淋球菌培养
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淋球菌怎么检查比较好
文章导读
淋球菌感染很容易引起一些生殖疾病,所以对于淋球菌的一些检查工作要注意,其检查的方法包括分泌物涂片检查,还有淋球菌的分离培养,以及氧化酶试验检查。
1.分泌物的涂片检查
主要适用于男性。
(1)用灭菌生理盐水洗净尿道口。
(2)戴消毒手套后,用手指由阴茎根部向尿道口方向挤出脓液,用接种环或棉拭子蘸
取脓液,轻轻涂于载玻片上,待其自然干燥后加热固定,做革兰染色,然后镜检。
(3)在多形核白细胞内找到革兰阴性的肾形双球菌时,可明确诊断。
2.淋球菌的分离培养
(1)取材。
①男性患者从尿道取材时,可用细小棉拭子伸入尿道2~4cm,轻轻转动后取出分泌物(应略带黏膜)。
②女性患者取材时,先用阴道窥器暴露宫颈口,用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌。
淋球菌快速检测方法淋球菌(Neisseria gonorrhoeae)是一种常见的性传播疾病病原体,引起的淋病是一种严重的感染性疾病,如果不及时治疗,可能会导致严重的并发症。
因此,淋球菌的快速检测方法对于早期诊断和治疗具有重要意义。
本文将介绍淋球菌的快速检测方法,帮助医务人员更快速、准确地进行淋球菌的检测,从而提高治疗效果和预防传播。
淋球菌的快速检测方法主要包括核酸扩增技术(NAAT)、抗原检测和培养法。
其中,核酸扩增技术是目前应用最为广泛的方法之一,其具有高度的敏感性和特异性,可以在短时间内检测出淋球菌的存在。
此外,抗原检测也是一种常用的快速检测方法,通过检测淋球菌的特定抗原来进行诊断,具有简便、快速的特点。
而培养法虽然具有较高的特异性,但需要较长的时间来获得结果,因此在临床上的应用较为有限。
在实际操作中,医务人员可以根据患者的临床症状和病史,选择合适的快速检测方法进行检测。
对于症状明显的患者,可以首选核酸扩增技术进行检测,以获得快速而准确的诊断结果。
而对于一些症状不典型或疑似感染的患者,可以考虑结合抗原检测和培养法进行综合诊断,以提高诊断的准确性。
此外,在进行淋球菌的快速检测时,医务人员需要严格遵守操作规程,使用严谨的实验操作流程,确保检测结果的准确性和可靠性。
同时,还需要注意保护自身安全,避免接触感染源,做好个人防护工作。
总之,淋球菌的快速检测方法对于早期诊断和治疗具有重要意义。
医务人员应根据患者的具体情况,选择合适的快速检测方法进行诊断,同时严格遵守操作规程,确保检测结果的准确性和可靠性,从而提高治疗效果,预防疾病的传播。
希望本文能对淋球菌的快速检测方法有所帮助,为临床工作提供参考。
淋病诊断的金标准淋病是由淋球菌引起的一种性传播疾病,常见于青壮年人群。
淋病的治疗非常重要,因为不及时治疗可能导致多种严重的后果,如不孕症、输卵管炎、子宫内膜异位症、阴道狭窄和盆腔炎等症状。
早期的淋病症状会与其它疾病症状相似,因此进行淋病的准确诊断非常重要。
目前,淋病诊断的金标准是实验室检测淋球菌。
下面将介绍几种主要的检测方法。
1.聚合酶链反应(PCR)检测PCR是一种高灵敏度和高特异性的分子生物学技术,可以扩增特定DNA序列。
PCR检测法采用采集尿液或分泌物样本中的淋球菌DNA,通过放大特异的DNA片段来检测样本中是否存在淋球菌。
这种方法可以检测到很小的淋球菌数量,因此被视为淋病检测的金标准。
PCR方法非常适用于无症状感染的早期诊断,而且具有高度的敏感性和特异性。
2. 细菌培养法检测细菌培养法是最传统的淋球菌检测方法之一。
