银屑病药效学模型及结果评价-姚治 孙涛

壳聚糖纳米技术的加减润肌膏治疗寻常型银屑病血燥证疗效观察邱　玥1,2,卢春茜2,李冠汝3,孙丽蕴1(1.首都医科大学附属北京中医医院,北京100010;2.北京市密云区中医医院,北京101500;3.北京中医医院顺义医院,北京101300) [评价壳聚糖纳米技术的加减润肌膏治疗寻常型银屑病血燥证的临床疗效及安全性。

选取2021年1月—2022年1月在首都医科大学附属北京中医医院皮肤科门诊就诊的40例寻常型银屑病血燥证患者,按1∶1比例将患者随机分为对照组和治疗组。

2组患者均口服养血解毒汤,治疗组同时外用壳聚糖纳米颗粒包裹的加减润肌膏,对照组外用壳聚糖纳米颗粒包裹的安慰剂药膏,2组疗程均为8周,每2周随访1次,比较2组皮损面积与严重程度指数(PASI )评分、体表面积(BAS )评分、银屑病瘙痒(VAS )评分、中医症状评分、皮肤屏障-水分评分、皮肤屏障-油脂评分、皮肤病生活质量(DLQI )评分及临床疗效。

治疗组19例、对照组18例患者完成研究。

治疗8周末,治疗组PASI 评分、BAS 评分、VAS 评分、中医症状评分、皮肤屏障-水分评分、皮肤屏障-油脂评分、DLQI 评分改善情况均明显优于对照组(P 均<0.05)。

治疗组显效率为84.2%(16/19),总有效率为94.7%(18/19);对照组显效率为50.0%(9/18),总有效率为83.3%(15/18),治疗组显效率明显高于对照组(P 均<0.05),2组总有效率比较差异无统计学意义(P >0.05)。

治疗组94.7%(18/19)的患者达到PASI50,对照组66.7%(12/18)的患者达到PASI50,治疗组高于对照组(P <0.05);治疗组47.4%(9/19)的患者达到PASI75,对照组16.7%(3/18)的患者达到PASI75,治疗组高于对照组(P <0.05)。

所有受试者均未见明显不良反应。

中医药治疗银屑病随机对照试验方法学质量评价
唐蔚;周萌;雷一鸣
【期刊名称】《辽宁中医杂志》
【年(卷),期】2006(33)9
【摘要】研究国内发表的中医药和中西医结合治疗性文献,对其中属于“随机对照试验”的文献进行方法学质量评价。

