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《酶工程》课后知识题目解析第一章酶工程基础1.名词解释：酶工程、比活力、酶活力、酶活国际单位、酶反应动力学①酶工程：由酶学与化学工程技术、基因工程技术、微生物学技术相结合而产生的一门新技术，是工业上有目的地设计一定的反应器和反应条件，利用酶的催化功能，在常温常压下催化化学反应，生产人类所需产品或服务于其它目的地一门应用技术。
②比活力：指在特定条件下，单位质量的蛋白质或RNA所拥有的酶活力单位数。
③酶活力：也称为酶活性，是指酶催化某一化学反应的能力。
其大小可用在一定条件下，酶催化某一化学反应的速度来表示，酶催化反应速度愈大，酶活力愈高。
④酶活国际单位: 1961年国际酶学会议规定：在特定条件(25℃，其它为最适条件)下，每分钟内能转化1μmol底物或催化1μmol产物形成所需要的酶量为1个酶活力单位，即为国际单位（IU）。
⑤酶反应动力学:指主要研究酶反应速度规律及各种因素对酶反应速度影响的科学。
2.说说酶的研究简史酶的研究简史如下：(1)不清楚的应用：酿酒、造酱、制饴、治病等。
(2)酶学的产生：1777年，意大利物理学家 Spallanzani 的山鹰实验；1822年，美国外科医生Beaumont 研究食物在胃里的消化；19世纪30年代，德国科学家施旺获得胃蛋白酶。
1684年，比利时医生Helment提出ferment—引起酿酒过程中物质变化的因素（酵素）；1833年，法国化学家Payen和Person用酒精处理麦芽抽提液，得到淀粉酶；1878年，德国科学家K?hne提出enzyme—从活生物体中分离得到的酶，意思是“在酵母中”（希腊文）。
(3)酶学的迅速发展（理论研究）：1926年,美国康乃尔大学的”独臂学者”萨姆纳博士从刀豆中提取出脲酶结晶，并证明具有蛋白质的性质;1930年，美国的生物化学家Northrop分离得到了胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶结晶，确立了酶的化学本质。
3.说说酶工程的发展概况I.酶工程发展如下：①1894年，日本的高峰让吉用米曲霉制备淀粉酶，酶技术走向商业化：②1908年，德国的Rohm用动物胰脏制得胰蛋白酶，皮革软化及洗涤；③1911年，Wallerstein从木瓜中获得木瓜蛋白酶，用于啤酒的澄清；④1949年，用微生物液体深层培养法进行－淀粉酶的发酵生产，揭开了近代酶工业的序幕；⑤1960年，法国科学家Jacob和Monod 提出的操纵子学说，阐明了酶生物合成的调节机制，通过酶的诱导和解除阻遏，可显著提高酶的产量；⑥1971年各国科学家开始使用“酶工程”这一名词。
三一文库（）〔“酶工程”_暑期科研实践_实习_报告_总结 2100字 - 总结范文〕“酶工程”暑期科研实践总结报告生物科学与工程学院生物工程2班黄义林20xx30742333这次暑期科研实践，我和李洋、黄文潘都参加了有张俊辉师兄所负责的酶分子改造的项目，实际参加实验的时间是7月13至29号，以及8月16至19号。
在此之前，我们还参加了有郑穗平老师和林影老师讲授的关于酶的发展、现状以及前景的讲座，以及内容为负责各个项目的师兄对其项目讲解的培训。
参加实践前的讲座和培训都让我对酶的发展概况、研究方向有了更深刻全面的认识。
实验中，张俊辉师兄让我们从实验的开头开始，逐步学习实验过程中各阶段的实验操作，同时对专业知识进行讲解，让我们更好地掌握实验操作的原理。