该方法采用患者收集的分泌物样本,特别是尿液样本,将其用于培养淋球菌。
这种方法的优点是可以非常确切地识别淋球菌,但需要较长时间才能获得结果,通常需要等待3至5天。
此外,细菌培养法的特异性和灵敏性相对较低,因此可能会产生假阳性或假阴性结果。
3. 病原体抗原检测病原体抗原检测是在采集尿液、分泌物等样本后,通过检测淋球菌表面抗原来发现病原体的一种方法。
这种方法具有较高的特异性和敏感性,通常可以在几个小时内获得结果。
但是,病原体抗原检测的缺点是不能区分活菌和死菌,而且对于静止的菌,也难以检测到它们。
4. 免疫层析技术(ICT)检测免疫层析技术是一种免疫学检测方法,它可以检测到尿液、分泌物或血清样本中淋球菌的特异性抗原,是非常快速和便捷的检测方法。
免疫层析技术通常可以在20分钟内获得结果,同时具有适当的灵敏度和特异性,但需要注意的是,免疫层析技术检测的金标准要求的许多实验条件都需要严格的规范化和标准化,以保证其准确性。
结论:淋病是一种性传播疾病,具有严重的后果。
准确诊断对于早期治疗非常重要。
淋病的报告单模板摘要淋病是一种性传播疾病,由淋球菌引起。
本文提供了淋病的报告单模板,包括患者信息、检验结果和治疗建议等内容,以供医务人员参考。
患者信息姓名:性别:出生年月:联系电话:病历号:临床表现淋病的症状通常在感染后1-3周内出现,表现为以下症状:•尿道分泌物增多•尿道烧灼、瘙痒、疼痛等不适感•尿频、尿急、夜尿增多•下腹部不适或疼痛•性交后局部不适或疼痛检验结果医生应根据临床表现及检测报告确定诊断结果。
PCR检测PCR检测是目前最为常用的淋病检测方法,其灵敏度和特异性均较高。
一般情况下,PCR检测的结果可在24-48小时内出来。
淋球菌PCR检测结果:阳性/阴性:细菌培养淋病细菌培养需要较长时间,一般需要3-7天。
如果淋球菌分离出来,则诊断结果为淋病。
淋球菌细菌培养结果:阳性/阴性:治疗建议淋病需要使用抗生素治疗,且应避免直接性接触,以免交叉感染。
抗生素治疗淋病治疗的首选药物为头孢菌素或青霉素类抗生素,例如:•头孢孟多(Ceftriaxone)•青霉素G•百福龙(Azithromycin)其他治疗方法•休息•饮食清淡•多喝水•禁止饮酒、性生活预后如果得到及时、恰当的治疗,淋病的预后通常很好。
但如果不治疗或治疗不及时不充分,则可能导致严重后果。
结论淋病是一种常见的性传播疾病,医务人员应该密切关注淋病的诊断和治疗。
本文提供了淋病的报告单模板,帮助医务人员更清晰地了解患者的症状、检测结果和治疗建议。
淋球菌初步鉴定依据
淋球菌的初步鉴定依据主要包括以下几个方面:
1. 细菌形态特征:淋球菌为革兰氏阴性菌,具有细长的杆状或曲杆状形态。
2. 细菌培养特征:淋球菌能够在专门的培养基上生长,如新叶状体液培养基。
淋球菌生长速度较慢,通常需要3-5天形成菌落。
3. 线粒体试验:淋球菌通常能够氧化葡萄糖产生酸,但不能氧化岛果糖。
4. 鉴定酶:淋球菌被一些特定酶产物发酵或产生的酶反应所特征化,如麦立克林试验(正反应为麦立克林试剂变红)和尿素酶试验(能产生氨气泡)。
5. 免疫学鉴定:传统上,淋球菌可通过酶标记免疫吸附试验(ELISA)或荧光抗体试验(IFA)等方法检测其特异性抗原。
这些初步鉴定依据可以帮助确定是否为淋球菌,但最终的确诊还需要结合其他鉴定方法,如分子生物学技术进行进一步的确认。
淋球菌快速检测方法淋球菌是一种常见性传播疾病的致病菌,该疾病会引起尿道炎、宫颈炎、盆腔炎等一系列症状,如果不及时治疗,将会带来严重后果。
现代实验室技术的发展,为淋球菌的快速检测提供了可能。
