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我院男性患者淋球菌感染及耐药性分析目的：探讨本院男性患者淋球菌感染情况及耐药性分析。
方法：选取2013年1月-2014年12本院收治的淋球菌感染患者，共计198例。
所有患者均为成年男性，对上述患者采用无菌方式进行标本采集，同时进行病菌培养，观察检验情况。
医护人员对淋球菌感染患者进行问卷调查，内容包括学历、年龄、职业等，分析相关因素。
结果：淋球菌对青霉素等耐药性在90%以上，说明淋球菌已对青霉素产生高度耐药性。
对头孢曲松耐药性较低，在临床用药过程中可将其作为最后药物使用选择以指导用药。
娱乐业为感染高发行业、主要感染年龄段为25～35岁，而对学历调查发现，本组参与者未有显著差异，可能与人群特异性以及选择对象有关。
结论：临床针对淋球菌感染患者进行药物治疗时，应根据患者病原菌培养情况选择合适药物，并且尽可能使用窄谱抗生素，避免耐药性进一步增强。
随着社会的不断发展及人们生活方式的不断变化，临床各类疾病的发生率显著增加，泌尿系统感染发生情况尤为严重，其中以淋球菌感染情况最为受到关注[1-2]。
发生该类细菌感染后可引发包括尿道炎、膀胱感染等，严重影响患者的正常生活和工作[3]。
近年来由于广谱抗生素类药物的大量使用，间接形成了选择压力，导致环境或人体中多数致病菌均产生了不同程度的耐药性，给临床治疗和诊断泌尿系统感染带来了巨大的困难[4]。
在上述背景条件下，此次研究以本院收治的相关患者为研究对象，探讨淋球菌感染现状并且对其菌种耐药性进行分析，为相关病症的治疗开展提供借鉴和参考，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取2013年1月-2014年12月本院收治的淋球菌感染患者，共计198例。
所有患者均为成年男性，年龄21～61岁，平均（39.73±9.18）岁；病程3～9个月，平均（4.62±1.77）个月；对上述患者采用无菌方式进行标本采集，同时进行病菌培养，观察检验情况。
1.2 纳入及排除标准（1）本次研究选取患者均符合临床对淋球菌感染的诊断标准[2]；（2）排除患有心脏、肝、肺等重要脏器严重疾病患者；（3）排除患有精神类疾病病例，所有选取病例均意识清楚，有自主能力；（4）所有患者及家属均签署知情同意书，表示对研究内容充分知情并自愿参与，同意坚持并完成治疗过程[5]。
淋球菌和衣原体对抗菌药物的耐药现况摘要淋球菌和沙眼衣原体的耐药在临床多见。
淋球菌的耐药不仅可以通过染色体和质粒介导，还可以通过主动外排系统中的基因突变引起多重可传递耐药，且耐药基因也可通过转化、接合等方式在淋球菌间传递。
大观霉素和头孢曲松是我国治疗淋病的首选用药，不再推荐环丙沙星等氟喹诺酮类药物治疗淋病。
沙眼衣原体为细胞内寄生菌，相对不易从其它病原体获得耐药基因，对抗生素耐药的机理与特性至今不明，但临床报道耐药多见。
我国对沙眼衣原体感染的推荐治疗药物为阿奇霉素和多西环素，替代治疗药物包括红霉素和氧氟沙星等。
关键词淋球菌沙眼衣原体耐药Drug resistance on Neisseria gonorrhoeae and Chlamydia trachomatisGong Wei-ming，Zhou Ping-yu*（STD Institute，Shanghai Skin Disease Hospital，Shanghai，200050）Abstract Drug resistance on Neisseria gonorrhoeae and Chlamydia trachomatis is common clinically. The former can be encoded not only by chromosome and plasmid，but also by mutant gene in active efflux