实验四 豚鼠的基本操作技术
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小鼠实验的基本技术和方法小鼠实验是生物实验中常用的实验方法之一,主要用于研究生物学、药理学、毒理学等领域。
以下将介绍小鼠实验的基本技术和方法。
一、小鼠的选材与饲养1.小鼠的选材:选取体重相近、同龄、同性的小鼠作为实验对象,并确保其健康状态。
2.小鼠的饲养:小鼠应在洁净、无臭、适温的实验动物房进行饲养。
提供适宜的饲料和清洁的饮水,保持适定的饲养环境,有规律地进行日常护理,确保小鼠的健康和舒适。
二、小鼠实验的基本技术1.注射技术:常用的小鼠注射技术包括静脉注射、皮下注射、腹腔注射等。
操作时应注意选用适当的注射器和针头,避免伤害到小鼠的内脏和组织。
2.静脉采血技术:静脉采血是获取小鼠血液样本的一种常用技术。
通常采用静脉穿刺的方式,先选定采血部位,再使用适当的器具(如针管)进行采血。
3.取脏器技术:小鼠解剖和取脏器是许多实验研究的必要步骤。
这包括心脏、肺、肝脏、脾脏等器官的解剖和获取。
操作时应尽量避免伤害到脏器,确保获取到完整可用的样本。
4.外周血细胞计数:通过采集小鼠的血液样本,使用血细胞计数仪进行细胞计数。
这是评估小鼠免疫功能、全血红细胞计数和血红蛋白浓度的重要方法,有助于评估一些疾病或药物对血液系统的影响。
三、小鼠实验的常用方法1.急性毒性实验:通过给小鼠灌胃或注射一定量的物质来观察其毒性反应,包括死亡率、体重变化、行为异常等。
根据实验设计的需要,可以使用LD50(半数致死量)等指标来评估物质的毒性。
2.慢性毒性实验:将小鼠长期接触一定浓度的物质,观察其对小鼠生理和行为的长期影响。
常用的实验方法包括饮水或饮食添加剂量法、慢性面毒研究等。
3.细胞培养和移植:通过培养小鼠的细胞,观察其在体外的生长和变化。
可以进行细胞增殖、凋亡、分化等方面的研究。
此外,还可以将小鼠的细胞或组织移植到其他物种中,进行异种移植实验。
4.基因改良和基因敲除:通过基因工程技术,改变小鼠基因组的特定基因,观察其对小鼠生理和行为的影响。
复旦大学实验动物学实验报告实验报告一小鼠的一般技术操作一、实验目的和要求:通过实际操作,掌握小鼠实验的一般操作方法,包括动物的抓取和保定、性别鉴定、编号、给药、麻醉、采血、处死、解剖等方法。
二、实验基本步骤:(一)抓取和保定先用右手将小鼠的尾巴提起,至于鼠笼或粗糙的平面上,当小鼠向前挣扎行进时,再用左手的拇指和示指捏住小鼠两耳后颈部皮肤,翻转小鼠至于掌心,拉直后肢。
以小指拉住小鼠尾巴即可。
在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用专门的小鼠固定器进行保定。
(二)性别鉴定将小鼠抓取后,观察其肛门及生殖器之间的距离,距离远的为雄性,距离近的为雌性。
另外翻转小鼠观察生殖器附近,性成熟的雄性小鼠的睾丸降至阴囊内,会有明显的突起;雌性小鼠的肛门至会阴处有一条无毛覆盖的细线。
(三)编号方法常用的有染色法、耳缘打孔法、烙印法、挂牌法。
此外还有断趾法、剪尾法、被毛剪号法、笼子编号法等。
在本次实验中,我们小组使用的是染色法。
(四)去毛方法常用的有拔毛法、剪毛法、剃毛法、脱毛法。
(五)给药方法常用的有经口灌胃法、经呼吸道吸入、经皮肤吸收和注射给药法。
1.经口给药法(1)灌胃法:左手固定小鼠,右手持灌胃器,将灌胃针从小鼠的一侧犬齿缺失处插入口中,灌胃针竖起靠向口腔后壁,使小鼠消化道成直线,沿咽喉壁缓慢插入食管,使其前段到达膈肌位置,灌胃针插入时应无阻力,如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出,以免损伤、穿破食管或误入气管。
(2)口服法在本次实验中,我们小组使用的是灌胃法。
2.注射给药法(1)皮下注射(2)肌肉注射(3)腹腔注射(4)静脉注射在本次实验中,我们使用的是皮下注射、腹腔注射、静脉注射。
(六)采血方法1.断头取血2.眼眶后静脉丛穿刺采血3.尾静脉切割采血法4.摘眼球采血法5.心脏采血在本次实验中,我们小组使用的是眼眶后静脉丛穿刺采血、尾静脉切割采血、摘眼球采血法、心脏采血。
(七)麻醉方法1.常用局部麻醉剂:普鲁卡因、利多卡因2.常用全身麻醉剂:乙醚、苯巴比妥钠、戊巴比妥钠、硫喷妥钠、巴比妥钠、氨基甲酸乙酯。
11.常用实验动物的给药途径和方法第一篇:11.常用实验动物的给药途径和方法常用实验动物的给药途径和方法在动物实验中,为了观察药物对机体功能、代谢及形态的变化,常需将药物注入动物体内。