本篇文章将介绍几种常见的淋球菌快速检测方法。
一、核酸扩增技术核酸扩增技术是一种基于淋球菌DNA序列的敏感快速检测方法。
该技术可以通过扩增富含在淋球菌细胞表面的主要外膜蛋白(porB和ompA)基因,将淋球菌DNA检测出来。
核酸扩增技术的优势是敏感度高,可以检测出数量较少的细菌,同时具有较高的特异性,可以排除其他细菌的干扰。
核酸扩增技术还可以分为PCR和LAMP两种方法。
PCR:该方法通过利用DNA聚合酶对模板DNA的扩增,使得淋球菌DNA得以繁殖,最终产生充足的DNA量从而实现快速检测。
LAMP:该方法使用一组特异性高的介导引,引导引物扩增淋球菌DNA;同时,引物对复制DNA进行逐步退火,不断产生大量Tth酶,加速DNA复制。
该方法的优点包括快速、高灵敏度和高特异性。
二、抗原检测技术抗原检测技术是一种基于淋球菌周围结构中的抗原与抗体作用原理的检测方法。
该技术的原理是将尿道、宫颈或其他部位的标本与包含特异性抗体的检测物质结合,如果存在淋球菌抗原,那么该物质中的特异性抗体将与之结合,从而被检测出来。
此外,抗原检测技术还可以分为两种方法。
磁珠免疫分析法(MIA):该方法主要分别利用MIA系统与放射免疫分析法,通过联合检测尿液中淋球菌抗原,提高淋球菌检测的敏感度和特异度。
免疫色谱检测法(ICA):该法通常使用比色杆或凝胶将尿液标本转化为表现为颜色变化的带,从而检测淋球菌抗原。
三、细菌培养法细菌培养法是一种常用的淋球菌诊断方法,该方法先将标本放置在适宜的培养基上进行培养,然后镜检检查培养出来的细菌形态学,并通过转化菌株后行凝集抗体判定菌群是否为淋球菌。
该方法具有较高的特异性,可以对淋球菌进行精细的检测。
虽然细菌培养法的特异性和敏感性不高,但它仍然是一种目前最为常见的淋球菌检测体系,对于感染患者的确诊和治疗提供类似于淋球菌感染诊断的金标准。
淋球菌耐药检测方法金标准全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:淋球菌是一种性传播疾病,感染者可能会出现尿道分泌物增多,尿道或阴道痒感、尿痛、排尿困难等症状。
越来越多的淋球菌感染病例被报告,这也引起了人们对淋球菌耐药性的关注。
淋球菌的耐药性意味着治疗可能面临更大的挑战,因此及早做好耐药性检测至关重要。
淋球菌耐药性检测方法的金标准是一个被广泛认可的标准方法,可以帮助医生准确判断感染者的淋球菌对抗生素的耐药情况,从而选择最有效的治疗方案。
以下将介绍一种被认为是淋球菌耐药检测方法金标准的方法。
首先,淋球菌耐药性检测通常会选择使用培养法。
培养法是一种通过将分离的微生物菌株在适宜的培养基上培养并观察其生长情况来判断其对抗生素的敏感性的方法。
对于淋球菌来说,培养法是最常用的检测方法之一,因为淋球菌在人体内的繁殖速度相对较慢,需要在适宜的培养条件下进行培养才能准确检测其对抗生素的耐药情况。
其次,淋球菌耐药性检测方法金标准还包括了分子生物学方法。
分子生物学方法是一种通过检测微生物的基因组来判断其对抗生素的耐药情况的方法。
通过PCR技术可以快速、准确地检测淋球菌的基因组,并判断其对抗生素的耐药性。
分子生物学方法在淋球菌耐药性检测中起到了至关重要的作用,可以帮助医生更快速、更准确地做出治疗决策。
最后,淋球菌耐药性检测方法金标准还需要考虑到药物敏感性测试。
药物敏感性测试是通过将淋球菌菌株与不同抗生素的药物敏感性进行实验观察,以确定淋球菌对抗生素的耐药情况。
不同的淋球菌品系可能对同一种抗生素表现出不同的耐药性,因此药物敏感性测试是淋球菌耐药性检测方法金标准中必不可少的一环。