结果:可以看出近年来中医药治疗银屑病取得了一定成绩,但研究质量的论文还存在一定问题。

【总页数】2页(P1066-1067)
【关键词】银屑病;中医药疗法;随机对照试验;文献挖掘;方法学质量评价
【作者】唐蔚;周萌;雷一鸣
【作者单位】广西壮族自治区医学科学情报研究所;广西中医学院附属瑞康医院【正文语种】中文
【中图分类】R275.9;R758.63
【相关文献】
1.中医药治疗DN临床随机对照试验文献方法学系统评价 [J], 陈弼沧;吴秋英;孟晓嵘;王丽英;向成斌
2.中医药治疗慢性萎缩性胃炎临床随机对照试验文献方法学评价 [J], 张竞之;陈弼沧;涂志红;常艳杰
3.中医药治疗心力衰竭临床随机对照试验文献的方法学评价 [J], 李明;谢世阳
4.中医药治疗IgA肾病临床随机对照试验文献的方法学评价 [J], 聂莉芳;徐建龙
5.中医药治疗慢性前列腺炎临床随机对照试验的方法学质量评价 [J], 滕东海;卢一平;王莉;李响;魏强;辛宇鹏;刘孝东;杨宇如
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环球中医药2023年7月第16卷第7期　Global Traditional Chinese Medicine,July 2023,Vol.16,No.71317　㊃基础研究㊃基金项目:北京市自然科学基金(7192116);北京中医药大学校级课题-李元文名师工作坊;北京市中医管理局课题-中医药继续教育导航工程-继教专委会建设及精品课程制作;北京中医药大学2020年新教师启动基金(2020⁃JYB⁃XJSJJ⁃044);北京中医药大学横向科研项目(HX202119)作者单位:100078　北京中医药大学东方医院皮肤科[于心荟(硕士研究生)㊁李元文㊁任雪雯(博士研究生)㊁邓宇童(博士研究生)㊁王莹(博士研究生)];北京中医药大学东直门医院皮肤科(冯蕙裳);江阴江天药业有限公司(王化龙㊁刘晓东)作者简介:于心荟(1998-),2021级在读硕士研究生㊂研究方向:中医皮肤性病学㊂E⁃mail:yuxinhui9898@通信作者:冯蕙裳(1992-),硕士,住院医师㊂研究方向:中医皮肤病学㊂E⁃mail:fhs1116@化斑解毒方对咪喹莫特诱导银屑病样皮炎小鼠模型抗炎机制探究于心荟　李元文　任雪雯　邓宇童　王莹　王化龙　刘晓东　冯蕙裳【摘要】　目的　观察化斑解毒方对咪喹莫特诱导银屑病样皮炎小鼠模型的抗炎作用㊂方法　采用咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮炎,以随机数字表法将60只小鼠随机分为空白组㊁模型组㊁化斑解毒方低㊁中㊁高剂量组及甲氨蝶呤组,每组10只㊂观察各组小鼠银屑病皮损严重程度指数(psoriasis area and severity index,PASI)评分,苏木素 伊红染色观察组织病理学变化,酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子⁃α(tumor necrosis factor⁃α,TNF⁃α)㊁干扰素⁃γ(interferon⁃γ,IFN⁃γ)㊁白细胞介素⁃23(interleukin⁃23,IL⁃23)㊁白细胞介素⁃1β(interleukin⁃1β,IL⁃1β)表达水平,蛋白免疫印迹法测定核转录因子⁃κB(nuclear factor⁃κB,NF⁃κB)水平㊂结果　(1)模型组与空白组PASI 评分具有统计学差异(P <0.05),各药物组PASI 评分较模型组均降低,差异有统计学意义(P <0.05);(2)模型组TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁IL⁃23表达水平较空白组显著升高(P <0.05);与模型组相比,各药物组TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β表达水平显著降低(P <0.05),甲氨蝶呤组㊁化斑解毒方中㊁高剂量组IL⁃23水平显著降低(P <0.05);化斑解毒方低剂量组IL⁃23表达水平与模型组无显著差异(P >0.05);(3)与空白组相比,模型组NF⁃кB 表达水平显著升高(P <0.05);各用药组NF⁃κB 表达水平较模型组显著降低(P <0.05);化斑解毒方各剂量组NF⁃кB 表达水平与甲氨蝶呤组相比无显著差异(P >0.05)㊂结论　化斑解毒方可以明显改善银屑病样皮损症状及病理学改变,并通过调节细胞炎性因子表达改善炎症㊂【关键词】　化斑解毒方;　银屑病;　核转录因子⁃κB;　肿瘤坏死因子⁃α;　干扰素⁃γ;　白细胞介素⁃23;　白细胞介素⁃1β【中图分类号】　R285.5　【文献标识码】　A　doi:10.3969/j.issn.1674⁃1749.2023.07.006Study on the anti⁃inflammatory mechanism of Huaban Jiedu Decoction on imiquimod induced psoriasis⁃like dermatitis in miceYU Xinhui ,LI Yuanwen ,REN Xuewen ,DENG Yutong ,WANG Ying ,WANG Hualong ,LIU Xiaodong ,FENG HuichangDongfang Hospital Beijing University of Chinese Medicine ,Beijing 100078,China Corresponding author :FENG Huichang ,E⁃mail :fhs1116@【Abstract 】　Objective To study the anti⁃inflammatory effects of different concentrations of HuabanJiedu Decoction on imiquimod induced psoriasis⁃like dermatitis in mice.Methods Psoriasis⁃likedermatitis