“生物化学实验”理论知识期终考查

生物化学期考试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 蛋白质的一级结构是指：A. 蛋白质的空间构象B. 蛋白质的氨基酸序列C. 蛋白质的二级结构D. 蛋白质的三级结构答案：B2. 酶促反应中，酶的催化作用不包括：A. 降低反应的活化能B. 提高反应速率C. 改变反应的平衡点D. 提供反应物答案：C3. 下列哪种化合物不是核酸的组成成分？A. 核苷酸B. 磷酸C. 核糖D. 氨基酸答案：D4. 脂肪酸合成过程中，乙酰辅酶A的来源是：A. 糖酵解B. 三羧酸循环C. 脂肪酸氧化D. 蛋白质分解答案：A5. 糖酵解过程中，下列哪种酶催化的反应是不可逆的？A. 己糖激酶B. 磷酸果糖激酶-1C. 丙酮酸激酶D. 乳酸脱氢酶答案：B6. 细胞色素C属于哪一类蛋白质？A. 结构蛋白B. 调节蛋白C. 转运蛋白D. 氧化还原蛋白答案：D7. 胆固醇在体内合成的主要场所是：A. 肝脏B. 肌肉C. 脂肪组织D. 脑答案：A8. 下列哪种维生素是辅酶A的组成部分？A. 维生素AB. 维生素B1C. 维生素B2D. 维生素B5答案：D9. DNA复制过程中，下列哪种酶负责解开双螺旋结构？A. DNA聚合酶B. DNA连接酶C. DNA解旋酶D. DNA限制酶答案：C10. 细胞呼吸过程中，下列哪种化合物是电子传递链的最终电子受体？A. NAD+B. FADC. O2D. CoQ答案：C二、填空题（每空1分，共20分）1. 蛋白质的二级结构主要包括____和____两种类型。

答案：α-螺旋、β-折叠2. 酶的活性中心通常含有____和____。

答案：氨基酸残基、金属离子3. 核酸根据五碳糖的不同，可以分为____和____。

答案：DNA、RNA4. 脂肪酸合成的起始物质是____，而脂肪酸氧化的起始物质是____。

答案：乙酰辅酶A、长链脂肪酸5. 糖酵解过程中，____酶的活性受到葡萄糖水平的调控。

答案：磷酸果糖激酶-16. 细胞色素C是____途径中的关键电子传递体。

生物化实验试题及答案生物化学实验试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 下列哪种物质不属于酶的辅因子？A. 金属离子B. 辅酶C. 辅基D. 蛋白质答案：D2. 蛋白质的一级结构是指：A. 氨基酸的排列顺序B. 蛋白质的空间构象C. 蛋白质的亚基组成D. 蛋白质的二级结构答案：A3. 核酸的基本组成单位是：A. 氨基酸B. 核苷酸C. 脂肪酸D. 单糖答案：B4. 下列哪种物质不是糖酵解途径中的中间产物？A. 葡萄糖-6-磷酸B. 果糖-1,6-二磷酸C. 丙酮酸D. 柠檬酸答案：D5. 脂肪酸合成过程中，酰基的载体是：A. 辅酶AB. 辅酶QC. 黄素蛋白D. 硫辛酸答案：A6. 下列哪种物质是DNA聚合酶的底物？A. dNTPsB. NTPsC. dNDPsD. NDPs答案：A7. 细胞色素c属于哪一类蛋白质？A. 结构蛋白B. 调节蛋白C. 功能蛋白D. 运输蛋白答案：C8. 下列哪种物质不是糖异生途径的底物？A. 乳酸B. 甘油C. 丙酮酸D. 果糖-1,6-二磷酸答案：D9. 哪种维生素是辅酶A的组成部分？A. 维生素AB. 维生素B1C. 维生素B2D. 维生素B5答案：D10. 下列哪种物质是DNA复制的引物？A. 引物酶B. 引物RNAC. 引物DNAD. 引物蛋白质答案：B二、填空题（每空1分，共20分）1. 酶的活性中心由__________和__________组成。