system causing multiple transferable resistances. Resistance genes can transfer among Neisseria gonorrhoeae by transformation，conjugation or other mechanisms. Spectinomycin and ceftriaxone are the first choice for the treatment of gonorrhoeae in China. Chlamydia trachomatis is an intracellular parasitic bacterium and is relatively not easier to obtain resistance genes from other pathogens. The mechanism and characteristics of drug resistance of Chlamydia trachomatis are still unknown，though clinical reports on drug resistance are not rare. Azithromycin and doxycycline are recommended for treatment of non-gonococcal urethritis，cervicitis. The alternative treatment regimen includes erythromycin and ofloxacin.Key words Neisseria gonorrhoeae；Chlamydia trachomatis；drug resistance淋球菌（Neisseria gonorrhoeae）、沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis）可分别引起性传播疾病中的淋病和非淋菌性尿道炎、宫颈炎。
南昌地区淋球菌对抗生素的耐药性及质粒谱分析谢大泽;湛学军;陶雪花;王军;舒向荣;杨淑华;徐燕萍;谭力伟【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2010(7)23【摘要】目的了解南昌地区淋病患者感染的淋球菌对抗生素的耐药状况,探讨质粒在介导淋球菌耐药中的作用.方法采用纸片法分析69株淋球菌对头孢噻肟,头孢曲松、头孢他啶、青霉素、壮观霉素、环丙沙星的敏感性;头孢硝基噻吩显色法测定β-内酰胺酶;碱裂解法提取淋球菌菌株质粒,琼脂糖凝胶电泳法分析质粒谱型.结果对青霉素、环丙沙星、壮观霉素耐药的菌株分别为39株(39/69.56.52%)、67株(67/69,97.10%)、1株(1/69,1.45%),头孢噻肟,头孢曲松,头孢他啶未发现耐药株.β-内酰胺酶阳性菌株为35株(35/69,50.72%).检出质粒菌株37株(37/69,53.62%),质粒谱型共5型,以39.5 Kb和39.5 Kb+42.5 Kb型为主.结论青霉素、环丙沙星的耐药率较高,在本地区已不适宜作为治疗淋病的药物,头孢噻肟,头孢曲松,头孢他啶的敏感性较高,可作为本地区治疗淋病的首选药物,壮观霉素已出现耐药株应引起重视.质粒的介导在淋球菌耐药性的形成中起着重要的作用.【总页数】3页(P2605-2606,2608)【作者】谢大泽;湛学军;陶雪花;王军;舒向荣;杨淑华;徐燕萍;谭力伟【作者单位】江西省医学科学研究所检测中心,南昌,330006;江西省医学科学研究所检测中心,南昌,330006;江西省南昌市第六人民医院,南昌,330003;广东省人民医院,广州,510080;江西省妇幼保健院,南昌,330003;江西省医学科学研究所检测中心,南昌,330006;江西省医学科学研究所检测中心,南昌,330006;江西省医学科学研究所检测中心,南昌,330006【正文语种】中文【中图分类】R378.16【相关文献】1.