土壤速效磷的测定(酸性土壤)

实训十（0.5mol/LNaHCO3浸提-钼锑抗比色法）一、目的要求土壤速效磷也称土壤有效磷，包括水溶性磷和弱酸溶性磷，其含量是判断土壤供磷能力的一项重要指标。

测定土壤速效磷的含量，可为合理分配和施用磷肥提供理论依据。

实验要求了解测定土壤速效磷的基本原理，掌握其测定方法。

二、方法原理用pH8.5的0.5mol/L的NaHCO3作浸提剂处理土壤，由于碳酸根的存在抑制了土壤中的碳酸钙的溶解，降低了溶液中Ca2+浓度，乡音的提高了3+3+磷酸钙的溶解度。

由于浸提剂的pH较高，抑制了Fe和Al的活性，有利-3-2-于磷酸铁和磷酸铝的提取。

此外，溶液中存在着OH、HCO、CO3等阴离子，也有利于吸附态磷的置换。

用NaHCO3作浸提剂提取的有效磷与作物吸收磷有良好的相关性，其适应范围也广泛。

浸出液中的磷，在一定的酸度下，用硫酸钼锑抗还原显色成磷钼蓝，蓝色的深浅在一定浓度范围内与磷的含量成正比，因此，可以用比色法测定其含量。

三、主要仪器震荡机、分光光度计或光电比色计、天平（0.01g）、三角瓶（250ml）、容量瓶（50ml）、漏斗、无磷滤纸、移液管（10ml）。

四、试剂配制1.0.5mol/L的NaHCO3（pH8.5）浸提液称取化学纯NaHCO342.0g溶于800ml蒸馏水中，以4mol/L NaOH溶液调节pH至8.5（用pH计测定），然后稀释至1000ml，保存在试剂瓶中。

如果贮存期超过1个月，是用时应重新调整pH。

2.无磷活性炭将会活性炭先用1：1（V/V）的盐酸浸泡过夜，在布氏漏斗-上抽滤，用蒸馏水冲洗多次至无Cl为止，在用0.5mol/L NaHCO3溶液浸泡过夜，在布氏漏斗上抽滤，用蒸馏水洗尽NaHCO3，检查至无磷为止，烘干备用。

3.7.5mol/L硫酸钼锑抗贮存液在1000ml烧杯中加入400ml蒸馏水，蒋烧杯浸在冷水中，然后缓慢注入208.3ml浓硫酸（分析纯），并不断搅拌，冷却至室温。

实验五土壤速效磷的测定一、目的和要求掌握比色法测定土壤速效磷的方法，了解土壤中磷素形态及其土壤供磷能力与土壤速效磷的关系。

掌握土壤速效磷的浸提，浸提液的处理，标准曲线制作，显色，比色，计算。

二、内容与原理酸性土壤中的磷主要是以Fe—P，A1—P的形态存在，利用氟离子在酸性溶液中络合Fe3+和Al3+的能力，可使这类土壤中比较活性的磷酸铁铝盐被陆续活化释放，同时由于H+的作用，也能溶解出部分活性较大的Ca—P，然后用钼锑抗比色法进行测定。

三、主要仪器及试剂配制仪器：塑料杯，往复式振荡机，分光光度计或光电比色计试剂：(1)0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl浸提剂称取1.11克NH4F溶于800毫升水中，加1.0molL-1HCl25毫升，然后稀释至1升，贮于塑料瓶中，其它试剂同前法。

(2)钼锑抗试剂称取酒石酸锑钾(KSbOC4H4O6)0.5克，溶于100毫升水中，制成5％的溶液。

另称取钼酸铵20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升浓硫酸，边加边搅动，再将0.5％的酒石酸锑钾溶液100毫升加入到钼酸铵液中，最后加至1升，充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混合液。

