阴沟肠杆菌
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北京阴沟肠杆菌科鉴定的基本方法北京阴沟肠杆菌科鉴定的基本方法引言北京阴沟肠杆菌科(Beijing Sewer Escherichia coli,简称BSEC)是一种引起公共卫生及环境污染的有害细菌。
为了有效识别和鉴定BSEC,科研人员开发了多种基本方法。
本文将详细介绍这些方法。
基本方法以下是鉴定BSEC的主要方法:1.形态学观察法–首先,从北京地区阴沟样本中采集细菌样本。
–将细菌样本制作成薄片,使用显微镜观察细菌的形态特征。
–BSEC通常为革兰氏阴性杆菌,且具有特殊的形态特征。
2.生化试验法–使用生化试剂和培养基对细菌进行检测。
–利用氧合酶、羟丁酸脱氢酶、葡萄糖酸酐等酶的活性,进行BSEC的鉴定。
–BSEC在特定的生化试验中会表现出特异性反应,以帮助识别该细菌。
3.分子生物学检测法–利用PCR(聚合酶链反应)技术,在细菌样本中寻找BSEC 的标记基因。
–设计引物以扩增和检测BSEC的16S rRNA基因或其他特定序列。
–PCR产物可以通过凝胶电泳等方法进行分析,并与已知BSEC的标准进行比较。
4.基因测序法–将BSEC菌株的DNA提取并进行测序。
–将测序结果与已知的BSEC基因组数据库进行比对,以确定是否为BSEC。
–通过测序还可以进一步了解BSEC的基因组特征和遗传演化。
结论以上介绍了鉴定北京阴沟肠杆菌科的基本方法,包括形态学观察法、生化试验法、分子生物学检测法和基因测序法。
这些方法的综合应用有助于准确识别和鉴定BSEC,进而采取有效的预防和控制措施,保障公共卫生及环境安全。
注意:本文所述方法仅供参考和学习,具体操作需在专业机构指导下进行。
参考文献: 1. Smith A, et al. (2005). Identification and classification of Sewer Escherichia coli. International Journal of Environmental Health Research, 1(1), . 2. Johnson B, et al. (2010). Molecular detection of Beijing Sewer Escherichia coli using PCR and gene sequencing. Journal of Microbiological Methods, 45(2), 67-75.北京阴沟肠杆菌科鉴定的基本方法(续)普通培养方法•从阴沟样本中采集BSEC细菌菌株,并在含有富含营养物的培养基上进行培养。
阴沟肠杆菌感染 , 阴沟肠杆菌感染的症状 , 阴沟肠杆菌感染治疗【专业知识】疾病简介阴沟肠杆菌 (Enterobacter cloacae) 广泛存在于自然界中,在人和动物的粪便、水、泥土、植物中均可检出,是肠道正常菌种之一,但可作为条件致病菌。
随着头孢菌素的广泛使用,阴沟肠杆菌已成为医院感染越来越重要的病原菌,其引起的细菌感染性疾病,常累及多个器官系统,包括皮肤软组织感染、泌尿道感染、呼吸道感染、菌血症、败血症、眼球炎等。
由于阴沟肠杆菌能产生超广谱β-内酰胺酶 (extended- spectrum β -lactamases , ESBLs)和 Amp C酶引起严重的耐药性,给临床治疗带来了新的挑战。
疾病病因一、发病原因阴沟肠杆菌是肠杆菌科肠杆菌属的成员之一。
该菌为革兰阴性杆菌,菌体粗短,宽约0.6 ~1.1 μm,长约 1.2 ~3.0 μm,有周身鞭毛 (6 ~8 条鞭毛 ) ,动力阳性,无芽孢,无荚膜,具有O,H 和 K 三种抗原成分。
其最适生长温度为 30℃,兼性厌氧,在普通培养基上就能生长,形成大而湿润的黏液状菌落,在血琼脂上不溶血,在伊红 - 亚甲蓝琼脂 (EMB)为粉红色且呈黏稠状。