答案：底物结合部位；催化部位2. 蛋白质的四级结构是指__________。

答案：多肽链间的相互作用3. 核酸的双螺旋结构是由__________和__________组成的。

答案：磷酸骨架；碱基对4. 糖酵解途径中，1分子葡萄糖完全氧化分解产生__________分子ATP。

答案：25. 脂肪酸的合成主要发生在__________。

答案：细胞质6. DNA聚合酶在DNA复制中的主要功能是__________。

生物化学实验复习题：1.试述旋光法测定淀粉含量的实验原理。

2.在加热及稀盐酸的作用下，淀粉水解并转入盐酸溶液中。

在一定的水解条件下，不同谷物淀粉的比旋光度是不同的。

其在171～195之间，因此可用旋光法测定粗淀粉的含量。

3.淀粉含量测定的方法有几种比较各方法特点。

4.淀粉是由多个葡萄糖缩合而成的多糖，测定淀粉的方法主要有酸水解法、酶水解法和旋光法等。

5.1、酸水解法：面粉经乙醚除去脂肪，乙醇除去可溶性糖类后，用酸水解淀粉为葡萄糖，按还原糖测定方法测定还原糖含量，再折算为淀粉含量。

6.2、酶水解法：面粉经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。

7.3、旋光法：在加热及稀盐酸的作用下，淀粉水解并转入盐酸溶液中。

在一定的水解条件下，不同面粉淀粉的比旋光度是不同的。

其淀粉的比旋光度在171~195之间，因此可用旋光法测定淀粉的含量。

8.简述旋光法测定淀粉的关键步骤。

9. 1.样品的处理在电子天平上称取小麦粉置于三角瓶中→加入50ml 1%HCl混成浆状（不能有结块）→沸水浴中准确加热15min→先加1ml 30% ZnSO4混匀→再加1ml 15%亚铁氰化钾混匀→移至100ml容量瓶中加水定容混匀后过滤→弃去最初15ml收集其余滤液。

2.旋光度测定取滤液20ml置于旋光管中，先用1%HCl 调节旋光仪“0”点，然后将样品溶液放入旋光仪中测α10.写出计算粗淀粉含量的公式并说明各符号的含义。

11.12.。

13.试述凯氏定氮法测定蛋白质含量的实验原理。

14.含氮的有机物与浓硫酸共热时，其中的碳、氢二元素被氧化成二氧化碳和水，而氮则转变成氨，并进一步与硫酸作用生成硫酸铵。

浓碱可使消化液中的硫酸铵分解，游离出氨，借水蒸汽将产生的氨蒸馏到一定浓度的过量硼酸溶液中，硼酸吸收氨后使溶液中氢离子浓度降低，然后用标准无机酸滴定，直到恢复溶液中原来氢离子浓度为止，最后根据所用标准酸的摩尔数（相当于待测物中氨的摩尔数）计算出待测物中的总氮量。

生物化学实验试题与答案生物化学实验考核试题库一、理论试题1盐析和盐溶（3分）2电泳（3分）3层析（色谱）（3分）4酶的活力单位（3分）5比活力（3分）6分子筛效应（3分）7电泳的原理（4分）8离子交换层析的原理（4分）9亲和层析的原理（4分）10凝胶过滤层析的原理（4分）11吸附色谱原理（4分）12透析技术的基本原理及其应用（4分）13聚丙烯酰胺凝胶电泳的主要优点和用途（6分）14按层析过程的机理，层析法分哪四类？按操作形式不同又分哪三类？（7分）15普通离心机的使用注意事项？（6分）16可见分光光度计的使用注意事项？（6分）17蛋白质含量测定的常用方法有那些？（6分）18粗脂肪的提取和含量测定的基本原理（6分）19索氏提取器是由哪几部分组成的？（6分）20粗脂肪的提取和含量测定的简要操作步骤（6分）21粗脂肪的提取实验中如何减少误差？（6分）22凯氏定氮法测定总氮量的基本原理（6分）23凯氏定氮实验中用到的主要器材有哪些？（6分）24核酸的含量测定常用的方法有哪些？（6分）25用双倒数法测量米氏常数的基本原理（6分）26双倒数法测定米氏常数的实验中，决定实验成败的因素有哪些？关键因素是什么？（7分）27生物细胞破碎的常用方法是什么？（6点）28酶的制备和提取应注意哪些事项？（6点）29蛋白质分离的常用方法是什么？（6分）30甲醛滴定法测定氨基酸的基本原理（6分）31什么是SDS-PAGE方法来测定未知蛋白质的相对分子质量？（6分）32连续聚丙烯酰胺凝胶电泳和间断聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么区别？（6分）聚丙烯酰胺凝胶电泳的33个优点？（6分）琼脂糖凝胶电泳的34个优点？（6分）35提取某种植物组织中的总dna时，使用的细胞提取液中的主要试剂成分是什么？各有什么作用？（7分）如何证明提取的核酸是DNA还是RNA？（6分）37聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白时，使用的电泳缓冲液ph＝8.3，那么样品应点在哪端？为什么？（6分）二、技能或实验操作试题38说明纸层析和离子交换层析分离氨基酸混合物的方法是根据氨基酸的什么性质?列出纸层析和柱层析的一般操作步骤。