广东省江门地区淋球菌分离株抗生素耐药性及其质粒图谱结果分析 [J], 柯建良;吴志周;黄澍杰;郑和平2.广东省中山市淋球菌抗生素耐药性质粒的研究 [J], 吴昌辉;蔡昌金;陆善词;胡斌;梁连辉;陈述文3.南昌地区淋球菌对抗生素耐药性研究 [J], 黎帆;宋矿余4.南昌地区淋球菌抗生素敏感性的测定 [J], 傅爰锟5.广州地区淋球菌抗生素耐药性及质粒图谱研究 [J], 曹文苓;黎小东;费实;李平;颜景兰;宋卫忠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
淋球菌对7 种抗生素耐药性及PPNG和TRNG的流行状况探究发表时间：2016-06-07T09:27:06.207Z 来源：《医师在线》2016年2月第3期作者：周泳威[导读] 近年来，随着社会的发展淋病的发病率越来越高，淋病是由淋球菌引起的以泌尿生殖系统化脓性感染为主要表现的性传播疾病。
周泳威佛山市南海经济开发区人民医院 528200[摘要] 目的：探讨淋球菌对7 种抗生素耐药性及PPNG和TRNG的流行状况。
方法：选取我院2014年6月-2015年10月门诊疑似为淋球菌感染患者的泌尿生殖道分泌物，共从中分离得到90株淋球菌菌株，对其进行青霉素、红霉素、四环素、大观霉素、环丙沙星、头孢曲松及阿奇霉素7种抗生素耐药性监测，并检测90株淋球菌的PPNG、TRNG情况。
结果：90株淋球菌菌株对青霉素、红霉素、四环素、大观霉素、环丙沙星、头孢曲松及阿奇霉素的耐药率分别为87.8%、61.1%、65.6%、0.0%、88.9%、4.4%、4.4%，其中对于青霉素和环丙沙星的耐药性较高；90株淋球菌的PPNG检出率为38.9%（35/90），TRNG检出率为26.7%（24/90）。
结论：淋球菌对青霉素、四环素、环丙沙星的耐药率较高，PPNG、TRNG流行率高，监测淋球菌的耐药性具有重要的意义。
[关键词] 淋球菌；抗生素；耐药性；产β-内酰胺酶淋球菌；高度耐四环素淋球菌近年来，淋病的发病率逐渐上升，抗生素的使用越来越广泛，导致淋球菌对抗生素的耐药率升高[1]，淋球菌随着地区和时间的变化其耐药性有所差异，因此进行淋球菌对抗生素的耐药性监测非常重要。
为了了解淋球菌对抗生素的耐药情况以及PPNG、TRNG流行率，本研究对本院门诊疑似为淋球菌感染患者的泌尿生殖道分泌物中分离出的90株淋球菌进行研究，主要探讨淋球菌对青霉素、红霉素、四环素、大观霉素、环丙沙星、头孢曲松及阿奇霉素的耐药性及PPNG和TRNG，以期为临床用药提供参考，现报道如下。
120株淋球菌对5种抗菌药耐药情况分析牛玉峰【摘要】目的了解2009年淋球菌对5种抗菌药的耐药性及产青霉素酶淋球菌(PPNG)和高水平耐四环素淋球菌(TRNG)的流行状况.方法用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)以及用纸片碘量法检测β-内酰胺酶.结果 120株淋球菌检出PPNG 33株(27.5%)、TRNG 52株(43.3%);环丙沙星的耐药率达95.8%,青霉素耐药率达95.0%;头孢曲松、壮观霉素没有发现耐药菌株,且抗菌活性最强.结论持续监测淋球菌的耐药性十分重要.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2011(000)013【总页数】2页(P1580-1581)【关键词】淋球菌;最低抑菌浓度;产青霉素酶淋球菌;高水平耐四环素淋球菌;耐药性【作者】牛玉峰【作者单位】江苏省淮安市楚州医院检验科,223200【正文语种】中文淋病是我国目前性传播疾病中发病率最高的病种。
随着抗菌药的广泛应用，淋球菌的耐药性日趋严重。
淋球菌对抗菌药物的耐药性研究关系到对患者疗效的判断和性病防治对策的制定。
