环氧乙烷灭菌生物指示剂的选择

环氧乙烷灭菌生物指示剂的规格文件导言环氧乙烷灭菌生物指示剂是一种用于验证环氧乙烷灭菌过程中灭菌效果的指示剂。

本文将围绕该产品的规格文件进行介绍，包括产品的名称、型号、规格、性能要求、使用方法和注意事项等内容。

一、产品的名称和型号环氧乙烷灭菌生物指示剂的产品名称为“环氧乙烷灭菌生物指示剂”，型号为“EBI-01”。

二、规格1. 外观：本产品为圆形片状，直径为20mm。

2. 包装：每瓶包装100片，每片单独包装。

3. 材质：本产品采用高温、高压下耐高温材质制成。

4. 贮存条件：应存放在阴凉、干燥的环境中，避免日晒和潮湿。

三、性能要求1. 灭菌效果指示：环氧乙烷灭菌生物指示剂应能够准确反映环氧乙烷灭菌的效果。

2. 生物指示剂存活率：环氧乙烷灭菌生物指示剂在灭菌过程中，存活率应低于1/1000。

3. 灭菌时间：环氧乙烷灭菌生物指示剂应能在规定的灭菌时间内达到灭菌效果。

四、使用方法1. 取出一片环氧乙烷灭菌生物指示剂，撕开包装。

2. 将指示剂放置在灭菌袋或容器中，与待灭菌物品一同进行灭菌。

3. 灭菌结束后，将指示剂拿出并观察其颜色变化。

4. 根据指示剂的颜色变化判断灭菌效果，如果指示剂变为黄色，表示灭菌效果良好；如果指示剂仍为蓝色，表示灭菌效果不理想。

五、注意事项1. 环氧乙烷灭菌生物指示剂仅供一次性使用，不得重复使用。

2. 使用过程中应避免与水或其他液体接触，以免影响灭菌效果。

3. 本产品应存放在干燥、阴凉的环境中，避免阳光直射。

4. 使用本产品时，应按照灭菌设备的操作规程进行操作，确保灭菌效果。

结语环氧乙烷灭菌生物指示剂是一种用于验证环氧乙烷灭菌效果的重要工具。

本文详细介绍了该产品的规格文件，包括名称、型号、规格、性能要求、使用方法和注意事项等内容。

希望通过本文的介绍，能够使用户更好地了解和正确使用环氧乙烷灭菌生物指示剂，确保灭菌效果的准确性和可靠性。

灭菌用生物指示剂指导原则（新增）生物指示剂是一种对特定灭菌程序有确定及稳定的耐受性的特殊微生物制成品，可用于灭菌设备的性能确认、特定物品的灭菌工艺研发及建立、产品灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控、灭菌程序的定期再验证、隔离器和无菌洁净室灭菌效果的验证评估等。

生物指示剂的分类生物指示剂主要有以下三种类型，其特征需符合《医疗保健产品灭菌生物指示物》GB18281-的要求。

（1）由微生物芽胞和载体经包装而成，载体可以是碟形或条状的滤纸、玻璃、塑料或其它材料。

载体和内层包装不得含有物理、化学或微生物的污染物，避免影响生物指示剂的性能和稳定性；不得被特定的灭菌工艺降解；能被灭菌介质（蒸汽、射线、化学试剂、过滤等）穿透并使灭菌介质与生物指示剂能充分接触。

载体和包装的设计应保证生物指示剂不受污染、并使其所含的微生物在贮存、运输和使用过程中损失最小，且方便取样、转移和接种。

（2）芽胞悬液生物指示剂，该类生物指示剂是将芽胞混悬于液体中。

若用于液体物品灭菌，建议测定生物指示剂在灭菌液体物品中的芽胞数、D值和Z值。

（3）自含式生物指示剂，该类生物指示剂是由芽孢和能够恢复微生物生长的培养基组成的系统。

系统中的培养基用于培养灭菌后的生物指示剂，应制定程序确认该培养基能保证残存微生物的生长。

自含式生物指示剂的耐受性是针对整个系统而言。

自含式系统所采用的材料不应该含有或在使用过程释放出抑制残存微生物生长的物质。

该系统的设计应能够承受运输和使用过程中的影响，不发生破损，并使原始接种的微生物损失减少到最小。

生物指示剂用微生物的基本要求生物指示剂含有对灭菌模式有明确耐受性的一种或两种微生物。

除了电离辐射外，微生物芽孢较菌体有更强的耐受性。

一般认为含芽胞的细菌更适合用于制备生物指示剂。

不同灭菌工艺使用不同的生物指示剂，制备生物指示剂所选用的微生物应具备以下特征：（1）菌种的耐受性应大于需灭菌物品中所有可能污染菌的耐受性。

（2）菌种应无致病性。

5.1.2 Biological indicators of sterilization 灭菌生物指示剂01/2001: 50102 EP7.0 page 504‐505 翻译日期：2012年12月生物指示剂采取选定的微生物用标准方法制备而成，用于评估灭菌程序的有效性。