was induced by imiquimod.Sixty mice were randomly divided into blank group,model group,low dose group,medium dose group,high dose group and methotrexate group with 10mice in each group.1318　环球中医药2023年7月第16卷第7期　Global Traditional Chinese Medicine,July2023,Vol.16,No.7 To observe the psoriasis area and severity index(PASI)and histopathological changes by HE staining.The expression levels of tumor necrosis factor⁃α(TNF⁃α),interferon⁃γ(IFN⁃γ),interleukin⁃23(IL⁃23)and interleukin⁃1β(IL⁃1β)in mice skin tissue homogenates were detected by ELISA.The expression level ofnuclear factor⁃κB(NF⁃κB)was measured by Western blotting assay.Results　(1)The PASI scores ofthe model group and the blank group were statistically different(P<0.05).Compared with the modelgroup,the PASI score of each drugged group was lower,and the difference was statistically significant(P<0.05).(2)Compared with the blank group,the expression levels of TNF⁃α,IFN⁃γ,IL⁃1β,IL⁃23inthe model group were significantly increased(P<0.05).Compared with the model group,the expressionlevels of TNF⁃α,IFN⁃γand IL⁃1βin each drug group were significantly decreased(P<0.05),and thelevel of IL⁃23in the methotrexate group and the Huaban Jiedu Decoction medium and high dose groups were significantly decreased(P<0.05).There was no significant difference in the expression level of IL⁃23between the Huaban Jiedu Decoction low dose group and the model group(P>0.05).(3)Compared withthe blank group,the expression levels of NF⁃κB in the model group was significantly increased(P<0.05).The expression level of NF⁃κB in each drugged group was significantly lower than that in the model group(P<0.05).There was no significant difference in the expression level of NF⁃кB between every HuabanJiedu Decoction group and the methotrexate group(P>0.05).Conclusion　Huaban Jiedu Decoction can significantly improve the symptoms and pathological changes of psoriasis⁃like skin lesions,and improve in⁃flammation by regulating the expression of inflammatory cytokines.【Key words】　Huaban Jiedu Decoction;　Psoriasis;　Nuclear factor⁃κB;　Tumor necrosis factor⁃α;　Interferon⁃γ;　Interleukin⁃23;　Interleukin⁃1β 银屑病是一种常见的慢性炎症性复发性皮肤疾病,临床表现主要是鳞屑性红斑或斑块,世界范围内发病率约1%~3%[1]㊂免疫异常被视为银屑病发病的重要环节,免疫细胞激活后产生多种炎症细胞因子,促进细胞增殖角化及炎症细胞浸润,导致银屑病的发生发展㊂化斑解毒方是李元文教授通过前期数据挖掘结合多年的临床经验与理论探索总结出的中药方剂[2],临床应用于寻常型银屑病血热证患者具有确切疗效,能够有效减轻患者皮肤炎症反应,但其治疗银屑病的作用机制尚不明确㊂本研究拟通过测定不同浓度的化斑解毒方对咪喹莫特诱导银屑病样皮炎小鼠肿瘤坏死因子⁃α(tumor necrosis factor⁃α,TNF⁃α)㊁干扰素⁃γ(interferon⁃γ, IFN⁃γ)㊁白细胞介素⁃23(interleukin⁃23,IL⁃23)㊁白细胞介素⁃1β(interleukin⁃1β,IL⁃1β)㊁核转录因子⁃κB (nuclear factor⁃κB,NF⁃κB)表达水平的影响,探究其治疗银屑病的抗炎作用,并为化斑解毒方的临床应用提供理论依据㊂1　材料与方法1.1　