IL-8

IL-8因子介绍最后更新：2008-8-14 阅读次数：13 【字体：小中大】IL-81986年Kownatzki等首先证实了单核细胞可产生一种中性粒细胞趋化因子。

嗣后，不同实验室根据这种因子不同的生物学活性有不同的命名，如中性粒细胞激活蛋白-1(neutrophil-activating protein-1, NAP-1)，单核细胞来源的中性粒细胞趋化因子(monocyte-derived neutrophil chemotactic factor, MDNCF), 单核细胞来源的中性粒细胞激活肽(monocyte-derived neutrophil-activating peptide, MDNAP)，中性粒细胞激活因子(neutrophil-ac-tivating factor, NAF)，中性粒细胞激活肽(neutrophil-activating peptide, NAP)，T 淋巴细胞趋化因子(T lymphocyte chemotactic factor, TCF)和内皮细胞来源的中性粒细胞激活肽(endothelial-derived nentrophil-activating peptide, EDNAP)。

1988年基因克隆成功，属于C-X-C亚族(α亚族)成员，目前文献中多采用名称是IL-8(interleukin-8)/NAP-1。

1.IL-8的产生(1)IL-1、TNF、LPS和PMA均能诱导单核细胞、巨噬细胞、内皮细胞、成纤维细胞和表皮细胞等合成和分泌IL-8。

(2)PHA等丝裂原活化的T细胞也可产生IL-8。

(3)人类多种肿瘤细胞均可高表达IL-8。

其中甲状腺癌、鳞状细胞癌、黑素瘤等可组成性产生IL-8，而星状细胞瘤、肝癌、肾细胞癌等则需在IL-1β或TNF-α等刺激下才合成和分泌IL-8。

2.IL-8的分子结构IL-8分子量8.3kDa，不成熟的IL-8为99个氨基酸，单核细胞产生的成熟IL-8分子主要形式为72个氨基酸，而内皮细胞产生的成熟IL-8分子主要为77个氨基酸。

中文摘要目的脑出血（ＩＣＨ）是指非外伤性脑实质出血，是一种发病率和致死率非常高的疾病。

由于对ＩＣＨ后神经元损伤的病理生理过程缺乏深入的了解，目前仍缺乏有效地治疗ＩＣＨ的方案。

炎性细胞因子的合成和释放发生在局灶脑缺血及创伤性脑损伤的早期。

在实验性中枢神经系统损伤中，炎性细胞因子和其ｍＲＮＡ的产生先于多巨核细胞和单核细胞的渗透，或同时出现，这表明炎性细胞因子和其ｎｆｆｔＮＡ在神经损伤的病理生理过程中起作用。

随着脑出血的发病机制研究的不断深入，多数学者发现炎性细胞因子直接参与了脑出血后许多病理生理过程。

炎性细胞因子是一类具有广泛免疫活性的小分子多肽，由免疫细胞、单核巨噬细胞、淋巴细胞、纤维母细胞、血管内皮细胞等合成，参与绝大部分类型的免疫反应。

现已证实，中枢神经系统具有与外周免疫系统相同的抗原提呈、抗体产生、补体和细胞因子合成及细胞吞噬等免疫应答过程。

应用基因表达分析发现，神经元本身可合成大量的炎性细胞因子及受体，同时表达多种炎性细胞因子受体。

脑损伤及炎症、感染等情况可导致外周免疫细胞进人脑内，或激活神经胶质细胞、神经元等分泌炎性细胞因子，参与脑水肿的发生、发展以及神经元损伤、修复与再生。

目前已经发现，神经胶质细胞与神经元可分泌自细胞介素一ｌ（ＩＬ—１）、白细胞介素一２（ＩＬ一２）、白细胞介素一３（ＩＬ一３）、自细胞介素一４（ＩＬ一４）、白细胞介素一６（ＩＬ一６）、肿瘤坏死因子一Ｑ（ＴＮＦ一旺）、转化生长因子（ＴＧＦ）等，其作用呈现一过性和区域性。

炎性细胞因子对免疫反应等有重要的调节和介导作用。

ＩＬ一２、ＩＬ一８是介导免疫反应的主要炎性细胞因子。

目前，脑血管疾病中有关ＩＬ一２、ＩＬ一８研究较多的是在脑梗塞方面的变化和应用，在ＩＣＩ－ｔ方面的报道较少。

本实验采用未抗凝新鲜自体动脉血注入大鼠尾状核建立ＩＣＨ模型，应用放射免疫法测定ＩＣＨ后各个时间点脑组织中ＩＬ一２、ＩＬ一８含量，同时应用湿重一千重（ｗｅｔ—ｄｒｙｗｅｉｇｈｔ）法测定脑含水量的变化，以探讨ＩＣＨ后血肿周围组织中ＩＬ一２、ＩＬ一８的表达及其意义。

