完整版植株全氮磷钾测定方法

植物体内全氮、磷、钾的测定一、实验原理作物体中的氮、磷、钾通过硫酸和H2O2消化，使有机氮化物转化成铵态氮，各种形态磷化物转化成磷酸，N、P、K均转变成可测的离子态（氮转化为NH4+，磷转化为H3PO4，钾为K+）。

然后采用相应的方法分别测定。

磷的测定原理（钒钼黄比色法）：在酸性条件下，溶液中的磷酸根与偏钒酸盐和钼酸盐作用形成黄色的钒钼酸盐。

黄色深浅与溶液中磷浓度呈正比。

此法要求酸度0.04—1.6N（以0.5—1.0N最好）；测磷浓度范围0—20mg/kg，比色波长460—490nm，磷浓度低时选用较短的波长，反之可选较长的波长。

钾的测定原理（火焰光度法）：含钾溶液雾化后与可燃气体（如：汽化的汽油等）混合燃烧，其中的钾离子（基态）接受能量后，外层电子发生能级跃迁，呈激发态，由激发态变成基态过程中发射出特定波长的光线（称特征谱线）。

单色器或滤光片将其分离出来，由光电池或光电管将特征谱线具有的光能转变为电流。

用检流计测出光电流的强度。

光电流大小与溶液中钾的浓度呈正比，通过与标准溶液光电流强度的比较求出待测液中钾的浓度。

二、仪器与试剂仪器：分析天平（0.0001）、凯氏定氮仪、分光光度计、火焰光度计、消煮管、容量瓶（50ml）移液管（5、10、20ml）消煮及定氮试剂：1．浓硫酸2．30％H2O 23. 10mol/L NaOH：称400.0ｇNaOH溶解于1L蒸馏水中4. 显色剂：称0.099ｇ溴甲酚绿和0.066ｇ甲基红，溶于95％乙醇且定容至100ml5. 2％硼酸：称样品20.0ｇH3BO2溶于1L蒸馏水中6. 硼酸指示剂：取显色剂20 ml与1L２％硼酸溶液混合均匀7.0.02N H2SO4 （0.01 mol/L）标准溶液：量取浓H2SO42.83ml定容至5 L8. 0.01N H2SO4 ：将0.02N H2SO4稀释1倍（7.8合并： 1.413ml定容到5L）测P、K试剂：1．钒钼酸试剂：25.0克钼酸铵〔（NH4）2Mo7O2• 4H2O〕溶于400ml水中，另取1.25克偏钒酸铵（NH4VO3）溶于300ml沸水中，冷却后加入250ml浓HNO3，冷却后，将钼酸铵溶液慢慢地混入偏钒酸铵溶液中，边混边搅拌，用水稀释至1升。

植株全氮、全磷、全钾的测定一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法）二、植株全氮的测定（H2SO4—H2O2消煮，蒸馏法）三、植株全磷的测定（H2SO4—H2O2消煮，钒钼黄比色法）四、植株全钾的测定（H2SO4—H2O2消煮，火焰光度法一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法）1 H2SO4—H2O2消煮原理植物样品在浓H2SO4溶液中，经过脱水、碳化、氧化等一系列的作用后，易分解的有机物则分解，然后再加入H2O2，H2O2在热的浓H2SO4溶液中会分解出新生态氧，具有强烈的氧化作用，可继续分解没被H2SO4破坏的有机物，使有机态氮全部转化为无机铵盐。

