咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的组织学及免疫学特征初步探究

生物技术进展 2023 年 第 13 卷 第 6 期 945 ~ 953Current Biotechnology ISSN 2095‑2341研究论文Articles氢分子对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损的抑制作用朱钧锴1 ， 葛玲智2 ， 张超2 ， 曹璨2 ， 吴嘉惠2 ， 穆震2*1.泰安八十八医院皮肤科，山东 泰安 271000；2.山东第一医科大学第二附属医院皮肤科，山东 泰安 271000摘 要：氢分子是一种新型的气体信号分子，对多种炎症疾病有一定的作用效果。

银屑病是一种慢性炎症性疾病，氢分子有望作为银屑病辅助治疗的新手段。

连续7 d 使用5%咪喹莫特（imiquimod, IMQ ）乳膏诱导小鼠银屑病模型，期间每天2次、每次2 h 将小鼠置于35%的氢分子环境中进行干预。

每天观察小鼠皮损变化并进行银屑病面积和严重程度指数（psoriasis area and severity index, PASI ）评分；第8天，处死小鼠取皮损，苏木精-伊红（hematoxylin -eosin ，HE ）染色并使用Baker 评分评估组织病理学损害程度；免疫组化检测皮损中炎症因子IL -6、TNF -α和IFN -γ的表达；实时荧光定量PCR （real -time quantitative fluorescent polymerase chain reaction, RT -qPCR ）和蛋白免疫印迹检测皮损中炎症因子IL -6、TNF -α和IFN -γ的相对mRNA 水平和蛋白水平的表达；用试剂盒检测皮损组织中氧化指标丙二醛（malondialdehyde, MDA ）含量和抗氧化相关的过氧化氢酶（catalase, CAT ）活力。

结果显示，氢分子干预降低了IMQ 诱导小鼠的PASI 评分（P <0.05）和Baker 评分（P <0.001），改善了组织的病理学变化；氢分子干预组小鼠皮损组织中IL -6、TNF -α和IFN -γ的mRNA 及蛋白表达水平均下降，MDA 的含量下降，CAT 的活力增加（P <0.05）。

咪喹莫特诱导银屑病模型小鼠T细胞免疫功能改变与性别的关系杨梅;唐彩红;桂雨晴;陈镜宇;魏伟【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2022(38)4【摘要】目的研究咪喹莫特诱导银屑病模型小鼠T细胞免疫功能改变及角质细胞损伤与性别的关系。

方法将IMQ诱导的银屑病小鼠随机分为雌、雄模型组,设雌、雄正常组涂抹等量凡士林。

银屑病皮损面积和严重程度(psoriasis area and severity index,PASI)评分评价皮损病变程度;HE染色观察皮损皮肤病理变化;Western blot和免疫荧光检测皮损皮肤增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Ki67、角蛋白1(keratin 1,K1)、角蛋白10(keratin 10,K10)及involucrin蛋白水平;计算脾脏指数;免疫组化检测皮损皮肤和脾脏中CD4、IFN-γ、IL-4以及IL-17的表达;流式细胞术检测脾脏中Th1、Th17细胞亚群变化。

结果与雌、雄正常组相比,雌、雄模型组PASI评分增加,皮损皮肤异常增厚与分化,PCNA、Ki67增加,K1、K10及involucrin减少,脾脏指数增大,皮损皮肤及脾脏中CD4、IFN-γ、IL-17水平升高,IL-4的水平降低,脾脏中Th1以及Th17细胞亚群增加。

而雌、雄模结论性别对IMQ诱导的银屑病样小鼠T细胞免疫功能的异常活化及角质细胞的增殖、分化没有影响。

【总页数】9页(P589-597)【作者】杨梅;唐彩红;桂雨晴;陈镜宇;魏伟【作者单位】安徽医科大学临床药理研究所【正文语种】中文【中图分类】R-332;R322.991【相关文献】1.树突状细胞在咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型中的表达及凉血解毒方的干预作用2.他克莫司通过抑制Th17治疗咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型3.养阴凉血中药对咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮损模型Th相关细胞因子的影响4.性别对咪喹莫特诱导小鼠银屑病模型建立的影响5.抑制树突细胞MMP-13基因对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样炎症模型的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

