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“优一”花芽解剖实验设计背景资料：核果类花芽生理分化的时间：5月下旬或6月上旬至7月初或7月中旬，在长梢生长量达全生长量的60%-95%时为盛期。
7月中旬至8月中旬开始进入形态分化期，部分品种6月中旬就开始进入形态分化，7月中旬至8月中旬是分化高峰时期，8月下旬至10月初为性器官分化阶段。
由于今年气温高整个物候期提前，所以计划于5月10号开始观察。
一、实验目的此次杏的花芽解剖实验从花芽生理分化开始，对杏的各个时期的花芽进行观察，力求找出雌蕊败育的时期和原因。
二、实验时间试验于2014年5 月10 日始至2015 年3月（开花前）三、实验材料选取原阳基地9年生以上的优一品种，在同一棵树上选取树冠外围南部中、短果枝上的中、下部芽为主。
四、实验方法先对优一挂牌采样，每隔10 d 取样1 次，每次取50个芽，每次从短枝取芽后用F A A 固定液(70％乙醇90mL ：福尔马林5mL ：冰醋酸5mL)保存。
将花芽材料需在固定液中固定24h以上。
五、实验方法与步骤采用石蜡切片法制片方案一：采用常规石蜡切片法制片1、染色将固定液中的芽取出，放人盛有50%乙醇的培养皿中，用镊子与解剖针小心剥去鳞片之后，移入装有蒸馏水的小瓶中，再用注射器吸干水，然后加入2～3 滴爱氏苏木精，封盖静置10～1 5 d。
2、材料冲洗用注射器将小瓶内的染色剂吸出，回收，然后将小瓶用纱布蒙口，倒置入水槽，后用自来水冲洗12～24 h 。
3、脱水材料取出后依次放入70% 乙醇、83％乙醇、90%乙醇、95%乙醇、100％乙醇、100%乙醇的脱水剂中脱水，每级脱水剂中处理50分钟(100 %乙醇中为30分钟／次)。
4、透明脱水后迅速将材料放人100％乙醇与一二甲苯的混合物中，混合物按2 ：1、1 ：1、1 ：2 的比例混合，再将混合物各放置20分钟，接着各放入两组纯一二甲苯15 分钟。
5、浸蜡将试验材料与二甲苯一并倒入玻璃杯中，放置在37℃恒温处12～24 h，后移人56～60℃的恒温箱中3 d ，期间更换恒温箱中纯蜡3～4次。
一、实验目的1. 学习石蜡制片的基本原理和操作步骤。
2. 掌握石蜡制片过程中常用的试剂和设备。
3. 了解石蜡制片在组织学、病理学等领域的应用。
二、实验原理石蜡制片是一种将组织固定、脱水、透明、包埋、切片和染色等一系列操作过程结合在一起的实验技术。
通过石蜡制片，可以使组织在显微镜下观察到其形态结构。
石蜡制片的基本原理是利用石蜡的物理和化学性质，将组织固定、脱水、透明、包埋，并使其具有适宜的硬度和透明度，以便于切片和染色。
三、实验器材与试剂1. 器材：石蜡切片机、切片刀、切片刀架、切片夹、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、剪刀、酒精灯、火柴、显微镜、烤箱、离心机、移液器、微量滴管、染色缸、染色瓶、试剂瓶、试管、试管架等。
2. 试剂：4%多聚甲醛固定液、70%酒精、80%酒精、95%酒精、无水乙醇、醇苯、二甲苯、石蜡、石蜡熔融剂、中性树胶、苏木精、伊红、盐酸酒精、磷酸盐缓冲液等。
四、实验步骤1. 组织固定：取新鲜组织，用4%多聚甲醛固定液固定24小时以上。
2. 组织脱水：将固定好的组织放入70%酒精中浸泡2小时，然后依次放入80%酒精、95%酒精、无水乙醇、醇苯中浸泡各2小时。
3. 组织透明：将脱水的组织放入二甲苯中浸泡2小时，使组织透明。
4. 组织包埋：将透明的组织放入石蜡中，加热熔融，使组织浸入石蜡中。
待石蜡凝固后，将组织从石蜡中取出，放入包埋框中，贴上标签。
5. 组织切片：将包埋好的组织块放入石蜡切片机中，调整切片厚度（一般为4μm），进行切片。
6. 组织展平：将切片从石蜡切片机上取下，放入水中展平。
7. 组织染色：将展平的切片放入苏木精染液中染色5分钟，然后用盐酸酒精分化，最后放入伊红染液中复染。
8. 组织封片：将染色的切片放入中性树胶中封片，待树胶凝固后，用盖玻片封片。
9. 显微镜观察：将封片后的切片放入显微镜中观察，记录观察结果。