在实验流程中，我们的操作都没有出现能直接导致实验失败的失误，但实验最后并没有得到想要的产物，原因应该是多方面的，也和我们的实验操作有很大关系。
实验没有得到很好的成果，但在实践过程中，我学习和掌握了一些基本实验操作技能及操作规范，并对实验室内的规章制度有了更多的了解。
下面说一下我在实验中学到的知识和其他心得体会。
首先是酶分子改造实验的思想：获得待改造酶分子的三维结构后，对其进行分析，从而确定可能改善酶某一方面性能的突变位点，通过反编译获得改造后的酶的基因，把这段基因再表达出来，就得到改造后的酶分子。
思想比较直接，但是实际操作却比较迂回，因为某些步骤看起来不复杂，但在现实中要实现就没有那么简单，比如要确定突变位点和突变的方向，目前的理论对蛋白质结构和功能的研究还达不到可以直接指导酶分子改造的那个层次，所以在改造的时候需要结合理性突变和随机突变，即理性确定突变位点，然后在那个位点进行全突变，或者增加突变位点；要获得反编译后的酶的基因，直接合成成本太高（1bp 要几块钱），所以需要对原来的基因进行操作（设计引物，通过PCR对酶基因进行全突变）；对改造后的酶的基因进行表达，需要利用基因工程技术，我们在实际操作中是先把基因和质粒连接，先转化大肠杆菌以增殖质粒，再从大肠杆菌中提取质粒，转化毕赤酵母进行最终的表达；因为设置多个突变位点以及每个突变位点都有二十种氨基酸，所以需要进行大量的筛选（筛选量随着突变位点的增长而呈指数增长）；基因既看不见有摸不着，在实验过程中需要对每一步的成果进行检测，比较多的就是依靠跑胶来检测DA分子的长度，确定是否得到目的基因，与突变后的酶基因进行连接的质粒上面要有抗生素抗性标记，转化后的大肠杆菌或毕赤酵母要用含抗生素的平板进行培养，以筛选出成功转化的菌落。
一、教学目标1. 让学生了解酶的作用和本质,掌握酶的基本特性。
2. 培养学生通过实验观察和数据分析来探究酶的作用和本质的能力。
3. 引导学生认识酶在生命科学和生物技术领域中的重要应用。
二、教学内容1. 酶的作用:介绍酶的作用机制和类型,通过实例讲解酶在生物体内的应用。
2. 酶的本质:介绍酶的化学本质和结构特点,探讨酶的催化机制。
3. 酶的特性:介绍酶的催化活性、特异性、稳定性和调节性等基本特性。
4. 酶的测定:介绍酶活性测定的方法和技术,以及相关实验操作。
5. 酶的应用:介绍酶在工业、医药、环保等领域的应用,以及酶工程的相关知识。
三、教学方法1. 采用讲授法,系统讲解酶的作用和本质,酶的特性,酶的测定和应用等方面的知识。
2. 采用实验法,组织学生进行酶活性测定实验,培养学生的实验操作能力和实验观察能力。
3. 采用案例分析法,引导学生分析酶在实际应用中的具体实例,提高学生的实际应用能力。
四、教学准备1. 教材、课件和参考资料。
2. 实验器材和试剂:酶标板、酶活性测定试剂盒、pH试纸等。
3. 视频资料:酶的作用和应用的相关视频。
五、教学过程1. 导入新课:通过问题引导,让学生思考酶的作用和本质是什么,引出本节课的教学内容。
2. 知识讲解:系统讲解酶的作用和本质,酶的特性,酶的测定和应用等方面的知识,结合实例进行讲解。
3. 实验操作:组织学生进行酶活性测定实验,引导学生掌握实验操作步骤和注意事项。
4. 实验观察和数据分析:引导学生观察实验现象,分析实验数据,探讨酶的作用机制和本质。
5. 案例分析:分析酶在实际应用中的具体实例,让学生了解酶的应用价值。