环球中医药2023年7月第16卷第7期　Global Traditional Chinese Medicine,July 2023,Vol.16,No.71317　㊃基础研究㊃基金项目:北京市自然科学基金(7192116);北京中医药大学校级课题-李元文名师工作坊;北京市中医管理局课题-中医药继续教育导航工程-继教专委会建设及精品课程制作;北京中医药大学2020年新教师启动基金(2020⁃JYB⁃XJSJJ⁃044);北京中医药大学横向科研项目(HX202119)作者单位:100078　北京中医药大学东方医院皮肤科[于心荟(硕士研究生)㊁李元文㊁任雪雯(博士研究生)㊁邓宇童(博士研究生)㊁王莹(博士研究生)];北京中医药大学东直门医院皮肤科(冯蕙裳);江阴江天药业有限公司(王化龙㊁刘晓东)作者简介:于心荟(1998-),2021级在读硕士研究生㊂研究方向:中医皮肤性病学㊂E⁃mail:yuxinhui9898@通信作者:冯蕙裳(1992-),硕士,住院医师㊂研究方向:中医皮肤病学㊂E⁃mail:fhs1116@化斑解毒方对咪喹莫特诱导银屑病样皮炎小鼠模型抗炎机制探究于心荟　李元文　任雪雯　邓宇童　王莹　王化龙　刘晓东　冯蕙裳【摘要】　目的　观察化斑解毒方对咪喹莫特诱导银屑病样皮炎小鼠模型的抗炎作用㊂方法　采用咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮炎,以随机数字表法将60只小鼠随机分为空白组㊁模型组㊁化斑解毒方低㊁中㊁高剂量组及甲氨蝶呤组,每组10只㊂观察各组小鼠银屑病皮损严重程度指数(psoriasis area and severity index,PASI)评分,苏木素 伊红染色观察组织病理学变化,酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子⁃α(tumor necrosis factor⁃α,TNF⁃α)㊁干扰素⁃γ(interferon⁃γ,IFN⁃γ)㊁白细胞介素⁃23(interleukin⁃23,IL⁃23)㊁白细胞介素⁃1β(interleukin⁃1β,IL⁃1β)表达水平,蛋白免疫印迹法测定核转录因子⁃κB(nuclear factor⁃κB,NF⁃κB)水平㊂结果　(1)模型组与空白组PASI 评分具有统计学差异(P <0.05),各药物组PASI 评分较模型组均降低,差异有统计学意义(P <0.05);(2)模型组TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁IL⁃23表达水平较空白组显著升高(P <0.05);与模型组相比,各药物组TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β表达水平显著降低(P <0.05),甲氨蝶呤组㊁化斑解毒方中㊁高剂量组IL⁃23水平显著降低(P <0.05);化斑解毒方低剂量组IL⁃23表达水平与模型组无显著差异(P >0.05);(3)与空白组相比,模型组NF⁃кB 表达水平显著升高(P <0.05);各用药组NF⁃κB 表达水平较模型组显著降低(P <0.05);化斑解毒方各剂量组NF⁃кB 表达水平与甲氨蝶呤组相比无显著差异(P >0.05)㊂结论　化斑解毒方可以明显改善银屑病样皮损症状及病理学改变,并通过调节细胞炎性因子表达改善炎症㊂【关键词】　化斑解毒方;　银屑病;　核转录因子⁃κB;　肿瘤坏死因子⁃α;　干扰素⁃γ;　白细胞介素⁃23;　白细胞介素⁃1β【中图分类号】　R285.5　【文献标识码】　A　doi:10.3969/j.issn.1674⁃1749.2023.07.006Study on the anti⁃inflammatory mechanism of Huaban Jiedu Decoction on imiquimod induced psoriasis⁃like dermatitis in miceYU Xinhui ,LI Yuanwen ,REN Xuewen ,DENG Yutong ,WANG Ying ,WANG Hualong ,LIU Xiaodong ,FENG HuichangDongfang Hospital Beijing University of Chinese Medicine ,Beijing 100078,China Corresponding author :FENG Huichang ,E⁃mail :fhs1116@【Abstract 】　Objective To study the anti⁃inflammatory effects of different concentrations of HuabanJiedu Decoction on imiquimod induced psoriasis⁃like dermatitis in mice.Methods Psoriasis⁃likedermatitis was induced by imiquimod.Sixty mice were randomly divided into