五、实验结果与分析1. 组织切片：经过石蜡制片，组织切片呈现出良好的透明度和硬度，便于观察。
石蜡切片的具体步骤与做法？石蜡切片法即用石蜡作为支持剂进行切片的方法。
石蜡切片法是一般组织学、病理学等常规制片方法，因此用得最多，它有很多优点：比较省时间，容易操作，可切成极薄的切片（4um以下），能制作连续切片，组织块可包埋在石蜡中永久保存。
缺点是只能用于较小的组织块，较大的组织块不易切好，容易破碎，组织在脱水透明过程中产生收缩并易变脆。
制片时间太长。
石蜡切片的制作过程（一）材料与用具1．材料：鱼皮肤、性腺、肠、肝胰脏等。
2．用具：溶蜡箱、蜡杯、不同熔点的石蜡、酒精灯等。
（二）实验内容与步骤1．取材及固定取动物体上的小块组织成为组织块。
组织块的大小以不超过0.5立方厘米为宜。
切去组织块时动作要轻，切忌用力牵引或挟持，以免组织内部发生变化。
组织块取下后，先用先用0.85％的生理盐水漂洗以戏曲血液与污渍，如果是管状组织则必须把管腔中污物洗净，可用注射器自一端向管腔中注射生理盐水数次，使其管腔冲洗干净，切忌不可用刀或其他器具刮之。
由动物身上切取的组织必须是新鲜的，材料越新鲜越好，一般不应超过死后24小时。
如果是管状器官或是其中有分泌之消化液，则死后应迅速采取，以免组织自溶或上皮剥落。
材料由动物体取下后应当迅速固定，固定的目的是尽快使固定液渗入组织内部，将组织固定，以保持其原有的结构。
不同的组织应选用适当的固定液。
固定液的用量与组织块体积之比一般在20：1。
不应使组织块贴于容器壁上，应记录固定液的名称，材料的种类，动物品种及开始固定的时间。
2．冲洗固定后的组织块在进行脱水前必须用流水洗去固定液。
组织块应用纱布包好，注名，放金属水洗网中用流水冲洗，甲醛固定液固定的组织一般水洗24小时，Bouins固定液固定的组织水洗24小时。
AFA固定液则不需要水洗。
3．脱水和硬化经过固定后的组织在水洗后要进行脱水，脱水的目的将组织内的水分用酒精或其他溶剂置换出来，使组织逐渐变硬，便于油类或其他透明及浸入，为熔化的石蜡浸渗到组织中创造条件。
第1篇一、实验目的1. 掌握石蜡切片的基本操作步骤。
2. 了解石蜡切片的染色原理和方法。
3. 观察细胞组织的结构特征。
二、实验器材与试剂1. 器材：- 石蜡切片机- 石蜡包埋机- 恒温箱- 显微镜- 载玻片- 盖玻片- 毛笔- 镊子- 刀片- 染色缸- 烤片机- 试剂瓶2. 试剂：- 4%多聚甲醛固定液- 无水乙醇- 二甲苯- 苏木素染液- 伊红染液- 1%盐酸酒精溶液- 1%氨水溶液- 甘油蛋白粘片剂- 中性树胶三、实验步骤1. 取材与固定：取新鲜组织，用4%多聚甲醛固定24小时以上。
2. 脱水：将固定好的组织放入脱水盒，依次用75%、85%、90%、95%、无水乙醇进行脱水，每级酒精处理1小时。
3. 浸蜡：将脱水后的组织放入二甲苯中浸泡，每缸浸泡1小时。
4. 包埋：将浸好蜡的组织块放入包埋机中，加入融化的石蜡，待石蜡凝固后取出，修整蜡块。
5. 切片：将修整好的蜡块固定在切片机上，切成4微米厚的切片。
6. 水化：将切片放入水中，用毛笔轻轻搅动，使切片展平。
7. 脱蜡：将水化的切片放入二甲苯中，依次浸泡30分钟，然后放入无水乙醇中，浸泡10分钟。
8. 苏木素染色：将脱蜡后的切片放入苏木素染液中，染色0.5-1分钟。
9. 自来水漂洗：将染色后的切片放入自来水中漂洗。
10. 盐酸酒精分化：将漂洗后的切片放入1%盐酸酒精溶液中分化数秒。
11. 自来水漂洗：将分化后的切片放入自来水中漂洗。
12. 氨水返蓝：将漂洗后的切片放入1%氨水溶液中返蓝1分钟。
13. 自来水漂洗：将返蓝后的切片放入自来水中漂洗。
14. 伊红染色：将漂洗后的切片放入伊红染液中染色1分钟。
15. 自来水漂洗：将染色后的切片放入自来水中漂洗。
16. 梯度酒精脱水：将漂洗后的切片依次放入70%、80%、90%、95%、无水乙醇中，每级酒精处理5分钟。
17. 透明：将脱水后的切片放入二甲苯中，依次浸泡5分钟，然后放入无水乙醇中，浸泡5分钟。
一、实验目的1. 掌握石蜡切片的制作过程，包括组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片和染色等步骤。