六、教学评估1. 课堂问答：通过提问学生对酶的作用和本质、酶的特性、酶的测定和应用的理解，评估学生对知识的掌握程度。
2. 实验报告：评估学生在酶活性测定实验中的操作技能、实验观察和数据分析能力。
3. 作业完成情况：评估学生对课堂所学知识的巩固和应用能力。
七、教学拓展1. 邀请相关领域的专家或企业代表进行讲座，分享酶在实际应用中的经验和案例。
酶的专一性实验报告酶的专一性实验报告引言：酶是一类生物催化剂，能够加速化学反应的进行，而不被消耗。
酶具有高度的专一性，即只对特定的底物起作用。
本实验旨在探究酶的专一性，并通过实验验证酶对底物的选择性。
实验材料和方法：实验所需材料包括：淀粉溶液、淀粉酶溶液、葡萄糖试剂、碘酒、试管、试管架、显微镜等。
实验步骤如下：1. 准备试管，标记为A、B、C。
2. 在试管A中加入淀粉溶液。
3. 在试管B中加入淀粉溶液和淀粉酶溶液。
4. 在试管C中加入淀粉溶液和葡萄糖试剂。
5. 将试管A和B放入恒温水浴中，保持温度恒定。
6. 分别在试管A、B和C中加入碘酒，观察颜色变化。
7. 使用显微镜观察试管A和B中的淀粉颗粒。
结果与讨论：通过观察实验结果，我们可以得出以下结论：1. 在试管A中，淀粉溶液与碘酒反应后呈现蓝黑色，表明淀粉存在。
2. 在试管B中，淀粉溶液与淀粉酶溶液反应后，颜色变为红褐色，表明淀粉酶催化了淀粉的降解。
3. 在试管C中，淀粉溶液与葡萄糖试剂反应后，颜色变为橙黄色，表明淀粉被转化为葡萄糖。
从实验结果可以看出，淀粉酶对淀粉具有专一性，能够催化淀粉的降解，而对其他底物如葡萄糖则无作用。
这说明酶对底物的选择性是由其空间构象和活性位点的特定结构所决定的。
此外，通过显微镜观察试管A和B中的淀粉颗粒，可以发现试管B中的淀粉颗粒明显减少，而试管A中的淀粉颗粒基本未变。
这进一步证明了淀粉酶对淀粉的降解作用。
实验结果的验证和应用：为了验证实验结果的准确性，我们可以进行对照实验。
在对照实验中，可以将试管B中的淀粉酶溶液替换为其他酶溶液，如蛋白酶溶液或脂肪酶溶液。
观察结果发现，只有淀粉酶能够催化淀粉的降解，其他酶对淀粉没有作用。
酶的专一性在生物学和医学领域有着广泛的应用。
通过研究酶的专一性，可以深入了解生物催化的机制，为药物研发和生物工程提供指导。
例如，通过研究特定酶对特定底物的选择性，可以设计出高效的药物靶向传递系统，减少药物对健康组织的损害；还可以利用酶的专一性，开发出高效的酶工程方法，用于生物催化合成和废水处理等领域。
2014-2015学年第二实践学期蛋白质与酶工程综合实训报告专业：生物技术班级： B1204*名：***学号： **********指导教师：***二○一五年七月六日100g/LZnSO4 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 蒸馏水 3 3 3 3 3 0.5 mol/L NaOH 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 充分摇匀，室温下静放5min，过滤，另取5支中试管，同上编号，按下表加入试剂滤液（mL） 1 1 1 1 1 蒸馏水（mL） 2 2 2 2 2 显色液（mL） 0.75 0.75 0.75 0.75 0.75 迅速摇匀，用分光光度计在420 nm 下测定各管A 值。
