溶血性链球菌的试验方法
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抗链球菌溶血素“O”试验【基本信息】[简要描述]·溶血素“O”(SLO)是A群溶血性链球菌产生的具有溶血活性的代谢产物,相应的抗体称抗链球菌溶血素“O”(Anti-streptolysin“O”, 抗O或ASO)。
·ASO试验是指通过测定血清中的ASO抗体效价,来判断患者有无A族溶血性链球菌感染。
·ASO试验可作为A族溶血性链球菌感染性疾病的辅助诊断方法之一,还对检测风湿病是否活动较有意义。
[其他名称]抗O、ASO【测定方法及参考值范围】·乳胶凝集法(LAT):阴性或<500U。
·溶血抑制法:儿童<250Todd u;成人<166Todd u。
(Todd单位为抗体效价稀释度,1932年Todd建立ASO测定法时用滴度表示沿用至今。
另外,U用于国际单位,等于IU,此处用u,意为非国际单位。
下同)·微量滴度法:儿童<320Todd u;成人<240Todd u。
·散射比浊法:<200Todd u;或<145u(Beckman Study)。
【结果及临床意义】[阳性或升高]◇疾病因素·活动性风湿热注释:感染后4-6周,80%的患者阳性,如果合并C反应蛋白升高,血沉加快,结合临床表现,可考虑风湿活动。
·风湿性关节炎·风湿性心肌炎·急性肾小球肾炎注释:溶血性链球菌感染症及其后续症ASO阳性率:60%-90%。
·急性上呼吸道感染·皮肤和软组织感染·感染性心内膜炎·急性扁桃体炎注释:溶血性链球菌感染症及其后续症ASO阳性率:50%-90%。
·猩红热注释:溶血性链球菌感染症及其后续症ASO阳性率:33%-89%。
·急性渗出性咽炎·过敏性紫癜·丹毒·其他A群链球菌感染·病毒性肝炎注释:非特异性升高。
·肾病综合征注释:非特异性升高。
【GB/T 4789.11—1994】食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验1 主题内容与适用范围本标准规定了食品中溶血性链球菌的检验方法。
本标准适用于食品和食物中毒样品中溶血性链球菌的检验。
2 引用标准GB 4789.28 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3 设备和材料3.1 温箱:36±1℃。
3.2 水浴:36±1℃。
3.3 显微镜。
3.4 离心机。
3.5 试管架。
3.6 灭菌平皿。
3.7 灭菌小试管。
3.8 载玻片。
3.9 灭菌吸管:1mL、10mL。
3.10 灭菌镊子。
3.11 均质器。
3.12 酒精灯。
3.13 接种环。
4 培养基和试剂4.1 葡萄糖肉浸液肉汤:按GB 4789.28中4.1规定,在肉浸液肉汤内加入1%葡萄糖。
4.2 肉浸液肉汤:按GB 4789.28中4.1规定。
4.3 匹克氏肉汤:按GB 4789.28中4.62规定。
4.4 血琼脂平板:按GB 4789.28中4.6规定。
4.5 人血浆。
4.6 0.25%氯化钙。
4.7 灭菌生理盐水。
4.8 杆菌肽药敏纸片(含0.04单位)。
5 检验程序(图略)6 操作步骤6.1 样品处理称取25g固体检样;称取25mL液体检样,加入225mL灭菌生理盐水,研成匀浆制成混悬液。
6.2 一般培养将上述混悬液吸取5mL,接种于50mL葡萄糖肉浸液肉汤;或直接划线接种于血平板,如检样污染严重,可同时按上述量接种匹克氏肉汤,经36±1℃培养24h,接种血平板,置36±1℃培养24h,挑起乙型溶血圆形突起的细小菌落,在血平板上分纯,然后观察溶血情况及革兰氏染色,并进行链激酶试验及杆菌肽敏感试验。
6.3 形态与染色本菌呈球形或卵圆形,直径0.5~1μm,链状排列,链长短不一,短者4~8个细胞组成,长者20~30个,链的长短常与细菌的种类及生长环境有关;液体培养中易呈长链;在固体培养基中常呈短链,不形成芽孢,无鞭毛,不能运动。