实验动物SPF级雄性BALB/c小鼠60只,8周龄,体质量约20g,购于斯贝福(北京)生物技术有限公司,动物质量合格证号:110324221101061643;实验动物生产许可证号:SCKX(京)2019⁃0010㊂小鼠于北京中医药大学动物房适应性喂养1周后开始实验㊂1.2　实验药物化斑解毒方组成:白花蛇舌草30g㊁半枝莲15g㊁威灵仙10g㊁苍术10g㊁土茯苓15g㊁生槐花10g㊁玄参20g㊁生地10g㊁香附10g㊁牛蒡子10g㊁知母10g㊁金银花15g㊁猪苓10g㊁白术10g㊁炙甘草6g㊂所用药物为颗粒剂,由江阴天江药业有限公司配制,产品批号2202306㊂甲氨蝶呤片(通化茂祥制药有限公司,产品批号:197220504,规格:2.5mg);咪喹莫特乳膏(四川明欣药业有限责任公司,产品批号40220501,规格: 250mg∶12.5mg)㊂1.3　主要实验试剂与仪器凡士林(德新康,批号:Q/371426DXK027);4%多聚甲醛(Solarbio,批号:P1110);苏木素 伊红(hematoxylin⁃eosin,HE)染色试剂盒(北京中科万邦生物科技有限公司,批号:RY⁃0002);中性树胶封片剂(北京中科万邦生物科技有限公司,批号:FP⁃0001);TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁IL⁃23酶联免疫吸附试验试剂盒(北京百奥思科生物医学技术有限公司,批号分别为:MD7125㊁MD16214㊁MD124889㊁MD53662);NF⁃κBp65抗体(Abcam,批号: AB32536);辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG环球中医药2023年7月第16卷第7期　Global Traditional Chinese Medicine,July2023,Vol.16,No.71319(Affinity,批号:T0021)㊂数码相机(Leica);JT⁃12S脱水机㊁JB⁃P7包埋机(武汉俊杰电子有限公司);电泳仪(美国Bio⁃Rad); Spectramac M3多功能酶标仪(美国MD);紫外分光光度计(美国赛默飞世尔科技公司);ST16R高速冷冻离心机(美国Thermo Sorvall);THZ⁃312台式恒温振荡器(上海精宏实验设备有限公司);化学发光成像系统(美国ChemiDoc MP)㊂1.4　实验方法1.4.1　动物分组与造模　将60只小鼠适应性喂养1周后,全部予背部去毛,面积约2cm×3cm㊂以随机数字表法将60只小鼠随机分为空白组㊁模型组㊁化斑解毒方低㊁中㊁高剂量组及甲氨蝶呤组,每组10只㊂脱毛后24小时确认小鼠脱毛处无损伤后开始造模,空白组小鼠于备皮区每日涂抹凡士林62.5mg,其余各组涂抹等质量5%咪喹莫特乳膏,连续7天㊂1.4.2　给药方法　造模后,各组均以标准饲料喂养并自由饮水,每3天更换垫料㊂造模开始第二日予以干预,每组小鼠以0.1mL/(10g㊃d)灌胃1次,空白组与模型组小鼠予以蒸馏水,化斑解毒方低㊁中㊁高剂量组分别予中药1/2倍㊁1倍及2倍量,甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤片混悬液㊂小鼠灌胃药物剂量根据体表法进行计算,根据标准成年人体质量70kg,则对应小鼠药物剂量约为成人的9.1倍,折算出化斑解毒方中剂量组小鼠每日给药剂量为24.83g/kg,甲氨蝶呤组每日给药剂量为1mg/kg㊂1.4.3　取材方法　在实验第7天进行标本制备,对小鼠予4%水合氯醛(0.1mL/10g)腹腔注射进行麻醉㊂取小鼠背部银屑病皮损集中皮肤(全层创面),面积为2cm×2cm的正方形,空白组取相同部位,所得皮肤组织以90°为范围平均分为4份,3份置于无菌无酶冻存管,置于液氮冷冻后,放于-80℃超低温冰箱保存用于做蛋白检测;1份放于4%多聚甲醛中固定,用于切片染色㊂1.5　观察指标1.5.1　各组小鼠皮损变化情况评价　于模型建立及治疗期间,每日观察各组小鼠皮损变化,并采用数码相机对同一部位拍照记录㊂观察期间无小鼠死亡情况,重复数量为1㊂根据校正后的银屑病样皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI)评分作为标准,对鳞屑㊁浸润㊁红斑的严重程度进行评分,由轻到重分为5个等级,从0到4进行赋分㊂计算三项评分之和表示皮损严重程度;取每日各组总分平均值绘制趋势线,从而反映小鼠皮损的变化情况㊂1.5.2　皮肤组织HE染色及观察　取固定于4%多聚甲醛中的皮肤组织,修剪至合适大小,二甲苯脱蜡后,用从高到低浓度酒精及蒸馏水洗脱,苏木素水溶液染色10分钟,0.7%盐酸乙醇分化30秒,置于酒精中脱水,酒精伊红染色2分钟,冲洗后先后酒精脱水㊁二甲苯透明㊁中性树胶封片,放置于显微镜下观察并摄片㊂1.5.3　皮肤组织炎症因子水平检测　采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组小鼠皮肤组织匀浆中TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁IL⁃23水平㊂将试剂盒取出平衡至室温,取出冰箱中冻存的皮肤样本研碎㊂实验操作步骤以ELISA检测试剂盒为准㊂显色后立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度值(OD值),绘制浓度标准曲线计算样品中相应检测目标的浓度㊂以蛋白免疫印迹法检测皮肤标本中NF⁃κB水平㊂取出冻存标本加入裂解液,超声破碎细胞取上清,按照BCA试剂盒说明书对蛋白定量,对蛋白样品进行电泳及转膜㊂将转移膜置于封闭液中封闭1小时,加入用封闭液稀释的一抗工作液4℃孵育过夜,洗净后加入二抗工作液室温孵育60分钟,洗膜后使用显色剂显影,利用化学发光成像系统成像并通过测定主带的光密度值计算上述蛋白在皮肤组织中的表达水平㊂1.6　统计学方法实验所得数据为计量资料,采用SPSS20.0软件对所得数据进行统计分析,数据以均数±标准差(x±s)表示㊂其中,IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁NF⁃кB各组数据符合正态分布且满足方差齐性,采用单因素方差分析(One⁃way