同时，样品中的有机磷也转化为无机磷酸盐，故可用同一消煮液分别测定N、P、K（植株中K以离子态存在）。

2 主要仪器：万分之一电子天平、0.5 mm筛、三角瓶（50ml）或消煮管、移液管（5、10ml）+吸耳球、弯颈小漏斗、消煮炉、吸管、漏斗、无磷钾滤纸、容量瓶（100ml）2 试剂：浓硫酸（GB T625）：化学纯、比重1.8430%H2O2（GB 6684）：阴凉处存放3 操作步骤称取烘干、磨细的植物样品(过0.5 mm筛)0.19g，置于50ml三角瓶（或消煮管）底部（勿将样品粘附在瓶颈上），加浓硫酸5mL，摇匀（最好放置过夜），瓶口盖一弯颈小漏斗，在电炉上先缓缓加热，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度（在消煮炉上先250℃消煮—温度稳定后计时，时间约30min，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度至400℃）。

消煮至溶液呈均匀的棕黑色时，取下三角瓶，稍冷后提起弯颈漏斗，滴加30%H2O210滴，并不断摇动三角瓶。

再加热(微沸)约7-10 min，取下，稍冷后重复滴加30%H2O25~10滴，再消煮。

如此反复进行3-5次，每次添加的H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热5-10min（以赶尽剩余的H2O2)，取下三角瓶冷却，用少量水冲洗漏斗，洗液流入三角瓶中。

植物全氮磷钾的测定1植物氮、磷、钾全量分析植物中氮、磷、钾测定包括待测液制备和氮、磷、钾定量2大步骤。

1植物全氮、磷、钾含量测定—待测液制备（H2SO4+H2O2消煮法）1.1适用范围：本方法不包括硝态氮的植物全氮测定，适合于含硝态氮低的植物样品的测定。

1.2方法提要植物中的氮、磷大多数以有机态存在，钾以离子态存在。

样品经浓H2SO4和氧化剂H2O2消煮，有机物被氧化分解，有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐，钾也全部释出。

消煮液经定容后，可用于氮、磷、钾等元素的定量。

采用H2O2为加速消煮的氧化剂，不仅操作手续简单快速，对氮、磷、钾的定量没有于扰，而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度。

但要注意遵照操作规程的要求操作，防止有机氮被氧化成N2气或氮的氧化物而损失。

1.3试剂1.3.1硫酸(化学钝，比重1.84)；+1.3.2 30％H2O2 (分析纯)。

1.4主要仪器设备1.4.1消煮炉1.5 操作步骤称取植物样品(0.5mm)0．3 g ~0．5g（称准至0．0002g）装入100mL开氏瓶或消煮管的底部，加浓H2SO4 5mL，摇匀，放置过夜。

第二天在电炉或消煮炉上先小火加热，待H2SO4发白烟后再升高温度，当溶液呈均匀的棕黑色时取下。

稍冷后加10滴H2O2，再加热至微沸，消煮约7～10min，稍冷后重复加H2O2，再消煮。

如此重复数次，每次添加的H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热约10min，除去剩余的H2O2。