“生物化学实验”理论知识考查题1.酶有什么不同于一般催化剂的特性？在酶的分离纯化过程中要注意哪些环节？1、高效性2、专一性3、条件温和4、酶活性的可调控性5、酶催化的活性与辅酶、辅基和金属离子有关6、不稳定易失活酶是一种特殊的蛋白质，在分离纯化过程中需要注意温度以及PH 值等的控制，注意在纯化过程中所使用的缓冲溶液的离子强度的控制(常用PBS缓冲溶液)，在实际纯化过程中，一般要在低温冰箱中进行，缓冲溶液中注意加入EDTA二钠盐(1-5mM)螯和重金属离子一般避免酶失活。

2.如何评价蛋白质纯化方法的优劣？判断分离提纯方法的优劣，一般用两个指标来衡量，一是总活力的回收；而是比活力的提高倍数。

理想的分离提纯方法希望比活力和总活力越高越好，但两者往往不可兼得。

因此在考虑分离条件和方法时，需要在比活力多提高一些和总活力多回收一些作适当的选择。

3、纯化蛋白质的层析方法有哪些？凝胶过滤层析；离子交换层析；疏水层析；亲和层析；聚焦层析；高效液相层析。

4、请回答Q Sepharose-柱层析法纯化蔗糖酶的基本原理是什么？离子交换剂是以纤维索或葡聚糖凝胶等不溶性物质为母体，通过酯化、醚化或氧化等化学反应．引入阳性或阴性离子基团的特殊制剂．可与带相反电荷的化学物质进行交换吸附。

Q Sepharose柱代表季氨基琼脂糖色谱，以琼脂糖作为不溶性母体引入季铵型基团，为强阴离子交换剂。

酵母蔗糖酶的等电点为5.0左右，在Tris-HCl缓冲液（pH 7.3）下带负电。

在pH7左右，QSepharose凝胶带正电，与带负电的蔗糖酶结合。

洗脱液中的离子基因与结合在离子交换剂上的蛋白质离子基团相竞争时．亲合力小的蛋白质分子先被解吸而洗脱下来，而亲合力大者则后被解吸．而后洗脱下来。

因此依靠增加缓冲液的离子强度和(或)改变酸碱度．即可改变蛋白质的吸附状态，使不同亲合力的蛋白质得以分离。

5.什么是酶活力？根据实验体会，在进行酶活力测定时要注意哪些问题？什么是酶活力:酶活力也称为酶活性，是指酶催化一定化学反应的活力。

生物化学实验期末试题及答案1. 电泳时，醋酸纤维薄膜点样的一端靠近哪一电极？为什么？答：点样的一端负极。

因为缓冲液的PH8.6，而血清蛋白的等电点PI小于PH8.6，故在PH8.6缓冲液中，各蛋白质带负电，所以在电场中，各蛋白质分子从负极向正极泳动。

2. 用分光光度计测定物质含量时，设置空白对照组的意义是什么？答：起校正作用：排除实验中其他因素对实验的影响，减小误差。

空白对照是为了排除溶剂对吸光度的影响。

溶液的吸光度表示物质对光的吸收程度但是作为溶剂也能吸收，反射和透射一部分的光，因此必须以相同的溶剂设置对照，排除溶剂对吸光度的影响3. 简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳的原理答：血清中各种蛋白质分子在电场中向与其电性相反的电极方向泳动的现象称为电泳。