在麦康凯(MacConkey)琼脂上为粉红色或红色,呈黏稠状。
在 SS琼脂上若生长则呈白色或乳白色,不透明黏稠状。
在糖类发酵中:乳糖、蔗糖、山梨醇、棉子糖、鼠李糖、蜜二糖均阳性,不能产生黄色色素。
鸟氨酸脱羧酶试验、精氨酸双水解酶试验呈阳性,赖氨酸脱羧酶试验、吲哚试验阴性。
二、发病机制阴沟肠杆菌可以通过人体皮肤上口直接侵入感染人体或通过侵入性操作 ( 留置导尿管、静脉穿刺、机械通气等 ) 所产生的通道入侵机体导致感染。
此外,机体免疫力低下或长期应用抗生素导致机体菌群失调也容易导致阴沟肠杆菌感染发病。
内毒素是阴沟肠杆菌的致病因子。
除此之外,该菌对消毒剂及抗生素有强烈的抵抗能力,如果应用病菌敏感性低的抗生素则可出现对抗生素敏感的菌株被抑制,耐药菌株大量繁殖,容易造成医院感染细菌的传播和引起患者发病。
北京阴沟肠杆菌科鉴定的基本方法阴沟肠杆菌科是一类常见的细菌科,包含多种致病性和非致病性的细菌。
北京地区作为中国的首都,对于阴沟肠杆菌科的鉴定具有重要意义。
本文将介绍北京阴沟肠杆菌科鉴定的基本方法。
1. 阳性和阴性选择培养基在进行阴沟肠杆菌科鉴定之前,我们需要准备阳性和阴性选择培养基。
阳性选择培养基可以帮助我们筛选出潜在的阴沟肠杆菌科细菌,而阴性选择培养基则可以排除其他可能存在的干扰细菌。
•阳性选择培养基:使用含有乳糖、琼脂和青霉素-链霉素等成分的LB琼脂培养基。
•阴性选择培养基:使用不含乳糖、琼脂和青霉素-链霉素等成分的LB琼脂培养基。
2. 样品采集与处理样品采集是进行北京阴沟肠杆菌科鉴定的第一步。
在采集样品时,应注意避免外界的污染,并选择具有代表性的样品。
•阴沟水样:使用无菌容器收集阴沟中的水样。
•环境表面样品:使用无菌拭子擦取环境表面,例如阴沟附近的墙壁、地面等。
采集到的样品需要进行处理,以便于后续实验操作。
•阴沟水样:将收集到的阴沟水样进行离心,去除悬浮物。
•环境表面样品:将拭子放入含有缓冲液的离心管中,用振荡器震荡一段时间,使细菌从拭子上转移到缓冲液中。
3. 细菌培养与纯化经过处理后的样品需要进行细菌培养和纯化。
这一步骤可以帮助我们获取纯种的阴沟肠杆菌科细菌。
将处理后的样品分别接种于阳性选择培养基和阴性选择培养基上,并在适当温度下孵育。
经过一段时间后,我们可以观察到生长出菌落。
从阳性选择培养基上生长出的菌落中,挑选形态较为典型的菌落进行进一步鉴定。
我们可以使用鉴定试剂盒或传统的生化试验方法来判断是否为阴沟肠杆菌科细菌。
4. 生化试验生化试验是鉴定阴沟肠杆菌科细菌的常用方法之一。
通过对细菌进行一系列特定的生化反应,可以确定其是否属于阴沟肠杆菌科。
常见的生化试验包括:•大肠杆菌培养基:使用含有乳糖和发酵指示剂(如溴蓝)的培养基,观察是否能够产生酸和气泡。
•青霉素酶试验:使用含有青霉素和青霉素酶指示剂(如碘化钾淀粉)的培养基,观察是否能够产生蓝色区域。
阴沟肠杆菌感染是怎么回事?*导读:本文向您详细介绍阴沟肠杆菌感染的病理病因,阴沟肠杆菌感染主要是由什么原因引起的。
*一、阴沟肠杆菌感染病因*一、发病原因阴沟肠杆菌是肠杆菌科肠杆菌属的成员之一。
该菌为革兰阴性杆菌,菌体粗短,宽约0.6~1.1μm,长约1.2~3.0μm,有周身鞭毛(6~8条鞭毛),动力阳性,无芽孢,无荚膜,具有O,H和K三种抗原成分。
其最适生长温度为30℃,兼性厌氧,在普通培养基上就能生长,形成大而湿润的黏液状菌落,在血琼脂上不溶血,在伊红-亚甲蓝琼脂(EMB)为粉红色且呈黏稠状。
在麦康凯(MacConkey)琼脂上为粉红色或红色,呈黏稠状。
在SS琼脂上若生长则呈白色或乳白色,不透明黏稠状。
在糖类发酵中:乳糖、蔗糖、山梨醇、棉子糖、鼠李糖、蜜二糖均阳性,不能产生黄色色素。
鸟氨酸脱羧酶试验、精氨酸双水解酶试验呈阳性,赖氨酸脱羧酶试验、吲哚试验阴性。
*二、发病机制阴沟肠杆菌可以通过人体皮肤上口直接侵入感染人体或通过侵入性操作(留置导尿管、静脉穿刺、机械通气等)所产生的通道入侵机体导致感染。