取下冷却。

用水将消煮液无损地转移入100mL容量瓶中，冷却至室温后定容(V1)。

用无磷钾的干滤纸过滤，或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾。

每批消煮的同时，进行空白试验，以校正试剂和方法的误差。

1.６注意事项1.6.1所用的H2O2应不含氮和磷。

H2O2在保存中可能自动分解，加热和光照能促使其分解，故应保存于阴凉处。

在H2O2中加入少量H2SO4酸化，可防止H2O2分解。

水稻植株中氮、磷、钾含量的测定是农业研究和生产中的重要内容，它有助于了解作物的营养状况，指导合理施肥。

以下是常用的测定方法：
1. 样品采集：
选取代表性的水稻植株，剪取叶片或全株作为样品。

将样品清洗干净，去除表面的灰尘和杂质。

将清洗后的样品在60-80°C的烘箱中烘干至恒重，然后磨细备用。

2. 氮含量测定（凯氏定氮法）：
称取一定量的细粉样品，放入凯氏定氮仪的消化管中。

加入硫酸和催化剂，加热消化至样品完全分解，冷却后加入蒸馏水。

将消化液移至蒸馏装置中，加入碱液，进行蒸馏，收集蒸馏出的氨气。

用酸性指示剂和标准酸溶液滴定收集到的氨水，根据滴定体积计算氮含量。

3. 磷含量测定（钼蓝比色法）：
将烘干磨细的样品与浓硫酸和高锰酸钾混合，加热消化。

待消化液冷却后，加入钒钼酸钠溶液和抗坏血酸，进行还原。

在一定波长下，使用分光光度计测定溶液的吸光度，根据标准曲线计算磷含量。

4. 钾含量测定（火焰光度计法）：
将烘干磨细的样品与浓硫酸混合，加热灰化。

将灰化后的样品溶解在水中，过滤。

使用火焰光度计测定滤液中的钾离子浓度，根据标准曲线计算钾含量。

以上方法需要专业的仪器设备和操作技能，一般在实验室环境下进行。

测定结果可以帮助农业工作者评估水稻植株的营养状态，指导施肥管理。

植物全氮、磷、钾的测定植物中氮、磷、钾的测定包‎括待测液的‎制备和氮磷‎钾的定量两‎大步骤。

植物全氮待‎测液的制备‎通常用开氏‎消煮法(参考有机肥‎料全氮的测‎定)。

植物全磷、钾可用干灰‎化或其他湿‎灰化法制备‎待测液。

本书介绍H‎2SO4—H2O2消‎煮法，可用同一份‎消煮液分别‎测定氮、磷、钾以及其它‎元素(如钙、镁、铁、锰等)。

一、植物样品的‎消煮(H2SO4‎—H2O2法‎)方法原理植‎物中的氮磷‎大多数以有‎机态存在，钾以离子态‎存在。

样品经浓H‎2SO4和‎氧化剂H2‎O2消煮，有机物被氧‎化分解，有机氮和磷‎转化成铵盐‎和磷酸盐，钾也全部释‎出。

消煮液经定‎容后，可用于氮、磷、钾等元素的‎定量。

本法采用H‎2O2加速‎消煮剂，不仅操作手‎续简单快速‎，对氮磷钾的‎定量没有干‎扰，而且具有能‎满足一般生‎产和科研工‎作所要求的‎准确度，但要注意遵‎照操作规程‎的要求操作‎，防止有机氮‎被氧化成N‎2或氮的氧‎化物而损失‎。

试剂：(1)硫酸(化学纯、比重1.84)(2)30%H2O2（分析纯)操作步骤：(1)常规消煮法‎称取植物样‎品(0.5mm)0.3～0.5g(准确至0.0002g‎)装入100‎m l开氏瓶‎的底部，加浓硫酸5‎m l，摇匀(最好放置过‎夜)，在电炉上先‎小火加热，待H2SO‎4发白烟后再‎升高温度，当溶液呈均‎匀的棕黑色‎时取下，稍冷后加6‎滴H2O2‎，再加热至微‎沸，消煮约7—10 分钟，稍冷后重复‎加H2O2‎再消煮，如此重复数‎次，每次添加的‎H2O2应逐次减少‎，消煮至溶液‎呈无色或清‎亮后，再加热约1‎0分钟，除去剩余的‎H2O2，取下冷却后‎，用水将消煮‎液无损转移‎入100m‎l容量瓶中，冷却至室温‎后定容(V1)。

用无磷钾的‎干燥滤纸过‎滤，或放置澄清‎后吸取清液‎测定氮、磷、钾。

每批消煮的‎同时，进行空白试‎验，以校正试剂‎和方法的误‎差。

(2)快速消煮法‎称取植物样‎品(0.5mm)0.3～0.5g(称准至0.0002g‎)，放入100‎m l 开氏瓶中，加1ml水‎润湿，加入4ml‎浓H2SO‎4摇匀，分两次各加‎入H2O2‎2ml，每次加入后‎均摇匀，待激烈反应‎结束后，置于电炉上‎加热消煮，使固体物消‎失成为溶液‎，待H2SO‎4发白烟，溶液成褐色‎时，停止加热，此过程约需‎10 分钟。

