免疫双扩、免疫电泳实验

免疫双扩散实验报告实验目的本次实验的目的是通过普尔钦斑实验，观察和分析金属在不同浓度的硫酸溶液中的腐蚀现象，研究金属的耐腐蚀性能。

实验原理普尔钦斑实验是一种常用的评价金属耐腐蚀性能的方法。

实验中，将金属试样置于不同浓度的硫酸溶液中，观察其表面是否产生普尔钦斑或者其他腐蚀现象。

普尔钦斑是由于金属表面部分区域缺乏保护性的氧化膜而发生的电化学腐蚀。

实验材料和设备- 金属试样（铁、铜、铝等）- 实验盒- 硫酸溶液（不同浓度）实验步骤1. 准备实验盒，并将其清洗干净。

2. 准备不同浓度的硫酸溶液，如5%、10%、15%等。

3. 将金属试样放置于实验盒内，并分别注入不同浓度的硫酸溶液。

4. 观察金属试样的表面，记录下是否产生普尔钦斑或其他腐蚀现象。

5. 完成观察后，将金属试样取出，用清水冲洗干净并进行干燥。

实验结果与分析实验中使用的金属试样分别为铁、铜和铝。

观察不同浓度的硫酸溶液中金属试样的表面，得出以下结果：1. 铁试样：在5%浓度的硫酸溶液中，铁试样表面未发生明显的腐蚀现象；而在10%以上的浓度下，铁试样表面出现了普尔钦斑，随着浓度的增加，普尔钦斑的数量和大小也增加。

2. 铜试样：铜试样在5%浓度的硫酸溶液中无明显腐蚀现象，但在10%以上的浓度下，铜试样表面开始出现腐蚀现象，但无明显的普尔钦斑。

3. 铝试样：铝试样在5%和10%浓度的硫酸溶液中无明显腐蚀现象，但在浓度达到15%以上时，铝试样表面出现了片状的腐蚀和普尔钦斑。

通过以上结果分析，可以得出以下结论：1. 铁的耐腐蚀性能较差，容易在高浓度的硫酸溶液中发生腐蚀。

2. 铜的耐腐蚀性能相对较好，在低浓度的硫酸溶液中不容易发生腐蚀。

3. 铝的耐腐蚀性能较为优良，只有在浓度较高的硫酸溶液中才有可能发生腐蚀和普尔钦斑。

这些结果可以为我们在实际工程应用中选择合适的材料提供参考。

实验结论通过本次普尔钦斑实验，观察了三种不同金属在不同浓度硫酸溶液中的腐蚀表现。

根据实验结果，我们可以得出以下结论：1. 铁的耐腐蚀性能较差，在高浓度硫酸溶液中容易产生普尔钦斑。

双扩试验实验报告
本质上属于固相免疫沉淀反应;
可溶性抗原和抗体分别在含有电解质的相介质中向四周扩散,若抗体抗原相对应，LI则在比例适宜处形成沉淀线若将待检抗体做系列倍比稀释，可以根据白色沉淀线逐渐消失的情况确定抗体的效价。

试剂与材料
1.已知浓度的抗原:人IgG
2.待测抗血清
3.1.5%琼脂糖:生理盐水配制
4.生理盐水
5.载玻片、移液管、打孔器、针头、移
液器、湿盒
结果判断:
出现沉淀线的最高抗体稀释度即为该抗体在对应抗原浓度下的
效价。

3讨论
本实验制备的抗鸡卵白蛋白血清的目的就是为了让学生0m能够观察到可溶性抗原与相应的抗体在琼脂平板上反应所出现的沉淀线.我们用此方法制备的抗血清效价在14时,就能Vo1 .21No.12004够出现典型的沉淀线.基本上能适用于双扩实验教学另外每只被免疫的兔子分离出的血清基本上能够适用于一-个大班百余名学牛应用.且用
鸡卵白蛋白及其抗体代替AFP及其诊断血清，减少r血液污染的危险
性因此，此实验制备的抗血清既经济又实用:如果此实验方法在免疫
途径的选择上，采用淋巴结或肌肉注射所获得的抗体效价叮能更高些。