为了本院淋球菌耐药菌株的情况，现将淋球菌对5种抗菌药的耐药性测定结果报道如下。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌株来源 120株淋球菌均从本院患者的泌尿生殖道分泌物中分离得到，所有菌株经革兰染色、氧化酶试验和糖发酵试验证实后。
传代一次，洗于脱脂牛奶中，于-78℃低温冰箱冻存备用。
菌株收集时间为2009年1～12月。
1.1.2 抗菌药壮观霉素由国药集团国瑞药业有限公司提供;头孢曲松为上海罗氏制药有限公司提供;青霉素由哈药集团制药总厂提供;四环素由哈药集团制药四厂提供;环丙沙星由哈药集团制药六厂提供。
1.1.3 培养基GC(GIOLIT TI-CANTON)基础培养基为OXOID公司产品，加入10%脱纤维新鲜羊血。
1.1.4 标准菌株 A、B、C、D、E 5株WHO标准淋球菌菌株由中国医学科学院皮肤病研究所提供。
淋球菌对头孢克肟等6种抗生素敏感性及耐药质粒分型研究吴兴中;曾维英;蓝银苑;李奕歆;唐三梅;郑和平;李燕娃;黄澍杰;陈少楠;郭炽星;黄进梅;覃晓琳;薛耀华【摘要】目的:检测2011年广东省广州、佛山、江门、肇庆四市临床分离的淋球菌流行株对青霉素、四环素、环丙沙星、头孢克肟、头孢曲松和大观霉素等6种抗生素的敏感性,对质粒介导的产β-内酰胺酶淋球菌 (PPNG)和四环素高水平耐药淋球菌(TRNG)进行耐药质粒 TEM-1和tetM基因分型.方法:采用琼脂稀释法测定菌株对6种抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),判断敏感性按WHO西太区淋球菌耐药性监测统一标准,其中头孢克肟敏感性试验和判断标准按美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)判断.用纸片酸度法检测产β-内酰胺酶淋球菌(PPNG)菌株,多重PCR方法鉴定β-内酰胺酶质粒并进行 TEM-1和TRNG tetM基因分型.结果:来自四市429株淋球菌中检出青霉素耐药364株(84.8%),四环素和环丙沙星耐药株(率)分别为389株(90.7%)和418株(97.4%),未发现对大观霉素、头孢克肟和头孢曲松耐药菌株,但头孢曲松低敏率达到34.0%(146/429),头孢克肟低敏只有1株(0.2%).青霉素、四环素和环丙沙星的MIC50及MIC90均已超过耐药标准.检出PPNG株156株(36.4%),TRNG株201株(46.9%).耐药质粒TEM-1基因分型以亚洲型为主(94.9%,148/156),只有8株携带非洲型质粒;tetM基因分型均为荷兰型.结论:四市淋球菌对青霉素、四环素和环丙沙星耐药率较高,对大观霉素、头孢克肟和头孢曲松的敏感性较高,TEM-1基因质粒分型以亚洲型为主,tetM基因分型均为荷兰型.【期刊名称】《皮肤性病诊疗学杂志》【年(卷),期】2012(019)006【总页数】5页(P352-355,358)【关键词】奈瑟氏球菌,淋病;微生物敏感性试验;TEM-1【作者】吴兴中;曾维英;蓝银苑;李奕歆;唐三梅;郑和平;李燕娃;黄澍杰;陈少楠;郭炽星;黄进梅;覃晓琳;薛耀华【作者单位】广东省皮肤病医院,广东,广州,510091;广东省皮肤病医院,广东,广州,510091;广东省皮肤病医院,广东,广州,510091;广东省皮肤病医院,广东,广州,510091;广东省皮肤病医院,广东,广州,510091;广东省皮肤病医院,广东,广州,510091;佛山市皮肤病防治所,广东,佛山,528000;江门市皮肤医院,广东,江门,529002;肇庆市皮肤病医院,广东,肇庆,526020;广州市番禺区慢性病防治站,广东,广州,511400;广东省皮肤病医院,广东,广州,510091;广东省皮肤病医院,广东,广州,510091;广东省皮肤病医院,广东,广州,510091【正文语种】中文【中图分类】R759有效的抗生素治疗是治愈淋病和遏制淋病播散的重要途径，随着淋球菌的耐药性的变化和耐药质粒流行株的扩散，临床选用抗生素显得日益重要。