植株全氮、磷、钾测定方法‎一、植物全氮测‎定（一）H2SO4‎-H2O2消‎煮法1、适用范围本方法不包‎括硝态氮的‎植物全氮测‎定,适合于含硝‎态氮低的植‎物样品的测‎定。

2、方法提要植物中的氮‎、磷大多数以‎有机态存在‎,钾以离子态‎存在。

样品经浓H‎2S O4和‎氧化剂H2‎O2消煮,有机物被氧‎化分解,有机氮和磷‎转化成铵盐‎和磷酸盐,钾也全部释‎出。

消煮液经定‎容后,可用于氮、磷、钾的定量。

采用H2O‎2为加速消‎煮的氧化剂‎,不仅操作手‎续简单快速‎,对氮、磷、钾的定量没‎有干扰,而且具有能‎满足一般生‎产和科研工‎作所要求的‎准确度。

但要注意遵‎照操作规程‎的要求操作‎,防止有机氮‎被氧化成N‎2气或氮的‎氧化物而损‎失。

3、试剂（1）硫酸(化学纯,比重1.84);（2）30% H2O2(分析纯)。

4、主要仪器设‎备。

消煮炉，定氮蒸馏器‎。

5、操作步骤称取植物样‎品(0.5mm)0.3～0.5g(称准至0.0002g‎)装入100‎m l开氏瓶‎或消煮管的‎底部,加浓H2S‎O45ml‎,摇匀(最好放置过‎夜),在电炉或消‎煮炉上先小‎火加热,待H2SO‎4发白烟后‎再升高温度‎,当溶液呈均‎匀的棕黑色‎时取下。

稍冷后加班‎10滴H2‎O2(3),再加热至微‎沸,消煮约7～10min‎,稍冷后重复‎加H2O2‎,,再消煮。

如此重复数‎次,每次添加的‎H2O2应‎逐次减少, 消煮至溶液‎呈无色或清‎亮后,再加热10‎m in,除去剩余的‎H2O2。

取下冷却后‎,用水将消煮‎液无损地转‎移入100‎m l容量瓶‎中,冷却至室温‎后定容(V1)。

用无磷钾的‎干滤纸过滤‎,或放置澄清‎后吸取清液‎测定氮、磷、钾。

每批消煮的‎同时,进行空白试‎验,以校正试剂‎和方法的误‎差。

6、注释（1）所用的H2‎O2应不含‎氮和磷。

H2O2在‎保存中可能‎自动分解,加热和光照‎能促使其分‎解,故应保存于‎阴凉处。

植株全氮的测定1 主题内容与适用范围本标准规定了植株全氮测定的硫酸-过氧化氢消煮、碱化后蒸馏定氮的方法。

本标准适用于禾本科植株全氮含量的测定。

2引用标准GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法NY/T 297-1995 有机肥料全氮的测定3 方法原理植株样品用浓硫酸加双氧水消煮，使有机氮转化为铵盐。

铵盐经碱化后形成氨，经蒸馏将氨吸收到硼酸溶液中。

以甲基红—溴甲酚绿为指示剂，用标准酸滴定，测定植株中的全氮含量（不包括全部硝态氮）。

4 试剂所有试剂除注明者外，均为分析纯。

分析用水应符合GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法三级水的规格。

4.1 硫酸（GB/T 625）。

4.2 30%过氧化氢（GB 6684）。

4.3氢氧化钠：40%，（m/V）溶液称取40g氢氧化钠（GB 629 分析纯）溶于100mL水中。

4.4硼酸：2%（v/m）溶液20g硼酸（GB 628）溶于1L约60℃去离子水中，冷却后再用稀碱调节溶液pH至4.5。

使用前每升硼酸溶液中加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂20mL，并用稀酸或稀碱调节至微红色，此时该溶液的PH值为4.5。