5支试管在420 nm 下各管A 值分别为0.294、0.278、0.254、0.243、0.180三、实验结果:以尿素终浓度1/C为横坐标，1/A（1/v）为纵坐标作图，然后依1/C找出对应1/A点，将各点连线并延长与1/C轴相交，得- 1/Km ，计算出Km（以x×10-nmol·L-1表示）。
1/C 100 150 200 2501/A 1.01 1.02 1.08 1.12Km值代表酶的亲和力，km值越大亲和力越小，反之则越大。
三、实验结果：测得糖浆液重：45.5g实训三、不同浓度果胶酶对澄清果汁收得率的影响所需药品与仪器：药品：桃子、果胶酶溶液、抗坏血酸溶液、明胶、活性炭。
仪器：榨汁机、水果刀、PH试纸、温度计、定性滤纸、量筒、烧杯、刻度试管、恒温水浴器等。
一、实验原理桃汁中存在的果胶，有很强的保护胶体的作用，能保持稳定的浑浊度，同时，果胶溶液粘度大，如果不加处理，过滤是困难的，而且即使过滤之后，在果汁中所存在的果胶和其它高分子物质，在贮藏中，由于分解、与金属离子结合及其他作用，也会产生凝固沉淀，因此，在过滤之前，必须先进行澄清，常用的澄清方法主要有自然澄清法和热处理法、冷冻法、酶法、加澄清剂法、离心分离法、超滤法等。
一、实验目的1. 探究影响酶活性的主要因素。
2. 分析不同因素对酶活性的影响规律。
3. 掌握酶活性测定的方法。
二、实验原理酶是一种具有催化功能的蛋白质，具有高效性和专一性。
酶活性受多种因素的影响，如温度、pH值、底物浓度、酶浓度等。
本实验主要探究温度、pH值和底物浓度对酶活性的影响。
三、实验材料与仪器1. 材料：淀粉酶、淀粉、蔗糖、葡萄糖、盐酸、氢氧化钠、蒸馏水等。
2. 仪器：恒温水浴锅、移液器、试管、试管架、烧杯、滴定管、酸度计等。
四、实验方法1. 温度对酶活性的影响（1）将淀粉酶溶液分别置于不同温度（如0℃、20℃、40℃、60℃、80℃）的水浴锅中预热。
（2）取等量淀粉溶液，分别加入等量的酶溶液，观察并记录反应时间。
（3）重复实验，计算不同温度下酶的活性。
2. pH值对酶活性的影响（1）将淀粉酶溶液分别用盐酸和氢氧化钠调节至不同pH值（如3、4、5、6、7、8、9、10）。
（2）取等量淀粉溶液，分别加入等量的酶溶液，观察并记录反应时间。
（3）重复实验，计算不同pH值下酶的活性。
3. 底物浓度对酶活性的影响（1）将淀粉酶溶液置于恒温水浴锅中预热。
（2）分别配制不同浓度的淀粉溶液（如0.1g/mL、0.2g/mL、0.4g/mL、0.6g/mL、0.8g/mL、1.0g/mL）。
（3）取等量淀粉溶液，分别加入等量的酶溶液，观察并记录反应时间。
（4）重复实验，计算不同底物浓度下酶的活性。
五、实验结果与分析1. 温度对酶活性的影响实验结果显示，酶活性随温度升高而增加，但在一定范围内（如20℃-60℃）达到最大值后，随温度继续升高而降低。
这表明酶活性受温度的影响，且存在最适温度。
2. pH值对酶活性的影响实验结果显示，酶活性随pH值的变化而变化。
在一定的pH值范围内（如5-7），酶活性较高，而在酸性或碱性条件下，酶活性降低。
这表明酶活性受pH值的影响，且存在最适pH值。
3. 底物浓度对酶活性的影响实验结果显示，酶活性随底物浓度的增加而增加，但在一定范围内（如0.2g/mL-0.8g/mL）达到最大值后，随底物浓度继续增加而降低。
酶工程实验指导西南农业大学农学与生物科技学院2009年3月实验一产蛋白酶菌株的分离一、实验目的学习胞外生产微生物菌种的分离选择，熟悉分离菌种的基本操作。