blank group,model group,low dose group,medium dose group,high dose group and methotrexate group with 10mice in each group.1318　环球中医药2023年7月第16卷第7期　Global Traditional Chinese Medicine,July2023,Vol.16,No.7 To observe the psoriasis area and severity index(PASI)and histopathological changes by HE staining.The expression levels of tumor necrosis factor⁃α(TNF⁃α),interferon⁃γ(IFN⁃γ),interleukin⁃23(IL⁃23)and interleukin⁃1β(IL⁃1β)in mice skin tissue homogenates were detected by ELISA.The expression level ofnuclear factor⁃κB(NF⁃κB)was measured by Western blotting assay.Results　(1)The PASI scores ofthe model group and the blank group were statistically different(P<0.05).Compared with the modelgroup,the PASI score of each drugged group was lower,and the difference was statistically significant(P<0.05).(2)Compared with the blank group,the expression levels of TNF⁃α,IFN⁃γ,IL⁃1β,IL⁃23inthe model group were significantly increased(P<0.05).Compared with the model group,the expressionlevels of TNF⁃α,IFN⁃γand IL⁃1βin each drug group were significantly decreased(P<0.05),and thelevel of IL⁃23in the methotrexate group and the Huaban Jiedu Decoction medium and high dose groups were significantly decreased(P<0.05).There was no significant difference in the expression level of IL⁃23between the Huaban Jiedu Decoction low dose group and the model group(P>0.05).(3)Compared withthe blank group,the expression levels of NF⁃κB in the model group was significantly increased(P<0.05).The expression level of NF⁃κB in each drugged group was significantly lower than that in the model group(P<0.05).There was no significant difference in the expression level of NF⁃кB between every HuabanJiedu Decoction group and the methotrexate group(P>0.05).Conclusion　Huaban Jiedu Decoction can significantly improve the symptoms and pathological changes of psoriasis⁃like skin lesions,and improve in⁃flammation by regulating the expression of inflammatory cytokines.