动物细胞工程常用的技术手段

考点2 动物细胞工程及应用1．动物细胞培养(1)地位：动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合等。

其中动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础。

(2)培养过程(3)培养条件 ①无菌、无毒环境⎩⎪⎨⎪⎧培养液和培养用具进行无菌处理培养过程加抗生素定期更换培养液，清除代谢产物②营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。

③适宜的温度：36.5 ℃±0.5 ℃；适宜的pH ：7.2～7.4。

④气体环境⎩⎪⎨⎪⎧ 95%的空气：其中O 2为细胞代谢必需5%的CO 2：维持培养液的pH2．动物体细胞克隆技术(核移植技术)(1)原理：动物细胞核具有全能性。

(2)核移植分类：胚胎细胞核移植和体细胞核移植。

(3)核移植过程(以克隆高产奶牛为例)(4)应用①加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。

②保护濒危物种。

③生产医用蛋白。

④作为异种移植的供体。

⑤用于组织器官的移植。

3．动物细胞融合和单克隆抗体的制备(1)动物细胞融合①原理：细胞膜的流动性。

②融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。

③意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，也为制造单克隆抗体开辟了新途径。

(2)单克隆抗体①制备过程②优点：特异性强、灵敏度高，并可以大量制备。

③用途：作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。

提醒单克隆抗体制备过程B淋巴细胞要经过免疫过程，即接触抗原，增殖分化为有特异性免疫功能的B淋巴细胞，才能产生相应的抗体，所以，与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是浆细胞。

(析图建模)下图为单克隆抗体制备流程(顺序已被打乱)，请据图分析：(1)图中B注射的物质是什么？其目的是什么？(2)在获取C细胞的过程中，筛选淘汰了哪些细胞？(3)C细胞有什么特点？(4)请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。

答案(1)注射特定抗原；目的是刺激机体发生免疫应答，从而产生浆细胞(效应B细胞)。

动物细胞培养[高中生物]　1.阐明动物细胞培养的条件和过程。

2.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。

一、动物细胞培养的条件和过程1．动物细胞工程常用技术(1)常用技术：动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等。

(2)基础：动物细胞培养。

2．动物细胞培养(1)概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。

(2)培养条件①营养a．合成培养基：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。

b．天然成分：血清。

c．培养液：即液体培养基。

②无菌、无毒的环境a．对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。

b．在无菌环境下进行操作。

c．培养液需定期更换，以清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。

③温度、pH和渗透压a．温度：以36.5 ℃±0.5 ℃为宜。

b．pH：以pH为7.2～7.4为宜。

c．适宜的渗透压。

④气体环境a．O2作用：细胞代谢所必需的。

b．CO2主要作用：维持培养液的pH。

c．气体组合：95%空气＋5%CO2。

(3)培养过程②过程(4)相关概念①细胞贴壁：悬液中分散的细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。

②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。

③原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。

④传代培养：分瓶后的细胞培养。

判断正误(1)动物细胞培养体现了动物细胞的全能性( )(2)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞( )(3)悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴壁细胞需要用胰蛋白酶等处理后再用离心法收集( ) (4)动物细胞培养时，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH( )答案　(1)×　(2)×　(3)√　(4)√探讨点　动物细胞培养1．动物细胞培养的原理是细胞增殖。

2．幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？提示　幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞更易培养，原因是这些细胞分裂能力强。

