微生物讨论(沙门菌属)

❖ 1、传染源：人 ❖ 2、传播途径：粪－口途径 ❖ 3、与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌密切相关
大肠菌群：在37℃24小时内发酵乳糖产酸产气的肠道 杆菌，包括埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属 及肠杆菌属等。 1ml饮用水:细菌总数＜100个 1L饮用水:大肠菌群数＜3个 100ml饮料:大肠菌群数＜5个
第二节 志贺菌属
(Shigella)
所致疾病为细菌性痢疾，故又统称为 痢疾杆菌(dysentery bacterium)。
肠杆菌科
(Enterobacteriaceae)
肠杆菌科——是一大群生物学性状相 似的革兰阴性杆菌，常寄居在人和动物的肠 道内。亦存在于土壤、水和腐物中。
一、种类
1、致病菌 2、机会致病菌 3、由正常菌群转变而来的致病菌
二、共性
1、形态与结构 ❖ 都是形态相类似的G—杆菌 ❖ 大多都有鞭毛(除痢疾杆菌外)，大多都有菌
❖ 在胃粘膜粘液层中常呈鱼群样排列
❖ 微需氧菌，需5%~10%的CO2和5%O2，营养要求 高，还需一定湿度，培养3—6天可见细小、 针尖状、无色半透明的菌落
生化反应 ❖ 不活泼，不分解糖类 ❖ 触酶试验、氧化酶试验（+） ❖ 尿素酶丰富，可迅速分解尿素产氨，是鉴定
该细菌的主要依据之一
致病性
(Escherichia)
一、生物学性状
1、形态结构
G—杆菌，多数有周鞭毛
有普通菌毛和性菌毛
2、培养
普通平板培养 基上形成圆形， 凸起，灰白色的 S型菌落
SS琼脂平板、 麦康凯琼脂平板 中形成红色菌落
3、生化反应
❖ 可分解多种糖，并且产酸产气
(注:只有肠道的非致病菌才能分解乳糖且产酸 产气)
霍乱肠毒素（外毒素） 口腔

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MIU试验
• 为动力、吲哚及脲酶复合试验 • 原理：培养基为含尿素、蛋白胨的半固体
培养基，指示剂为酚红。具色氨酸酶的细 菌能分解色氨酸产生吲哚，加入吲哚试剂 后，培养基上层的吲哚会变红；具脲酶的 细菌能分解尿素产氨，使整个培养基变碱 呈红色；有动力的细菌沿穿刺线扩散生长。 • 作用：常用于肠杆菌科细菌的鉴定。
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IMVIC试验
• I:吲哚（indol）试验 • M:甲基红（methyl red）试验 • V:V.P（Voges-Proskauer）试验 • C:柠檬酸（citrate utilization）实验(枸橼酸
盐) • 作用：这4个试验主要是用来快速鉴别大肠
杆菌和产气肠杆菌，多用于水的细菌检查。
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• （四）抗原构造
• 沙门菌的抗原结构较复杂，主要包括菌体O 抗原，鞭毛H抗原，少数的菌种有表面Vi抗 原，均具有分类鉴定的意义。
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• 1.菌体抗原（O抗原） • 化学成分是脂多糖，耐热，它刺激机体产
生的抗体以IgM为主，与相应的抗体结合出 现颗粒状凝集。 • 是沙门菌分群的依据，每个沙门菌的血清 型可具有一种或树种O抗原，将具有共同O 抗原成分的归为一个群。临床上常见的是 A~F群。
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• 在SS平板上形成中心为黑褐色的菌落
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• 在HE琼脂平板上菌落呈蓝色或蓝绿色，大 部分菌落中央呈黑色。
• 在XLD琼脂平板上菌落呈红色或中央黑色 • 在液体培养基中均匀混浊生长。
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• （三）生化特性
• 可发酵葡萄糖、麦芽糖和甘露醇，除伤寒 沙门菌产酸不产气外，其余沙门菌均产酸 产气；
• 不发酵乳糖和蔗糖（亚利桑那菌除外）； • 不分解尿素； • 大多可产生H2S； • 动力阳性； • IMVIC试验结果为++--，MIU试验为+--。