【Key words】　Huaban Jiedu Decoction;　Psoriasis;　Nuclear factor⁃κB;　Tumor necrosis factor⁃α;　Interferon⁃γ;　Interleukin⁃23;　Interleukin⁃1β 银屑病是一种常见的慢性炎症性复发性皮肤疾病,临床表现主要是鳞屑性红斑或斑块,世界范围内发病率约1%~3%[1]㊂免疫异常被视为银屑病发病的重要环节,免疫细胞激活后产生多种炎症细胞因子,促进细胞增殖角化及炎症细胞浸润,导致银屑病的发生发展㊂化斑解毒方是李元文教授通过前期数据挖掘结合多年的临床经验与理论探索总结出的中药方剂[2],临床应用于寻常型银屑病血热证患者具有确切疗效,能够有效减轻患者皮肤炎症反应,但其治疗银屑病的作用机制尚不明确㊂本研究拟通过测定不同浓度的化斑解毒方对咪喹莫特诱导银屑病样皮炎小鼠肿瘤坏死因子⁃α(tumor necrosis factor⁃α,TNF⁃α)㊁干扰素⁃γ(interferon⁃γ, IFN⁃γ)㊁白细胞介素⁃23(interleukin⁃23,IL⁃23)㊁白细胞介素⁃1β(interleukin⁃1β,IL⁃1β)㊁核转录因子⁃κB (nuclear factor⁃κB,NF⁃κB)表达水平的影响,探究其治疗银屑病的抗炎作用,并为化斑解毒方的临床应用提供理论依据㊂1　材料与方法1.1　实验动物SPF级雄性BALB/c小鼠60只,8周龄,体质量约20g,购于斯贝福(北京)生物技术有限公司,动物质量合格证号:110324221101061643;实验动物生产许可证号:SCKX(京)2019⁃0010㊂小鼠于北京中医药大学动物房适应性喂养1周后开始实验㊂1.2　实验药物化斑解毒方组成:白花蛇舌草30g㊁半枝莲15g㊁威灵仙10g㊁苍术10g㊁土茯苓15g㊁生槐花10g㊁玄参20g㊁生地10g㊁香附10g㊁牛蒡子10g㊁知母10g㊁金银花15g㊁猪苓10g㊁白术10g㊁炙甘草6g㊂所用药物为颗粒剂,由江阴天江药业有限公司配制,产品批号2202306㊂甲氨蝶呤片(通化茂祥制药有限公司,产品批号:197220504,规格:2.5mg);咪喹莫特乳膏(四川明欣药业有限责任公司,产品批号40220501,规格: 250mg∶12.5mg)㊂1.3　主要实验试剂与仪器凡士林(德新康,批号:Q/371426DXK027);4%多聚甲醛(Solarbio,批号:P1110);苏木素 伊红(hematoxylin⁃eosin,HE)染色试剂盒(北京中科万邦生物科技有限公司,批号:RY⁃0002);中性树胶封片剂(北京中科万邦生物科技有限公司,批号:FP⁃0001);TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁IL⁃23酶联免疫吸附试验试剂盒(北京百奥思科生物医学技术有限公司,批号分别为:MD7125㊁MD16214㊁MD124889㊁MD53662);NF⁃κBp65抗体(Abcam,批号: AB32536);辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG环球中医药2023年7月第16卷第7期　Global Traditional Chinese Medicine,July2023,Vol.16,No.71319(Affinity,批号:T0021)㊂数码相机(Leica);JT⁃12S脱水机㊁JB⁃P7包埋机(武汉俊杰电子有限公司);电泳仪(美国Bio⁃Rad); Spectramac M3多功能酶标仪(美国MD);紫外分光光度计(美国赛默飞世尔科技公司);ST16R高速冷冻离心机(美国Thermo Sorvall);THZ⁃312台式恒温振荡器(上海精宏实验设备有限公司);化学发光成像系统(美国ChemiDoc MP)㊂1.4　实验方法1.4.1　动物分组与造模　将60只小鼠适应性喂养1周后,全部予背部去毛,面积约2cm×3cm㊂以随机数字表法将60只小鼠随机分为空白组㊁模型组㊁化斑解毒方低㊁中㊁高剂量组及甲氨蝶呤组,每组10只㊂脱毛后24小时确认小鼠脱毛处无损伤后开始造模,空白组小鼠于备皮区每日涂抹凡士林62.5mg,其余各组涂抹等质量5%咪喹莫特乳膏,连续7天㊂1.4.2　给药方法　造模后,各组均以标准饲料喂养并自由饮水,每3天更换垫料㊂造模开始第二日予以干预,每组小鼠以0.1mL/(10g㊃d)灌胃1次,空白组与模型组小鼠予以蒸馏水,化斑解毒方低㊁中㊁高剂量组分别予中药1/2倍㊁1倍及2倍量,甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤片混悬液㊂小鼠灌胃药物剂量根据体表法进行计算,根据标准成年人体质量70kg,则对应小鼠药物剂量约为成人的9.1倍,折算出化斑解毒方中剂量组小鼠每日给药剂量为24.83g/kg,甲氨蝶呤组每日给药剂量为1mg/kg㊂1.4.3　取材方法　在实验第7天进行标本制备,对小鼠予4%水合氯醛(0.1mL/10g)腹腔注射进行麻醉㊂取小鼠背部银屑病皮损集中皮肤(全层创面),面积为2cm×2cm的正方形,空白组取相同部位,所得皮肤组织以90°为范围平均分为4份,3份置于无菌无酶冻存管,置于液氮冷冻后,放于-80℃超低温冰箱保存用于做蛋白检测;1份放于4%多聚甲醛中固定,用于切片染色㊂1.5　观察指标1.5.1　各组小鼠皮损变化情况评价　于模型建立及治疗期间,每日观察各组小鼠皮损变化,并采用数码相机对同一部位拍照记录㊂观察期间无小鼠死亡情况,重复数量为1㊂根据校正后的银屑病样皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI)评分作为标准,对鳞屑㊁浸润㊁红斑的严重程度进行评分,由轻到重分为5个等级,从0到4进行赋分㊂计算三项评分之和表示皮损严重程度;取每日各组总分平均值绘制趋势线,从而反映小鼠皮损的变化情况㊂1.5.2　