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沙眼衣原体抗原检测标准操作程序

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沙眼衣原体抗原检测标准操作程序
一、目的：保证沙眼衣原体抗原检测的准确性
二、适用范围：
男性：用无菌拭子取尿道分泌物或尿液。

女性：用无菌拭子取子宫颈分泌物。

三、职责：所有实验室人员严格按此操作。

四、工作程序：
l.将加热器打开，并将温度调置80℃土2C。

向提取管中加入提取液至标线。

2.棉拭：将棉拭标本侵没在提取液中并进行搅动，将带有棉拭标本的提取试管放入加热器让其加热10－12分钟。

从加热器内取出提取试管。

在提取试管中转动棉拭，在试管口边缘按压棉拭以去除其上的液体，然后轻缓地将棉拭从试管中取出丢弃棉拭。

3．尿液：取10ml尿液标本至一个离心管，然后向离心管中加入10ml蒸馏水或去离子水，将标本在3000g下离心转动15分钟。

小心倒掉上清波，并用吸水纸吸去试管口边缘的残余上清液。

取下提取液瓶上的滴管，吸取0 6ml试剂并加入试管，漩涡混合至少30秒。

然后将试管放入加热器10－12分钟。

4．让标本提取液在室温下冷却至少5分钟，提取液在室温下最多保持3小时而不致影响检测结果。

5．从箔片袋中取出一个检测块，并将其水平放置。

将滴管附件盖在提取试管上，然后向检测块的标本窗滴上5滴提取液，15分钟后读取检测结果。

6．结果判定
6．1控制盲目内有一条线出现．即表示检测过程中操作正确无误。

所有未能在15分钟后在控制窗显示一条线的检测块其检测结果均属无效。

6．2在结果窗内有一条线出现，即表示检测结果为阳性。

标本内含有衣原体抗原。

如结果窗内无线条出现，则表示检测结果就衣原体而言为阴性。

结果窗和控制窗的线条可能深浅不同，但这种现象不影响检测结果。

6．3如控制窗内无线条出现，应使用新的检测块再次进行检测。

只要剩余的提取混合液制作成后未到3小时。

仍可供检测使用。

亦可按试验方法中规定的程序重新采集和处理标本。

6．4强阳性的提取液有可能未到15分钟即在结果窗内形成一条线。

这是阳性检测结果的表
示，而检测操作的正确性则由稍候在控制窗内出现的线条确认。

五、此标准操作变更程序：
如果本操作程序使用者在实际工作中发现其存在问题，则应向科室负责人提出，科室负责人刚召集所有与本程序有关的人员讨论，以决定是否需要变更本程序。

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沙眼衣原体抗原检测方法及试剂盒[发明专利]

沙眼衣原体抗原检测方法及试剂盒[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910435696.3(22)申请日 2019.05.23(71)申请人 郑州迪安图医学检验所有限公司地址 450000 河南省郑州市郑州经济技术开发区第六大街133号1号厂房(72)发明人 童贻丽　卓会丽　刘芮　刘萍　(51)Int.Cl.G01N 33/569(2006.01)G01N 33/532(2006.01)G01N 33/558(2006.01)G01N 33/58(2006.01)(54)发明名称沙眼衣原体抗原检测方法及试剂盒(57)摘要本发明提供一种沙眼衣原体抗原检测方法，将胶体金标记的沙眼衣原体抗体载于固体硝酸纤维素膜上，并在所述固体硝酸纤维素膜上包被由抗衣原体脂多糖单克隆抗体-II制成的检测线和由抗鼠、兔、羊IgG二抗形成的控制线；先将人体的分泌物与0.2 mol/L HCl溶液进行混合，然后再放入含有0.2 mol/L NaOH溶液的样品处理管中，滴于固体硝酸纤维素膜上，所述固体硝酸纤维素膜上同时显示出检测线和控制线双线时，该人体的分泌物中含有沙眼衣原体抗原；其中，所述分散剂由相同体积的0.2 mol/L NaOH溶液和0.2 mol/L HCl溶液组成。

本发明所述提供的沙眼衣原体抗原检测方法为一步法，具体高度的特异性很少出现困扰临床的假阴性或假阳性等问题，具有高度的敏感性且操作简单，耗时短。

权利要求书1页 说明书3页CN 111983224 A 2020.11.24C N 111983224A1.一种沙眼衣原体抗原检测方法，具体步骤包括：将胶体金标记的沙眼衣原体抗体载于固体硝酸纤维素膜上，并在所述固体硝酸纤维素膜上包被由抗衣原体脂多糖单克隆抗体-II制成的检测线和由抗鼠、兔、羊IgG二抗形成的控制线；先将人体的分泌物与0.2 mol/L HCl溶液进行混合，然后再放入含有0.2 mol/L NaOH 溶液的样品处理管中，滴于固体硝酸纤维素膜上，所述固体硝酸纤维素膜上同时显示出检测线和控制线双线时，该人体的分泌物中含有沙眼衣原体抗原；其中，所述分散剂由相同体积的0.2 mol/L NaOH溶液和0.2 mol/L HCl溶液组成。

沙眼衣原体(CT)核酸定量检测标准操作规程(PCR-荧光探针法)

沙眼衣原体(CT)核酸定量检测标准操作规程(PCR-荧光探针法)

沙眼衣原体（CT）核酸定量检测标准操作规程（PCR－荧光探针法）1.目的:规范沙眼衣原体（CT）核酸DNA（PCR－荧光探针法）检测操作流程，保证检测结果的准确性。