2. 了解石蜡切片技术在生物学研究中的应用。
3. 学会使用显微镜观察石蜡切片，识别不同组织结构。
二、实验原理石蜡切片技术是一种重要的生物学制片方法，用于观察组织、细胞等微观结构。
其基本原理是将组织固定后，通过一系列的脱水、透明、浸蜡等步骤，使组织在石蜡中充分浸渍，然后用切片机切成薄片，最后进行染色和观察。
三、实验材料1. 实验动物：小鼠2. 组织：肝脏、肾脏、心肌、骨骼肌等3. 试剂：卡诺氏固定液、FAA固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、埃利希苏木精染液、1%伊红酒精溶液、1%盐酸酒精溶液、甘油蛋白粘片剂、郝普特氏粘片剂、中性树胶、1%番红、1%固绿、1%过碘酸、Schiff 试剂、0.5%偏重亚硫酸钠溶液、醋酸酐-吡啶混合液、0.5%~1%淀粉糖化酶溶液等4. 器材：切片刀、切片机、恒温箱、温台、熔蜡炉、蜡杯、酒精灯、蜡铲、展片台、解剖刀、解剖针、解剖剪、解剖盘、培养皿、吸管、镊子、单面刀片、台木、毛笔、洒精灯、包埋纸盒、染色缸、盖玻片、载玻片、玻片盘、树胶、树胶瓶、显微镜、温度计、脸盆、水浴锅等四、实验步骤1. 取材：取新鲜组织，固定于4%多聚甲醛24小时以上。
2. 脱水：将固定后的组织依次放入75%、85%、90%、95%酒精中浸泡1小时，然后放入无水乙醇I、无水乙醇II中浸泡30分钟，最后放入醇苯中浸泡5-10分钟。
3. 透明：将组织放入二甲苯I、二甲苯II中浸泡5-10分钟。
4. 浸蜡：将组织放入熔化的石蜡中浸泡1小时。
5. 包埋：将浸好蜡的组织放入包埋机内进行包埋，待石蜡凝固后取出并修整蜡块。
6. 切片：将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片，片厚约4微米。
7. 展片：将切片漂浮于摊片机40℃温水上，将组织展平，用载玻片将组织捞起，并放进60℃烤箱内烤片。
8. 染色：将烤干的切片进行染色，如苏木精-伊红染色。
一、实验目的1. 熟悉石蜡切片的制作过程。
2. 掌握石蜡切片的染色技术。
3. 了解石蜡切片在组织学研究和病理诊断中的应用。
二、实验原理石蜡切片技术是一种常用的组织学制片方法，其原理是将组织标本进行脱水、浸渍、浸蜡等处理，使其在石蜡中充分浸渍，然后用微型切片机将其切成薄片，最终制成组织学切片。
石蜡切片具有切片厚薄均匀、染色效果好、保存时间长等优点，是组织学研究和病理诊断的重要工具。
三、实验材料1. 实验动物：小白鼠2. 实验器材：石蜡切片机、显微镜、载玻片、盖玻片、染色缸、酒精灯、剪刀、镊子等3. 实验试剂：卡诺氏固定液、FAA固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、埃利希苏木精染液、1%伊红酒精溶液、1%盐酸酒精溶液等四、实验步骤1. 取材：取小白鼠肝脏组织，用剪刀剪成小块。
2. 固定：将剪好的组织块放入卡诺氏固定液中固定24小时。
3. 脱水：将固定好的组织块依次放入70%、80%、90%、95%、100%酒精溶液中，每级酒精溶液浸泡1小时，使组织逐渐脱水。
4. 透明：将脱水的组织块依次放入三个二甲苯溶液中，每缸浸泡1小时，使组织逐渐透明。
5. 浸蜡：将透明的组织块依次放入三个石蜡溶液中，每缸浸泡1小时，使组织完全浸渍在石蜡中。
6. 包埋：将浸好蜡的组织块放入熔蜡中，待石蜡凝固后取出，用剪刀修整蜡块。
7. 切片：将修整好的蜡块固定在石蜡切片机上，调整切片厚度为4微米，制成石蜡切片。
8. 展片：将切好的石蜡切片展平在载玻片上。
9. 脱蜡：将展平的石蜡切片依次放入二甲苯、无水乙醇中，使切片脱蜡。
10. 染色：将脱蜡后的切片放入苏木精染液中染色5-10分钟，然后放入1%盐酸酒精溶液中分化，最后放入伊红染液中复染30秒。
11. 封片：将染好的切片放入封片液中封片。
五、实验结果制作完成的石蜡切片在显微镜下观察，可见到肝脏组织的细胞结构，如细胞核、细胞质、血管等。
六、实验讨论1. 石蜡切片技术是组织学研究和病理诊断的重要工具，具有切片厚薄均匀、染色效果好、保存时间长等优点。