皮肤组织HE染色及观察　取固定于4%多聚甲醛中的皮肤组织,修剪至合适大小,二甲苯脱蜡后,用从高到低浓度酒精及蒸馏水洗脱,苏木素水溶液染色10分钟,0.7%盐酸乙醇分化30秒,置于酒精中脱水,酒精伊红染色2分钟,冲洗后先后酒精脱水㊁二甲苯透明㊁中性树胶封片,放置于显微镜下观察并摄片㊂1.5.3　皮肤组织炎症因子水平检测　采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组小鼠皮肤组织匀浆中TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁IL⁃23水平㊂将试剂盒取出平衡至室温,取出冰箱中冻存的皮肤样本研碎㊂实验操作步骤以ELISA检测试剂盒为准㊂显色后立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度值(OD值),绘制浓度标准曲线计算样品中相应检测目标的浓度㊂以蛋白免疫印迹法检测皮肤标本中NF⁃κB水平㊂取出冻存标本加入裂解液,超声破碎细胞取上清,按照BCA试剂盒说明书对蛋白定量,对蛋白样品进行电泳及转膜㊂将转移膜置于封闭液中封闭1小时,加入用封闭液稀释的一抗工作液4℃孵育过夜,洗净后加入二抗工作液室温孵育60分钟,洗膜后使用显色剂显影,利用化学发光成像系统成像并通过测定主带的光密度值计算上述蛋白在皮肤组织中的表达水平㊂1.6　统计学方法实验所得数据为计量资料,采用SPSS20.0软件对所得数据进行统计分析,数据以均数±标准差(x±s)表示㊂其中,IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁NF⁃кB各组数据符合正态分布且满足方差齐性,采用单因素方差分析(One⁃way ANOVA),组间比较应用LSD法;其余结果指标数据不符合正态分布或不满足方差齐性,故采用Kruskal⁃Wallis检验,组间比较应用Wilcoxon Mann⁃Whitney U秩和检验(Bonferronni法)㊂检验水准a=0.05,P<0.05表示差异有统计学意义㊂2　结果2.1　皮损变化及评分比较空白组小鼠未见皮损,模型组小鼠皮肤存在不同程度红斑㊁浸润㊁鳞屑等皮肤损害㊂与模型组相比,化斑解毒方各剂量组及甲氨蝶呤组小鼠皮肤红斑色泽㊁浸润程度㊁出现鳞屑皮肤面积大小㊁鳞屑厚度均较轻㊂第7天时,化斑解毒方低㊁中㊁高剂量组㊁1320　环球中医药2023年7月第16卷第7期　Global Traditional Chinese Medicine,July 2023,Vol.16,No.7甲氨蝶呤组小鼠皮损相比于模型组,红斑面积较小㊁颜色浅,皮肤浸润程度较轻,鳞屑较少㊂见图1㊂注:A 空白组;B 模型组;C 化斑解毒方低剂量组;D 化斑解毒方中剂量组;E 化斑解毒方高剂量组;F 甲氨蝶呤组㊂图1　各组银屑病样皮炎小鼠皮肤表现 皮损评分结果显示,空白组与模型组之间PASI评分存在统计学差异(P <0.05);与模型组相比,化斑解毒方各剂量组及甲氨蝶呤组PASI 评分降低,皮损症状改善(P <0.05)㊂依据PASI 评分绘制化斑解毒方各剂量组与模型组㊁甲氨蝶呤组的7日曲线可观察评分变化㊂见图2,表1㊂图2　各组银屑病样皮炎小鼠PASI 评分变化曲线2.2　皮肤组织学变化HE 染色显示:空白组角质层细胞未见明显异常,基底层细胞连续,血管周围及真皮浅层未见炎症细胞浸润;模型组表现为表皮角化过度伴角化不全,棘细胞数量增加,棘层肥厚,表皮突向下延伸呈棒槌状,真皮内可见毛细血管扩张,血管周围淋巴细胞浸润,类似银屑病的皮损病理表现;与模型组相比,化斑解毒方各剂量组和甲氨蝶呤组小鼠病理损害程度较低,表皮角化不全减轻,棘层厚度变薄,淋巴细胞浸润减少㊂见图3㊂表1　各组银屑病样皮炎小鼠PASI 评分比较(x ±s )组别鼠只PASI 评分(分)第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天模型组100.5±0.53 2.3±0.48 2.3±0.59 3.2±1.48 4.8±0.42 6.6±0.707.6±0.70化斑解毒方低剂量组100.5±0.53 1.2±0.79a 1.7±0.68a 2.6±0.97 3.4±1.17a 4.4±0.84a 4.4±0.84a 化斑解毒方中剂量组100.2±0.420.8±0.62a 1.4±0.84a 1.9±0.94a3.0±1.16a 3.5±1.08a4.3±0.95a 化斑解毒方高剂量组100.6±0.27 2.0±0.67 2.4±0.70 2.8±0.79 3.8±0.79a 4.6±0.70a 5.0±0.67a 甲氨蝶呤组100.2±0.421.7±0.48a2.3±0.682.9±0.573.7±1.06a4.4±1.08a4.2±1.03a注:与模型组相比,a P <0.05㊂注:A 空白组;B 模型组;C 化斑解毒方低剂量组;D 化斑解毒方中剂量组;E 