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泛酸钙检测标准

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微生物法测定维生素片中的泛酸含量

微生物法测定维生素片中的泛酸含量

分析检测微生物法测定维生素片中的泛酸含量高志城，周　敏，张任广（广东省科学院测试分析研究所（中国广州分析测试中心），广东广州 510000）摘　要：目的：建立适用于定量测定维生素片中泛酸含量的微生物法。

方法：植物乳杆菌（ATCC8014）繁殖速度与泛酸的含量呈正比关系，且在一定浓度范围内呈线性关系，对培养后菌悬液的吸光度与泛酸标准工作曲线进行比较，定量测定出维生素片中的泛酸含量。

结果：微生物法测定泛酸的线性范围为0～98.0 ng，其标准曲线多变量相关系数为0.991 29，测定维生素片中的泛酸含量的相对标准偏差（RSD）为2.23%，回收率为91.4%～103.4%。

结论：微生物法测定维生素片中的泛酸含量操作简便、稳定可靠、重复性好。

关键词：微生物法；泛酸；维生素片；植物乳杆菌Determination of Pantothenic Acid in Vitamin Tablets byMicrobiological MethodGAO Zhicheng, ZHOU Min, ZHANG Renguang(Institute of Analysis, Guangdong Academy of Sciences (China National Analytical Center, Guangzhou),Guangzhou 510000, China)Abstract: Objective: A microbiological method for quantitative determination of pantothenic acid in vitamin tablets was established.Method: The growth rate of Lactobacillus plantarum (ATCC 8014) was in direct proportion to the content of pantothenic acid,and showed a linear relationship within a certain concentration range. According to the comparison between the absorbance of bacterial suspension after culture and the working curve of pantothenic acid standard, the content of pantothenic acid in vitamin tablets was determined quantitatively. Results: The linear range of the microbiological method was 0～98.0 ng and the multivariate correlation coefficient of the standard curve was 0.991 29. The relative standard deviation (RSD) of the determination of pantothenic acid content in vitamin tablets was 2.23% and the recovery rate was 91.4%～103.4%. Conclusion: The microbiological method for the determination of pantothenic acid in vitamin tablets is simple, reliable and repeatable.Keywords: microbiological method; pantothenic acid; vitamin tablets; lactobacillus plantarum泛酸常用的检测方法有微生物法[1]、微孔板试剂盒法[2]以及仪器分析法。

一种泛酸钙含量的检测方法

一种泛酸钙含量的检测方法

一种泛酸钙含量的检测方法赵静;陈子龙【摘要】为研究建立复合维生素B片中泛酸钙含量的测定方法,采用高效液相色谱法,C18色谱柱(150 mm ×4.6 mm,5μm),以乙腈-水-磷酸(100∶ 900∶1)为流动相,通过在200 ～400 nm的波长范围内扫描,结果显示210 nm为最大吸收波长,最终确定检测波长为210 nm.结果表明,在本方法中,泛酸钙浓度在353.08 ～706.16μg·mL-1的质量浓度范围内,线性良好,与相应色谱峰面积呈良好的线性关系(r =0.999 4);专属性强,平均回收率为97.53％,RSD =0.89％(n =6),供试品及对照品溶液稳定性良好,常温下12 h内能保持稳定.本法准确、可靠、方便,可用于复合维生素B片中泛酸钙的含量测定及其质量控制,同时也为其他药厂同类产品的测定提供参考依据.【期刊名称】《西安科技大学学报》【年(卷),期】2014(034)005【总页数】4页(P631-634)【关键词】高效液相色谱法;泛酸钙;复合维生素B片;含量测定【作者】赵静;陈子龙【作者单位】陕西省渭南市食品药品检验所,陕西渭南714000;陕西省渭南市食品药品检验所,陕西渭南714000【正文语种】中文【中图分类】R9170 引言泛酸钙是B 族维生素的一种，是生物正常生长必需的营养物质之一，分混旋体(dl -型)、右旋体(d-型)、左旋体(l -型)3 种型式。

其中以右旋体为主，又名本多生酸钙，d -泛酸钙属维生素类药物，是人体和动物体内辅酶A 的成分之一，存在于活细胞中，其主要作用是参与蛋白质、脂肪、糖在体内的新陈代谢，治疗维生素B缺乏症、周围神经炎以及手术后的肠绞痛，与维生素C 合用可治疗播散性红斑狼疮。