生物专题细胞工程之动物细胞工程题库详解一、单项选择题（共80小题；共160分）1. 动物细胞融合的原理是A. 动物细胞没有识别能力B. 动物细胞易被病毒感染C. 细胞膜具有流动性D. 动物细胞膜易被击穿2. 能使动物细胞融合的特有的诱导因子是A. 离心B. 灭活的病毒C. 电刺激D. 振动3. 科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是A. 经过免疫的淋巴细胞B. 不经过免疫的淋巴细胞C. 经过免疫的淋巴细胞D. 不经过免疫的淋巴细胞4. 动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是A. 动物细胞培养B. 动物细胞融合C. 生产单克隆抗体D. 胚胎移植、核移植5. 进行动物细胞培养时，选用的材料是A. 衰老退化的动物细胞B. 成熟动物个体的体细胞C. 动物的受精卵D. 动物胚胎或幼年个体的细胞6. 动物细胞融合与植物原生质体融合的理论基础是A. 细胞膜的流动性B. 细胞膜的选择透过性C. 细胞质的流动性D. 细胞质中酶的活性7. 用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞A. 容易产生各种变异B. 具有更强的全能性C. 取材十分方便D. 分裂增殖的能力强8. 为了让用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬液，选取来的动物组织应选用下列哪种物质处理A. 胃蛋白酶B. 胰蛋白酶C. 盐酸D. 胰脂肪酶9. 动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是A. 动物细胞培养B. 动物细胞融合C. 单克隆杭体D. 胚胎、核移植10. 动物细胞培养的细胞来自于A. 任何个体的细胞B. 只能取自动物胚胎细胞C. 只能取自幼龄动物的组织细胞D. 胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞11. 细胞株的特点是A. 遗传物质没有改变，可以无限传代B. 遗传物质发生改变，不可无限传代C. 遗传物质没有改变，不可无限传代D. 遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以无限传代12. 动物细胞工程技术的基础是A. 动物细胞融合B. 单克隆抗体C. 胚胎移植D. 动物细胞培养13. “国际频道”曾报道，广东出入境检疫部门连续两次从美国进口冻猪肾和加拿大进口冻猪肉中检测出兽药残留物—莱克多巴胺。

高二动物细胞工程知识点动物细胞工程是指运用细胞生物学、遗传学、分子生物学等理论和技术，对动物细胞进行研究、操作和改良的一门学科。

它在农业、医学和科学研究等多个领域具有重要的应用价值。

本文将介绍一些高二动物细胞工程的基础知识点。

一、细胞培养基础动物细胞培养是动物细胞研究中最基本的技术手段之一。

常见的细胞培养基包括无血清培养基和含血清培养基。

无血清培养基不含动物血清，通过添加人工合成的营养物质来满足细胞生长所需。

而含血清培养基则利用动物血清中所含有的生长因子和营养物质来维持细胞的生长。

二、细胞培养技术1. 细胞传代：细胞传代是指将原始培养的细胞分为若干个小培养皿中，使细胞继续生长和分裂。

细胞传代的目的是为了扩增细胞数量，以满足后续的实验需求。

2. 细胞冻存：细胞冻存是将细胞在低温下保存，以便日后使用。

通过添加特定的保护剂和冷冻液，可以在极低温度下减少细胞的代谢活动，避免细胞死亡。

3. 细胞鉴定：细胞鉴定是通过观察细胞的形态、生长特性、标记物等来确定细胞的身份和纯度。

常用的方法包括细胞形态观察、细胞分子标记和遗传分析等。

4. 细胞转染：细胞转染是将外源基因导入细胞的过程。

常用的转染方法有化学法、电穿孔法和病毒介导的转染法等。

三、动物细胞培养的应用1. 药物筛选：动物细胞培养可以用于药物的筛选和评价。

通过将药物添加到细胞培养系统中，观察其对细胞的影响，可以评估药物的毒性和疗效。

2. 组织工程：动物细胞培养可以为组织工程提供细胞来源。

通过培养和增殖体外的细胞，可以获得大量的细胞用于组织重建和移植。

3. 基因工程：动物细胞培养可以用于基因工程研究。

通过导入外源基因，可以改变细胞的性质和功能，用于疾病基因治疗和基因表达研究。

四、动物细胞工程的挑战与展望尽管动物细胞工程在许多领域都已取得了重要的成果，但仍面临着一些挑战。

例如，细胞培养过程中的细胞衰老、细胞突变和污染等问题需要得到解决。

此外，细胞工程的应用还需要更深入的研究和探索，以满足不断发展的医学和科学需求。

221动物细胞培养和核移植技术第1课时【学习目标】1 、简述动物细胞培养的过程、条件及应用。

2、比较动物细胞培养与植物组织培养区别。

【学习重点】1、动物细胞培养的过程、条件。

【自主学习】一、动物细胞工程常用的技术手段1、动物细胞工程常用的技术手段有哪几种？2、 ______________ 是动物细胞工程技术的基础。

二、动物细胞培养1、 动物细胞培养的概念（1） 动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，它分散成 _______________ ，后放在 _______________ 中，让这些细胞 ________________ 和 _______________ 。