二、实验原理工业上常用的生产酶的微生物有许多，重要的有枯草杆菌和真菌中的曲霉等等，它们都能产生耐热的芽孢或分生孢子，分离这类菌种时可采取先进行一定的热处理杀灭其它营养细胞，提高该菌株的相对数目。
根据胞外酶能分泌到培养基的特点，采用一定的方法在培养基上形成单菌落分泌的酶形成的“水解透明圈”，可对产酶的微生物的产酶能力（活力）进行初步估计、分离高产酶的微生物。
三、试剂、仪器高压灭菌锅，天平，无菌超净工作台，培养皿（8套/组）、试管（2支/组）、三角瓶、烧杯、酵母膏，蛋白胨，NaCl、琼脂粉，奶粉三、操作步骤1、带菌土壤的热处理称取1g带菌土壤湿润后放入80℃烘箱处理30min。
2、分离选择培养基的配制，各组按下列比例配制120ml培养基：奶粉2g ，自来水50ml，装入50ml三角瓶琼脂1.8g ，NaCl 0.5g，自来水70ml，装入100ml三角瓶自来水50ml，装入50ml三角瓶取50ml烧杯一个，放入5支带帽5ml离心管，灭菌备用。
分别封口，常规灭菌（121℃、20min）,灭菌后待冷却至不太烫手时混合上述液体，按无菌操作要领迅速倒平板8个，其中4个加有0.2ml不同稀释倍数（操作5）的样品液（菌悬液），迅速混合冷却形成平板，余4个平板冷却后用于涂布筛选。
3、稀释制备菌液，取5支灭菌带帽5ml离心管，各加入无菌水3.6ml备用；将热处理过的土壤放入无菌50ml烧杯中，加入无菌水10ml，搅拌后静置片刻，上层液体为微生物悬液，按下法稀释微生物悬液：在第一支试管中加入0.4ml微生物悬液，混合均匀后再取0.4ml到第二支试管中混合，从第二支试管中再取0.4ml到第三支试管中，以此类推。
4、斜面培养基配制：配制100ml LB培养基，加入1.5g琼脂粉、蛋白胨1.0g、酵母膏1.0g、NaCl、1.0g加水到100ml，调节pH=7,加热融化后，各组倒斜面培养基2 支，灭菌备用。
5、涂布培养：取10-2、10-3、10-4、10-5稀释菌液各0.2ml,采用涂布和混合法形成8个平板，倒置后在37℃培养24-48小时，观察水解圈的形成，在无菌条件下将水解圈最大的菌落(水解圈/菌落最大者)转接种于斜面试管中（2支皆接种）在37℃培养。
6、结果是否观察到水解圈，你认为为了分离到高产酶菌株要注意什么问实验二高产蛋白酶菌株的诱变、筛选一、实验目的学习常用的菌株诱变筛选的原理、方法，对已分离的产酶菌株进行诱变，筛选出一个试验用的产酶菌株。
二、实验原理用于发酵生产的微生物，必须是一个良好的品种，为此，应当对分离获得的菌种进行筛选工作。
另外，刚从自然界分离的微生物，可通过诱变的方式，获得优良的，高产的菌种。
微生物诱变的方式很多，可通过物理或者是化学的方式进行诱变。
三、试剂、仪器高压灭菌锅，无菌工作台，培养皿，紫外灯，无菌注射器，琼脂粉，含糖乳粉，接种环，三角瓶4个，细玻璃珠，其余同实验一试剂：0.1M.PH4.6醋酸缓冲液：吸取11.55ml冰醋酸，加蒸馏水倒1000ml(A液)，另取27.29g 醋酸钠加蒸馏水溶解后加倒1000ml(B液)。
取A液25ml, B液24ml,混合,再加蒸馏水50ml,调PH=4.60.1M亚硝酸钠溶液；0.07M的N a2HPO4溶液四、操作步骤1 将装有上述溶液的试剂瓶扎上隔菌膜，常规消毒；另将装有10ml LB培养基的三角瓶中加入少许玻璃珠，同上扎上隔菌膜，常规消毒；另将10ml离心管1只, 5ml离心管10只灭菌备用。