总的来说,淋球菌耐药性检测方法金标准是一种综合性的检测方法,结合了培养法、分子生物学方法和药物敏感性测试等多种技术手段,可以帮助医生准确判断淋球菌对抗生素的耐药情况,选择最适合的治疗方案。
只有通过这样的金标准检测方法,才能更好地应对淋球菌耐药性的挑战,保障患者的健康。
淋球菌检验操作方法淋球菌检验是针对人体泌尿生殖道中淋球菌感染的常用实验室诊断方法,通过检测尿液、分泌物或分离物中的淋球菌,以确定是否存在淋球菌感染。
以下是淋球菌检验的操作方法:1. 收集样本:根据病情,可以选择采集尿液、分泌物或分离物作为样本。
对于尿液样本,应该遵循无菌技术进行采集,尽量避免污染。
对于分泌物或分离物样本,可以使用无菌尿旁采样棉签或取样棉签进行采集。
2. 样本处理:尿液样本可以直接进行培养,而分泌物或分离物样本首先需要进行离心,去除杂质,然后将上清液用于后续实验。
3. 培养:将样本涂布在适宜的培养基上,如Thayer-Martin培养基等。
这种培养基含有丰富的营养物质,可以促使淋球菌的生长。
将涂布后的培养基在CO2孵化箱中孵育,一般在35-37度下孵育24-48小时。
4. 淋球菌的形态观察:在培养箱中观察培养基上是否有典型的淋球菌生长。
淋球菌的形态为革兰氏阴性的小杆状菌,形成典型的透明、粘稠的圆锥形粘液菌落。
在显微镜下观察淋球菌的形态特征,如形态、大小、可运动性等。
5. 淋球菌的生化鉴定:对于淋球菌菌落的鉴定,可以进行一系列的生化试验。
首先是氧化酶试验,因为淋球菌为氧化酶阳性;其次是N脱酰胺酶试验,因为淋球菌能够产生N脱酰胺酶;然后是马刺试验,淋球菌样本在马刺培养基上会形成细长的菌落;最后可以进行特异性血清试验,检测淋球菌菌株的血清学特征。
6. 淋球菌的药敏试验:淋球菌的抗菌药物敏感性试验是非常重要的步骤。
使用淋球菌培养物制备药敏试验所需的菌悬液,将之滴在已经浸透了抗生素的纸片或者培养基上,然后观察抗生素的抑菌圈直径,从而确定哪些抗生素对淋球菌菌株具有抑制作用。
以上是淋球菌检验的一般操作方法。
需要注意的是,操作时需要严格遵守无菌技术,以防止交叉污染。
此外,结果的解读应该综合临床情况,结合其他检查结果进行判断。
淋球菌感染需要及时治疗,以避免引起严重的并发症。
一、淋球菌培养基组分含量和制备方法(1)取基础琼脂浸泡于水中,加热煮沸溶解,121℃高压灭菌20分钟。
(2)加入羊血和葡萄糖,于90℃水浴中加热,不时摇动使成咖啡色。
(3)冷却至60℃,加入万古霉素和多粘霉素B溶液,摇匀倒入平板,凝固备用。
二、淋球菌的分离培养(医学教育网)1、原理如果标本中有淋球菌,则在合适的培养基上经培养后可长成菌落。
各种细菌在培养基上生长成的菌落形态各不相同。
根据菌落的大小、表面高起或扁平、光泽、色素和边缘的情况等,作为细菌鉴定的标准。
2、方法(1)取材培养要获得成功,取材的部位和方法要准确。
由男性病人前尿道取材时,应该用细小棉拭子或藻酸钙拭子或白金耳伸入尿道口2cm~4cm,取出的分泌物应略带粘膜。
从女病人的宫颈取材时,应先用温水湿润扩阴器(不要用液体石蜡等润滑油)。
应将棉拭插入宫颈口1.5cm处,稍转动并停留10s~30s,让棉拭充分吸附分泌物。
从直肠取材时,应将棉拭插入肛门2.5cm以上,如果棉拭碰到粪便,应换一个棉拭重取。
检查淋菌性咽炎时,应从扁桃体及扁桃体窝取材。
为了提高阳性率,可同时取二份标本进行培养。
附:收集细菌培养标本首先应注意无菌的原则,其次还应注意:A、细菌培养标本应在抗生素治疗前收集,并及时送检。
B、血培养:成人抽血5~10ml,儿童3~5ml,注入规定培养瓶。