4.5甲基红-溴甲酚绿混合指示剂0.5g溴甲酚绿(HG 3-1220)和0.1g甲基红(HG 3-958)于研钵中，加少量95%乙醇研磨至指示剂全溶为止，最后加95%的乙醇至100mL。

4.6硫酸标准液[c（1/2 H2SO4）=0.02mol/L]（GB 601）。

5 仪器通常实验室仪器和5.1消煮管：50mL或100mL。

5.2消煮炉或可调电炉：1000W。

5.3弯颈小漏斗：￠2cm。

5.4 凯氏定氮仪：全自动或半自动。

5.5分析天平：感量为0.1mg。

5.6移液管：5，10mL。

6 检试样的制备取风干的实验室待测样品充分混匀后，按四分法缩减至100g，粉碎，籽粒全部通过0.25mm（秸秆通过0.5mm）孔径筛，装入样品瓶备用。

植物组织样品的采集制备及全氮、磷、钾的测定（基础方法）一植物组织样品的采集植物组织样品多用于诊断分析，采集植物组织样品首先要选定植株。

样株必须有充分的代表性，通常也象采集土样一样按照一定路线多点采集，组成平均样品。

组成每一平均样品的样株数目视作物种类、种植密度、株型大小、株龄或生育期以及要求的准确度而定。

从大田或试验区选择样株要注意群体密度，植株长相、植株长势、生育期的一致，过大或过小，遭受病虫害或机械损伤以及由于边际效应长势过强的植株都不应采用。

如果为了某一特定目的，例如缺素诊断而采样时，则应注意植株的典型性，并要同时在附近地块另行选取有对比意义的正常典型植株，使分析的结果能在相互比较的情况下，说明问题。

植株选定后还要决定取样的部位和组织器官，重要的原则是所选部位的组织器官要具有最大的指示意义，也就是说，植株在该生育期对该养分的丰欠最敏感的组织器官。

大田作物在生殖生长开始时期常采取主茎或主枝顶部新成熟的健壮叶或功能叶；幼嫩组织的养分组成变化很快，一般不宜采样。

苗期诊断则多采集整个地上部分。

大田作物开始结实后，营养体中的养分转化很快，不宜再做叶分析，故一般谷类作物在授粉后即不再采诊断用的样品。

如果为了研究施肥等措施对产品品质的影响，则当然要在成熟期采取茎秆、籽粒、果实、块茎、块根等样品，果树和林木多年生植物的营养诊断通常采用“叶分析”或不带叶柄的“叶片分析”，个别果树如葡萄、棉花则常做“叶柄分析”。

植物体内各种物质，特别是活动性成分如硝态氮、氨基态氮，还原糖等都处于不断的代谢变化之中，不仅在不同生育期的含量有很大的差别，并且在一日之间也有显著的周期性变化。

因此在分期采样时，取样时间应规定一致，通常以上午8—10时为宜，因为这时植物的生理活动已趋活跃，地下部分的根系吸收速率与地上部正趋于上升的光合作用强度接近动态平衡。

此时植物组织中的养料贮量最能反映根系养料吸收与植物同化需要的相对关系，因此最具有营养诊断的意义。

植株全氮、全磷、全钾的测定一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法）二、植株全氮的测定（H2SO4—H2O2消煮，蒸馏法）三、植株全磷的测定（H2SO4—H2O2消煮，钒钼黄比色法）四、植株全钾的测定（H2SO4—H2O2消煮，火焰光度法一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法）1 H2SO4—H2O2消煮原理植物样品在浓H2SO4溶液中，经过脱水、碳化、氧化等一系列的作用后，易分解的有机物则分解，然后再加入H2O2，H2O2在热的浓H2SO4溶液中会分解出新生态氧，具有强烈的氧化作用，可继续分解没被H2SO4破坏的有机物，使有机态氮全部转化为无机铵盐。