临用前(当天)称取1.5克左旋抗坏血酸溶液于100毫升钼锑混合液中，混匀。

此即钼锑抗试剂。

(有效期24小时，如贮于冰箱中，则有效期较长。

)(3)磷标准溶液称取0.439克KH2PO4(105℃烘2小时)溶于200毫升水中，加入5毫升浓H2SO4，转入1升量瓶中，用水定容，此为100 mgkg-1磷标准液，可较长时间保存。

取此溶液稀释20倍即为5 mgkg-1磷标准液，此液不宜久存。

四、操作方法与实验步骤1、称取通过1毫米筛孔的风干土样品5克(精确到0.01克)于150毫升塑料杯中，加入0.03molL-1NH4F——0.025 molL-1HCl浸提剂50毫升，在20—30℃条件下振荡30分钟，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于塑料杯中，同时作试剂空白试验。

土壤速效磷含量测定方法土壤中速效磷含量的测定方法主要分为化学法和仪器分析法两大类。

下面将介绍几种常用的测定方法。

1.摩根提取法摩根提取法是一种常用的土壤速效磷测定方法。

它通过将土壤样品与醋酸盐-硫酸钠提取液进行反应，使速效磷转化为磷酸盐，并测定提取液中的磷酸盐含量来计算速效磷含量。

该方法操作简单，成本低廉，适用于各种土壤类型。

2.树脂定量法树脂定量法是一种比较准确的土壤速效磷测定方法。

它利用树脂的吸附性能将土壤样品中的速效磷吸附到树脂颗粒上，然后用酸来溶解树脂，将速效磷从树脂上解吸出来，并通过颜色反应或分光光度法测定溶液中磷酸盐的含量。

该方法操作简单，测定结果准确，但对实验条件要求较高。

3. Alkaline-Citrate-Dithionite(DCD)法Alkaline-Citrate-Dithionite(DCD)法是一种常用的土壤速效磷测定方法。

它利用碱性条件下柠檬酸盐与亚硫酸盐的还原作用，使土壤样品中的速效磷转化为磷酸盐，并通过分光光度法测定还原溶液的磷酸盐浓度。

该方法操作简单，测定结果准确，适用于有机质含量较高的土壤样品。

4. Mehlich-3法Mehlich-3法是一种常用的土壤速效磷测定方法。

它利用氯化亚铁和硫酸的还原性质，可以将土壤中的速效磷转化为磷酸盐，并通过分光光度法测定还原溶液中磷酸盐的含量。

该方法操作简单，测定结果准确，适用于各种土壤类型。

5.酶解法酶解法是一种常用的土壤速效磷测定方法。

它通过在土壤样品中加入酶，将速效磷转化为磷酸盐，并测定酶解液中的磷酸盐含量来计算速效磷含量。

该方法操作简单，适用于含有有机磷的土壤样品。

总结起来，土壤速效磷测定方法有化学法和仪器分析法两大类，常用的方法包括摩根提取法、树脂定量法、Alkaline-Citrate-Dithionite(DCD)法、Mehlich-3法和酶解法。

这些方法各有优劣，适用于不同类型的土壤样品。

在实际应用中，可以根据土壤样品的性质和测定要求选择合适的方法进行测定。

实训十0.5mol/LNaHCO3 浸提-钼锑抗比色法）一、目的要求土壤速效磷也称土壤有效磷，包括水溶性磷和弱酸溶性磷，其含量是判断土壤供磷能力的一项重要指标。

测定土壤速效磷的含量，可为合理分配和施用磷肥提供理论依据。

实验要求了解测定土壤速效磷的基本原理，掌握其测定方法。

二、方法原理用pH8.5 的0.5mol/L 的NaHCO3 作浸提剂处理土壤，由于碳酸根的存在抑制了土壤中的碳酸钙的溶解，降低了溶液中Ca2+浓度，乡音的提高了3+3+磷酸钙的溶解度。