由于各种蛋白质分子等电点不同，带电荷不同，以及分子大小差异，所以在电场中泳动的速度不同，从而被分离。

4. 何谓Rf值？影响Rf值的主要因素是什么?答：Rf为比移值，Rf=原点到层析点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离。

可鉴定糖的种类它与温度，大气压强，薄层板的规格，扩张剂的组成，糖的种类有关5. 什么是盐析？盐析会引起蛋白质变性吗?一般我们用什么试剂做盐析的实验?答; 盐析是指当溶液中的中性盐持续增加时，蛋白质的溶解度下降，当中性盐的浓度达到一定程度的时候，蛋白质从溶液中析出的现象。

盐析不会引起蛋白质的变性。

一般用饱和硫酸铵溶液进行盐析6. 简述DNS法测定还原糖浓度的实验原理？答：还原糖与DNS在碱性条件下加热被氧化成糖酸，而DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。

在一定范围内还原糖的量与3-氨基-5硝基水杨酸颜色的深浅成正比，用分光光度计测出溶液的吸光度，通过查对标准曲线可计算出3-氨基-5硝基水杨酸的浓度，从而得出还原糖的浓度7. 依据我们所做的实验沉淀和变性有何关系？用实验事实说明。

答：沉淀的蛋白质不一定变性，如盐析实验先沉淀，后加水，沉淀消失变性的蛋白质不一定沉淀，如实验中，当卵清蛋白变性后加入氢氧化钠溶液，不产生沉淀。

生物化学实验复习资料（蓝林）生物化学是研究生命的化学。

是研究组成生物体物质的结构及其功能、代谢及其中的能量代谢、信号物质的信号传导、生命遗传物质的遗传及变异和表达调控、以及疾病发生和治疗相关的生物化学问题等的科学。

玻璃仪器的洗涤一般玻璃仪器用肥皂或去污粉以毛刷洗涤即足以满足要求，洗后应将肥皂或去污粉仔细冲掉，将水倾去后，器壁不挂水珠，视为合格。

铬酸洗液仅用于毛刷不能洗净的仪器，切勿滥用普通玻璃仪器之洗涤。

使用铬酸洗液时，仪器应干燥；过多的水份将使洗液迅速失效。

用过之铬酸洗液须加以保存以反复使用，直至变为绿色后方可舍弃；其舍弃法与浓硫酸液相同。

用洗液浸洗过的玻璃仪器，应先用自来水冲洗，然后再用蒸馏水或去离子水清洗，清洗时，宜采用“少量多次”原则以节约蒸馏水，同时清洗的效率也高。

温度、pH及酶的激活剂、抑制剂对酶的影响实验原理大多数酶的化学本质是蛋白质、凡能引起蛋白质变质的因素，都可以使酶丧失活性、温度、pH、抑制剂、激活剂、对酶活性有显著的影响。

淀粉各种糊精麦芽糖葡萄糖加加加碘碘碘变蓝蓝、紫、褐、红不变色氨基酸、蛋白质的性质鉴定实验原理氨基酸与蛋白质分子组成中的某些特殊结构与某些试剂作用可以表现出特殊的颜色反应，利用此性质，可检验出氨基酸及蛋白质。

肝糖原的提取与鉴定实验原理糖原是一高分子化合物。

微溶于水，无还原性。

肝糖原是糖在体内的重要储存形式之一，是体内糖的重要来源之一，原理2 肝糖原理的糖在体内的重要储存形式之一，是体内糖的重要来源之一，糖原是一高分子化合物。

微溶于水，无还原性、与碘作用生成红色。

本实验通过对动物肝脏研磨，在三氯醋酸作用下一使其中的蛋白质被沉淀，二使糖原水解酶失活，从而过滤得到糖原。

实验步骤称肝脏约1g+10%三氯醋酸1ml 研磨+5%三氯醋酸2ml 研磨至肉糜状过滤（滤液收集在带刻度的离心管中）加入等体积95%乙醇混匀、静置10min 离心弃去上清夜、留沉淀加蒸馏水1ml 搅拌溶解而得糖原溶液待用。