另外，d -泛酸钙还能与羟酸形成高能硫酯化合物，激活活性较弱的酸，参与血色素卟啉架的合成，对皮肤和粘膜功能的正常化、对毛发的着色和抗感染也是不可缺少的，在预防链霉素和卡那霉素副作用方面也有积极的作用［1-4］。

五维甘草那敏胶囊中泛酸钙、维生素B_(2)含量测定方法改进

五维甘草那敏胶囊中泛酸钙、维生素B_(2)含量测定方法改进

五维甘草那敏胶嚢中泛酸钙、维生素B2含量测定方法改进杨小林，王思琦，白英豪（信阳市食品药品检验所，河南信阳464000)摘要：目的利用高效液相色谱法同时测定五维甘草那敏胶囊中泛酸钙、维生素B:的含量.，方法色谱柱：Agilent Eclipse Plus C l8(4.6 m m x250 m m，5 (jun);流动相：甲醇-0.5%磷酸溶液（28:72);进样量：10 p L;柱温为 30 T：;流速：丨.0 m L.min—1 ;检 测波长为2l<)m n结果泛酸钙、维生素心分别在40.76-815.2,10.56〜211.2 |xg.m L_l范围内线性关系良好.回归方程分别 为：V,= 3.3x101+1.4xl0J(f = 0.999 5，" = 6)，匕=1.9xl〇4J-1.9x l〇3(r= 0.999 4，n = 6);平均回收率分别为 98.82% (ftSD = 0.76%)、98.54%(/«/J = 0.98%h.精密度分别为0.63%、0.88%(n= 6)。

结论该方法经方法学验证，可用于五维甘草那敏胶囊中泛酸钙、维生素B2的含量测定。

关键词：五维甘草那敏肢囊；泛酸钙；维生素B2;含量测定；高效液相色谱法中图分类号：R917 文献标志码：A 文章编号：l674-229X(2021)01-0043-03Doi ：10.12048/j.issn.1674-229X.2021.01.009Improvement of the Determination of Calcium Pantothenate and Vitamin B, in Pentavitamin, Licorice and Chlorphenamine Maleate CapsulesYANG Xiaolin,WANG Siqi,BAI Yinghao( A'inyang Institute fo r Food and Drug Control ,X in ya n g, Henan 46400Q .C hina)A B STR A C T ：O B JE C T IV E To establish a method of sinniltaneous determination for calcium pantothenate and vitamin B2in pentavitam in, licorice and chlorphenamine maleate capsules by high performance liquid chromatography. M E T H O D S Agilent Eclipse Plus C18colum n(4.6 m m x250 m m,5 (Jim) , with the mobile phase of methanol-0.5% phosphoric acid solution(28：72) was perfonned., The injection volume was 10 uL. The column temperature was set at 30 T i. The flow rate was 1.0 m L-m in '.T h e detection wavelength was 210 nm. RESU LTS Calcium pantothenate and vitamin B2had a good linear relationship in the range of 40.76-815.2and 10.56 -211.2(XgMiiL 1, respectively . The regression equations were K, = 3.3x l〇3X+1.4x l〇4( r = 0.999 5, n = 6), Y2=1.9x lO4^-1.9x l〇' (r = 0.999 4, n = 6).The average recovery rates were 98.82%( RSD = 0.16%) . 98.54%( RSD = 0.9S%).The precision were 0.63%and 0.88%, respectively (n= 6).C O N C LU SIO N The method is validated by methodologies and can be used for the content determination of calcium pantothenate and vitamin B2in pentavitamin, licorice and chlorphenamine maleate capsules.KEY W O R D S ： pentavitamin,licorice and chloq)henamine maleate capsules；calcium pantothenate；vitamin B2；content detennination；HPLC五维甘草那敏胶囊由马来酸氯苯那敏、泛酸钙、维生素、维生素B6、烟酰胺等多种成分加工而成，为抗组胺药。