沙门氏菌Ⅲ （即亚利桑那菌） 黑色有金属光泽
乳糖迟缓阳性或阴性的菌株与沙门氏菌Ⅰ、 Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ相同；乳糖阳性的菌株为 粉红色，中心带黑色。 乳糖阳性的菌株为黄色，中心黑色或几乎 全黑色；乳糖迟缓阳性或阴性的菌株为蓝 绿色或蓝色，中心黑色或几乎全黑色。 乳糖迟缓阳性或阴性的菌株，与沙门氏菌 Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ相同；乳糖阳性的菌 株为粉红色，中心黑色，但中心无黑色形 成时与大肠艾希氏菌不能区分.
培养基全黄色
制好的培 养基
斜面、 底部黄 色，并 产生H2S
对照管
斜面红色，底部黄 色，产生H2S
底面黄色，并产生CO2
食品安全检验技术（微生物部分） 沙门氏菌检验
（1）斜面碱性（红色-）底部酸性（黄色+）产气或不 产气（产气时会造成琼脂裂开）：表示仅葡萄糖发酵。 因微生物优先分解葡萄糖产酸，使培养基变黄，但因 葡萄糖含量低，于斜面产生之微量酸立即氧化而呈碱 性反应，同时培养基中的蛋白质也随之利用而产碱， 培养基底部则因氧张力较小，且微生物生长较慢，故 仍维持酸性反应。 （2）斜面酸性（黄色+）底部酸性（黄色+）产气或不 产气：表示除了葡萄糖发酵外，乳糖与（或）蔗糖也 发酵。由于乳糖与蔗糖浓度高，经继续发酵，可维持 培养基斜面与底部保持酸性反应。
10mL＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
10mL＋SC100mL
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
直接增菌法 25g＋灭菌生理盐水25mL
检样匀液25mL ＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
检样匀液25mL
＋SC100mL
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
（二）分离培养

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2、内毒素 导致体温升高、白细胞数下降等 3、肠毒素 个别沙门菌可产生肠毒素（鼠伤寒）， 作用与大肠杆菌、霍乱弧菌肠毒素相似， 引起胃肠炎
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所致疾病
1、肠热症
由伤寒沙门菌，副伤寒甲、乙等沙门菌引起。 肠道传染病 传染病传播三环节 传染源 病人、带菌者（尤为重要） 传播途径 经粪-口途径传播 易感者 人群普遍易感
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双糖铁培养基， 葡萄糖 + 乳糖-,动力+， 硫化氢+/-;
除伤寒杆菌 对葡萄糖不产气外 均产酸产气 (与大肠埃希菌 志贺菌区别)
尿素酶试验(-) 与变形杆菌区别
变形杆菌(左) 沙门菌(右)
• 1、菌体抗原cell wall O 三、抗原构造 • （O抗原） 特异性多糖 稳定、耐热， 特异性低，为沙门菌共有，
O抗原刺激机体产生抗体--- IgM（特点）
产生早、消退早--早期诊断
共同抗原刺激产生---无特异性
不易产生非特异性回忆反应
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• 2、鞭毛抗原flagella H • （H抗原） 蛋白质 不稳定，不耐热， 特异性高，可鉴别伤寒杆菌与副伤寒杆 菌甲及副伤寒杆菌乙的分型
H抗原刺激机体产生抗体---IgG（特点）
三、微生物学检查
细菌的分离鉴定 标本 伤寒病人按病程不同取不同标本 第一周 血 第二周 病程全程 尿、粪便 骨髓
食物中毒者取排泄物、呕吐物、可疑食物
败血症患者取血液
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伤寒病人微生物检查阳性率
阳 性 率
100 80 60 40 20 0 1 2 3 4 5 6
次
Ï µ µ Ï µ Ï µ Ï 7 8
第 4周 恢复期
细胞免疫逐渐增强， 细胞内细菌被清除