2018级《生物化学实验》与《食品生物化学实验》理论考查总复习题1. 请掌握下列生物化学实验常用仪器的正确操作使用方法，并能回答以下问题：（1）离心机使用时为什么要平衡？普通离心机与高速离心机在平衡时有什么不同要求？（2）为什么用高速组织捣碎机进行动、植物组织捣碎时，需采用间歇式方式进行操作？（3）用真空泵进行减压抽滤时，为什么要连接缓冲瓶？2. 为什么肝糖元只能从刚宰杀的动物肝脏中获取？在提取肝糖元过程中，三氯乙酸、95%乙醇各起什么作用？在糖元水解产物中如果存在残留蛋白质时，当用班氏试剂检测水解产物，有何影响？（请参照课堂重点讲解内容回答）3. 以下是涉及分光光度仪结构、各部件功能的一些基础问题，请依次解答：（1）请阐述分光光度仪的主要部件及其功能，紫外与可见光光波的波长范围？（2）从光源发出的光是复合光，而测定物质吸光度大小的光是单色光，请问该单色光与物质结构和对光的吸收有何内在联系？什么叫物质的特征吸收波长？用分光光度法定制实测物质标准曲线时，如何确定被测物质的特征吸收波长？（请参照课堂重点讲解内容回答）（3）产生紫外与可见光光谱的光波是由什么光源发出的？用石英与普通玻璃所制作的比色皿在材质上有何差异？为什么在紫外波长范围内测定物质吸光度大小必须采用石英材质的比色皿？（4）光电管的主要功能是什么？为什么说光电管是分光光度仪最脆弱和最易损的部件？4. 以下是涉及分光光度仪工作原理—Beer-Lamber定律的一些基础问题，请依次解答：（1）Beer-Lamber定律揭示在稀溶液中，物质的浓度与其对光的吸收值大小（吸光度）之间的什么关系？该定律如何用数学表达式表示？在该表达式中，各符号代表什么含义？（2）由于分光光度仪不能直接测定溶液吸光度的大小，请问分光光度仪是如何间接测定溶液吸光度大小的？在间接测定溶液吸光度大小时，Beer-Lamber定律还有一种表达方式即溶液的吸光度大小与其透光率的关系表达式，请写出该表达式，在该表达式中，各符号代表什么含义？（3）由于分光光度仪是通过测定溶液透光率大小，间接测定其吸光度大小的，请依据溶液吸光度大小与其透光率的关系表达式，详细阐述为什么在用分光光度仪定制标准曲线或测定样品时，需将待测溶液的吸光度（OD 值）控制在一定的范围内？（请参照课堂重点讲解内容回答）你知道该测定范围是多少吗？5. 可以用来进行定量分析测定用的标准品应具备哪些特性？（请参照课堂重点讲解内容回答）6. 请阐述移液管与比色皿的正确清洗方法和放置方法；阐述移液管取样与比色皿加样的正确操作方式和操作注意事项。

生物化学期末考试知识点归纳三羧酸循环记忆方法一：糖无氧酵解过程中的“１、２、３、４”１：1分子的葡萄糖２：此中归纳为：6个22个阶段；经过2个阶段生成乳酸2个磷酸化；2个异构化，即可逆反应；2个底物水平磷酸化；2个ＡＴＰ消耗，净得2个分子的ＡＴＰ；产生2分子ＮＡＤＨ３：整个过程需要3个关键酶４：生成４分子的ＡＴＰ．二：糖有氧氧化中的“１、２、３、４、５、６、７”１：1分子的葡萄糖２：2分子的丙酮酸、2个定位３：3个阶段：糖酵解途径生成丙酮酸丙酮酸生成乙酰ＣＯ-Ａ三羧酸循环和氧化磷酸化４：三羧酸循环中的４次脱氢反应生成３个ＮＡＤＨ和１个ＦＡＤＨ2５：三羧酸循环中第５步反应：底物水平磷酸化是此循环中唯一生成高能磷酸键的反应６：期待有人总结７：整个有氧氧化需７个关键酶参与：己糖激酶、６－磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶、丙酮酸脱氢酶复合体、拧檬酸合酶、异拧檬酸脱氢酶、a-酮戊二酸脱氢酶复合体一.名词解释：1.蛋白质的等电点：当蛋白质溶液处在某一pH值时，蛋白质解离成正、负离子的趋势和程度相等，即称为兼性离子或两性离子，净电荷为零，此时溶液的pH值称为该蛋白质的等电点。