由于实验目的、动物种类、药物剂型不同,给药途径和方法也多种多样。
一经口给药法(一)灌胃法此法给药剂量准确,是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种常用给药方法。
1、白鼠灌胃法:抓起小鼠,以左手拇指、食指固定头部,小指、无名指和掌心夹注尾巴,使腹部朝上,颈部拉直,右手持灌胃器,将灌胃针从鼠的口角插入口腔,从舌背沿上腭插入食道。
灌胃量0.2~0.5ml/10g。
胃管可用适宜口径的硬质塑料管或磨去针头的8号注射针头弯成适当的弧度制成。
注意,操作时不要用力猛插,以免插破食道或误插入器官造成动物死亡。
2、白鼠灌胃法:左手戴上棉手套,用左手拇指和食指将大鼠头部固定,将大鼠灌胃器沿腭后壁慢慢插入食道。
灌胃针插入时应无阻力,如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出,重新再插。
灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。
灌胃量10~20ml/kg 3 兔、犬等:灌胃一般要借助于开口器、灌胃管进行。
先将动物固定,再将开口器固定于上下门齿之间,然后将灌胃管(常用导尿管代替)从开口器的小孔插入动物口中,沿咽后壁而进入食道。
插入后应检查灌胃管是否确实插入食道。
可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中,若无气泡产生,表明灌胃管被正确插入胃中,未误入气管。
此时将注射器与灌胃管相连,注入药液。
4、猪的胃内灌注法:给猪下鼻饲管较困难,因猪的鼻翼与上唇联合形成吻突,鼻腔内上下鼻夹与鼻中隔通道极窄,只能通过F10-12号的导尿管,F14号以上的导尿管不能插入,故一般均给猪采用经口入胃的灌胃方法。
具体方法是,预先做好一矩形小木块,中间有一洞,让小猪咬住,将其固定,然后再由此洞下胃管。
此种操作较为简便。
5、鸟类:包括鸽、鸡等,经口灌胃给药,可由助手将其身体用毛巾裹住固定好。
实验者用左手将动物向后拉,使其颈部倾斜,用左拇指和食指将动物嘴撬开,其他三只手指固定好动物头部,右手取带有灌胃针头的注射器,将灌胃针头由动物舌后插入食管。
药理学实验的基本知识和基本技术一、实验动物的种类选择药理学实验常用的动物有小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猫、犬、蛙、蟾蜍等。
常根据实验目的和要求选用不同的实验动物。
由于不同的动物具有不同的特点,故所选用的动物应能较好地反映试验药物的选择性作用,并符合节约的原则。
小白鼠:系实验室最常用的一种动物。
易于大量繁殖,且价廉,适用需要大量动物的实验,如药物筛选、半数致死量测定、药物效价比较、抗感染、抗肿瘤药物及避孕药物的研究等。
大白鼠:与小白鼠相似。
一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠,如药物抗炎作用的实验常选用大白鼠踝关节制备关节炎的模型。
此外也可用大白鼠直接记录血压、作胆管插管,或用大白鼠观察药物的亚急性或慢性毒性。
大白鼠的血压和人相近,且稳定,现常用于抗高血压药物实验。
豚鼠:是实验室常用动物之一。
对组织胺很敏感,容易致敏,常用于平喘药和抗组胺药的实验。
对结核菌亦敏感,故也用于抗结核药的研究。
此外还用于离体心脏及平滑肌实验,其乳头肌和心房常用于电生理特性及心肌细胞动作电位实验,研究抗心律失常药物的机理。
家兔:温顺、易饲养,常用于观察药物对心脏、呼吸的影响及农药中毒和解救的实验。
亦用于研究药物对中枢神经系统的作用、体温实验、热原检查及避孕药实验。
猫:与家兔比较,猫对外科手术的耐受性强,血压较稳定,故常用于血压实验。
但价格较贵。
此外,猫也常用于心血管药物及中枢神经系统药物的研究。
犬:药理实验需大动物时常用犬。
常用于观察药物对心脏泵功能和血流动力学的影响,心肌细胞电生理研究,降压药及抗休克药的研究等。
犬还可以通过训练,用于慢性实验研究,如条件反射、高血压的实验治疗、胃肠蠕动和分泌实验、慢性毒性实验。
蛙和蟾蜍离体心脏能较持久地有节律地搏动,常用于观察药物对心脏的作用;坐骨神经和腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、神经肌肉或横纹肌的作用;蛙的腹直肌还可以用于鉴定胆碱能药物的作用。