食品中泛酸的测定

食品中泛酸的测定
5.3 接种液的制备 试验前一天,取2 mL 泛酸标准工作溶液和4 mL 泛 酸 测 定 用 培 养 液 混 匀,分 装 于 2 支 5 mL 离 心
管中,塞好棉塞,于121 ℃高压灭菌15 min后即为种子培养液。冷却后用接种 环 将 活 化 的 菌 株 转 种 至 2支种子培养液中,于37 ℃±1 ℃恒温培养箱中培养20h~24h。取出后3000r/min离心10min,弃 上清液,无菌操作下用已预先灭 菌 的 生 理 盐 水 淋 洗 2 次,3000r/min 离 心 10 min,弃 上 清 液。 再 加 入 3 mL灭菌生理盐水,振荡混匀,制成接种液,立即使用。
1 范围
本标准规定了食品中泛酸和泛酸钙的测定方法。 本标准第一法适用于食品中泛酸的测定,第二法适用于营养素补 充 剂 类 保 健 食 品 和 配 方 食 品 中 泛 酸 (钙 )的 测 定 。
第一法 微生物法
2 原理
泛酸是植物乳杆菌 Lactobacillusplantarum(ATCC8014)生 长 所 必 需 的 营 养 素,在 一 定 控 制 条 件 下,将植物乳杆菌液接种至含有试样液的培养液中,培养一定时间后测定透 光 率(或 吸 光 度 值),根 据 泛 酸 含 量 与 透 光 率 (或 吸 光 度 值 )的 标 准 曲 线 计 算 出 试 样 中 泛 酸 的 含 量 。
3.4 标准品
D-泛 酸 钙 (C18H32CaN2O10):纯 度 ≥99% 。
3.5 标准溶液的配制
3.5.1 泛酸标准储备溶液(40.0μg/mL):精确称取43.5 mg 预干燥至恒重的 D-泛酸钙,加水溶解并转 移至1000 mL 容量瓶中,加10 mL 乙 酸 溶 液,100 mL 乙 酸 钠 溶 液,用 水 定 容 至 刻 度。 储 存 于 棕 色 瓶 中,加入3滴~5滴甲苯,于2 ℃~4 ℃冰箱中可保存2年。 3.5.2 泛酸标准中间液(1.00μg/mL):准确吸取25.0mL 泛酸标准储备溶液置于1000mL 容量瓶中, 加入10 mL 乙酸溶液,100 mL 乙酸钠溶液,用水定容至刻度。加入3滴~5 滴 甲 苯 于 2 ℃ ~4 ℃ 冰 箱 中可保存1年。 3.5.3 泛酸标准工作溶液(20ng/mL):准确 吸 取 2.00 mL 泛 酸 标 准 中 间 溶 液 置 于 100 mL 容 量 瓶 中, 用 水 定 容 至 刻 度 ,混 匀 。 临 用 前 现 配 。

BJS201716保健食品中9种水溶性维生素的测定.doc

BJS201716保健食品中9种水溶性维生素的测定.doc

附件4保健食品中9种水溶性维生素的测定BJS 2017161范围本方法规定了保健食品中维生素B1、维生素B2、泛酸、维生素B6、生物素、叶酸、维生素B12、烟酸、烟酰胺含量的液相色谱-串联质谱测定方法。

本方法适用于营养素补充剂类保健食品中维生素B1、维生素B2、泛酸、维生素B6、生物素、叶酸、维生素B12、烟酸、烟酰胺含量的测定。

2原理试样经水提取后，采用液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。

3试剂和材料注：除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

3.1 试剂3.1.1甲醇：质谱级。

3.1.2甲酸：质谱级。

3.1.3氨水：含量26%。

3.1.4冰醋酸。

3.1.5 浓盐酸。

3.1.6氨水（1+5）：量取100 mL 氨水（3.1.3）缓慢倒入500 mL 水中，混匀。

3.1.7 盐酸（0.01 mol/L）：吸取9 mL 浓盐酸（3.1.5），溶于1000 mL 水中。

吸取该溶液50 mL，用水稀释并定容至500 mL。

3.1.8 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1 mL用水稀释至1 000 mL，用滤膜（3.4）过滤后备用。

3.1.9 0.1%甲酸甲醇溶液：取甲酸1 mL用甲醇稀释至1000mL，用滤膜（3.4）过滤后备用。

3.2标准品维生素B1（硫胺素盐酸盐）、维生素B2、泛酸（泛酸钙）、维生素B6（吡哆醇）、生物素、叶酸、维生素B12、烟酸、烟酰胺标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。

3.3标准溶液配制3.3.1标准储备液（1 mg/mL）3.3.1.1维生素B1标准储备液：称取维生素B1标准品（3.2）0.1 g（精确至0.000 1 g），用0.01 mol/L 盐酸（3.1.7）溶解并定容于100 mL棕色容量瓶中。

3.3.1.2维生素B2、生物素、叶酸标准储备液：分别称取生物素、叶酸标准品（3.2）0.1 g（精确至0.000 1 g），加入30 mL氨水（3.1.6）溶解，甲酸调节pH值至7.0后，用水转移并定容至100 mL棕色容量瓶中。