生物指示剂通常用适当的惰性载体放置一定数量的细菌孢子。

载体经过良好的覆盖能确保不受损坏或污染，而同时能使灭菌介质进入与微生物接触。

孢子混悬液可以用密封安瓿瓶放置。

生物指示剂经过适当的方法制备后，可在定义条件下储存，并给予有效期。

可采用与生物指示剂制备用细菌同物种（species）的细菌，直接接种到待灭菌的液体产品或与待灭菌产品类似的液体产品。

这种情况下，要证明液体产品对所使用的孢子，尤其是其生长，没有抑制作用，生物指示剂的性质确认通过用于对照微生物的细菌种属名称、原始收集中菌株的数量，每个载体中活孢子的数量及D值。

D值指 需要将活性微生物降低到原始值1/10的灭菌（时间或吸收剂量）参数值（The D‐value is the value of a parameter of sterilization (duration or absorbed dose) required to deduce the number of viable organism to 10 percent of the original number.）D 值只有在定义的实验条件下才有意义。

只能采用明确说明的微生物。

可能会使用在同一载体上有多种细菌的生物指示剂。

需提供培养基和培养条件的信息。

建议指示剂放置在假定位置，或者如果可能，放置在经过物理测量至少能接触到灭菌介质的位置。

暴露在灭菌介质后，要采用无菌技术将孢子载体转移至培养基中，以保证不会在检查过程中造成污染。

也可以采用包装中直接放置培养基安瓿瓶以保护载体的生物指示剂。

指示剂微生物选择如下：a）检测菌株的耐受性适合某种灭菌方法，且与潜在污染产品的微生物耐受性有良好的可比性；b）检测菌株没有致病源；c）测试菌株易于培养。

环氧乙烷(ethylene oxide,EO)在常温常压下为无色气体,4℃时冷凝为液体,沸点为10.4℃,具有高度的化学活性,易燃易爆。

环氧乙烷具有广谱高效杀菌作用,属最有效的化学冷灭菌剂之一。

环氧乙烷常被用于工业灭菌与消毒,近年来在医院怕热怕湿医疗器械灭菌中也得到广泛应用。

但环氧乙烷属于有毒气体,对许多物品具有高度的吸附性,灭菌物品必须等待残留气体完全挥发才可给病人使用。

因此,医护人员应充分掌握环氧乙烷的性质及灭菌原理和严格职业行为，这对有效监测和控制环氧乙烷灭菌及其灭菌后的物品安全试用具有重要意义。

1 环氧乙烷灭菌的应用1.1 EO的灭菌原理 EO可以杀灭各种微生物,包括细菌繁殖体、芽胞、病毒和真菌孢子,是一种广谱灭菌剂。

一般认为是由于它能与微生物的蛋白质、DNA和RNA发生非特异性烷基化作用(non2specificalkylation)。

水溶液中的EO能与蛋白质上的游离羧基(COOH基(2NH2),硫氢基(2SH)和羟基(2OH)发生烷基化作用,取代不稳定的氢原子而形成带有羟乙根(CH2CH2OH)的化合物,蛋白质上的基团被烷基化,使蛋白质失去了在基本代谢中需要的反应基,阻碍了细菌蛋白质正常的化学反应和新陈代谢,从而导致微生物死亡。

到目前为止,所有资料显示EO 杀菌作用是不可逆的,也就是说EO是杀菌剂(sterileagent)而不是消毒剂(disinfectant)。

而且根据各种临床、科研结果显示EO是所有化学消毒剂或灭菌剂中灭菌效果最好的一种化学灭菌剂。

环氧乙烷能抑制一些微生物酶的活性,包括磷酸致活酶、肽酶、胆碱化酶和胆碱脂酶。

环氧乙烷也和DNA、RNA发生烷基化作用而导致微生物的灭活。

1.2 EO灭菌的优缺点及临床适用范围1.2.1 EO灭菌的优点EO ①可用于不耐高温、不耐湿物品的灭菌。

②环氧乙烷被认为是一种灭菌效果最好的化学灭菌剂,可杀灭所有微生物包括细菌芽胞。

③穿透性强,可用以各种难通透部位的灭菌:如有些较细、较长的导管用其他低温灭菌方法很难达到灭菌效果,而只能用EO或辐照。

无菌医疗器械产品环氧乙烷灭菌工艺验证方案1 概述验证名称：无菌医疗器械产品环氧乙烷灭菌工艺验证。

容积： 6m3验证目的：通过对灭菌过程确认，确保灭菌系统和灭菌过程能持续、稳定和有效的运行，保证灭菌产品达到10-6的无菌保证水平，并且灭菌后产品和包装的性能符合预期要求。