1.溶血性链球菌
①GB4789.11-2014 《食品安全国家标准食品微生物学检验β型溶血性链球菌检验》于
2015年05月01日实施,代替GB/T 4789.11-2003 《食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验》。
注:根据链球菌在血液培养基上生长繁殖后是否溶血及其溶血性质分为三类,α-溶血性链球菌,也称甲型溶血,此类细菌致病力不强,多为条件致病菌。
在人类呼吸道及肠道中有α型溶血链球菌正常寄生,但有时也可引起亚急性心内膜炎等症。
β-溶血性链球菌,这类菌亦称为溶血性链球菌,该菌的致病力强,常引起人类和动物的多种疾病。
具体用途是用于研究和质量控制。
γ-溶血链球菌也称为丙型或不溶血性链球菌,该菌无致病性,常存在于乳类和粪便中,偶尔也引起感染。
②选作项目:链激酶试验:搜索了广东环凯/青岛海博/北京陆桥均没有发现“草酸钾血浆”或者链激酶实验套装在售。
③生化鉴定:搜索了广东环凯/青岛海博/北京陆桥仅在北京陆桥发现“溶血性链球菌荧光定量PCR检测试剂盒“
2.根据GB4789.35-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》可进行双歧杆菌计数嗜热链球菌鉴别乳杆菌鉴别如果对标准理解没有错误的情况下,应该问题不大。
3.若根据GB4789.34-2012 进行双歧杆菌的鉴定,需要气相色谱,这个仪器是微生物检验科所不具备的。
4.总之,从实验条件上,药品检验实验室是否可以用于保健食品的检测,尚不明确;从人员看,微生物检验科实验人员均没有上述检验项目的检验经验。
从检测标准看,除自学外,微生物检验科检验人员均没有相关标准的学习经历。
从仪器设备材料看,溶血性链球菌检验缺少相关试剂及仪器。
aso试验实验报告实验分析实验名称:ASO(抗链球菌溶血素O)试验实验分析实验目的:ASO试验是一种用于检测人体血清中抗链球菌溶血素O抗体水平的实验,主要用于辅助诊断风湿热和链球菌感染。
通过分析血清中ASO抗体的浓度,可以评估个体是否近期或曾经感染过A组β溶血性链球菌。
实验原理:ASO试验基于抗原-抗体反应的原理。
A组β溶血性链球菌在体内感染后,机体会产生特异性的抗体来对抗这种细菌。
通过测定血清中ASO抗体的浓度,可以间接反映链球菌感染的情况。
实验材料:1. 待测血清样本2. ASO抗体检测试剂盒3. 实验室常规设备(离心机、恒温水浴、酶标仪等)实验步骤:1. 采集待测个体的血液样本,分离血清备用。
2. 按照试剂盒说明书,将血清样本稀释至适当浓度。
3. 将稀释后的血清样本加入到试剂盒中的反应孔内。
4. 加入试剂盒提供的酶标抗体,使血清中的ASO抗体与酶标抗体结合。
5. 将反应板放入恒温水浴中孵育一定时间。
6. 孵育结束后,用洗涤液清洗反应板,去除未结合的酶标抗体。
7. 加入底物溶液,使酶催化底物产生颜色变化。
8. 使用酶标仪测定各反应孔的吸光度值。
9. 根据吸光度值与ASO抗体浓度的标准曲线,计算血清样本中的ASO抗体浓度。
实验结果:实验结果显示,待测血清样本的ASO抗体浓度为XX IU/mL。
根据标准曲线,该浓度高于正常参考值范围(< 200 IU/mL),提示可能存在链球菌感染。
实验分析:ASO抗体浓度的升高通常与链球菌感染相关,但也可能受到其他因素的影响,如其他类型的感染或自身免疫性疾病。
因此,ASO试验结果需要结合临床症状和其他实验室检测结果综合分析。
如果ASO抗体浓度显著升高,应考虑进一步的诊断和治疗措施。
结论:本次ASO试验实验分析表明,待测个体的血清样本中ASO抗体浓度高于正常范围,提示可能存在链球菌感染。
建议结合临床症状和其他检测结果,进行进一步的诊断和评估。
备注:本实验报告仅为实验分析的示例,实际实验结果应以实验室检测结果为准。
链球菌属及其检验「微生物检验」链球菌属(Streptococcus)细菌,呈链状排列的革兰阳性球菌,个别种成双排列。
