医学检验·检查项目:碳氧血红蛋白定性试验(HBCO)_课件模板
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导读:碳氧血红蛋白定性试验操作程序(sop),原理:一氧化碳与血红蛋白结合后,形成樱桃红色的碳氧血红蛋白,它对碱抵抗力较正常血红蛋白为强,操作:(1)取试管2支,如患者血液中有碳氧血红蛋白,②本试验敏感性较差,试验可阴性,临床意义:碳氧血红蛋白定性试验是用于急诊煤气中毒的实验诊断项目,碳氧血红蛋白含量亦会升高,碳氧血红蛋白定性试验操作程序(sop)原理:一氧化碳与血红蛋白结合后,形成樱桃红色的碳氧血
碳氧血红蛋白定性试验操作程序(sop)
原理:一氧化碳与血红蛋白结合后,形成樱桃红色的碳氧血红蛋白,它对碱抵抗力较正常血红蛋白为强。
试剂:5% 氢氧化钠
操作:(1)取试管2支,各加蒸馏水3至5ml,第一管加患者血液3滴,第二管加正常人对照血3滴,混匀,此时如患者血中有一氧化碳则溶血液呈樱桃红色。
(2)每管各加5% 氢氧化钠1滴,轻轻混匀,正常对照管呈绿褐色。
如患者血液中有碳氧血红蛋白,则溶血液仍呈樱桃红色,为阳性。
如与正常对照色泽一致为阴性。
附注:①观察结果须及时,否则樱桃红色逐渐退去,不易分辨。
②本试验敏感性较差,血液中一氧化碳含量到一定程度时才显阳性。
如患者事先已采取通气措施,血中一氧化碳含量下降,试验可阴性。
但临床症状,体征仍可能存在。
临床意义:碳氧血红蛋白定性试验是用于急诊煤气中毒的实验诊断项目。
在重度吸烟者和锅炉工人的血液中,碳氧血红蛋白含量亦会升高。
人一氧化碳血红蛋白(HbCO)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
药品名称:通用名:人一氧化碳血红蛋白(HbCO)酶联免疫分析试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆、或相关组织液中一氧化碳血红蛋白(HbCO)的含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人一氧化碳血红蛋白(HbCO)水平。
用纯化的人一氧化碳血红蛋白(HbCO)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入一氧化碳血红蛋白(HbCO),再与HRP标记的一氧化碳血红蛋白(HbCO)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人一氧化碳血红蛋白(HbCO)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人一氧化碳血红蛋白(HbCO)的含量。
试剂盒组成120倍浓缩洗涤液30ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(7.2ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液 1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本处理及要求1.血清、血浆标本可直接测定;2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
3.采集后尽早进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
操作步骤1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上按序设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;再各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后,在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉;再各取50μl分别加到第五、第六孔中;再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中;再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中;再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。