C、尿标本收集前应清洁外阴部,留中段尿2~3ml于无菌小瓶中。
D、胸腹水、脓、分泌物应收集于无菌小瓶或无菌试管内。
E、厌氧培养的标本应避免与氧接触,并及时送检。
(2)培养基由于淋球菌的营养要求较复杂,所用的培养基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的各种因子。
目前国内常用的是血液琼脂或巧克力琼脂。
为抑制杂菌,在培养基中可加入少量抗菌物质如多粘菌素B(25g/ml)和万古霉素(3.3g/ml)等。
所用血液如羊血、兔血和人血均可,浓度为8%~10%。
但避免血液中加入抗凝剂等药物。
培养基的pH值以7.4为好。
第1篇实验目的:本实验旨在通过淋球菌气泡实验(Bead Test)检测淋球菌对头孢曲松钠(Ceftriaxone)的敏感性,为临床用药提供参考。
实验材料:1. 淋球菌培养物2. 头孢曲松钠(Ceftriaxone)粉末3. 无菌生理盐水4. 细菌培养箱5. 细菌接种环6. 96孔板7. 移液器8. 移液枪9. 显微镜实验方法:1. 将淋球菌培养物在生理盐水中制成悬液,调整浓度为1×10^6 CFU/ml。
2. 在96孔板中,每个孔加入100μl淋球菌悬液。
3. 将头孢曲松钠粉末溶解于生理盐水中,配制成浓度为0.5mg/ml的溶液。
4. 在每个孔中加入不同浓度的头孢曲松钠溶液,分别为:0.0625mg/ml、0.125mg/ml、0.25mg/ml、0.5mg/ml。
5. 每个浓度设置3个复孔,同时设置一个无抗生素的对照孔。
6. 将96孔板放入细菌培养箱中,37℃培养24小时。
7. 观察并记录每个孔中细菌生长情况。
实验结果:1. 在无抗生素的对照孔中,细菌生长良好,形成明显的菌落。
2. 在0.0625mg/ml和0.125mg/ml的头孢曲松钠浓度孔中,细菌生长受到抑制,菌落数量明显减少。
3. 在0.25mg/ml和0.5mg/ml的头孢曲松钠浓度孔中,细菌生长完全被抑制,无菌落形成。
实验分析:根据实验结果,淋球菌对头孢曲松钠具有敏感性,且随着头孢曲松钠浓度的增加,抑制作用逐渐增强。
在0.25mg/ml和0.5mg/ml的头孢曲松钠浓度下,淋球菌的生长被完全抑制,说明该浓度范围内的头孢曲松钠对淋球菌具有显著的杀菌作用。
结论:本实验结果表明,淋球菌对头孢曲松钠具有敏感性,临床治疗淋病时可考虑使用头孢曲松钠。
同时,本实验为临床用药提供了参考依据,有助于提高治疗效果。
注意事项:1. 实验过程中,严格遵守无菌操作规程,防止污染。
2. 控制实验条件,如温度、湿度等,以保证实验结果的准确性。
3. 实验过程中,注意观察并记录实验现象,以便分析实验结果。
医疗器械产品技术要求编号:
TM (Thayer—Martin)淋球菌培养基
1.产品型号/规格及划分说明
1.1产品型号/规格
9cm或7cm。
1.2结构组成
培养基含有特殊蛋白胨、淀粉、氯化钠、酵母粉、羊血、琼脂、万
古霉素、多粘菌素E、制霉菌素、甲氧苄氨嘧啶、纯化水。
1.3 适用范围
淋病奈瑟菌专用培养基,主要用于生殖道标本中淋病奈瑟菌的筛选。
12.性能指标
2外观
2.1平皿无破碎和裂纹;琼脂表面光滑、湿润、均匀分布,不得有裂痕、无琼脂凝块、无明显气泡。
2.2琼脂层厚度≥3mm。
2.3琼脂层颜色呈均一巧克力色。
3微生物限度要求
将琼脂平板培养基在特定条件下培养,应无肉眼可见的菌落生长,可见污染菌生长的平板数应不大于 5%。
4细菌生长条件及特性
淋病奈瑟菌:生长良好。
脑膜炎奈瑟菌:生长良好。
肺炎链球菌:生长受抑制。