、2.蛋白质的一级结构：是指多肽链中氨基酸的排列的序列，若蛋白质分子中含有二硫键，一级结构也包括生成二硫键的半胱氨酸残基位置。

维持其稳定的化学键是：肽键。

蛋白质二级结构：是指多肽链中相邻氨基酸残基形成的局部肽链空间结构，是其主链原子的局部空间排布。

蛋白质二级结构形式：主要是周期性出现的有规则的α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲等。

蛋白质的三级结构是指整条多肽链中所有氨基酸残基，包括相距甚远的氨基酸残基主链和侧链所形成的全部分子结构。

因此有些在一级结构上相距甚远的氨基酸残基，经肽链折叠在空间结构上可以非常接近。

蛋白质的四级结构是指各具独立三级结构多肽链再以各自特定形式接触排布后，结集所形成的蛋白质最高层次空间结构。

3..蛋白质的变性：在某些理化因素的作用下，蛋白质的空间结构受到破坏，从而导致其理化性质的改变和生物学活性的丧失，这种现象称为蛋白质的变性作用。

生物化学实验_北京师范大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年1.纯化蛋白时不一定是越多的纯化步骤效果就越好。

参考答案:正确2.如果有一个蛋白A，其分子量为40 KD。

它在Native PAGE上产生两条条带，下面哪种说法有可能具有合理性参考答案:两条条带分别为单体和某个降解产物_两条条带分别为单体和二聚体_两条条带分别为二聚体和四聚体_两条条带分别为单体和四聚体3.在超声破碎时，可以连续超声5分钟，这样可以快速完成细胞破碎。

参考答案:错误4.设计纯化实验时，尽量不要利用相似原理的纯化步骤进行多步纯化。

参考答案:正确5.如果蛋白可以利用亲和层析分离纯化，那么通常会首先考虑亲和层析。

参考答案:正确6.纯化流出曲线上，上样过程中出现的流出峰又称为参考答案:穿过峰7.蛋白哪种性质可以用来设计层析实验对其进行纯化参考答案:分子大小_与特定抗体结合_等电点8.蛋白的哪种特性可以用来粗纯化参考答案:等电点_热稳定性9.在pH 7.0的缓冲条件下，下面哪种等电点的蛋白可以用阴离子交换树脂分离纯化参考答案:4.0_5.010.下面哪种方法是常用浓缩蛋白的方法参考答案:蒸发浓缩_超滤_盐析_真空冷冻干燥11.离子交换层析介质常常按如下方式进行保存参考答案:20%乙醇中4℃保存12.小规模纯化过程中上样量是A mg。

如果计划在大规模纯化过程中上样量扩大n倍，那么，层析柱的内径、高度以及层析流速该做如何调整？参考答案:高度不变_内径扩大n倍_流速扩大n倍13.纯化过程中，收集流出样品的方式有哪些种？参考答案:按固定体积进行收集_按流出峰斜率变化进行收集_按流出峰紫外吸收值变化进行收集_按流出峰参数变化进行收集14.待纯化样品无需过滤，离心后可以直接上样。

参考答案:错误15.一般来说，离子交换层析适合粗纯化阶段，适合大体积上样。

参考答案:正确16.在蛋白质纯化过程中，速度越快，分辨率越高。

参考答案:错误17.离子交换层析结束后，可以用0.5 mol/L 的NaOH进行层析介质再生。