须注意:由于动物对外界刺激的反应存在个体差异,在选择实验动物时,还应注意动物的年龄、体重、性别、生理状态、健康状况及其品系、等级等因素对实验的影响。
三、动物实验的基本技术(一)实验动物的捉持方法1.青蛙和蟾蜍通常用左手握持,以食指和中指夹住左前肢,大拇指压住右前肢,右手将下肢拉直并固定于无名指和小指之间。
毁脑和脊髓时,左手食指和中指夹持青蛀或蟾蜍的头部,右手将探针经枕骨大孔向前刺入颅腔,左右摆动探针捣毁脑组织。
如需破坏脊髓,毁脑后退回探针刺入椎管即可。
2.小鼠右手提起鼠尾,放在鼠笼(或其它粗糙面)上,向后轻拉其尾,小鼠即固定于鼠笼上,迅速用左手拇指和食指捏住小鼠头颈部皮肤,并以左手小指、无名指压其尾部于手掌尺侧。
另一方法是只用左手,先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后用手掌尺侧和小指夹住尾根部,然后用左手拇指和食指捏住头颈部皮肤。
3.大鼠捉持方法与小鼠相似。
因大鼠容易被激怒咬人,捉持时左手应戴防护手套。
右手抓住鼠尾,再用左手拇指和食指握住头部,其余手指与手掌握住脊部和腹部。
注意不要捏其颈部,以防用力过大、过久,造成窒息死亡。
4.豚鼠以左手直接从背侧握持前部躯干,右手托住臀部或抓住两后肢。
体重小者,可用单手捉持。
5.家兔一只手抓住兔颈背部皮肤,将兔轻轻提起,另一只手托住臀部,使兔呈蹲坐姿势。
切不可用手握持双耳提起兔子。
(二)实验动物的性别辨认、标记和去毛方法1.性别辨认鼠类:雄性小鼠和大鼠性器官与肛门距离较远,其间有被毛,阴囊明显可见。
雌性小鼠和大鼠性器官与肛门距离较近,其间无被毛,腹部乳头明显可见。
豚鼠性别辨认方法与小鼠和大鼠相同;家兔:雄兔泄殖孔附近,可见阴囊,用拇指和食指挤压泄殖孔部位,可露出阴茎。
雌兔腹部5对乳头明显可见。
2.标记小鼠、大鼠和兔多采用染色法,一般用1%的苦味酸溶液(黄色)或5%中性红溶液(红色)涂于动物体表不同部位的皮毛处,代表不同号码。
编号原则是先左后右,自前到后。
例如1号涂左前肢;2号涂左侧腹部;本号涂后肢;4号涂右前肢;5号涂右侧腹部;6号涂右后肢;7号涂头部;8号涂背部;9号涂尾部;10号不涂色。
如10只以上动物作标记时,可用两种不同颜色溶液,一种颜色作为个位数,另一种颜色作为十位数,涂在不同部位。
一小鼠抗绵羊红细胞抗体的制备及检测【实验原理】免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。
具有灵敏度高、特异性强、快速反应的特点,是免疫学技术中应用最为广泛的方法之一。
酶联免疫技术以酶作为标记物,与相应的抗原或者抗体结合后,通过底物的颜色反应作为抗原抗体的定量定性检测,即酶联免疫吸附实验(ELISA)。
其中间接法适用于抗体的检测。
【实验步骤】1.脱纤维防凝处理的绵羊血,配制20%和40%的SRBC悬液给小鼠免疫,腹股沟皮下注射,每周一次,连续3周,每次0.1ml。
2.第四周时,摘眼球取血,收集小鼠血于EP管,静置半小时。
2000转离心10min,取血清。
3.取出包被好抗原的酶标板(4孔/组),甩干孔内液体。
以洗涤液(200μL/孔)洗涤3次,2min/次。
4.编号各孔1~4,分别加入空白、阴性、阳性、待测液各100μL,置于37℃湿盒内30min。
5.甩干孔内液体,以洗涤液(200μL/孔)洗涤3次,2min/次,孔加入酶标羊抗鼠二抗100μL/孔,置于37℃湿盒内30min。
6.甩干孔内液体,以洗涤液(200μL/孔)洗涤3次,2min/次,加入底物溶液100μL/孔,避光显色,观察。
【实验结果】图片左组为20%组,右组为40%组,所加液体分别为空白、阴性、阳性、待测血清。
其中显色的3、4号为阳性,1、2号为阴性。
【实验分析】实验结果显示,待测小鼠血清结果为阳性,表示小鼠血清中含有抗绵阳红细胞抗原的抗体。
结果显示两组的3号添加阳性液的管内二者颜色深浅不同,可能是由于洗涤过程中由于4号管液体溅出至第一组3号管所致。
二豚鼠过敏实验【实验原理】超敏反应是指已致敏的机体再次接触相同变应原时,所引起的自身组织损伤和生理功能紊乱。
其中I型超敏反应又称为速发型超敏反应或者变态反应,引起超敏反应的抗原称之为变应原。
变应原首次进入机体时,刺激浆细胞产生IgE,IgE的Fc段与肥大细胞或噬碱性粒细胞表面的FcεR结合,使得IgE吸附于细胞的表面。