化斑解毒方高剂量组;F 甲氨蝶呤组㊂图3　各组银屑病样皮炎小鼠皮肤病理变化比较(HE 染色,×400)环球中医药2023年7月第16卷第7期　Global Traditional Chinese Medicine,July 2023,Vol.16,No.71321　表2　各组银屑病样皮炎小鼠皮肤组织中TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁IL⁃23表达水比较(x ±s ,pg /mL)组别鼠只TNF⁃αINF⁃γIL⁃1βIL⁃23空白组1042.47±3.2218.42±1.2322.53±2.1710.52±1.04模型组10107.35±6.03a 50.64±3.61a 79.86±2.62a 22.96±2.98a 化斑解毒方低剂量组1072.69±2.57ab 31.40±2.49ab 60.55±1.66ab 20.73±3.50a 化斑解毒方中剂量组1055.18±2.55ab 27.64±1.32ab 54.25±1.52ab 13.64±1.04ab 化斑解毒方高剂量组1051.35±1.60abc 24.81±1.49ab 49.31±1.56ab 12.85±1.02abc甲氨蝶呤组1051.72±1.89ab19.26±2.32b45.63±2.54ab11.20±0.66b注:与空白组相比,a P <0.05;与模型组相比,b P <0.05;与甲氨蝶呤组相比,c P >0.05㊂2.3　皮肤组织中TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁IL⁃23表达情况与空白组相比,模型组小鼠皮肤组织中TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃23㊁IL⁃1β表达水平显著升高(P <0.05);与模型组相比,各用药组炎症因子水平均有不同程度降低,其中以甲氨蝶呤组及化斑解毒方高剂量组最为显著;另外,化斑解毒方低剂量组与模型组IL⁃23表达水平无明显差异(P >0.05)㊂见表2㊂2.4　皮肤组织中NF⁃кB 表达水平与空白组相比,模型组NF⁃кB 表达水平显著升高(P <0.05);与模型组相比,各用药组NF⁃кB 表达水平显著降低(P <0.05);化斑解毒方各剂量组NF⁃кB 表达水平较甲氨蝶呤组无显著差异(P >0.05)㊂因空白组中两个数据离散度过大,考虑误差,在统计过程中主动剔除㊂结果见表3及图4㊂表3　各组银屑病样皮炎小鼠皮肤组织中NF⁃кB 表达水平比较(x ±s )组别鼠只NF⁃кB 相对表达量空白组80.53±0.47模型组100.96±0.09a 化斑解毒方低剂量组100.73±0.12abc 化斑解毒方中剂量组100.73±0.08abc化斑解毒方高剂量组100.70±0.12abc 甲氨蝶呤组100.67±0.09ab注:与空白组相比,a P <0.05;与模型组相比,b P <0.05;与甲氨蝶呤组相比,c P >0.05㊂注:A 空白组;B 模型组;C 化斑解毒方低剂量组D 化斑解毒方中剂量组;E 化斑解毒方高剂量组;F 甲氨蝶呤组㊂图4　各组银屑病样皮炎小鼠皮肤组织中NF⁃кB 蛋白表达情况3　讨论银屑病是皮肤科常见且重大的疾病,其发病机制复杂且尚不明确[3]㊂目前普遍认为银屑病的发病主要由免疫细胞介导的炎症反应㊁多种细胞因子失衡及细胞间信号转导通路异常等导致[4]㊂现代医学对轻度银屑病治疗以外用药为主,中㊁重度常联合甲氨蝶呤㊁阿维A 酸㊁环孢素等系统治疗,近年来生物制剂也日益广泛应用于银屑病的治疗[5]㊂中药治疗相对安全且价格适中,探索更为稳定有效的中药方剂有助于解除银屑病患者的困扰,并为银屑病的临床治疗提供更多选择㊂中医学普遍认为,银屑病发生与 血”与 风”两个因素密切相关,病机多为营血亏虚或外邪入里以致血热内蕴,生风化燥,肌肤失养,发为白疕[6]㊂李元文教授认为寻常型银屑病的病因病机在血热瘀阻㊁化燥生风的基础之上,兼有湿邪为患,且多与毒邪相关[7]㊂化斑解毒方在目前常用清热凉血解毒药如生地㊁玄参㊁知母㊁金银花㊁生槐花㊁白花蛇舌草㊁半枝莲㊁土茯苓之外[8],加用健脾化湿之苍术㊁白术㊁猪苓,佐以威灵仙通络,香附理气,旨在宣通中焦之气,气行则血行,气机通畅则瘀血得通㊁风邪自灭,故红斑鳞屑得以消减㊂化斑解毒方临床治疗寻常型银屑病疗效确切,但其治疗的分子层面的机制仍不明确,故本实验通过对不同浓度化斑解毒方的抗炎方面机制进行探究㊂作为由免疫介导的炎症性皮肤病,银屑病的发生发展过程由多种免疫细胞和炎症因子共同作用㊂TNF⁃α是重要的促炎因子,可影响角质细胞的再生㊁诱导表皮中性粒细胞浸润,并可诱导免疫细胞增殖产生不同的趋化因子的细胞因子,加重炎症反应㊂IFN⁃γ能够增强抗原加工和呈递㊁诱导免疫反应,在银屑病患者血清中显著升高,并且可能与银屑病的活动有关[9]㊂IL⁃1β是在早起皮肤1322　环球中医药2023年7月第16卷第7期　Global Traditional Chinese