反相高效液相色谱法同时测定维生素B6、烟酰胺和泛酸钙

反相高效液相色谱法同时测定维生素B6、烟酰胺和泛酸钙
Abstract: T he method of R P- H PL C w as applied to simultaneo us deter minat ion o f v itamin B6 , nico tinamide
and calcium pentot henate in some v itamin nutr iments. T he sample was extr acted ultraso nically w ith an ext ractant co nta ining pho sphate buffer solution ( pH 3. 0) and methanol fo r 5 min and then heat ed at 65- 70 e in a w ater bath for 10 min. T he ext ract obtained was used for the H PL C analysis. T he Inertsil pH- 3 Phenyl column was used as stat ionary phase, and a mix ed solution of 0. 05 mol # L - 1 K H2 PO 4 , methanol and acetonit rile mix ed in the ratio o f 90 t o 6 to 4 by vo lume, w as used as mobile phase. U V detection w as made at the wav elength of 210 nm. Linear ity of the st andard curves betw een the values o f peak area and concentr ation o f the 3 co mpo unds was checked by reg ression ana lysis, giving values of cor relat ion co eff icient s g reater than 0. 999 9. T est for r eco very w as made by standard addition met ho d w ith a substantial sample as the matr ix, the results o f reco very w ere fo und to be 97. 4% for v itamin B6, 100. 3% fo r calcium pento thenate and 102. 4% for nico tinamide.

食品中泛酸的测定

1
GB 5009.210—2016
3.1.18 3.1.19 3.1.20 3.1.21 3.1.22
碱 性 磷 酸 酶 :酶 活 力 ≥23 U/g。 鸽 子 肝 脏 丙 酮 提 取 物 干 粉 (liveracetonepowder,from pigeon):酶 活 力 ≥0.1 U/g。 蛋 白 胨 :含 氮 量 ≥10% 。 酵 母 提 取 物 :含 氮 量 ≥10% 。 琼脂。
3.2 试剂配制
3.2.1 乙酸溶液(0.2 mol/L):吸取11.8 mL 冰乙酸,用水稀释至1000 mL,混匀。 3.2.2 乙酸钠溶液(0.2 mol/L):称取27.2g三水合乙酸钠,加水溶解并稀释至1000 mL,混匀。 3.2.3 盐酸溶液(1 mol/L):吸取83 mL 盐酸,加水稀释至1000 mL,混匀。 3.2.4 盐酸浸泡液:吸取100 mL 盐酸与50倍水混合。 3.2.5 氢氧化钠溶液(1 mol/L):称取40g氢氧化钠,加水溶解并稀释至1000 mL,混匀。 3.2.6 氢氧化钠溶液(0.1 mol/L):称取4g氢氧化钠,加水溶解并稀释至1000 mL,混匀。 3.2.7 Tris缓冲液:称取121.0g三羟甲基氨基甲烷溶于500 mL 水中,用冰乙酸调 pH 至 8.1±0.1,加 水至1000 mL,混匀。贮存于2 ℃~4 ℃冰箱中,可保存2周。 3.2.8 生理盐水:称取9g氯化钠,加水溶解 并 稀 释 至 1000 mL,混 匀。临 用 前 预 先 灭 菌,于 121 ℃ 高 压灭菌10 min后备用。 3.2.9 乙醇溶液(20%):量取200 mL 无水乙醇与800 mL 水混匀。 3.2.10 碳酸钠溶液(0.08 mol/L):称取8.5g碳酸钠,加水溶解并稀释至1000 mL,混匀。 3.2.11 碳酸氢钾溶液(0.02 mol/L):称取2g碳酸氢钾,加水溶解并稀释至1000 mL。混匀。 3.2.12 碱性磷酸酶溶液:称取2g碱性磷酸酶,加水溶解并稀释至100mL。临用现配,2 ℃~4 ℃冰箱 预冷。