实验二： 对流免疫电泳实验报告实验者：毛寰宇 时间：2015年3月25日 合作者：周鹏、张国栋一、实验原理对流免疫电泳是双向琼脂扩散与电泳分析的结合产物。

CIEP 是一种加速的免疫双扩散技术。

在琼脂糖凝胶平板的两个孔中分别加入抗原和抗体，抗体侧连接电源正极。

通电后，带负电荷的抗原向抗体孔方向移动，而抗体则由于电渗作用被带向抗原孔侧。

两者相遇时形成沉淀物。

可用于检测抗原，但敏感性较低。

在pH8.6的缓冲液中，大部分蛋白质抗原成分（等电点约3~5）常带较强的负电荷，在电场中向正极移动；而作为抗体的IgG ，等电点偏高(约为5~6)，在pH8.6时带负电荷较少，再加上分子量较大，移动速度慢，所以它本身向正极移动缓慢甚至不移动，这样它就会在凝胶的电渗作用下，随水流向负极，电渗引向负极移动的液流速度超过了IgG 向正极的移动，因此抗体移向负极，在抗原抗体最适比处形成沉淀线。

二、实验材料1、抗原 & 抗体2、微量可调加样器、加样头、玻片3、打孔器、针头、打孔样纸（均放平皿内）4、电泳液、电泳槽、电泳仪、标签纸5、1.2%琼脂糖(加热溶化）、5ml 刻度吸管、吸耳球三、实验步骤1、制版与打孔：取洁净玻片，将1.2%融化的琼脂3~4ml 均匀浇注于玻片上，厚度约1.5~2.0mm 。

待琼脂凝固后，放置于打孔样纸上，按样纸上图形打孔。

2、用水倍比稀释抗体：原液、1: 2、1: 4、1: 8。

3、加样：在加样孔中加入5 μl 待测抗原样品（人IgG ）和抗体（羊抗人IgG 血清）。

靠近负极的孔中加入抗原，正极端的孔中加入抗体，玻片标记抗原抗体方向。

4、电泳：将已加样的琼脂板平放于电泳槽内，以纱布为桥，电压为100v ，时间约30min 。

四、实验结果图1：实验电泳结果A.原液、1:2、1:4稀释抗体条件下均可见沉淀线；1:8稀释度不能见沉淀线。

B.抗体稀释到1:2后，可见沉淀线向抗体侧移动。

1:2和1:4条件下沉淀线位置差异较小。

实验一双向免疫扩散试验一、实验目的1、熟练掌握免疫扩散法的操作步骤2、掌握抗血清效价的测定和特异性抗体的分析技术二、实验原理在一定条件下，抗原能与相应的抗体相互作用，发生免疫沉淀反应。

免疫扩散法就是使抗原与抗体在琼脂糖凝胶中自由扩散而相遇，从而形成抗原抗体复合物，由于此复合物分子量增大并产生聚集，不再继续扩散而形成肉眼可见的带状或线状沉淀带。

抗原抗体复合物的沉淀带是一种特异性的半渗透性屏障，它可以阻止免疫学性质与其相似的抗原抗体分子通过，而允许那些性质不相似的分子继续扩散，这样由不同抗原或不同抗体所形成的沉淀带各有各的位置，从而可以分离和鉴定混合系统。

利用琼脂糖凝胶作为扩散介质是因为一定浓度的琼脂糖凝胶，其内部为多孔网状。

而且孔径很大，可以允许大分子物质（分子量自十几万到几百万以上）自由通过。

因为大多数抗原和抗体的分子量都在20 万以上，所以它们在琼脂糖凝胶中几乎可以自由扩散。

而且琼脂糖凝胶又具有良好的化学稳定性、含水量大、透明度好、来源方便、处理容易等优点，因此是免疫沉淀检测技术中最理想的扩散介质。

双向免疫扩散法测定时将加热溶化的琼脂或琼脂糖浇至玻片上，等琼脂凝固后，打多个小孔，将抗原和抗体分别加入小孔内，使抗原和抗体在琼脂板上相互扩散。

当二个扩散圈相遇，如抗原和抗体呈特异性的结合且比例适当时，将会形成抗原抗体复合物的沉淀，该沉淀可在琼脂中呈现一条不透明的白色沉淀线。

如果抗原与抗体无关，就不会出现沉淀线，因此可以通过该试验，用特异性抗体鉴定抗原，或反之用已知抗原鉴定抗体。

三、实验仪器和试剂1、仪器设备载玻片、打孔器和挑针、湿盒、恒温箱、三角瓶、移液管、微量移液器2、试剂和材料（1）生理盐水（2）1.2%琼脂胶：称取1.2 g 琼脂糖，加100mL 生理盐水，加热溶解（3）抗原及相应免疫血清：抗原为人IgG，抗体为羊抗人IgG 免疫血清四、实验步骤1、制备琼脂玻片：将已加热溶化的1.2%琼脂5mL，迅速倾入洁净干燥的载玻片上，室温自然冷却凝固。