线性范围及检测限

侧向免疫层析参数
侧向免疫层析（Lateral Flow Immunoassay，LFIA）是一种基于抗原-抗体特异性
反应的快速检测技术，常用于生物样本中目标分析物的检测。

以下是一些侧向免疫层析的常见参数：
1.检测限（Limit of Detection，LOD）：指能够可靠地检测到目标分析物的
最低浓度或量。

检测限通常以一定置信度下的浓度表示。

2.灵敏度：指检测方法对目标分析物的敏感程度，通常以检测限或最低可检
测浓度来表示。

3.特异性：指检测方法对目标分析物的选择性，即能够区分目标分析物与其
他类似物或干扰物的能力。

4.线性范围：指检测方法在一定浓度范围内能够保持线性响应的区间，通常
以相关系数（R^2）来评估线性程度。

5.准确度：指检测结果与真实值之间的接近程度，可以通过与标准方法或参
考物质进行比较来评估。

6.精密度：指在相同条件下多次重复检测结果之间的一致性，可以通过重复
性和中间精密度等指标来评估。

7.稳定性：指检测试剂在储存和使用过程中的稳定性，包括长期稳定性和开
封后稳定性等。

8.反应时间：指从样本加入到检测结果出现所需的时间，通常以秒或分钟为
单位。

这些参数是评估侧向免疫层析方法性能的重要指标，可以用于优化检测条件、选择合适的试剂和设备，以及确保检测结果的准确性和可靠性。

具体的参数要求可能因不同的检测项目和应用而有所差异。

线性与范围（li nearity and ran ge）分析方法的线性是在给定范围内获取与样品中供试物浓度成正比的试验结果的能力。

换句话说，就是供试物浓度的变化与试验结果（或测得的响应信号）成线性关系。

所谓线性范围是指利用一种方法取得精密度、准确度均符合要求的试验结果，而且成线性的供试物浓度的变化范围，其最大量与最小量之间的间隔，可用mg/L ~ mg /L、ug/ml ~ ug/ml等表示。

线性与范围的确定可用作图法（响应值Y/浓度X）或计算回归方程（Y = a+bX）来研究建立。

测定样品时所有生物药物分析方法都必须同时作标准曲线。

每次作标准曲线时，方法应与分析方法考核时完全一致。

标准浓度应包括一定梯度的5-8个浓度（非线性者如免疫分析可适当增加）,每个浓度只需测定一次（免疫分析可测定两次并取均值）;标准曲线应覆盖样品可能的浓度范围，对于含量测定要求一般浓度上限为样品最高浓度的120%，下限为样品最低浓度的80% （但应高于LOQ）;目前仍广泛采用相关系数（r）表示标准曲线的线性度、并控制r > 0.990。

对照品的LOQ必须包括在线性范围。

线性范围是指与检测器响应信号成线性关系的样品的含量范围一般情况下，标准曲线的最低和最高值是包含在线性范围内的，而且不同人做的标准曲线，他所取的最低和最高值也不会都相同，打个比方来说,A做5个点的标准曲线，所选择的标准样品的浓度分别为：1,5,10,15,20,那么最低最高值分别为1和20,而对于这种要检测的物质来说它的线性范围可能是10E5,要远大于制作标准曲线所选择的浓度范围•通常在建立一个新方法的时候可以通过文献查到一些物质的线性范围，而实际工作中，要确切知道某种物质的线性范围必要性可能也不大。

S/N=3时的浓度是检测限，也就是峰高约在基线噪音高的3倍，注入液相色谱仪的对照品百分浓度％。

S/N=10是定量限，也就是峰高约在基线噪音高的10倍时，注入液相色谱仪的对照品量。

在水质环己酮的测定中，可以参考以下标准和方法：方法类型：通常采用气相色谱法进行水质环己酮的测定。

检测限：该方法对环己酮的检测限为0.03mg/L。

线性范围：在0.03mg/L至2.00mg/L的范围内，该方法呈线性关系，相关系数r值可达到0.9996。

精密度与准确度：加标回收率在90%以上，相对标准偏差(RSD)小于7.0%。

其他指标：该方法预处理简单，检测灵敏度高，可用于水体中环己酮含量的测定。

需要注意的是，在进行水质环己酮的测定时，应结合实际情况选择合适的标准和方法，并严格遵守相关实验室规范和操作规程，以确保试验结果的准确性和可靠性。

气相色谱外标法计算公式气相色谱外标法是一种常用的定量分析方法，其基本原理是通过测量样品中待测组分气相色谱外标法是一种常用的定量分析方法，其基本原理是通过测量样品中待测组分与已知浓度的标准物质的响应值，然后利用标准曲线计算出待测组分的含量。