ANOVA),组间比较应用LSD法;其余结果指标数据不符合正态分布或不满足方差齐性,故采用Kruskal⁃Wallis检验,组间比较应用Wilcoxon Mann⁃Whitney U秩和检验(Bonferronni法)㊂检验水准a=0.05,P<0.05表示差异有统计学意义㊂2　结果2.1　皮损变化及评分比较空白组小鼠未见皮损,模型组小鼠皮肤存在不同程度红斑㊁浸润㊁鳞屑等皮肤损害㊂与模型组相比,化斑解毒方各剂量组及甲氨蝶呤组小鼠皮肤红斑色泽㊁浸润程度㊁出现鳞屑皮肤面积大小㊁鳞屑厚度均较轻㊂第7天时,化斑解毒方低㊁中㊁高剂量组㊁1320　环球中医药2023年7月第16卷第7期　Global Traditional Chinese Medicine,July 2023,Vol.16,No.7甲氨蝶呤组小鼠皮损相比于模型组,红斑面积较小㊁颜色浅,皮肤浸润程度较轻,鳞屑较少㊂见图1㊂注:A 空白组;B 模型组;C 化斑解毒方低剂量组;D 化斑解毒方中剂量组;E 化斑解毒方高剂量组;F 甲氨蝶呤组㊂图1　各组银屑病样皮炎小鼠皮肤表现 皮损评分结果显示,空白组与模型组之间PASI评分存在统计学差异(P <0.05);与模型组相比,化斑解毒方各剂量组及甲氨蝶呤组PASI 评分降低,皮损症状改善(P <0.05)㊂依据PASI 评分绘制化斑解毒方各剂量组与模型组㊁甲氨蝶呤组的7日曲线可观察评分变化㊂见图2,表1㊂图2　各组银屑病样皮炎小鼠PASI 评分变化曲线2.2　皮肤组织学变化HE 染色显示:空白组角质层细胞未见明显异常,基底层细胞连续,血管周围及真皮浅层未见炎症细胞浸润;模型组表现为表皮角化过度伴角化不全,棘细胞数量增加,棘层肥厚,表皮突向下延伸呈棒槌状,真皮内可见毛细血管扩张,血管周围淋巴细胞浸润,类似银屑病的皮损病理表现;与模型组相比,化斑解毒方各剂量组和甲氨蝶呤组小鼠病理损害程度较低,表皮角化不全减轻,棘层厚度变薄,淋巴细胞浸润减少㊂见图3㊂表1　各组银屑病样皮炎小鼠PASI 评分比较(x ±s )组别鼠只PASI 评分(分)第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天模型组100.5±0.53 2.3±0.48 2.3±0.59 3.2±1.48 4.8±0.42 6.6±0.707.6±0.70化斑解毒方低剂量组100.5±0.53 1.2±0.79a 1.7±0.68a 2.6±0.97 3.4±1.17a 4.4±0.84a 4.4±0.84a 化斑解毒方中剂量组100.2±0.420.8±0.62a 1.4±0.84a 1.9±0.94a3.0±1.16a 3.5±1.08a4.3±0.95a 化斑解毒方高剂量组100.6±0.27 2.0±0.67 2.4±0.70 2.8±0.79 3.8±0.79a 4.6±0.70a 5.0±0.67a 甲氨蝶呤组100.2±0.421.7±0.48a2.3±0.682.9±0.573.7±1.06a4.4±1.08a4.2±1.03a注:与模型组相比,a P <0.05㊂注:A 空白组;B 模型组;C 化斑解毒方低剂量组;D 化斑解毒方中剂量组;E 化斑解毒方高剂量组;F 甲氨蝶呤组㊂图3　各组银屑病样皮炎小鼠皮肤病理变化比较(HE 染色,×400)环球中医药2023年7月第16卷第7期　Global Traditional Chinese Medicine,July 2023,Vol.16,No.71321　表2　各组银屑病样皮炎小鼠皮肤组织中TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁IL⁃23表达水比较(x ±s ,pg /mL)组别鼠只TNF⁃αINF⁃γIL⁃1βIL⁃23空白组1042.47±3.2218.42±1.2322.53±2.1710.52±1.04模型组10107.35±6.03a 50.64±3.61a 79.86±2.62a 22.96±2.98a 化斑解毒方低剂量组1072.69±2.57ab 31.40±2.49ab 60.55±1.66ab 20.73±3.50a 化斑解毒方中剂量组1055.18±2.55ab 27.64±1.32ab 54.25±1.52ab 13.64±1.04ab 化斑解毒方高剂量组1051.35±1.60abc 24.81±1.49ab 49.31±1.56ab 12.85±1.02abc甲氨蝶呤组1051.72±1.89ab19.26±2.32b45.63±2.54ab11.20±0.66b注:与空白组相比,a P <0.05;与模型组相比,b P <0.05;与甲氨蝶呤组相比,c P >0.05㊂2.3　皮肤组织中TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁IL⁃23表达情况与空白组相比,模型组小鼠皮肤组织中TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃23㊁IL⁃1β表达水平显著升高(P <0.05);与模型组相比,各用药组炎症因子水平均有不同程度降低,其中以甲氨蝶呤组及化斑解毒方高剂量组最为显著;另外,化斑解毒方低剂量组与模型组IL⁃23表达水平无明显差异(P >0.05)㊂见表2㊂2.4　皮肤组织中NF⁃кB 表达水平与空白组相比,模型组NF⁃кB 表达水平显著升高(P <0.05);与模型组相比,各用药组NF⁃кB 表达水平显著降低(P <0.05);化斑解毒方各剂量组NF⁃кB 表达水平较甲氨蝶呤组无显著差异(P >0.05)㊂因空白组中两个数据离散度过大,考虑误差,在统计过程中主动剔除㊂结果见表3及图4㊂表3　各组银屑病样皮炎小鼠皮肤组织中NF⁃кB 表达水平比较(x ±s )组别鼠只NF⁃кB 相对表达量空白组80.53±0.47模型组100.96±0.09a 化斑解毒方低剂量组100.73±0.12abc 化斑解毒方中剂量组100.73±0.08abc化斑解毒方高剂量组100.70±0.12abc 