由于浸提剂的pH较高，抑制了Fe和Al的活性，有利-3-2-于磷酸铁和磷酸铝的提取。

此外，溶液中存在着OH、HCO、CO3 等阴离子，也有利于吸附态磷的置换。

用NaHCO3 作浸提剂提取的有效磷与作物吸收磷有良好的相关性，其适应范围也广泛。

浸出液中的磷，在一定的酸度下，用硫酸钼锑抗还原显色成磷钼蓝，蓝色的深浅在一定浓度范围内与磷的含量成正比，因此，可以用比色法测定其含量。

三、主要仪器震荡机、分光光度计或光电比色计、天平（O.OIg）、三角瓶（250ml）、容量瓶（50ml）、漏斗、无磷滤纸、移液管（10ml）。

四、试剂配制1.0.5mol/L 的NaHCO3 （pH8.5）浸提液称取化学纯NaHCO342.0g 溶于800ml蒸馏水中，以4mol/L NaOH溶液调节pH至8.5 （用pH计测定），然后稀释至1000ml，保存在试剂瓶中。

如果贮存期超过1个月，是用时应重新调整pH。

2•无磷活性炭将会活性炭先用1:1（V/V ）的盐酸浸泡过夜，在布氏漏斗- 上抽滤，用蒸馏水冲洗多次至无Cl为止，在用0.5mol/L NaHCO3 溶液浸泡过夜，在布氏漏斗上抽滤，用蒸馏水洗尽NaHCO 3，检查至无磷为止，烘干备用。

3.7.5mol/L硫酸钼锑抗贮存液在1000ml烧杯中加入400ml蒸馏水，蒋烧杯浸在冷水中，然后缓慢注入208.3ml 浓硫酸（分析纯），并不断搅拌，冷却至室温。

1土壤全磷的测定(硫酸一高氯酸消煮法)方法原理在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的硫酸和强氧化剂高氯酸作用，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。

操作步骤1.在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的土壤样品1g(精确到0.0001)置于50ml三角瓶中，以少量水湿润，并加入浓H2SO48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。

2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。

3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。

轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。

同时做空白试验。

4.吸取滤液2—10ml于50ml容量瓶中，用水稀释至30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。

5.加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容至刻度。

6.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P—mg/L数。

7.工作曲线的绘制。

分别吸取5mg/L标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml于50ml 容量瓶中，加水稀释至约30ml，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。

即得0，0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,mg/LP标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。

在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L数为横坐标，绘制成工作曲线。

结果计算全P %=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106)×100式中：显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L；显色液体积—本操作中为50ml；分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积；106—将ug换算成gW—土样重(g)。

实验五土壤速效磷的测定一、目的和要求掌握比色法测定土壤速效磷的方法，了解土壤中磷素形态及其土壤供磷能力与土壤速效磷的关系。

掌握土壤速效磷的浸提，浸提液的处理，标准曲线制作，显色，比色，计算。

二、内容与原理酸性土壤中的磷主要是以Fe—P，A1—P的形态存在，利用氟离子在酸性溶液中络合Fe3+和Al3+的能力，可使这类土壤中比较活性的磷酸铁铝盐被陆续活化释放，同时由于H+的作用，也能溶解出部分活性较大的Ca—P，然后用钼锑抗比色法进行测定。

三、主要仪器及试剂配制仪器：塑料杯，往复式振荡机，分光光度计或光电比色计试剂：(1)0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl浸提剂称取1.11克NH4F溶于800毫升水中，加1.0molL-1HCl25毫升，然后稀释至1升，贮于塑料瓶中，其它试剂同前法。

(2)钼锑抗试剂称取酒石酸锑钾(KSbOC4H4O6)0.5克，溶于100毫升水中，制成5％的溶液。

另称取钼酸铵20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升浓硫酸，边加边搅动，再将0.5％的酒石酸锑钾溶液100毫升加入到钼酸铵液中，最后加至1升，充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混合液。

临用前(当天)称取1.5克左旋抗坏血酸溶液于100毫升钼锑混合液中，混匀。

此即钼锑抗试剂。

(有效期24小时，如贮于冰箱中，则有效期较长。

)(3)磷标准溶液称取0.439克KH2PO4(105℃烘2小时)溶于200毫升水中，加入5毫升浓H2SO4，转入1升量瓶中，用水定容，此为100 mgkg-1磷标准液，可较长时间保存。

