器官。
可以把茎尖想象成一个小小的“魔法种子”,只要给予它合适的环境和条件,它就能生根发芽,长出全新的植物来。
而且哦,这个魔法种子还很纯净,因为茎尖的细胞一般还没有受到外界的各种“干扰”,所以可以培养出健康、纯正的植物呢。
比如说,我们想要培育出一种特别漂亮的花朵,就可以通过茎尖培养,让它从一个小小的茎尖开始,慢慢长成我们心目中那美丽的模样。
这是不是很神奇呀?就好像我们是植物的魔法师,用我们的魔法让它们变得更加美好!总之,茎尖培养的基本原理就是利用茎尖的神奇力量,让植物开启新的生长之旅,创造出更多的美好和惊喜呢!。