Medicine,July2023,Vol.16,No.7损伤中占主导地位的细胞因子,其增多导致早期银屑病炎症加重[10]㊂IL⁃23是银屑病免疫反应机制的上游炎症因子之一,可诱导Thl7细胞分化产生细胞因子,进一步促进角质形成细胞增殖及炎症级联反应[11]㊂本研究中,甲氨蝶呤组㊁化斑解毒方各剂量组TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β表达水平较模型组显著降低,提示经治疗后细胞炎症因子水平下降,组织炎症缓解,同理甲氨蝶呤组与化斑解毒方中㊁高剂量组的IL⁃23表达水平降低亦提示炎症减轻㊂化斑解毒方高剂量组与甲氨蝶呤组TNF⁃α㊁IL⁃23表达水平无显著差异,提示二者在影响TNF⁃α㊁IL⁃23的作用上效果趋于相同㊂化斑解毒方低剂量组IL⁃23表达水平与模型组无显著差异,提示对此炎症因子作用效果不明显,考虑血药浓度可能未达到起效水平,或与造模用药时间较短等因素有关,具体原因需进一步探究㊂NF⁃кB被认为是免疫及炎症反应的中心枢纽,激活后可诱导下游炎症因子和趋化因子表达,促进组织炎症发生[12]㊂NF⁃кB在银屑病过程中表达水平升高[13],并可调控细胞凋亡,影响银屑病炎症进展[14]㊂本研究结果显示,与空白组相比,模型组NF⁃кB表达水平显著升高,提示在咪喹莫特诱导银屑病样皮炎小鼠中NF⁃кB过度激活;与模型组相比,各用药组NF⁃кB显著下调,提示化斑解毒方的抗炎作用可能与抑制NF⁃кB表达有关,且下调情况在化斑解毒方各组间呈现一定的量效差异㊂化斑解毒方各剂量组NF⁃кB表达水平与甲氨蝶呤组无统计学差异,提示化斑解毒方可有效抑制银屑病皮损中的NF⁃кB表达,从而改善炎症反应㊂综上所述,化斑解毒方在改善银屑病皮损症状及组织病理学表现上有确切治疗作用;同时在分子层面上,化斑解毒方能够通过降低TNF⁃α㊁IFN⁃γ㊁IL⁃1β㊁IL⁃23的表达水平㊁抑制NF⁃кB在组织细胞中的表达减轻炎症反应,起到抗炎作用,且化斑解毒方的抑制炎症作用与使用剂量呈正相关㊂但是,本研究所检测的只是银屑病炎症反应相关的部分细胞因子,没有涉及细胞通路及其他治疗机制方面的研究;且咪喹莫特诱导的小鼠模型不能完全代表人类银屑病的发展及转归过程㊂因此,探究化斑解毒方的作用机制仍需经过其他分子水平研究及临床实验进一步验证㊂参考文献[1]　郑佳媛,陈显侠,骆志成.银屑病瘙痒发病机制的研究现况[J].中国医学科学院学报,2022,44(3):529⁃534. [2]　李雪,杭小涵,邓宇童,等.银屑病中医治疗 枢机”之窥见[J].北京中医药,2021,40(8):826⁃829.[3]　中华医学会皮肤性病学分会银屑病专业委员会.中国银屑病诊疗指南(2018完整版)[J].中华皮肤科杂志,2019,52(10):667⁃710.[4]　Griffiths C E M,Armstrong A W,Gudjonsson J E,et al.Psoriasis[J].Lancet,2021,397(10281):1301⁃1315. [5]　Armstrong A W,Read C.Pathophysiology,clinical presentation,and treatment of psoriasis:A review[J].JAMA,2020,323(19):1945⁃1960.[6]　王晓瑾,张建英,张守亮,等.中医药防治银屑病的机制研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(21):243⁃253. [7]　钱冬冬,张怀亮.银屑病的 毒邪”现代理论探析[J].环球中医药,2015,8(8):950⁃952.[8]　成雪,刘朝圣,刘芳榕,等.基于国家专利的中药复方调治银屑病用药规律研究[J].中国中医药信息杂志,2023,30(2):62⁃67.[9]　Grän F,Kerstan A,Serfling E,et al.Current developments inthe immunology of psoriasis[J].Yale J Biol Med,2020,93(1):97⁃110.[10]　Orsmond A,Bereza⁃Malcolm L,Lynch T,et al.Skin barrierdysregulation in psoriasis[J].Int J Mol Sci,2021,22(19):10841.[11]　薛潇春,原源,沈闻文,等.IL⁃23p19抗体古塞奇尤在银屑病治疗中的应用研究进展[J].山东医药,2020,60(18):106⁃109.[12]　王生,刘洋,张晶.川芎嗪调控NF⁃κB信号通路对银屑病HaCaT细胞模型趋化因子和炎症因子表达影响[J].中国免疫学杂志,2022,38(8):952⁃957.[13]　Rendon A,Schäkel K.Psoriasis pathogenesis and treatment[J].Int J Mol Sci,2019,20(6):1475.[14]　王胜珊.银屑病发病诊断及治疗中的MPAK/NF⁃κB信号通路作用[J].解剖学研究,2017,39(6):468⁃471,486.(收稿日期:2022⁃09⁃25)(本文编辑:张楠)。