取此溶液稀释20倍即为5 mgkg-1磷标准液，此液不宜久存。

四、操作方法与实验步骤1、称取通过1毫米筛孔的风干土样品5克(精确到0.01克)于150毫升塑料杯中，加入0.03molL-1NH4F——0.025 molL-1HCl浸提剂50毫升，在20—30℃条件下振荡30分钟，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于塑料杯中，同时作试剂空白试验。

土壤速效磷的测定土壤速效磷的测定5.3.1概述了解土壤中速效磷供应情形，对于施肥有着直接的引导意义。

土壤中速效磷的测定方法很多。

有生物方法、化学速测方法、同位素方法、阴离子交换树脂法等。

在测定土壤有效磷之前，先了解一些名词的涵义是紧要的。

文献中常用土壤中有效磷含量、土壤中磷的有效性、“磷位”、磷素供应的强度因素、容量因素、速率等。

弄清楚这些名词，对土壤有效磷的提取是有帮忙的。

土壤中有效磷含量是指能为当作物汲取的磷量。

因此，有效磷的测定生物方法是*直接的，即在温室中进行盆钵试验，测定在肯定生长时间内作物从土壤汲取的磷量。

土壤中磷的有效性是指土壤中存在的磷能为植物汲取利用的程度，有的比较简单，有的则较难。

这里就涉及到强度、容量、速率等因素。

土壤固相磷→溶液中磷→植物从溶液汲取磷植物汲取磷，首先决议于溶液中磷的浓度（强度因素），溶液中磷的浓度高，则植物汲取的磷就多。

当植物从溶液中汲取磷时，溶液中磷的浓度降低，则固相磷不断补给以维持溶液中磷的浓度不降低，这就是土壤的磷供应容量。

固相磷进入溶液的难易，或土壤吸持磷的本领，即所谓“磷位”（1/2pCa+pH2PO4）。

它与土壤水分情形用pF表示相像，即用能量概念来表示土壤的供磷强度。

土壤吸持磷的本领愈强，则磷对植物的有效性愈低。

土壤有效磷的测定，生物的方法被认为是*牢靠的。

目前用同位素32P稀释法测得的“A”值被认为是标准方法。

阴离子树脂方法有仿佛植物汲取磷的作用，即树脂不断从溶液中吸附磷，是单方向的，有助于固相磷进入溶液，测出的结果也接近“A”值。

但是用得*普遍的是化学速测方法。

化学速测方法即用提取剂提取土壤中的有效磷。

5.3.2土壤有效磷的化学浸提方法（1）用水作提取剂。

植物汲取的磷重要是H2PO4—的形态，因此测定土壤中水溶性磷应是测定土壤有效磷的一个牢靠方法。

但是用水提取不易获得澄清的滤液；水溶液缓冲本领弱，溶液pH简单更改，影响测定结果，而且很多含有效磷低的土壤，测定也有困难，由于水的提取本领较弱。

实验九、土壤速效磷测定（－）目的与要求了解土壤速效磷的测定原理；初步掌握测定土壤速效磷的主要方法和步骤；加深对课堂所学知识的理解。

（二）主要内容用盐酸一氟化铵浸提法测定旱地酸性土壤速效磷的含量。

（三）仪器用品50ml带盖朔料瓶、100ml三角瓶、25mL 容量瓶、10ml吸量管、50ml移液管、洗耳球、无磷滤纸、分析天平、729分光光度计。

（四〕原理方法测定土壤速效磷的办法很多，由于浸提剂的不同，其结果也不一致。

浸提剂的选择主要是根据各种土壤性质而定。

在一般情况下，中性和石灰性土壤采用碳酸氢钠法浸提；酸性水稻土采用0.1mol/l盐酸浸提旱地酸性土壤采用盐酸一氟化铵法浸提。

在酸性土壤中，速效磷可用酸性氟化铵提取，形成氟铝化铵和氟铁化铵络合物，少量的钙离子则生成氟化铵沉淀，磷酸根离子则被释放到浸提剂溶液中，其反应成如下：3NH4+3HF+AlPO4H3PO4+(NH4)3AlF63NH4F+3HF+FePO4H3PO4+(NH4)3FeF6在一定酸度条件下，正磷酸根与钼酸铵及三价锑离子共同形成磷锑钼杂聚络合物，其组成中P : Sb : Mo的原子比约为1：2：12。