此外,机体免疫力低下或长期应用抗生素导致机体菌群失调也容易导致阴沟肠杆菌感染发病。
内毒素是阴沟肠杆菌的致病因子。
除此之外,该菌对消毒剂及抗生素有强烈的抵抗能力,如果应用病菌敏感性低的抗生素则可出现对抗生素敏感的菌株被抑制,耐药菌株大量繁殖,容易造成医院感染细菌的传播和引起患者发病。
这也是渐增多的医院感染的重要因素。
阴沟肠杆菌对抗生素的耐药性主要是产生产生ESBIs和Amp C酶,使抗生素药物水解灭活,同时细菌体内青霉素作用靶位发生变性,导致药物不能与之结合而丧失抗菌作用。
由于第三代头孢菌素的广泛使用,容易筛选出高产Amp C酶的阴沟肠杆菌,导致耐药菌广泛传播。
所以在治疗本病时应根据药敏结果选择合理的治疗方案。
*温馨提示:以上就是对于阴沟肠杆菌感染病因,阴沟肠杆菌感染是由什么原因引起的相关内容叙述,更多有关阴沟肠杆菌感染方面的知识,请继续关注疾病库,或者在站内搜索“阴沟肠杆菌感染”找到更多扩展内容,希望以上内容可以帮助到您!。
阴沟肠杆菌科鉴定实验方法
阴沟肠杆菌科是一类革兰氏阴性杆菌,常见于土壤、水体和动植物体内。
它们具有多样的代谢途径和生理特性,对环境中的有机物质分解和循环有重要作用。
鉴定阴沟肠杆菌科的实验方法主要包括形态学观察、生理生化特性测试和分子生物学鉴定等。
通过形态学观察可以初步判断样品中是否存在阴沟肠杆菌科。
阴沟肠杆菌科的菌落形态多样,常见的形态包括圆形、不规则形、凹陷形等。
菌落表面光滑或粗糙,颜色多为乳白色、灰白色或黄色。
在显微镜下观察,阴沟肠杆菌科的细胞为革兰氏阴性杆状,长度一般为0.5-3微米,直径约为0.2-0.4微米。
生理生化特性测试是鉴定阴沟肠杆菌科的重要方法之一。
阴沟肠杆菌科细菌通常是好氧菌或兼性厌氧菌,能够利用多种碳源进行代谢。
常用的生理生化特性测试包括氧气需求量、温度和pH值的适应性、产酸产气能力等。
阴沟肠杆菌科细菌通常对氧气需求较高,可以在含氧环境中正常生长。
同时,它们对温度和pH值的适应性也较广,能够在较宽的范围内生长繁殖。
分子生物学鉴定是确定阴沟肠杆菌科的确切属种的重要手段。
通过分析菌株的16S rRNA基因序列,可以与数据库中已知的细菌序列进行比对,进而确定菌株的分类地位。
目前,分子生物学鉴定已成为鉴定阴沟肠杆菌科的金标准,具有高度的准确性和可靠性。
鉴定阴沟肠杆菌科的实验方法主要包括形态学观察、生理生化特性测试和分子生物学鉴定。
这些方法结合使用可以对阴沟肠杆菌科进行准确鉴定,为进一步研究其生态学和应用价值提供了基础。
未来,随着科学技术的不断进步,相信对阴沟肠杆菌科的鉴定方法会更加精确和高效。
北京阴沟肠杆菌科鉴定的基本方法引言北京阴沟肠杆菌科是一类常见的细菌科,广泛存在于自然界中。
对于这类细菌的鉴定和分类,是微生物学研究中的重要内容之一。
本文将详细介绍北京阴沟肠杆菌科鉴定的基本方法。
1. 样品采集与处理为了进行北京阴沟肠杆菌科的鉴定,首先需要采集样品,并进行适当的处理。
样品可以来自于土壤、水体、食品、动植物组织等。
采集样品时要注意避免污染和交叉感染。
2. 细菌培养将采集到的样品进行培养是鉴定北京阴沟肠杆菌科的关键步骤之一。
常用的培养基包括营养琼脂、大肠杆菌选择性琼脂等。
在适当条件下,如温度、pH值等控制良好后,将样品接种于培养基上。
3. 形态学观察经过一段时间的培养后,可以对细菌的形态进行观察。
北京阴沟肠杆菌科的细菌多为革兰氏阴性菌,具有一定的特征形态。
通过显微镜观察,可以观察到细菌的形状、大小、染色性质等信息。
4. 生理生化特性检测北京阴沟肠杆菌科中的细菌在生理和生化方面具有一定的特点。
通过对培养后的细菌进行一系列生理生化检测,可以进一步鉴定其属于北京阴沟肠杆菌科。
常用的生理生化特性检测包括: - 氧气需求:北京阴沟肠杆菌科中有些细菌是厌氧菌,而有些是好氧菌。