为了解广东省四市2011年度淋球菌流行株的耐药性和产β-内酰胺酶淋球菌(PPNG)耐药质粒TEM-1以及四环素高水平耐药淋球菌(TRNG)tetM基因分型情况，对广州、佛山、江门和肇庆四市临床分离的429株淋球菌流行株测定了6种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)以及进行了TEM-1以及tetM基因分型的研究，现将结果报告如下。
1 材料与方法1.1 菌株1.1.1 临床菌株 429株淋球菌由四市性病门诊患者的泌尿生殖道分泌物中分离得到，男性标本自尿道口内3 cm～4 cm处，女性由宫颈口内1 cm～2 cm处取材，接种于选择性培养基(TM)，所有菌株经革兰染色、氧化酶和过氧化氢酶试验及糖发酵试验确证后冻存备用。
1.1.2 质控菌株 PPNG阳性和阴性质控菌株(WHO J和WHO D株)，由中国CDC 性病艾滋病控制中心赠送。
质粒分型标准质粒由加拿大Jo-Anne R.D教授赠送。
1.2 抗生素大观霉素(普强公司)、头孢曲松(Roche公司)、青霉素(SmithKline公司)、四环素(Sigma公司)和环丙沙星(Bayer Leverkussen公司)等5种抗菌药物均为标准品，由中国CDC性病控制中心提供。
头孢克肟标准品由中国药品生物制品检定所提供。
1.3 培养基GC基础培养基(OXOID公司)加入10%新鲜羊血。
1.4 标准菌株6株淋球菌标准菌株D、G、J、L由中国疾病预防控制中心性病控制中心赠送，其中D、G、L株为产β-内酰胺酶阴性菌株，J株为产β-内酰胺酶(PPNG)菌株。
1.5 试剂及仪器Taq DNA 聚合酶，10 × Buffer、MgCl2、dNTP 等PCR试剂购自宝生生物工程(大连)有限公司。
DNA相对分子质量标准标记物购自立陶宛Fermentas公司。
PCR引物由上海Invitrogen生物工程公司合成。
PCR仪为美国PEPKIN ELMER公司产品，电泳仪为美国Bio-Rad公司产品，凝胶成像系统为法国Bio-print公司产品。
1.6 方法1.6.1 菌株对抗生素敏感性测定采用WHO西太区淋球菌耐药监测规划协作组推荐的琼脂稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)[1]。
先将各抗生素用适当的缓冲液溶解，配成溶液，再倍比稀释，各抗菌药物在培养基平皿上的最终浓度分别为:青霉素、四环素和环丙沙星均为0.03μg/mL～32 μg/mL，头孢曲松0.001 μg/mL～1μg/mL，大观霉素0.5μg/mL～128μg/mL。
试验菌株和标准菌株先在无选择性培养基(GC)上传代2次，用16～18小时的新鲜培养物制成107～108 cfu/mL的菌悬液，用多头点接种器蘸取菌液接种于各抗生素琼脂平皿，经35℃培养24小时观察结果，以能抑制淋球菌生长的最小药物浓度为该药的最小抑菌浓度(MIC)。
每批试验均由标准菌株作质控，按WHO西太平洋地区淋球菌耐药监测项目推荐的标准判断药物敏感性[1]，头孢克肟敏感性试验和判断标准按美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)判断[2]，并统计出 MIC50和 MIC90。
1.6.2 产β-内酰胺酶淋球菌(PPNG)测定采用纸片酸度法[3]。
以标准菌株J株作为阳性对照，标准菌株D株为阴性对照。
1.6.3 PCR模版DNA的提取取GC培养基上纯培养18 h淋球菌，用灭菌水配成菌悬液，浓度相当于1个麦氏单位，取该菌悬液100μL离心去掉灭菌水，加入50μL裂解液，100℃沸水浴10 min，冷却后以10 000 r/min的速度在低温离心机中离心5 min，上清液即为DNA模板，将上清液转移到一干净无菌微量离心管，－20℃保存备用。