2在一接种有菌种的斜面培养试管中加入2ml 无菌LB培养基，用接种环将菌体刮下，一并转入装有玻璃珠的三角瓶，摇动使菌体分散，操作中注意避免其他微生物的污染。
3取上述菌体悬液1ml到10ml的离心管,加入2ml pH 4.6的醋酸缓冲液和1ml 0.1M的亚硝酸钠溶液，常温下处理10—20分钟，在3500rpm离心5min，上清液顷入废液桶中，沉淀用2ml 0.07M的N a2HPO4悬浮，中止诱变，在上述溶液中加入5ml LB培养基，中间培养3-4h后按实验一方法进行稀释、涂布，筛选。
4 另取菌悬液2ml，放入无菌的培养皿中，在无菌工作台上进行紫外线照射诱变，（15W, 30cm,30-40s）经中间培养后同上法进行筛选。
5按实验一方法配制8个分离筛选平板，用于诱变菌株的分离筛选。
6按下表配制50ml发酵产酶液体培养基：酵母膏0.2%，蛋白胨0.3%，硝酸铵0.5%，k2HPO40.2% , 蔗糖5%，自来水100ml.。
分装入2个50ml三角瓶，灭菌备下个实验用。
实验三发酵液中酶的分离与活性测定一、实验目的学习蛋白酶活性的测定方法。
二、实验原理蛋白酶在一定的温度与pH条件下，水解酪蛋白底物，产生不被三氯乙酸沉定的含有酚基的氨基酸，在碱性条件下，将福林试剂还原，生成钼蓝与钨蓝，用分光光度法测定，计算其酶活力。
酶活性单位的定义：在一定的温度和pH条件下，1min水解酪蛋白产生1ug不被三氯乙酸沉定的酪氨酸的还原能力的活力为一个单位，常以u/ml或u/g表示三、试剂、仪器Folin-酚试剂：0.4M碳酸钠溶液，0.4M三氯乙酸，0.5M N a OH，0.1M HCl0.1M 磷酸缓冲液PH=7.51%酪蛋白溶液，取酪蛋白1.000g，用少量0.5M N a OH润湿，加0.1M 磷酸缓冲液80ml，沸水浴中加热溶解，冷却后用0.1M 磷酸缓冲液定容仪器：高速离心机，分光度计，温控培养摇床，无菌工作台，恒温水浴锅四、操作步骤1按下表配制50ml发酵产酶液体培养基：酵母膏0.2%，蛋白胨0.3%，硝酸铵0.5%，k2HPO40.2% , 蔗糖5%，自来水100ml.。
分装入2个50ml三角瓶，灭菌备用。
（接上一个实验）2 在无菌工作台上将筛选和对照的菌株接入发酵产酶液体培养基，在摇床上培养发酵72小时。
3酶的分离与测定：酶的分离：各取发酵液5ml，在10000rpm*5min条件下离心分离酶液，取2.5ml上清液转入25ml容量瓶，用0.1M 磷酸缓冲液定溶到刻度，作为酶的测定液。
4酶的测定：试管1（空白）酶液1.00ml→→→40℃，2min→→→加三氯乙酸2.00ml，摇匀→→→40℃，10min→→加酪蛋白1.00ml，摇匀→→→取出，静置10min,过滤→→→取1.0ml滤液→→→加碳酸钠溶液5.0ml→→→加Folin-酚试剂1.00ml→→→40℃，显色20min→→于680nm波长，测A作空白试管2（测定）酶液1.00ml→→→40度，2min加酪蛋白1.00ml，摇匀→→→40℃，10min→→加三氯乙酸2.00ml，摇匀→→→取出，静置10min,过滤→→→取1.0ml滤液→→→加碳酸钠溶液5.0ml→→→加Folin-酚试剂1.00mll→→→40℃，显色20min→→于680nm波长，以试管1作空白，测A（需作三个平行试验）五、计算酶活=A*K*4/10*N (u/ml)A 样品的光密度，K 吸光常数上面方法K值应在95—100之间。