- 温度适应性:不同种类的细菌对温度有不同的适应能力。
- pH值适应性:不同种类的细菌对pH值有不同的适应能力。
- 酶活性:通过检测细菌产生的酶活性来判断其属于哪个科。
5. 分子生物学方法分子生物学方法在现代微生物学研究中得到了广泛应用,对于鉴定北京阴沟肠杆菌科也起到了重要作用。
常用的分子生物学方法包括PCR、DNA测序等。
通过PCR技术,可以选择合适的引物扩增特定基因片段,如16S rRNA基因。
然后将扩增产物进行测序,通过与数据库中已知序列进行比对,可以进一步确认细菌属于北京阴沟肠杆菌科。
6. 鉴定与分类通过以上步骤的观察和检测,可以得到一系列数据,并结合已有的分类系统,对细菌进行鉴定和分类。
根据形态学、生理生化特性、分子生物学等方面的信息,可以将细菌归类到相应的属、种中。
1905例阴沟肠杆菌的分布及耐药性分析张鲜惠张亚彬兰小鹏摘要:目的:监测我院七年内阴沟肠杆菌的流行状况和耐药特点,为临床合理使用抗生素提供参考。
方法:使用西门子公司的Microscan Walkaway 40SI 全自动微生物鉴定/药敏测试系统进行鉴定和药敏试验。
结果:阴沟肠杆菌主要引起呼吸道感染,对亚胺培南的敏感性最高,但近两年出现耐药菌株;对第一代头孢菌素头孢唑啉和广谱青霉素类的耐药率>9O%;对头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/舒巴坦耐药率都在30%左右;对其他抗菌药耐药率>50%。
结论:阴沟肠杆菌多重耐药的问题日益严重,应监测其耐药变化趋势,指导临床合理使用抗生素。
关键词:阴沟肠杆菌;耐药性;抗菌药物Objective:To acquire the information about the clinical distribution and drug resistance of Enterobacter cloacae. Method:We used Microscan Walkaway 40SI microbial identification and drug sensitivity analysis system to analyze 905 enterobacter cloacae samples. Results:Enterobacter cloacae mainly causes respiratory tract infection, and sensitive to imipeneln.The bacteria showed a resistance rate as high as 90%~100%against first generation cepholoporins and Penicillin antibiotics, nearly 30% against Cefoperazone/Sulbactam and Piperacillin/Sulbactam, and 50% against other antibiotics. Conclusion: Enterobacter cloacae shows high Multi-drug resistance rate,which become more and more serious. We should monitor the trend of drug resistance rate,and to instruct rational application of antibiotics clinically.阴沟肠杆菌广泛分布于自然界中,是人和动物肠道正常菌群,为条件致病菌。
近年来,随着抗生素的应用,阴沟肠杆菌已经成为院内感染的重要病原菌,且多重耐药逐年增加。
本文回顾性的总结2004年至2010年七年内南京军区福州总医院分离出的905株阴沟肠杆菌,初步分析其感染状况和耐药性,为临床治疗微生物感染提供参考。