（2） 动物细胞培养的原理是： __________________ 。

2、 动物细胞培养的过程 （1）基本概念① 什么是细胞贴壁？② 什么是接触抑制？③ 什么是原代培养？什么是传代培养?说明：分瓶之前，称原代培养；出现接触抑制用胰蛋白酶处理，再分瓶培养为传代培养。

（2）过程胰虫白酶，细胞悬液一细胞株或细胞系幼龄动物组织或胚胎剪碎胰蛋白酶*单个细胞---- 细胞悬液原代培养・细胞贴壁生长【思考探究】①为什么选用幼龄的动物组织或胚胎?②如何使组织分散为单个细胞？这说明细胞间的物质是什么？能不能用胃蛋白酶？③制成细胞悬液的主要目的是什么？④培养细胞的培养瓶或培养皿应具备什么条件？⑤贴满瓶壁的细胞要如何处理才能继续培养？⑥目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的，为什么？10〜50代,50 代以后细胞有什么变化？【例1】下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是（）A、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中D培养至50代后的传代细胞称为细胞株3、动物细胞培养的条件①无菌、无毒的环境采取什么措施保证无菌、无毒的环境？②营养什么是合成培养基？培养动物细胞时为什么要加入血清、血浆？③温度和PH适宜的温度一般为________________ ;适宜的PH—般为 ____________________④气体环境细胞培养所需气体主要为Q和CQ,它们分别有什么作用？4、动物细胞培养技术的应用①生产生物制品：疫苗、干扰素、单克隆抗体等；②作为基因工程中的受体细胞；③检测有毒物质及毒性；④科研方面：筛选抗癌药物、治疗和预防疾病等。

必修三动物细胞工程编制：张树义王福玲审核：审批：【学习目标】1.简述动物细胞培养的过程、条件及其应用2.简述克隆动物的概念和原理；体细胞核移植技术和体细胞克隆及其应用前景3.说出述动物细胞融合的方法和过程；单克隆抗体的制备过程及其应用【知识梳理】（使用要求：先独立完成，再借助课本查缺补漏）一、常用技术手段：。

二、动物细胞的培养1．动物细胞培养的原理：。

2．动物细胞培养液的特点：培养基、含动物3．动物细胞培养的条件：⑴无菌、无毒的环境：培养液应进行处理⑵营养物质：。

⑶温度和PH：；。

⑷气体环境：。

4.思考：①为什么用幼龄动物的组织或动物胚胎？②制造细胞悬浮液的目的是什么？胰蛋白酶能用胃蛋白酶代替吗5．动物细胞培养技术的应用：(1)生产蛋白质生物制品。

举例：。

(2)检测有毒物质。

(3) 。

(4)用于科学研究。

如筛选抗癌药物等6.植物组织培养和动物细胞培养的比较7.受精作用、原生质体融合、动物细胞融合受精作用原生质体融合动物细跑融合不同细胞类型细胞来源染色体数目变化2N 2N1+2N22N1+2N2融合条件相同都有两个细胞融合成一个细胞，并且融合成这个细胞的遗传物质都是由原来的两个细胞决定的比较项目植物组织培养动物细胞培养培养原理培养基物理性质化学成分营养物质、营养物质、培养材料常用植物幼嫩部位或常用动物胚胎或培养结果培养目的快速繁殖、培育无病毒植株获得细胞或细胞产品等山东昌乐一中 2012-2013学年高三生物一轮复习学案集编号37 编制时间：2012-12-20三． 动物体细胞核移植技术和克隆动物动物体细胞核移植技术过程：四．动物细胞融合技术和单克隆抗体制备 1.植物体细胞杂交和动物细胞融合项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合细胞融 合原理细胞融 合方法诱导 手段 离心、振动、电刺激、 聚乙二醇诱导 （同植物体细胞融合）再加上 诱导用途 获得杂种植株 主要：制备单克隆抗体2.单克隆抗体概念：由一个杂交瘤细胞通过无性繁殖得到的细胞群分泌产生的一种单一、纯净的抗体。