同时，样品中的有机磷也转化为无机磷酸盐，故可用同一消煮液分别测定N、P、K（植株中K以离子态存在）。

2 主要仪器：万分之一电子天平、0.5 mm筛、三角瓶（50ml）或消煮管、移液管（5、10ml）+吸耳球、弯颈小漏斗、消煮炉、吸管、漏斗、无磷钾滤纸、容量瓶（100ml）2 试剂：浓硫酸（GB T625）：化学纯、比重1.8430%H2O2（GB 6684）：阴凉处存放3 操作步骤称取烘干、磨细的植物样品(过0.5 mm筛)0.19g，置于50ml三角瓶（或消煮管）底部（勿将样品粘附在瓶颈上），加浓硫酸5mL，摇匀（最好放置过夜），瓶口盖一弯颈小漏斗，在电炉上先缓缓加热，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度（在消煮炉上先250℃消煮—温度稳定后计时，时间约30min，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度至400℃）。

消煮至溶液呈均匀的棕黑色时，取下三角瓶，稍冷后提起弯颈漏斗，滴加30%H2O210滴，并不断摇动三角瓶。

再加热(微沸)约7-10 min，取下，稍冷后重复滴加30%H2O25~10滴，再消煮。

如此反复进行3-5次，每次添加的H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热5-10min（以赶尽剩余的H2O2)，取下三角瓶冷却，用少量水冲洗漏斗，洗液流入三角瓶中。

- - 实验报告课程名称： 土壤学实验 指导老师： 倪吾钟 成绩：实验名称： 植物全氮、全磷、全钾含量的测定 同组学生姓名： 余慧珍 一、实验目的和要求 二、实验内容和原理 三、实验材料与试剂 四、实验器材与仪器五、操作方法和实验步骤 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析 八、讨论、心得一、 实验目的和要求1. 掌握植物样品消煮液制备方法；2. 掌握植物全氮、磷、钾的测定与结果分析。

二、 实验内容和原理1. 植物样品消煮——H 2SO 4-H 2O 2消煮法在浓H 2SO 4溶液中，植物样品经过脱水、碳化、氧化等作用后，易分解的有机物则分解。

再加入H 2O 2 ，H 2O 2在热浓H 2SO 4溶液中会分解出新生态氧，具有强烈的氧化作用，可继续分解没被H 2SO 4破坏的有机物，使有机态氮全部转化为无机铵盐。

同时，样品中的有机磷也转化为无机磷酸盐，植株中K 以离子态存在。

故可用同一消煮液分别测定N 、P 、K 。

2. 植株全氮的测定——靛酚蓝比色法经消煮待测液中氮主要以铵态氮存在，被测物浸提剂中的NH 4+，在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚反应，生成水溶性染料靛酚蓝，其深浅与溶液中的NH 4+－N 含量呈正比，线性范围为0.05-0.5mg/l 之间。

3. 植株全磷的测定——钒钼黄比色法经消煮待测液中磷主要以磷酸盐存在，在酸性条件下，正磷酸能与偏钒酸和钼酸发生反应，形成黄色的三元杂多酸—钒钼磷酸[1]。

溶液黄色稳定，黄色的深浅与磷的含量成正专业： 农资1202姓名： 平帆学号： 3120100152 日期： 2015.3.27地点： 农生环B249装订线相关。

4. 植株全钾的测定——火焰光度计法消煮待测液中难容硅酸盐分解，从而使矿物态钾转化为可溶性钾。

待测液中钾主要以钾离子形式存在，用酸溶解稀释后即可用火焰光度计测定。

三、 实验器材与仪器样品：三叶草，取于东七教学楼南侧，研磨过18目筛备用；试剂：浓硫酸、300g/l H 2O 2、6mol/l NaOH 溶液、0.2%二硝基酚指示剂、酚溶液、次氯酸钠溶液、铵标准溶液（准确称量0.3142g 经105℃干燥2h 的氯化铵（NH 4Cl ），用少量水溶解，移100mL容量瓶中，用吸收液稀释至刻度。