这种杂聚络合物在10－60℃时甚易被抗坏血酸还原成磷铝蓝（H8[P(Mo2O3）（M02O7)3]），蓝色十分稳定，蓝色的深度与磷的含量成正比关系，在一定浓度范围内服从比尔定律。

测磷（P）范围为0.1—1.0ppm。

比色酸度控制在0.55土0.1mol/L。

试剂配制：(1)0.03mol／L氟化铵一0.025mol/L盐酸溶液称取1.11g分析纯氟化铵溶于800mL蒸馏水中，加1mol／L盐酸25mL，然后稀释至1000mL，贮于塑料瓶中。

（2）硼酸固体（分析纯）。

(3)磷（P）标准溶液：准确称取经45℃烘干4－8小时的分析纯磷酸二氢钾0.2197g，用少量蒸馏水溶解后，洗入1000mL容量瓶中，稀释至刻度并充分摇匀，此溶液为含磷（P）50ppm标准液。

实验十五一、目的和意义测定土壤中速效磷的含量，是评价土壤对当季作物供应磷素能力的一种手段，对于施肥有着直接的参考价值。

由于提取剂的不同，所得结果也不一致。

在中性土壤和石灰性土壤，一般采用碳酸氢钠或碳酸铵来提取。

二、方法原理中性、石灰性土壤中的速效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙的状态存在，可用0.5M碳酸氢钠提取到溶液中；酸性土壤中的速效磷，多以磷酸铁和磷酸铝的状态存在，0.5M碳酸氢钠能同时提取磷酸铁和磷酸铝表面的磷，故也可使用酸性土壤中速效磷的提取。

然后将待测液用钼锑抗混合显色剂在常温下进行还原，使黄色的锑磷钼杂多酸还原成为磷钼兰，进行比色。

三、测定方法1.称取通过20号筛的风干土样5克（精确到0.01克）置于250毫升三角瓶中，加100毫升0.5M碳酸氢钠溶液，再加一小角勺无磷活性炭，塞紧瓶塞，在振荡器上震荡30分钟，立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤，滤液承接于250毫升三角瓶中。

2.吸取滤液10毫升（含磷量高时取2.5~5毫升，同时应补加0.5M碳酸氢钠溶液至10毫升）于50毫升容量瓶中，加7.5N硫酸钼锑抗混合显色剂5毫升，利用其中多余的硫酸来中和碳酸氢钠、充分摇匀，等二氧化碳充分排出后加水定容至刻度，再充分摇匀（最后的硫酸浓度为0.65N）。

3. 30分钟后在光电比色计上用红色滤光板比色，或用72型分光光度计比色（波长660微米），比色时须同时做空白测定。

4.磷标准曲线绘制：分别吸取5ppm磷标准溶液0、1、2、3、4、5毫升于50毫升容量瓶中，每一容量瓶即为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ppm磷，再逐个分别加入0.5M碳酸氢钠10毫升和7.5N硫酸—钼锑抗混合显色剂5毫升，然后同待测液一样进行比色，在半对数纸上绘制成曲线。

四、结果计算P(毫克/100克土)显色液ppm显色液体积分取倍数100样品重1000式中：显色液ppm——从标准曲线上查得磷的ppm数；显色液体积——50ml；1000——将微克换算成毫克；100——换算成每百克样品中磷的毫克数；分取倍数——浸提液总体积100ml/吸取浸提液ml数。