实验四淀粉酶的分离及活性测定（备选实验）一、实验目的学习淀粉酶的分离和活性测定方法，比较两株产淀粉酶菌株的产酶能力，观查生淀粉对淀粉酶的吸附作用，了解淀粉酶制剂的制备方法。
二、实验原理淀粉酶是能水解淀粉类物质的许多酶的总称，被水解的淀粉通常要在高温熟化，与生淀粉不作用或作用缓慢，酶的活测定通常是利用淀粉水解后溶液还原能力的增加来予以定量：淀粉+H2O+淀粉酶--------麦芽糖+葡萄糖+糊精等麦芽糖，葡萄糖具有还原能力，可利用3，5，-二硝基水杨酸反应测定溶液的还原力，酶单位定义为在一定条件下（例如在45℃pH6.5）每分钟水解可溶淀粉产生相当于1ug的麦芽糖的还原能力的酶活性为１Ｕ。
生淀粉对淀粉酶具有特殊的吸附作用，（酶－底物相互作用）利用各种处理过的生淀粉吸附淀粉酶后干燥是一种有效的淀粉酶制剂制备方法。
三、试剂、仪器：医用离心机，5ml高速离心机，发酵用培养摇床，灭菌锅，分光光度剂，配套离心试管，1ml，2ml，5ml移液管各2只，水浴锅，长试管，量筒，50ml，100ml烧杯1%可溶淀粉，1 N N a OH，0.2M柠檬酸缓冲液pH=5.6，1mg/ml麦芽糖，3，5，-二硝基水杨酸试剂材料，米根霉，米曲霉发酵液四、操作步骤1酶分离：各取米根霉、米曲霉发酵液10ml 于3000rpm离心5min，取上清液作为酶提取液。
2 生淀粉的处理：取市售淀粉2.0g，用蒸馏水洗涤---3000rpm/3min 离心，反复3次，备用。
3 取5ml清亮酶液，加入处理过的生淀粉，不时摇动吸附5min, 3000rpm/3min 离心,取上清液同上法测定酶活，与未吸附的酶液进行比较，说明生淀粉对淀粉酶是否具有吸附作用4标准曲线制作：取5只大试管，按下表加入各试剂：以麦芽糖ug数作横坐标，A值为纵坐标，作出标准曲线。
3酶总活力测定：取6只试管，按下表加入反应试剂：再取4只试管，编号后按下表进行反应：1、2 代表生淀粉吸附淀粉酶后活力；1＃、2＃代表正常淀粉酶活力；1＃＃、2＃＃代表两个材料的对照；混匀各管，以##为空白，在分别测定1，1#，2，2#的A值，在标准曲线上查出相应的麦芽糖ug数，计算出酶活力：活力=麦芽糖ug数×稀释倍数/5min (单位U/ml)实验5 淀粉的糖化及DE值的测定一目地了解淀粉的水解过程，学会测定水解淀粉的DE值二原理：发酵工业所用的原料作以淀粉或糖质为主，而许多微生物并不能直接利用淀粉。
例如，在以糖质为原料发酵生产氨基酸过程中，几乎所有的氨基酸生产菌都不能直接利用（或只能微弱地利用）淀粉和糊精。
同样在酒精发酵过程中，酵母菌也不能直接利用淀粉或糊精，这些淀粉或糊精必须经过水解制成淀粉糖以后才能被酵母菌所利用。
此外，在抗生素、有机酸、有机溶剂以及酶制剂发酵过程中，大都也要求对淀粉进行加工处理以提供给微生物可利用的碳源。
当然有些微生物能够直接利用淀粉作原料，但这一过程必须在微生物分解出胞外淀粉酶类以后才能进行，过程非常缓慢，致使发酵过程周期过长，实际生产上无法被采用。
因此工业上利用耐热性α—淀粉酶，葡萄糖淀粉酶以及麦芽产生的淀粉酶、麦芽糖酶将熟化的淀粉分解产生具甜味的饴（葡萄糖麦芽糖、低聚糖混合物），产物用作甜味剂或发酵工业的原料。
该反应是酶在工业上应用的典型例子。
水解一般分为两步：第一步是利用α－淀粉酶将淀粉液化转为糊精及低聚糖，使淀粉的可溶性增加，这个过程称为液化。
第二步是利用糖化酶将糊精或低聚糖进一步水解，转变为葡萄糖麦芽糖、低聚糖混合物这一过程叫糖化。