4 pH 值
在 20℃~25℃时,pH 值在 7.4±0.2。
淋球菌琼脂平板的用途淋球菌琼脂平板是一种常用的微生物培养基,它主要用于淋病菌的检测和分离。
淋病是一种性传播疾病,由淋球菌引起,严重危害人类健康。
淋球菌琼脂平板的使用可以有效地检测淋球菌的存在,从而及时采取措施进行治疗和预防。
一、淋球菌琼脂平板的制备淋球菌琼脂平板的制备需要琼脂、肉汤、酵母提取物、葡萄糖和淋球菌抗原等原料。
首先将琼脂加入肉汤中煮沸,然后加入酵母提取物、葡萄糖和淋球菌抗原,搅拌均匀后倒入培养皿中,待凝固后即可使用。
二、1. 淋球菌检测淋球菌琼脂平板主要用于淋球菌的检测和分离。
将样本涂抹在琼脂平板上,放入恒温箱中进行培养,淋球菌会在琼脂平板上生长形成典型的菌落,从而进行检测和分离。
2. 淋球菌药敏试验淋球菌琼脂平板还可以用于淋球菌的药敏试验。
将不同的抗生素涂抹在琼脂平板上,然后将淋球菌接种在上面,观察不同抗生素对淋球菌的抑制作用,从而确定最佳的治疗方案。
3. 淋球菌疫苗研究淋球菌琼脂平板还可以用于淋球菌疫苗的研究。
将不同的淋球菌菌株接种在琼脂平板上,观察不同菌株的生长情况和抗原性质,从而为淋球菌疫苗的研制提供参考。
三、淋球菌琼脂平板的注意事项1. 淋球菌琼脂平板制备时需要注意无菌操作,避免污染。
2. 淋球菌琼脂平板使用时需要注意消毒,避免交叉感染。
3. 淋球菌琼脂平板使用后需要及时处理,避免对环境造成污染。
总之,淋球菌琼脂平板是一种重要的微生物培养基,它在淋病的检测、药敏试验和疫苗研究等方面发挥着重要作用。
在使用过程中需要注意无菌操作和消毒,以保证检测结果的准确性和可靠性。
一、淋球菌培养基组分含量和制备方法
(1)取基础琼脂浸泡于水中,加热煮沸溶解,121℃高压灭菌20分钟。
(2)加入羊血和葡萄糖,于90℃水浴中加热,不时摇动使成咖啡色。
(3)冷却至60℃,加入万古霉素和多粘霉素B溶液,摇匀倒入平板,凝固备用。
二、淋球菌的分离培养(医学教育网)
1、原理
如果标本中有淋球菌,则在合适的培养基上经培养后可长成菌落。
各种细菌在培养基上生长成的菌落形态各不相同。
根据菌落的大小、表面高起或扁平、光泽、色素和边缘的情况等,作为细菌鉴定的标准。
2、方法
(1)取材
培养要获得成功,取材的部位和方法要准确。
由男性病人前尿道取材时,应该用细小棉拭子或藻酸钙拭子或白金耳伸入尿道口2cm~4cm,取出的分泌物应略带粘膜。
从女病人的宫颈取材时,应先用温水湿润扩阴器(不要用液体石蜡等润滑油)。
应将棉拭插入宫颈口1.5cm处,稍转动并停留10s~30s,让棉拭充分吸附分泌物。
从直肠取材时,应将棉拭插入肛门2.5cm以上,如果棉拭碰到粪便,应换一个棉拭重取。
检查淋菌性咽炎时,应从扁桃体及扁桃体窝取材。
为了提高阳性率,可同时取二份标本进行培养。
附:收集细菌培养标本首先应注意无菌的原则,其次还应注意:
A、细菌培养标本应在抗生素治疗前收集,并及时送检。
B、血培养:成人抽血5~10ml,儿童3~5ml,注入规定培养瓶。
C、尿标本收集前应清洁外阴部,留中段尿2~3ml于无菌小瓶中。
D、胸腹水、脓、分泌物应收集于无菌小瓶或无菌试管内。
E、厌氧培养的标本应避免与氧接触,并及时送检。
(2)培养基
由于淋球菌的营养要求较复杂,所用的培养基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的各种因子。
目前国内常用的是血液琼脂或巧克力琼脂。
为抑制杂菌,在培养基中可加入少量抗菌物质如多粘菌素B(25g/ml)和万古霉素(3.3g/ml)等。