验证时间: 2012 年 2 月至 2012 年 3 月验证项目：安装验证（IQ）、运行确认（OQ）和性能确认（PQ）。

适用产品：一次性使用吸氧管参加验证部门：研发部、质管部、生产部、设备部主要验证依据：ISO11135-1:2007 医疗保健产品灭菌环氧乙烷第1部分：医疗器械灭菌过程的开发、确认和常规控制的要求EN 1422：1997 环氧乙烷灭菌器（itd YY0503-2005）EN ISO 11737-1:2006 医疗器械的灭菌微生物学方法第1部分：产品上微生物总数的测定（AC:2009）EN ISO 11607-1:2009 最终灭菌医疗器械的包装第1部分：材料、无菌屏障系统和包装系统要求EN ISO 11138-2:2009 医疗保健产品灭菌生物指示物第2部分：环氧乙烷灭菌用生物指示物EN ISO 10993-7:2008 医疗器械生物学评价第7部分环氧乙烷灭菌残留量EN ISO 11737-2:2009 医疗器械的灭菌微生物学方法第2部分：确认灭菌过程的无菌试验2 验证小组的构成及人员职责根据ISO11135-1:2007标准规定，确定了从事环氧乙烷灭菌验证过程中的方案制定及实施操作、微生物检验、设备运行及计量管理工作的人员，再根据设备维护操作、计量器具检定、物理性能及微生物性能测定作了分工，见下表：3 参加验证部分人员资质确认灭菌操作人员须经专业培训合格上岗，灭菌效果验证（检验）人员应经过培训合格，建立“验证人员资质确认表”4 相关要素的确认4.1 产品定义a)适用产品名称：一次性使用吸氧管b) 主要材料： PP、PE、橡胶等。

灭菌用生物指示剂指导原则（新增）生物指示剂是一种对特定灭菌程序有确定及稳定的耐受性的特殊微生物制成品，可用于灭菌设备的性能确认、特定物品的灭菌工艺研发及建立、产品灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控、灭菌程序的定期再验证、隔离器和无菌洁净室灭菌效果的验证评估等。

生物指示剂的分类生物指示剂主要有以下三种类型，其特征需符合《医疗保健产品灭菌生物指示物》GB18281的要求。

（1）由微生物芽胞和载体经包装而成，载体可以是碟形或条状的滤纸、玻璃、塑料或其它材料。

载体和内层包装不得含有物理、化学或微生物的污染物，避免影响生物指示剂的性能和稳定性；不得被特定的灭菌工艺降解；能被灭菌介质（蒸汽、射线、化学试剂、过滤等）穿透并使灭菌介质与生物指示剂能充分接触。

载体和包装的设计应保证生物指示剂不受污染、并使其所含的微生物在贮存、运输和使用过程中损失最小，且方便取样、转移和接种。

（2）芽胞悬液生物指示剂，该类生物指示剂是将芽胞混悬于液体中。

若用于液体物品灭菌，建议测定生物指示剂在灭菌液体物品中的芽胞数和、D值和Z 。

（3）自含式生物指示剂，该类生物指示剂是由芽孢和能够恢复微生物生长的培养基组成的系统。

系统中的培养基用于培养灭菌后的生物指示剂，应制定程序确认该培养基能保证残存微生物的生长。

自含式生物指示剂的耐受性是针对整个系统而言。

自含式系统所采用的材料不应该含有或在使用过程释放出抑制残存微生物生长的物质。

该系统的设计应能够承受运输和使用过程中的影响，不发生破损，并使原始接种的微生物损失减少到最小。

生物指示剂用微生物的基本要求生物指示剂含有对灭菌模式有明确耐受性的一种或两种微生物。

除了电离辐射外，微生物芽孢较菌体有更强的耐受性。

一般认为含芽胞的细菌更适合用于制备生物指示剂。

不同灭菌工艺使用不同的生物指示剂，制备生物指示剂所选用的（1）菌种的耐受性应大于需灭菌物品中所有可能污染菌的耐受性。

（2）菌种应无致病性。

（3）菌株应稳定，存活期长，易于保存。

9207灭菌用生物指示剂指导原则（新增）生物指示剂是一种对特定灭菌程序有确定及稳定的耐受性的特殊微生物制成品，可用于灭菌设备的性能确认、特定物品的灭菌工艺研发及建立、产品灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控、灭菌程序的定期再验证、隔离器和无菌洁净室灭菌效果的验证评估等。