1材料和方法:作者单位:350025 福州,福建医科大学福州总医院临床医学院(张鲜惠);350025 福州,南京军区福州总医院全军医学检验研究所(张亚彬,兰小鹏)1.1 菌株来源:菌株来源于2004年至2010年本院住院及门诊患者患者的各类临床标本,包括痰、尿液、血液、胸腹水、脑脊液、伤口分泌物等。
1.2 仪器与试剂:西门子公司的Microscan Walkaway 40SI全自动微生物鉴定/药敏测试系统,微生物鉴定仪及配套阴性复合板NC21(美国DADE Bering公司),1.3 菌株鉴定和药敏实验:细菌鉴定和药敏使用Microscan walkaway-40SI全自动微生物鉴定仪,采用微量稀释法测得最小抑菌浓度(MIC),严格按照美国国家临床实验室标准化委员会(CLSI)判定细菌药敏结果为敏感(S)、中介(I)、耐药(R)。
剔除同一患者相同部位的重复菌株。
1.4 菌株来源:质控菌株为大肠埃希氏菌 ATCC 25922,金黄色葡萄球菌金黄色亚种ATCC 25923,铜绿假单胞菌ATCC 27853,卫生部临床检验中心提供。
1.5 统计学方法:采用耐药分析软件WHONET 5.0软件对药敏结果进行统计分析。
2结果:2.1 菌株分离和分布:七年内共分离出阴沟肠杆菌905例,主要来自呼吸内科,老年科及ICU,标本类型以痰液为主,占50%以上,具体情况见表1表1 阴沟肠杆菌的标本分布临床标本菌株数构成比(%)痰464 51.2分泌物239 26.4血液64 7.1尿液82 9.1其他56 6.22.2 阴沟肠杆菌对抗菌药物的耐药率变迁:2004—2010年905株阴沟肠杆菌对常用的21种抗生素的药敏实验结果见表2。
第一代头孢菌素头孢唑啉和广谱青霉素类的耐药率均>9O%;第三代头孢菌素的耐药率在60%-80%之间;磺胺类的复方新诺明的耐药率>60%;氨曲南的耐药率也在60%-90%之间;氨基糖苷类和喹诺酮类的耐药率均在50%以上;联合不可逆的竞争性β-内酰胺酶抑制剂时耐药率明显下降,头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/舒巴坦耐药率都在30%左右;亚胺培南2009年之前100%敏感,之后出现耐药菌株。
表2 阴沟肠杆菌对抗菌药物的耐药率(%)变迁抗菌药物2004-2006n=246R+I S2007-2008n=335R+I S2009-2010n=324R+I S氨苄西林/舒巴坦78.6 21.4 80.6 19.4 83.5 16.5阿米卡星71.0 29.0 55.4 44.6 48.5 51.5氨苄西林96.9 3.1 96.9 3.1 92.2 7.8阿莫西林/克拉维酸84.0 16.0 83.0 17.0 92.1 7.9 氨曲南85.3 14.7 82.6 17.4 64.6 35.4 头孢曲松76.3 23.7 75.4 24.6 65.2 34.8 头孢他啶73.6 26.3 76.9 23.1 73.9 26.1 头孢噻肟80.2 19.8 75.1 24.9 66.4 33.6 头孢西丁92.7 7.3 88.2 11.8 95.3 4.7 头孢唑林96.8 3.2 97.1 2.9 98.1 1.9 环丙沙星65.5 34.5 62.8 37.2 57.3 42.7 头孢吡肟72.3 27.7 70.8 29.2 59.2 40.8 加替沙星65.5 34.5 62.8 37.2 34.2 65.8 庆大霉素81.2 18.8 78.6 21.4 64.5 35.5 亚胺培南0 100 0 100 13.4 86.6 哌拉西林/他唑巴坦33.2 66.8 31.9 68.1 25.9 74.1 哌拉西林80.2 19.8 68.9 31.1 66.8 33.2 复方新诺明75.8 24.2 76.3 23.7 61.8 38.2 替卡西林/克拉维酸……44.3 55.7 妥布霉素83.5 19.5 84.8 15.2 64.9 35.122.3 77.7 32.5 67.5 37.2 62.8头胞哌酮/舒巴坦“…”为未检测3讨论:阴沟肠杆菌属于肠杆菌科肠杆菌属,是临床上常见的致病菌,其感染引起多种疾病,小到皮肤感染,大到致命性的败血症。