这种方法具有操作简便、准确度高、灵敏度好等优点，广泛应用于环境监测、食品安全、石油化工等领域。

气相色谱外标法的计算公式如下：1. 标准曲线的斜率（S）：S = (C_s2 - C_s1) / (A_s2 - A_s1)其中，C_s1和C_s2分别为标准物质在两个不同浓度下的浓度；A_s1和A_s2分别为标准物质在两个不同浓度下的响应值。

2. 待测样品中待测组分的浓度（C_x）：C_x = (A_x * S) / A_s其中，A_x为待测样品中待测组分的响应值；A_s为标准物质的响应值。

3. 待测样品中待测组分的含量（W_x）：W_x = C_x * V_sample / V_standard其中，V_sample为待测样品的体积；V_standard为标准物质的体积。

4. 重复性和精密度：重复性（RSD）和精密度（%RSD）是评价气相色谱外标法准确性的重要指标。

重复性是指在相同条件下，对同一样品进行多次测量，得到的结果之间的一致性。

精密度是指在相同条件下，对同一样品进行多次测量，得到的结果之间的离散程度。

计算公式如下：RSD = (Σ(C_i - C_mean) / n) / C_mean * 100%其中，C_i为每次测量得到的浓度；n为测量次数；C_mean 为所有测量结果的平均值。

5. 线性范围和检测限：线性范围是指标准曲线呈线性关系的浓度范围。

检测限是指能够准确测量的最低浓度。

计算公式如下：线性范围= (C_s1 * A_s1) / A_s2 - (C_s2 * A_s1) / A_s2检测限= 3 * S / m + C_s1其中，m为空白样品的平均响应值。

IVD试剂性能评估指标体外诊断试剂是疾病诊断与治疗的重要辅助手段。

一个新开发的试剂能否真正面市，除了进行反应模式和体系等优化外，合理的性能分析与评估，是必经的程序，也是质量保障的基础。

通常，体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围，准确度，精密度，干扰实验，稳定性，参考区间。

1.检测限检测限是指检测方法可检测出的最低被检测量浓度，也称为分析灵敏度。

分析灵敏度：一般用95％可信限计算：重复测定空白样本20次，计算20次反应测得的均值（X）和标准差（SD），以X+2SD（夹心法）或X-2SD（竞争法）计算出相应的浓度，即为体外诊断试剂的分析灵敏度，也是注册资料所需提供的内容。

功能灵敏度：将低值样本倍比稀释后重复测定10次以上，计算每个低值样本检测信号的均值、标准差和变异系数（CV），选择CV大于20％时所对应的低值样本平均浓度，这就是体外诊断试剂的功能灵敏度。