甲氨蝶呤组100.67±0.09ab注:与空白组相比,a P <0.05;与模型组相比,b P <0.05;与甲氨蝶呤组相比,c P >0.05㊂注:A 空白组;B 模型组;C 化斑解毒方低剂量组D 化斑解毒方中剂量组;E 化斑解毒方高剂量组;F 甲氨蝶呤组㊂图4　各组银屑病样皮炎小鼠皮肤组织中NF⁃кB 蛋白表达情况3　讨论银屑病是皮肤科常见且重大的疾病,其发病机制复杂且尚不明确[3]㊂目前普遍认为银屑病的发病主要由免疫细胞介导的炎症反应㊁多种细胞因子失衡及细胞间信号转导通路异常等导致[4]㊂现代医学对轻度银屑病治疗以外用药为主,中㊁重度常联合甲氨蝶呤㊁阿维A 酸㊁环孢素等系统治疗,近年来生物制剂也日益广泛应用于银屑病的治疗[5]㊂中药治疗相对安全且价格适中,探索更为稳定有效的中药方剂有助于解除银屑病患者的困扰,并为银屑病的临床治疗提供更多选择㊂中医学普遍认为,银屑病发生与 血”与 风”两个因素密切相关,病机多为营血亏虚或外邪入里以致血热内蕴,生风化燥,肌肤失养,发为白疕[6]㊂李元文教授认为寻常型银屑病的病因病机在血热瘀阻㊁化燥生风的基础之上,兼有湿邪为患,且多与毒邪相关[7]㊂化斑解毒方在目前常用清热凉血解毒药如生地㊁玄参㊁知母㊁金银花㊁生槐花㊁白花蛇舌草㊁半枝莲㊁土茯苓之外[8],加用健脾化湿之苍术㊁白术㊁猪苓,佐以威灵仙通络,香附理气,旨在宣通中焦之气,气行则血行,气机通畅则瘀血得通㊁风邪自灭,故红斑鳞屑得以消减㊂化斑解毒方临床治疗寻常型银屑病疗效确切,但其治疗的分子层面的机制仍不明确,故本实验通过对不同浓度化斑解毒方的抗炎方面机制进行探究㊂作为由免疫介导的炎症性皮肤病,银屑病的发生发展过程由多种免疫细胞和炎症因子共同作用㊂TNF⁃α是重要的促炎因子,可影响角质细胞的再生㊁诱导表皮中性粒细胞浸润,并可诱导免疫细胞增殖产生不同的趋化因子的细胞因子,加重炎症反应㊂IFN⁃γ能够增强抗原加工和呈递㊁诱导免疫反应,在银屑病患者血清中显著升高,并且可能与银屑病的活动有关[9]㊂IL⁃1β是在早起皮肤1322　环球中医药2023年7月第16卷第7期　Global Traditional Chinese Medicine,July2023,Vol.16,No.7损伤中占主导地位的细胞因子,其增多导致早期银屑病炎症加重[10]㊂IL⁃23是银屑病免疫反应机制的上游炎症因子之一,可诱导Thl7细胞分化产生细胞因子,进一步促进角质形成细胞增殖及炎症级联反应[11]㊂本研究中,甲氨蝶呤组㊁化斑解毒方各剂量组TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β表达水平较模型组显著降低,提示经治疗后细胞炎症因子水平下降,组织炎症缓解,同理甲氨蝶呤组与化斑解毒方中㊁高剂量组的IL⁃23表达水平降低亦提示炎症减轻㊂化斑解毒方高剂量组与甲氨蝶呤组TNF⁃α㊁IL⁃23表达水平无显著差异,提示二者在影响TNF⁃α㊁IL⁃23的作用上效果趋于相同㊂化斑解毒方低剂量组IL⁃23表达水平与模型组无显著差异,提示对此炎症因子作用效果不明显,考虑血药浓度可能未达到起效水平,或与造模用药时间较短等因素有关,具体原因需进一步探究㊂NF⁃кB被认为是免疫及炎症反应的中心枢纽,激活后可诱导下游炎症因子和趋化因子表达,促进组织炎症发生[12]㊂NF⁃кB在银屑病过程中表达水平升高[13],并可调控细胞凋亡,影响银屑病炎症进展[14]㊂本研究结果显示,与空白组相比,模型组NF⁃кB表达水平显著升高,提示在咪喹莫特诱导银屑病样皮炎小鼠中NF⁃кB过度激活;与模型组相比,各用药组NF⁃кB显著下调,提示化斑解毒方的抗炎作用可能与抑制NF⁃кB表达有关,且下调情况在化斑解毒方各组间呈现一定的量效差异㊂化斑解毒方各剂量组NF⁃кB表达水平与甲氨蝶呤组无统计学差异,提示化斑解毒方可有效抑制银屑病皮损中的NF⁃кB表达,从而改善炎症反应㊂综上所述,化斑解毒方在改善银屑病皮损症状及组织病理学表现上有确切治疗作用;同时在分子层面上,化斑解毒方能够通过降低TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁IL⁃23的表达水平㊁抑制NF⁃кB在组织细胞中的表达减轻炎症反应,起到抗炎作用,且化斑解毒方的抑制炎症作用与使用剂量呈正相关㊂但是,本研究所检测的只是银屑病炎症反应相关的部分细胞因子,没有涉及细胞通路及其他治疗机制方面的研究;且咪喹莫特诱导的小鼠模型不能完全代表人类银屑病的发展及转归过程㊂因此,探究化斑解毒方的作用机制仍需经过其他分子水平研究及临床实验进一步验证㊂参考文献[1]　郑佳媛,陈显侠,骆志成.银屑病瘙痒发病机制的研究现况[J].中国医学科学院学报,2022,44(3):529⁃534. [2]　李雪,杭小涵,邓宇童,等.银屑病中医治疗 枢机”之窥见[J].北京中医药,2021,40(8):826⁃829.[3]　中华医学会皮肤性病学分会银屑病专业委员会.中国银屑病诊疗指南(2018完整版)[J].中华皮肤科杂志,2019,52(10):667⁃710.[4]　Griffiths C E M,Armstrong A W,Gudjonsson J E,et al.Psoriasis[J].Lancet,2021,397(10281):1301⁃1315. [5]　Armstrong A W,Read C.Pathophysiology,clinical presentation,and treatment of psoriasis:A review[J].JAMA,2020,323(19):1945⁃1960.[6]　王晓瑾,张建英,张守亮,等.中医药防治银屑病的机制研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(21):243⁃253. 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银屑病及银屑病相关动物模型银屑病（Psoriasis）, 俗称“牛皮癣”，是最为常见的慢性AID，常发于青壮年人群，在世界范围内发病率约1-3%。