液相色谱-质谱法测定运动饮料中9种水溶性维生素

液相色谱-质谱法测定运动饮料中9种水溶性维生素施煜;林加如;辛希奕;郑曼冰【摘要】建立液相色谱-质谱法快速测定运动饮料中维生素B1、维生素B2、泛酸、维生素B6、生物素、叶酸、维生素B12、烟酸、烟酰胺9种水溶性维生素的方法.样品用水超声提取后,采用ACQUITY HSS T3液相色谱柱分离,以0.1％甲酸甲醇-0.1％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,采用质谱多反应监测扫描模式的选择性和特异性定量.9种水溶性维生素的质量浓度与色谱峰面积分别在各自范围内具有良好的线性关系,线性相关系数均大于0.999.当称样量为2.00 g,定容体积为50 mL时,方法检出限为0.0250～0.0625μg/g,测定下限为0.10～0.25μg/g.样品的加标回收率为90.0％～102.3％,测定结果的相对标准偏差为0.9％～3.2％(n=7).该方法简便、快速、准确、灵敏,适用于运动饮料中水溶性维生素的测定.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2018(027)005【总页数】5页(P29-33)【关键词】液相色谱-质谱法;运动饮料;水溶性维生素【作者】施煜;林加如;辛希奕;郑曼冰【作者单位】广东省汕头市质量计量监督检测所,广东汕头 515041;广东省汕头市质量计量监督检测所,广东汕头 515041;广东省汕头市质量计量监督检测所,广东汕头 515041;广东省汕头市质量计量监督检测所,广东汕头 515041【正文语种】中文【中图分类】O657.7运动饮料是根据人体运动后的生理代谢状态而配制的饮料，主要含有糖类、氨基酸、电解质、维生素等成分［1–2］，能够有针对性地补充人体运动时丢失的营养元素，可为机体补充水分、电解质和能量，有助于保持或提高机体运动能力，延缓运动性疲劳的产生［3–4］，其中水溶性维生素能够提高人体新陈代谢，将运动饮料中的糖类物质转化为热量，可舒缓心情，缓解紧张感，令人精力充沛，从而提高人体的运动动力，但维生素摄入过多会引起肝脏、肾脏的代谢负荷［5–6］。

饲料中泛酸的高效液相色谱检测方案

饲料中泛酸的高效液相色谱检测方案
泛酸在体内是合成辅酶A（CoA）的原料，约占辅酶A 分子量的10%。

因而泛酸能调节蛋白质、碳水化合物和脂肪的代谢。

泛酸对脂肪的合成
和分解起着十分重要的作用，具有抗皮肤炎、抑制微生物增殖的作用。

赛智科技参考国标（GB/T 18397-2001），利用高性能LC-10Tvp 高效液相色谱仪，经实践检测可提供饲料中泛酸的HPLC 检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于复合预混合饲料、维生素预混合饲料中泛酸的测定，
也适用于浓缩饲料中泛酸的测定，测量范围为每千克样品中含泛酸在50 mg 以上。

供广大用户参考。

以下是高效液相色谱仪对饲料中泛酸测定的详细检测方法。

1仪器与试剂1.1 仪器设备
LC-10Tvp 高效液相色谱仪
Vertex 色谱柱：150mm×4.6mm×5μm
分析天平
超声波水浴
PH 计
离心机
针头过滤器1.2 试剂
磷酸
二水磷酸二氢钠
氢氧化钠
泛酸钙标准工作液2试样溶液的制备。

P1005 泛酸

VitaFast® Pantothenic Acid简介VitaFast® Vitamin 泛酸试剂盒简单易用，采用微生物方法，在微孔板种定量检测食品、药品和饲料中的泛酸总量（包括添加和原生泛酸）。

所有所需的试剂均包含在试剂盒中。

本试剂盒共能提供96次检测（包括标准品）。

最后使用ELISA reader (610 - 630 nm 或者540 - 550 nm)进行读数。

样品处理：液体样品：无菌过滤、稀释固体样品：均质样品、提取（离心）、无菌过滤和稀释含原生泛酸的样品处理：固体样品：均质样品、酶处理、提取（离心）、无菌过滤和稀释所需时间：试验过程…….. ……………………………约10分钟评价时间…………….2分钟孵育：37 °C黑暗条件下44 – 48小时标准品范围：0.04－0.24 mg / 100g（ml）回收率：90－105％Intra-assay CV for standards: < 10 %Inter-assay CV for standards: < 10 %1. 产品用途VistaFast®泛酸微孔板检测试剂盒是利用微生物方法，用于定量检测食品、药品和饲料中的泛酸总量（包括添加和原生泛酸）。

本微生物检测系统符合国际标准。

2. 检测原理泛酸是从样品稀释提取所获得的。

将稀释了的提取物和泛酸检测培养基加入包被有乳酸杆菌Lactobacillus plantarum (ATCC Nr. 8014)的微孔中。

则Lactobacillus plantarum的生长状况取决于泛酸的含量。

添加V泛酸作为标准或者作为样品混合物，细菌会一直生长直至泛酸被消耗殆尽。

孵育条件应为37 °C黑暗条件下孵育44-48小时。

细菌生长时新陈代谢的强度和泛酸的含量形成关系并可以绘制称标准曲线，最后通过ELISA reader在610 - 630 nm (或者540 - 550 nm)读取结果。

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