1.6.4 多重PCR 采用Palmer多重PCR方法测定 TEM-1基因型[4]。
引物包括:BL1:5'-TACTCAATCGGTAATTGGCT-3'，BL2:5'-CACCTATAAATCTCGCAAGC-3'，BL3:5'-CCATAGTGTTGAGTATTGCGAA-3'，BL4:5'TCATTCGTGCGTTCTAGGA-3';tetM基因型引物包括通用正向引物(UF):5'-TCGGACAAGCGGAAAGC-3'，反向引物美国型(AR):5'-GCATTACACATCCCTAC-3'，反向引物荷兰型(DR):5'-TGCAACAGAGTGAGG-3'。
反应总体系25μL，包括 Taq酶(5U)0.125μL，dNTP(2.5μmol)2 μL，10×PCR缓冲液2.5 μL，引物(10 μM)各0.5μl，模板DNA 2μL。
PCR反应条件:预变性94℃，3 min;变性94℃，15 s;退火64℃，15 s;延伸72℃，1 min;30个循环。
每批试验作阴性和阳性对照。
PCR扩增产物以0.8%琼脂糖凝胶中进行电泳后，紫外分析仪观察结果，最后用BIO-PRINT凝胶成像系统观察并照相。
2 结果2.1 MIC 测定结果青霉素耐药株为364株(70%)，四环素和环丙沙星耐药株分别为389株(90.7%)和418株(97.4%)，青霉素、四环素和环丙沙星的MIC50及MIC90均已超过耐药标准。
未发现对头孢曲松和大观霉素耐药株，头孢曲松低敏率为34.0%(146/429)，头孢克肟低敏只有1株(0.2%)。
见表1。
表1 429株淋球菌对6种抗生素的敏感性注:1):1株淋球菌头孢克肟MIC=0.5μg/mL抗菌药物敏感性[株(%)]MIC(μg/mL)敏感中敏耐药 MIC50MIC90 MIC 范围青霉素 10(2.3) 55(12.8) 364(84.8)2＞32 ＜0.125～＞32四环素 40(9.3) —— 389(90.7) 4 ＞32 ＜0.125～＞32环丙沙星 2(0.5) 9(2.1)418(97.4) 8 16 ＜0.25～32头孢克肟 428(99.8) —— 1(0.2)1) 0.03 0.125 ＜0.001 ～0.5头孢曲松 283(66.0) 146(34.0) 0(0) 0.03 0.125 ＜0.001 ～0.5大观霉素 429(100) 0(0) 0(0)32 32 ＜0.5 ～642.2 PPNG及TEM-1基因质粒和TRNG及tetM基因分型检测结果检出 PPNG株 156株，阳性率为 36.4%，TRNG株201株，阳性率为46.9%。
TEM-1基因质粒分型检测出亚洲型质粒148株，占94.9%，8株携带非洲型质粒，占5.1%;tetM基因分型均为荷兰型。
3 讨论头孢菌素作为治疗淋病的一线药物，一直受到临床医师的青睐，但近年来其敏感性受到了挑战，2009年日本东京从淋球菌咽炎患者中分离出一株对头孢曲松耐药淋球菌[5]，2008年中国淋球菌耐药监测网监测的头孢曲松低敏率47.42%[6]，本次对广东省四市淋球菌耐药性监测中发现头孢曲松低敏率达到34.0%，而美国淋球菌耐药监测项目(GISP)报道的头孢曲松低敏率只有0.5%[7]，澳大利亚报道头孢曲松低敏率1.1%[8]，虽然本次监测尚未发现头孢曲松耐药株，但低敏率偏高，应引起足够重视，治疗时应注意剂量和疗效，防止头孢曲松耐药株在本省出现。
头孢克肟是第三代口服头孢菌素类抗生素，是美国CDC淋病治疗方案推荐的口服三代头孢菌素类药物，根据GISP报告，头孢克肟的敏感性在快速下降，其最低抑菌浓度(MIC)值≥0.25μg/mL的菌株分离率，由2006年的0.1%上升到2011年上半年的1.7%[7]。
在我省及国内临床医师首选头孢曲松用于治疗淋病，很少选用第三代口服的头孢克肟。