生物指示剂的分类生物指示剂主要有以下三种类型，其特征需符合《医疗保健产品灭菌生物指示物》GB18281的要求。

（1）由微生物芽孢和载体经包装而成，载体可以是碟形或条状的滤纸、玻璃、塑料或其它材料。

载体和内层包装不得含有物理、化学或微生物的污染物，避免影响生物指示剂的性能和稳定性；不得被特定的灭菌工艺降解；能被灭菌介质（蒸汽、射线、化学试剂等）穿透并使灭菌介质与生物指示剂能充分接触。

载体和包装的设计应保证生物指示剂不受污染、并使其所含的微生物在贮存、及运输和使用过程中损失最小，且方便取样、转移和接种。

（2）芽孢悬液生物指示剂，该类生物指示剂是将芽孢混悬于液体中。

若用于液体物品灭菌，建议测定生物指示剂在灭菌液体物品中的芽孢数和D值。

（3）自含式生物指示剂，该类生物指示剂是由芽孢和能够恢复微生物生长的培养基组成的系统，其耐受性是针对整个系统而言。

系统中的培养基用于培养灭菌后的生物指示剂，应制定程序确认该培养基能保证残存微生物的生长。

自含式生物指示剂的耐受性是针对整个系统而言。

自含式系统所采用的材料不应该含有或在使用过程释放出抑制残存微生物生长的物质。

该系统的设计应能够承受运输和使用过程中的影响，不发生破损，并使原始接种的微生物损失减少到最小。

生物指示剂用微生物的基本要求除了电离辐射外，微生物芽孢较菌体有更强的耐受性。

一般认为含芽孢的细菌更适合用于制备生物指示剂。

不同灭菌工艺使用不同的生物指示剂，制备生物指示剂所选用的微生物应具备以下特性：（1）菌种的耐受性应大于需灭菌物品中所有可能污染菌的耐受性。

（2）菌种应无致病性。

（3）菌株应稳定，存活期长，易于保存。

环氧乙烷灭菌生物指示物选择、应用与缩短培养时间（RIT）的验证生物指示物是指一类特定的微生物和载体结合，经过特定方法制备的生物制品，这些特定微生物比普通微生物对相应的灭菌模式具有更强的耐受性，用于指示微生物的死亡情况，以反映灭菌效果。

由于生物指示物可以真实可靠的反映灭菌过程中有关时间、温度和湿度等多个因素的关系，因此广泛应用于环氧乙烷等灭菌工艺的验证与日常监控。

验证时应确认所选择的生物指示物的抗力的适宜性，否则将影响灭菌验证的效果与可靠性。

生物指示物的原理是通过检测其中的细菌芽孢是否存活来判断产品是否达到完全灭菌的效果。

产品上的微生物无法经过肉眼观察，而且无法通过灭菌后的抽样检测来确定该批次产品是否合格，是一个特殊过程。

我们只能通过生物指示物中的细菌芽孢模拟产品上带菌的最坏的情况。

生物指示物中的细菌芽孢也是微生物的一种，而且所有对灭菌效果有影响的因素都对其有作用。

同时，由于采用环氧乙烷等最终灭菌的产品，其生产过程中初始污染菌的数量是受控的，其数量远远低于生物指示物所含的菌体数量。

BI中选择的菌株比生产过程中自然环境下所发现的菌株是更难杀灭的菌株，具有更高的抗力。

如果生物指示物中的细菌芽孢全部被杀死，就等同于产品中的微生物全部被杀死。

故此，在环氧乙烷灭菌工艺里面，要确认灭菌是否合格，必须使用生物指示物，没有可以替代的手段或方法。

但是应当注意，生物指示物并不是用来指示与证实灭菌后的物品确实无菌。

也就是说即使生物指示物培养无菌生长，并不能证实或保证灭菌物品100%无菌。

生物指示物只是用来测试某一个已确认的灭菌过程和采用的的灭菌设备的有效性，这种测试的实施原理是：按照无菌保证水平对微生物致死性进行评估，以确定灭菌物品中微生物存活的概率足够低。

1生物指示物（Biological Indicators,BI)生物指示物是一类特定微生物经过确定制备方法制造的生物试剂。

生物指示物对于某种灭菌工艺具有特定的耐受性（USPS1035《Biological indicators for Sterilization》）。