大鼠白介素8(IL-8)酶联免疫分析试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中白介素8(IL-8)含量。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗IL-8抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-8抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的IL-8呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1. 酶联板：一块（96孔）2. 标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为5,000 pg/ml,请先稀释至1,000 pg/ml，再做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释为1,000 pg/ml，500 pg/ml，250 pg/ml，125 pg/ml，62.5 pg/ml，31.2 pg/ml，15.6 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。

如配制500 pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）1,000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

推。

3. 样品稀释液：1×20ml。

4. 检测稀释液A：1×10ml。

5. 检测稀释液B：1×10ml。

6. 检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。

如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

炎症标志物IL6IL8和INFa与冠⼼病的关系炎症标志物IL-6、IL-8和INF-α与冠⼼病的关系[关键词] 冠⼼病；⽩细胞介素-6；⽩细胞介素-8；综述[中图分类号] R541，4 [⽂献标识码] A冠⼼病是严重危害⼈类健康的疾病之⼀，其患病率呈逐年上升趋势。

近年来，越来越多的证据表明，炎症在冠⼼病的发⽣、发展和预后过程中起很重要的作⽤【1】。

冠⼼病作为⼀种炎症性疾病，已经证明低程度的慢性炎症贯穿了动脉粥样硬化的各个阶段，其发⽣是环境因素和遗传因素相互作⽤的结果。

从循环中细胞对动脉内层的浸润到斑块纤维帽的脆性增加，以及最终导致斑块的破裂出现急性冠脉综合征(ACS)，炎症在冠状动脉性疾病(CAD)的发⽣发展中起了关键性的作⽤。

【2】各种促炎和抗炎因⼦如肿瘤坏死因⼦(tumor necrosis factor，TNF)、⽩细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)等所形成的炎性因⼦调节⽹络在CHD 的发⽣、发展过程中可能起着免疫调节作⽤。

【3】动脉粥样硬化(AS)是冠⼼病病理过程的基础，炎症反应贯穿了AS的整个过程，炎症反应的激活可能是导致斑块不稳定⽽导致急性冠状动脉综合征的主要因素，⽽反映局部和全⾝炎症的主要是体内炎症标志物⽔平的变化。

有研究表明病原体的感染可能是冠⼼病的重要病因。

感染可引起全⾝的炎症反应，诱发细胞因⼦IL-6的升⾼，从⽽造成⾎管内⽪功能异常，促进凝⾎，加速动脉硬化。

[4]冠⼼病病⼈缺⾎事件的发⽣常与炎症标志物的变化相⼀致，揭⽰炎症标志物与冠⼼病的关系有很重要的临床意义。

炎症标志物与冠⼼病的发⽣、发展和预后的关系是冠⼼病研究领域的⼀个热点。

⽬前认为⾎管内(内⽪功能受损、氧化应激等)和⾎管外(感染等)因素导致炎症反应的发⽣，炎症反应⼜引起细胞因⼦的产⽣，进⼀步诱导急性时相反应物及⼀些炎症应答相关的效应分⼦的表达，这些物质进⼊循环参与动脉粥样硬化的发⽣、发展，通路中各个指标测定均与冠状动脉意外发⽣的危险性相关。

人IL-8定量分析酶联免疫检测试剂盒IL-8简介：IL-8是由巨噬细胞产生的单核因子，是趋化因子家族C-X-C亚族（α亚族）中的一员，对中性粒细胞、T淋巴细胞、嗜碱性粒细胞具有趋化作用，能够吸附中性粒细胞，嗜碱性粒细胞和T细胞，但是单核细胞除外。

人的IL-8 cDNA 序列表明有99个氨基酸残基。

经过剪节掉22个个残基后，形成成熟的具有77个氨基酸的蛋白。

IL-8还能够调节T 淋巴细胞、B淋巴细胞成熟分化，在炎症反应、免疫调节中起重要作用，并且研究表明IL-8还具有促进血管生成的作用。

IL-8在人体内存在两种主要形式，一种是来源于单核细胞含72个氨基酸的多肽，另一种是来源于内皮细胞含77个氨基酸的多肽。

72aa比77aa的IL-8具有更高的趋化活性，而77aa的IL-8具有诱导白血病细胞凋亡的功能，其位于N端的五肽序列已被确定是IL-8具有诱导凋亡功能的活性部位。

检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-8 的浓度。

IL-8 捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的IL-8 会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。

当加入生物素化的抗人IL-8 抗体后，抗人IL-8 抗体与IL-8 接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。

随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。

生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。

最后加入显色剂，若样本中存在IL-8 将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。

通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，IL-8 浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中IL-8 浓度。

人定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:组分规格预包被板12条或 6条样本分析缓冲液1瓶5ml/3 ml标准品稀释液10ml/5ml标准品2/1（冻干)生物素化抗体1瓶10ml/5mlHRP连接的酶结合物1瓶10ml/5ml浓缩洗涤液 20×30ml/瓶TMB底物1瓶10ml/5 ml终止液1瓶5ml/3 ml封板胶纸3/2张说明书1份标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作：A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可；B.血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；C.血浆标本，推荐用EDTA的方法收集；D. 若待测样本不能及时检测，标本收集后请分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。