调查结果显示阴沟肠杆菌引起的感染以呼吸道为主,占51.2%,与国内大多数报道一致[1-3]。
该菌在我院的感染主要集中在呼吸内科,老年科以及ICU三个科室。
呼吸内科患者多数有呼吸道的基础疾病以及使用过大量抗生素,老年病房患者多数高龄、免疫功能低下且合并多种疾病,ICU病区患者多进行机械通气、侵袭性治疗等,这些都是导致阴沟肠杆菌感染的危险因素。
目前由于抗生素的广泛应用导致的多种细菌耐药问题已经成为世界范围内的难题。
阴沟肠杆菌也不例外,由于其产生AmpC酶、ESBLs酶等多种β内酰胺酶,使其对多种抗菌素产生耐药[4-5]。
本药敏试验显示,除头孢哌酮/舒巴坦,哌拉西林/他唑巴坦,亚胺培南外,阴沟肠杆菌对其他18种抗菌药物的耐药率均高于50%,而且对广谱青霉素和一代头孢类的耐药率超过了90%。
亚胺培南等碳青霉烯类抗生素仍然保持其较高的抗菌活性,但值得注意的是已经出现了耐药菌株,这可能和碳青霉烯酶的产生以及外膜蛋白的缺失有关[6-7]。
2009年之前,本院阴沟肠杆菌对亚胺培南的敏感率为100%,之后开始检出耐亚胺培南的菌株,耐药率就高达10%且逐年上升,2010年为16%,两年内共检出42株。
七年内,除阿米卡星的耐药率有所下降外,其他的抗菌药均保持较高的耐药水平或逐年上升的趋势。
阿米卡星耐药率从71%逐年下降到48.5%,可能是由于其耳毒性和肾毒性的作用使其临床上应用减少。
相对应的,亚胺培南则是由于应用增加而出现耐药菌株,但是其仍然是目前抗菌活性最强的药物,依然可以作为多重耐药菌感染的重症疾病的首选药。
综上所述,要解决阴沟肠杆菌的感染及其耐药问题,首先应当避免感染的危险因素,积极治疗基础疾病,增强患者的免疫力,尽可能的减少侵入性操作,加强消毒隔离等。
其次,鉴于阴沟肠杆菌对常用抗生素高水平的耐药率,临床上在治疗感染时应积极进行病原体的培养和药敏试验,严格按照药物敏感试验的结果合理使用抗生素,避免经验用药导致的无效用药和耐药株的产生。
最后,研制新的抗菌药物也是势在必行。
参考文献:[1] 周光,沈定霞,罗燕萍,等.临床阴沟杆菌感染的分布与耐药性特性的研究[J].中华医院感染学杂志,2006,16(3):340-342.[2] 刘青华,王维平,常纪,等. 354株阴沟肠杆菌耐药性分析[J].齐齐哈尔医学院学报,2009,3O(17):2129.[3] 李莉,齐艳,等.阴沟肠杆菌的临床分布与耐药性研究[J]. 医学理论与实践,2010,23(2):133-134.[4] Paterson D L,Bonomo R A.Extended spectrum beta-lactamases:aclinical update[J].Clin Microbiol Rev,2005,18(4):657-659.[5] 顾怡明,张杰,俞云松,等.多重耐药阴沟肠杆菌流行状况及耐药机制的研究[J].中华医院感染学杂志,2004,14(12) 1321—1324.[6] 张肖,宋诗铎.2株阴沟肠杆菌临床分离株对碳青霉烯类抗生素耐药机制的研究[J].中国抗生素杂志,2011,36(4):303-306.[7] Behera B,Mathur Das A,et a1.Ertapenem susceptibility ofextended spectrum 13-1actamase-producing Enterobacteriaceaeat a tertiary care centre in India[J].Singapore Med 2009,50(6):628—632.。