动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。

动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

动物细胞培养的过程：（1）将组织分散成许多单个细胞（方法：从健康动物体内取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞）（2）用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液（3）将细胞悬液放入培养瓶内，置于适当环境中培养（悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。

培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖，这就要求培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒，易于贴附。

以后，细胞进行有丝分裂。

数量不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。

人们通常将底物组织消化后的初次培养称为原代培养。

）（4）贴壁细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬液，分瓶继续培养，让细胞继续增殖。

（传代培养。

传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了。

一般来说，细胞在传至10~50代左右时，增殖会逐渐缓慢，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。

当继续传代培养时，少部分细胞虎克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生了突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发展。

目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为十代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。

）动物细胞培养的条件（1）无菌、无毒的环境：即对培养液和所有培养用具进行无菌处理。

通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。

此外，应定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害（2）营养：细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。

细胞练习题
1、动物细胞工程常用的技术手段_______。

其中__________是基础。

2、动物细胞培养的过程、原理、条件。

3、细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养的概念。

4、将组织细胞分散成单个细胞用_______处理。

培养液中要加_______ 天然成分。

CO2的作用、O2的作用。

5、动物核移植的分类、原理。

6、体细胞核移植过程中，选用_____做受体细胞，原因？激活受体细胞的方法？目的？整个体细胞核移植过程中所用的技术手段有________。

7、人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化，形成相应_________，用于组织器官移植。

8、动物细胞融合也称_______ ，指_______ 的过程。

动物细胞融合的原理、结果、诱导因素、意义。

9、传统的制备抗体方法是：向小鼠体内反复注射，从_______ 分离所需抗体。

这种抗体的缺点是。

10、单克隆抗体的制备过程。

要得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞需_______ 次筛选，第一次筛选在_______ 上进行，第二次筛选要进行_______ 。

11、杂交瘤细胞的特点，单克隆抗体的特点？
12、生物导弹的概念。

其中，瞄准装置是_______ ，杀伤性弹头是_______ 。

细胞工程细胞器水平例子细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合技术科学。

细胞工程涉及的领域相当广泛，就其技术范围而言，大致有细胞融合技术、细胞拆合技术、染色体技术、基因转移技术、胚胎移植技术和细胞组织培养技术等;就其细胞类型的不同，可以把细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程。

植物细胞工程通常采用的技术手段有植物组织培养和植物体细胞杂交。

这些理论的基础是植物细胞的全能性。

动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植等。

其中，动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。

植物组织培养植物组织培养是指在人工操作下，将植物的器官、组织或细胞从植物体上取出，在一定的容器内供给适当的营养物质，使它们得到分化、发育和生长的培养技术。

用于组织培养的植物细胞或器官称为外植体。

外植体在适宜的营养和外界条件下，细胞首先发生脱分化，然后恢复细胞分裂形成愈伤组织(指一群形态、结构相同或相似的还未分化的细胞群)，再在一定的诱导因素作用下发生分化，最后形成具有根、茎、叶的完整植物体。

在植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化产生愈伤组织的一个重要因素是植物激素。

当细胞分裂素与生长素共同使用时，能强烈地剌激愈伤组织的形成。

早在20世纪50年代初，我国植物生理学家崔微等人就发现细胞分裂素与生长素之间的浓度比，可以调控植物组织培养过程中的芽和根的形成，即当细胞分裂素与生长素的浓度比高时，有利于芽的生长;当浓度比低时，则有利于根的发生。

植物体细胞杂交植物体细胞杂交是在原生质培养技术的基础上，借用动物细胞融合方法发展起来的-一门新型技术。

植物体细胞杂交的过程包括原生质的制备、原生质体融合的诱导，杂种细胞的筛选和培养，以及杂种植株的再生与鉴定等环节。

应用这种技术，能够克服远缘杂交不育的缺陷，对培育新品种具有广阔的应用前景。