2.应用范围：沙眼衣原体（CT）荧光定量检测。

3.职责:3.1 文件编写：实验室技术员。

3.2 文件审核：实验室主管。

3.3 文件审批：实验室主任。

3.4 执行：PCR实验室所有工作人员。

4.参考文献：4.1 中山大学达安基因股份有限公司沙眼衣原体（CT）核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒（PCR-荧光探针法）说明书。

4.2 中山大学达安基因股份有限公司DA7600核酸序列检测系统用户手册。

5. 内容：5.1 检测方法：PCR-荧光探针法5.2 实验原理：用一对沙眼衣原体特异性引物和一条沙眼衣原体特异性荧光探针，配以PCR反应液、耐热DNA聚合酶（Taq酶）、核苷酸单体（dNTPs）等成分，通过PCR体外扩增法，即高温变性、低温退火、适温延伸进行DNA扩增，并对PCR全过程进行实时监测，从而检测沙眼衣原体（CT）DNA。

主要用于CT感染的辅助诊断及其疗效监测的标准。

5.3 性能参数：5.3.1 检测下限：5.0×102基因拷贝/ml。

5.3.2 线性范围：5.0×102～5.0×108基因拷贝/ml5.4 标本采集：由合作单位按照以下要求进行采集5.4.1 标本类型：泌尿生殖道分泌物等。

5.4.2 标本采集：5.4.2.1 泌尿生殖道分泌物：5.4.2.1.1 男性尿道分泌物：用细小棉拭子伸入尿道约2～4厘米，捻动拭子采集分泌物，将棉拭子置于无菌管中，密封送检（采集分泌物前2小时禁小便）。

5.4.2.1.2 女性生殖道分泌物：用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物，再用宫颈刷或无菌棉拭子插入宫颈内，停5s后旋动宫颈刷或棉拭子采集宫颈分泌物，将宫颈刷或棉拭子置于无菌管中，密封送检。

5.4.2.1.3 女性尿道分泌物：用无菌生理盐水棉球洗净尿道口，再用无菌棉拭子插入尿道约2厘米，捻动拭子采集分泌物，将棉拭子置于无菌管中，密封送检。

沙眼衣原体检测

沙眼衣原体检测

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（3）衣原体抗原检测法：简称C-C 快速法。用试剂盒 检测，按试剂盒说明书规定进行操作，方便简单、快 速，特异性高。
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（4）免疫荧光法：将标本涂于玻片凹孔或圆圈中，自 然干燥后，丙酮或无水甲醛固定5min，漂洗，再干燥， 加入30μl荧光素标记的抗沙眼衣原体单克隆抗体试剂 覆盖凹孔，玻片置湿盒中于室温或37℃下作用15min， 去掉多余试剂，用蒸馏水淋洗涂片，自然干燥，加一 滴封固液，再加盖玻片，置显微镜下检测。
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2.检测方法
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（1）直接涂片染色法：标本涂片，待自然干燥，甲醛 固定5～10s后，用当日配制的姬姆萨溶液染色1h，再 用95%乙醇淋洗涂片、干燥。
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（2）细胞培养法：将每份标本接种于3个培养瓶中， 置37℃吸附2h后，以维持液洗涤2～3次，最后加入生 长液，37℃培养3～4d，取出盖玻片，经姬姆萨染色 或直接荧光染色后镜检，查包涵体。
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（4）免疫荧光法：阳性标本在高倍镜下可见上皮细胞 内的衣原体颗粒，为单一、针尖大小、明亮的绿色荧 光。在油镜下为荧光均匀、边缘光滑的圆盘样结构， 也可见网状体等其他形态的衣原体颗粒。
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4.注意事项 （1）男性病人在采集标本前应禁尿至少1h，取材时 适度用力以确保取得足够的上皮细胞。 （2）女性病人取材的拭子不要碰到阴道壁，以免影响 结果。 （3）男性尿道的脓性分泌物不应用于培养。
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谢谢大家！
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3.结果判定
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（1）直接涂片染色法：油镜下阳性标本可在上皮细胞 质内找到1～3个或更多个呈蓝色、深蓝色或暗紫色的 包涵体。
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（2）细胞培养法：阳性标本碘染色包涵体呈棕黑色， 姬姆萨染色呈红色。
沙眼衣原体检测及质控结果分析.ppt [兼容模式]

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沙眼衣原体抗原快速检测流程2011年全国Ct检测室间质评结果及存在的问题沙眼衣原体感染常用实验室检测方法抗原快速检测试验,沙眼衣原体抗原快速检测试验原理沙眼衣原体抗原快速检测试验优点缺点一、沙眼衣原体抗原快速检测流程-1(以实习试剂为例)nnnn一、沙眼衣原体抗原快速检测流程-2 nnn结果判读阳性：阴性：检测结果示意图-1阳性阴性检测结果示意图-2提示：正确注意事项uuuu二、2011年全国沙眼衣原体抗原检测室间质评结果及存在的问题参加室间质评单位（共222家）lll考评成绩-1在参评的222个单位中：考评成绩-2•••考评成绩-3111531表1 2011年5份Ct质控样品检测结果的符合率质控样品号参评单位数符合率％不符合率(％) 11010122294.59（210/222） 5.41（12/222）11010222296.40（214/222） 3.60（8）11010322290.99（202/222）9.00（20）11010422265.32（145/222）34.68（77）11010522295.50（212/222） 4.50（10）2011年全国Ct室间质评工作中主存在要存在的的问题-1 uu2011年全国Ct室间质评工作中主存在要存在的的问题-2 uu2011年全国Ct室间质评工作中主存在要存在的的问题-3 uu2011年全国Ct室间质评工作中主存在要存在的的问题-4uu谢谢！。