银屑病发病顽固且持续，最显著特征为皮肤表面红肿及白色鳞屑的覆盖，其病因尚不明确，目前认为是遗传和环境因素共同作用导致，如感染、压力、肥胖、吸烟等因素都可能对于疾病产生诱发作用。

目前临床上尚无根治银屑病的特效药物，故治疗银屑病主要以控制症状为主，如外用维生素D3类似物、糖皮质激素和维A酸，系统性使用糖皮质激素、甲氨蝶呤，以及免疫抑制剂如环孢素A、他克莫司等。

近年来随生物制药的发展，多种抗体类药物也对于银屑病具有较好疗效。

科学研究中银屑病的实验动物模型主要分为自发形成、基因工程改造、病灶原位移植和直接诱发四类，受限于模型建立难度和成本，直接诱发类模型使用最为广泛，以下介绍两种基于小鼠的银屑病直接诱发模型。

（一）咪喹莫特诱导小鼠银屑病皮损模型咪喹莫特（Imiquimod，IMQ）是T oll样受体7/8的抑制剂，临床上用来治疗病毒感染。

使用IMQ乳膏在小鼠背部连续涂抹5~7天，会出现皮肤增厚、红斑、鳞屑等类银屑病样症状。

该模型稳定、易建立、操作简单且应用广泛。

a. PASI评分根据PASI评分标准对小鼠背部皮肤炎症情况评分（包括银屑，红斑，肥厚），记录累积评分、体重与皮肤厚度变化。

对照组空白乳膏处理未表现炎症特征，模型组IMQ处理之后，逐渐表现出皮肤炎症特征及厚度增加，第5天PASI评分达到最高值，体重在IMQ处理的第3天下降到最低点，而后逐渐恢复，阳性药抗体可降低PASI评分与皮肤厚度的增加。

图1: 模型条件下小鼠背部皮肤PASI评分持续升高，体重下降，皮肤厚度增加；IL17A抗体可显著逆转皮肤病变b. 形态学检查IMQ连续处理5天后对于小鼠背部皮肤外观形态进行观察，并利用H&E染色分析组织病理学变化。

图片中可见，小鼠皮肤出现红斑，鳞屑与厚度增加；H&E 染色结果显示IMQ处理促进了炎性细胞的浸润，表皮细胞的增生；免疫组化结果显示银屑病相关PD marker IL-6在皮肤中表达水平增加。

银屑病小鼠药效评价方法
银屑病小鼠药效评价方法是通过使用小鼠模型来评估治疗银屑病的药物的疗效。

下面是常见的一些评价方法：
1. PAS染色法：使用Periodic acid-Schiff（PAS）染色方法，观察药物对银屑病小鼠皮肤组织中角质层增厚程度的影响。

该方法可通过显微镜观察到角质层的厚度变化，并评估药物的抗角质过度生成作用。

2. 炎症指标评估：通过检测银屑病小鼠皮肤组织中炎症指标的变化来评估药物的抗炎作用。

常用的指标包括炎性细胞浸润程度、炎性因子（如肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-17等）水平的检测。

3. 组织病理学评估：通过对银屑病小鼠皮肤组织进行病理学检查，观察药物对银屑病病理改变的影响。

常用的评估指标包括表皮增厚程度、表皮下炎细胞浸润情况等。

4. 临床评分法：根据银屑病小鼠的皮肤病变情况，使用临床评分系统对药物的疗效进行评估。

常用的评分系统包括Psoriasis Area and Severity Index（PASI）、Scoring of Atopic Dermatitis（SCORAD）等。