广泛分布于自然界、人及动物肠道和健康人鼻咽部,大多数不致病,致病菌可引起各种化脓性炎症、猩红热、新生儿败血症、细菌性心内膜炎以及风湿热、肾小球肾炎等超敏反应性疾病。
下面是yjbys店铺为大家带来的关于链球菌属细菌的知识,欢迎阅读。
⒈分类链球菌的分类方法尚未统一。
常用下列两种方法。
⑴根据溶血现象:分为3类。
①甲型溶血性链球菌(α-hemolytic streptococcus):菌落周围有1~2mm宽的草绿色溶血环,称甲型溶血或α溶血,该类菌又称草绿色链球菌,为条件致病菌。
②乙型溶血性链球菌(β-hemolytic streptococcus):菌落周围有2~4mm宽的透明溶血环,称乙型溶血或β溶血,该类菌又称溶血性链球菌,致病性强,常引起人和动物多种疾病。
③丙型链球菌(γ-streptococcus):菌落周围无溶血环,因而又称不溶血性链球菌,一般不致病。
⑵根据抗原结构:按链球菌细胞壁中多糖抗原不同,可分成A、B、C、D …等20个群。
同群链球菌间,因表面蛋白质抗原不同又分若干型。
如A群根据其M抗原不同,可分成约100个型;B群分4个型。
对人致病的链球菌菌株,主要是 A群,多数呈现乙型溶血。
⒉细菌特性⑴链球菌① 形态染色球形或椭圆形,直径0.5~1.0μm,链状排列,链的长短与细菌的种类和生长环境有关,在液体培养基中形成的链较长。
无芽胞,无鞭毛。
多数菌株在培养早期(2~4h)形成透明质酸的荚膜。
革兰染色阳性。
②分离培养要求较高,培养基中需加入血液或血清、葡萄糖、氨基酸、维生素等物质。
多数菌株兼性厌氧,少数为专性厌氧。
在液体培养基中呈沉淀生长,在血平板上,37℃18~24h后可形成灰白色、圆形、凸起、光滑、直径为0.5mm~0.75mm的细小菌落,菌落周围出现不同类型的溶血环。
③生化反应触酶阴性、一般不分解菊糖,不被胆汁溶解,这两特性可用来鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌。
抗链球菌溶血素O试验原理一、概述抗链球菌溶血素O试验是一种用于检测人体血清中对链球菌溶血素O的抗体水平的实验方法。
本实验通过将待测血清与链球菌溶血素O反应,观察反应结果来评估人体免疫系统对链球菌感染的抵抗能力。
该试验可以用于诊断链球菌感染、评估免疫功能以及判断疫苗的有效性。
二、实验原理链球菌溶血素O是由β型溶血性链球菌细菌分泌的一种溶血素,能够引起溶血反应。
正常情况下,人体会产生相应的抗体来中和这种溶血素,从而保护人体不受损伤。
抗链球菌溶血素O试验就是利用这一原理来检测人体中的抗体水平。
具体步骤如下: 1. 将待测血清稀释至一定浓度,通常采用两倍或三倍稀释; 2. 将稀释后的血清与含有链球菌溶血素O的试剂混合; 3. 在37℃下孵育一段时间,让抗体与链球菌溶血素O反应; 4. 添加一种适用于链球菌的红细胞悬液,如兔红细胞; 5. 再次孵育一段时间; 6. 观察溶血反应和溶血程度,评估抗体水平。
三、实验过程3.1 血清的稀释血清的稀释是为了确保试剂的最终浓度在适宜范围内,同时避免过高浓度的干扰。
稀释的选择根据具体实验要求进行,通常采用两倍或三倍稀释。
3.2 血清与试剂的混合将稀释后的血清与含有链球菌溶血素O的试剂混合,充分搅拌均匀。
3.3 反应孵育将混合溶液放置在恒温培养箱中,以37℃恒温孵育一定时间。
这个步骤的主要目的是让抗体与链球菌溶血素O发生特异性反应。
3.4 红细胞悬液的加入在经过一定时间的孵育后,加入适用于链球菌的红细胞悬液,如兔红细胞。
然后再次进行一定时间的孵育。
3.5 溶血程度的观察观察孵育后的溶血反应和溶血程度,根据溶血程度的不同可以评估抗体水平。
四、结果解读4.1 阴性结果如果试验中出现红细胞没有明显溶解的情况,则说明待测血清中没有足够的抗链球菌溶血素O抗体,即属于阴性。
这可能是由于未感染链球菌或感染不久等原因。
4.2 阳性结果如果试验中观察到红细胞有明显溶解的情况,则说明待测血清中含有足够的抗链球菌溶血素O抗体,即属于阳性。