所用血液如羊血、兔血和人血均可,浓度为8%~10%。
但避免血液中加入抗凝剂等药物。
培养基的pH值以7.4为好。
目前国外常用的培养基有Thayer-Martin(T-M)培养基、NewYork City(NYC)培养基和Martin-Lewis(ML)培养基等。
T-M培养基是在GC基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3g/ml、粘菌素7.5g/ml和制霉菌素12.5g/ml)和淋球菌增菌剂,使绝大多数杂菌被抑制而淋球菌
菌落长得较大,在乎皿中几乎呈纯培养,从而大大提高了由子宫颈、尿道,尤其是咽和直肠部位分离出淋菌的阳性率。
(3)培养条件
淋球菌对外环境变化颇为敏感,对寒冷和干燥抵抗力很弱。
因此,为了保证培养有足够的成功率,取材后应立即接种,标本离体时间越短越好。
取材处离实验室距离较远时,应将标本接种于Smart或Amies运送培养基或1%葡萄糖肉浸液中,并注意在运送过程中保温。
接种的血平皿应先放在37℃温箱中预温。
培养的最适温度为35℃~36℃,超过38.5℃或低于30℃便生长不良。
因此,孵育的温度要恒定。
淋球菌为需氧菌,但最初从人体分离时,为促进生长,需用5%二氧化碳环境培养。
为保持一定的湿度,可在培养缸中放些浸水棉球。
3、结果
淋球菌在血平皿上经24h~48h的培养后,可形成圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色菌落。
边缘呈花瓣状,直径为0.5mm ~1.0mm。
用白金耳触之有粘性。
如继续培养,菌落面积增大,表面变得粗糙,边缘出现皱缩。
若从菌落上取材作涂片,可见到菌的大小及染色的深度有差异,排列也不一致,约有25%的菌为典型的双球菌,其他75%为单球菌、四联形或八叠形。
淋球菌在液体培养基中生长于液体表面,或稍有轻度混浊和颗粒沉淀。
4、注意事项
(1)培养要获得成功,取材是关键之一。
取材的深度一定要够,因为淋球菌好发于柱状上皮细胞而不是复层鳞状上皮细胞。
男性尿道前端包括舟状窝都为复层鳞状上皮覆盖,所以要深人到尿道内2cm~4cm处,并蘸取少量粘膜,阳性率才高。
女性病人取材时,要求将棉拭插入宫颈管,转动并停留10s~30s也是这个道理。
有些人只在阴道口取少量分泌物作分离培养,阳性率当然会降低,因为有生活力的菌从宫颈随分泌物由阴道流出需一定时间,阴道内pH值低,又因各种杂菌的作用,到阴道口时淋菌的生活力较低,再加上培养过程中各种因素的影响,培养成功的机会就会减少。
(2)对症状不典型的男病人取材,最好是在晨起排尿前或排尿后2~3h之后。
另外,采样者应熟练掌握前列腺按摩术,必要时作前列腺按摩取材。
(3)对女性淋病的检查主张用淋球菌培养。
国内目前使用血液琼脂加入多粘菌素作抑菌剂效果尚可。
但蛋白胨最好用进口的(Oxoid公司产品或日本产或Polypepton等),并用肉浸液加酵母浸膏等为好。
(4)国内目前使用的血液琼脂或巧克力琼脂中加人多粘菌素和万古霉素以分别抑制革兰阴性和革兰阳性杂菌。
但由于部分淋球菌(某些地区可高达5%)对万古霉素也敏感,因此,最好不用万古霉素。
(5)淋球菌在血平板上培养24h,虽能见到菌落,但个儿很小,难以辨认其特点。
24h~36h,菌落迅速长大。
所以观看菌落特征最好在36h左右。
超过36h,菌落特征也会有较大的改变。
5、临床意义
淋球菌培养用作诊断和某些特殊目的。
此培养法对男性及女性标本都是适用的,是世界卫生组织推荐的筛查淋病病人的唯一方法,也是诊断淋病的金标准方法。