5. 免疫组化检测：通过免疫组化方法检测银屑病小鼠皮肤组织中相关蛋白的表达水平，评估药物对病理过程的影响。

常用的标记物包括角质形成相关蛋白（如角质蛋白1、角质蛋白10等）、炎症因子（如肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-17等）等。

需要注意的是，以上方法仅供参考，具体的药效评价方法应根据实验目的、药物特性和实验条件等因素进行选择和调整。

在进行动物实验时，应遵守相关的伦理规定，并确保实验设计科学合理、结果可靠。

凉血消银颗粒剂治疗银屑病的临床效果孙涛【期刊名称】《临床医学研究与实践》【年(卷),期】2017(002)012【摘要】目的分析凉血消银颗粒剂治疗银屑病的临床效果.方法选取我院2014年7月至2016年7月收治的143例银屑病患者,随机分为对照组(71例)与观察组(72例),对照组患者给予复方青黛胶囊治疗,观察组患者给予凉血消银颗粒剂治疗,两组患者均进行为期6周的治疗.疗程结束后,比较两组患者在不同治疗方案下取得的临床治疗效果及治疗2年后的复发率.结果治疗后,对照组患者的临床治疗总有效率为69.02%,观察组患者的临床治疗总有效率为93.05%,观察组患者的临床治疗总有效率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).随访结果显示,对照组患者在治疗2年后有13例患者病情复发,复发率为18.31%;观察组患者在治疗2年后有7例患者病情复发,复发率为9.72%,观察组患者治疗后的复发率显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论对银屑病患者使用凉血消银颗粒剂进行治疗能够取得良好的临床效果,且安全性高,可降低患者病情复发的可能性,值得在今后的临床工作中加以推广.【总页数】2页(P51-52)【作者】孙涛【作者单位】扶风县人民医院,陕西宝鸡,722200【正文语种】中文【中图分类】R758.63【相关文献】1.凉血消银颗粒剂治疗银屑病的临床观察 [J], 薛春梅;杨玲燕2.金黄膏走罐辅助凉血平银饮治疗银屑病的临床效果 [J], 张帅;杨志波;唐雪勇;罗宏;李丽琴3.凉血消银颗粒剂对银屑病转基因小鼠模型miR-155/SOCS1轴的影响 [J], 段紫钰;李建国;陈静;刘鸿伟;李丽娜;周武;张守民4.清热凉血汤内服、外用治疗银屑病的临床效果 [J], 吴卿;景慧玲;王星星;马晓红;闫小宁5.凉血消疕汤联合钙泊三醇倍他米松软膏治疗寻常型银屑病的临床效果 [J], 鹿见香;宋丹阳;李上云因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

新药研发中药效评价与利用模型研究药物研发是现代医学领域中至关重要的一环，而药效评价与利用模型则是衡量药物治疗效果与应用价值的重要手段。

本文将介绍新药研发中药效评价与利用模型的研究现状、意义以及未来发展方向。

一、药效评价与利用模型的研究现状随着科技的不断进步和研究方法的不断完善，药效评价与利用模型的研究取得了显著的进展。

目前常用的药效评价与利用模型主要包括动物模型、细胞模型和计算模型等。

1. 动物模型动物模型是药效评价与利用模型中最常用的一种模型。

一方面，通过在动物体内进行药物实验，可以模拟人体内药物代谢和药物治疗效果，为进一步的临床测试提供基础；另一方面，动物模型还可以探索药物的安全性和副作用。

动物模型虽然在药效评价与利用上具有一定的局限性，但仍然是药物研发领域中不可或缺的一部分。

2. 细胞模型细胞模型是另一种常用的药效评价与利用模型。

细胞模型通常是体外培养的人体细胞，通过在细胞层面上观察和评估药物的作用机制和效果。

与动物模型相比，细胞模型具有操作简便、成本低廉以及更高的重复性等特点，可以有效地筛选出具有较好治疗效果且对人体没有显著毒副作用的药物候选物。

3. 计算模型计算模型是近年来新药研发中药效评价与利用模型研究的一个重要方向。

通过计算模型可以预测药物的相互作用、药效以及药代动力学等参数，更加高效地筛选和设计新药。

计算模型的优势在于可以减少实验成本和时间，提高了研究的效率和精度。

二、药效评价与利用模型的意义药效评价与利用模型在新药研发中具有重要的意义。

1. 加速新药研发过程药效评价与利用模型可以帮助研究人员快速筛选出候选药物，从而加速了新药研发的过程。

通过建立合适的评价模型，可以迅速确定药物的活性、剂量和安全性，减少研发周期和人力物力的浪费。

2. 提高药物研发成功率药效评价与利用模型可以更准确地评估药物的疗效和安全性，通过对新药的全面性评估，可以提高药物研发的成功率。

这对于减少药物研发风险、节约成本以及改善患者的治疗效果具有重要意义。