2.线性范围线性范围是指检测系统最终输出值（浓度或活性）与被分析物的浓度成正比的范围。

建立一种定量测定方法的线性范围，需在预期测定范围内选择7-11个浓度水平。

准备足量的高值（H）样本和低值（L）样本，经不同比例混合配制成中间浓度样本，比例关系可按等间距或其他确定的比例。

其中，有几个重要的浓度水平需要考虑：1）最低分析浓度或线性范围下限；2）不同的医学决定水平值；3）最高分析浓度或线性范围上限。

3.可报告范围可报告范围是指对检测有意义的待测物浓度范围。

可报告范围低限：以方法性能指示的CV值为可接受界值，由数据中选取CV值等于或小于可接受界值的最低浓度水平作为可报告范围低限。

可报告范围高限：当测定值超出线性范围上限时，此测定值应视为不准确值，需要对标本进行稀释。

由于基质效应的影响，任何标本并非可以做无止境的稀释。

也就是说，每一个实验项目有其最大稀释倍数。

这个最大稀释倍数与线性范围上限的乘积即为可报告范围高限。

4.准确度准确度是指检测结果与被测量真值之间的一致程度。

线性与范围 (linearity and range) 分析方法的线性是在给定范围内获取与样品中供试物浓度成正比的试验结果的能力。

换句话说，就是供试物浓度的变化与试验结果(或测得的响应信号)成线性关系。

所谓线性范围是指利用一种方法取得精密度、准确度均符合要求的试验结果，而且成线性的供试物浓度的变化范围，其最大量与最小量之间的间隔，可用mg/L ~ mg/L、 ug/ml ~ ug/ml等表示。

线性与范围的确定可用作图法(响应值Y/浓度X)或计算回归方程(Y=a+bX)来研究建立。

测定样品时，所有生物药物分析方法都必须同时作标准曲线。

每次作标准曲线时，方法应与分析方法考核时完全一致。

标准浓度应包括一定梯度的5-8个浓度 (非线性者如免疫分析可适当增加)，每个浓度只需测定一次(免疫分析可测定两次并取均值);标准曲线应覆盖样品可能的浓度范围，对于含量测定要求一般浓度上限为样品最高浓度的120%，下限为样品最低浓度的80% (但应高于LOQ);目前仍广泛采用相关系数(r)表示标准曲线的线性度、并控制r≥0.9900。

对照品的LOQ必须包括在线性范围。

检测限(limit of detection，LOD) 是指分析方法能够从背景信号中区分出药物时，所需样品中药物的最低浓度，无需定量测定。

LOD是一种限度检验效能指标，它既反映方法与仪器的灵敏度和噪音的大小，也表明样品经处理后空白(本底)值的高低。

要根据采用的方法来确定检测限。

当用仪器分析方法时，可用已知浓度的样品与空白试验对照，记录测得的被测药物信号强度S与噪音(或背景信号)强度N，以能达到S/N=2或S/N=3时的样品最低药浓为LOD;也可通过多次空白试验，求得其背景响应的标准差，将三倍空白标准差(即3δ空或3S空)作为检测限的估计值。

为使计算得到的LOD值与实际测得的LOD值一致，可应用校正系数(f)来校正，然后依之制备相应检测限浓度的样品，反复测试来确定LOD。

血红蛋白测量技术评分标准简介本文档旨在提供血红蛋白测量技术的评分标准，以便评估不同技术方法的准确性和可靠性。

评分标准下面列出了血红蛋白测量技术的评分标准：1. 准确性（Accuracy）：- 针对不同样本类型，评估技术的血红蛋白测量结果与标准方法之间的一致性。

- 结果相对误差小于5%的得分为5分，5%至10%的得分为4分，10%至15%的得分为3分，大于15%的得分为2分。

2. 精确度（Precision）：- 评估技术对同一样本进行重复测量时的一致性。

- 相对标准差小于5%的得分为5分，5%至10%的得分为4分，10%至15%的得分为3分，大于15%的得分为2分。

3. 稳定性（Stability）：- 评估技术在不同运输和储存条件下的结果稳定性。

- 结果相对误差小于5%的得分为5分，5%至10%的得分为4分，10%至15%的得分为3分，大于15%的得分为2分。

4. 线性范围（Linearity Range）：- 评估技术在不同血红蛋白浓度范围内的线性关系。

- 在100%至80%的线性范围得分为5分，80%至60%的得分为4分，60%至40%的得分为3分，小于40%的得分为2分。

5. 检测限（Detection Limit）：- 评估技术能够可靠检测的最低血红蛋白浓度。

- 检测限小于0.5 g/dL的得分为5分，0.5 g/dL至1 g/dL的得分为4分，1 g/dL至2 g/dL的得分为3分，大于2 g/dL的得分为2分。

总结本文档提供了血红蛋白测量技术评分标准，包括准确性、精确度、稳定性、线性范围和检测限。

这些评分标准可用于评估不同技术方法的优劣，帮助选择最适合的血红蛋白测量技术方法。