银屑病及银屑病相关动物模型银屑病（Psoriasis）, 俗称“牛皮癣”，是最为常见的慢性AID，常发于青壮年人群，在世界范围内发病率约1-3%。

银屑病发病顽固且持续，最显著特征为皮肤表面红肿及白色鳞屑的覆盖，其病因尚不明确，目前认为是遗传和环境因素共同作用导致，如感染、压力、肥胖、吸烟等因素都可能对于疾病产生诱发作用。

目前临床上尚无根治银屑病的特效药物，故治疗银屑病主要以控制症状为主，如外用维生素D3类似物、糖皮质激素和维A酸，系统性使用糖皮质激素、甲氨蝶呤，以及免疫抑制剂如环孢素A、他克莫司等。

近年来随生物制药的发展，多种抗体类药物也对于银屑病具有较好疗效。

科学研究中银屑病的实验动物模型主要分为自发形成、基因工程改造、病灶原位移植和直接诱发四类，受限于模型建立难度和成本，直接诱发类模型使用最为广泛，以下介绍两种基于小鼠的银屑病直接诱发模型。

（一）咪喹莫特诱导小鼠银屑病皮损模型咪喹莫特（Imiquimod，IMQ）是T oll样受体7/8的抑制剂，临床上用来治疗病毒感染。

使用IMQ乳膏在小鼠背部连续涂抹5~7天，会出现皮肤增厚、红斑、鳞屑等类银屑病样症状。

该模型稳定、易建立、操作简单且应用广泛。

a. PASI评分根据PASI评分标准对小鼠背部皮肤炎症情况评分（包括银屑，红斑，肥厚），记录累积评分、体重与皮肤厚度变化。

对照组空白乳膏处理未表现炎症特征，模型组IMQ处理之后，逐渐表现出皮肤炎症特征及厚度增加，第5天PASI评分达到最高值，体重在IMQ处理的第3天下降到最低点，而后逐渐恢复，阳性药抗体可降低PASI评分与皮肤厚度的增加。

图1: 模型条件下小鼠背部皮肤PASI评分持续升高，体重下降，皮肤厚度增加；IL17A抗体可显著逆转皮肤病变b. 形态学检查IMQ连续处理5天后对于小鼠背部皮肤外观形态进行观察，并利用H&E染色分析组织病理学变化。

图片中可见，小鼠皮肤出现红斑，鳞屑与厚度增加；H&E 染色结果显示IMQ处理促进了炎性细胞的浸润，表皮细胞的增生；免疫组化结果显示银屑病相关PD marker IL-6在皮肤中表达水平增加。

咪喹莫特诱导银屑病小鼠模型的研究进展刘爱民;李伟玲;吴盘红;赵巍;李静文;徐茗圆【摘要】银屑病是一种免疫介导的慢性炎症性皮肤病,在对银屑病复杂的发病机制的研究中,银屑病动物模型的建立显示出重要作用.目前对银屑病动物模型建构主要集中于动物天然组织、局部药物诱导、以及基因水平研究,其中Toll样受体(TLR)激动剂的局部诱导是运用最为广泛的模型之一.本文搜索并整理分析近年文献,将目前运用TLR激动剂构建银屑病动物模型的研究现状作一综述.【期刊名称】《中国中西医结合皮肤性病学杂志》【年(卷),期】2018(017)004【总页数】3页(P380-382)【关键词】咪喹莫特;银屑病;小鼠模型【作者】刘爱民;李伟玲;吴盘红;赵巍;李静文;徐茗圆【作者单位】河南省中医院,河南郑州450000;河南中医药大学第二临床医学院,河南郑州450000;河南省中医院,河南郑州450000;河南省中医院,河南郑州450000;河南中医药大学第二临床医学院,河南郑州450000;河南中医药大学第二临床医学院,河南郑州450000;河南中医药大学第二临床医学院,河南郑州450000【正文语种】中文【中图分类】R758.63银屑病是临床常见的以红斑，鳞屑为主要表现的慢性复发性疾病，组织病理学上，角质形成细胞过度增殖、炎症细胞浸润及新生血管生成为其3大主要的病理特征[1]。

银屑病罕见于任何非人类动物，且自然出现的比例极少见[2]，其发病机制复杂，易于反复而目前尚无确切的治愈方法，因此建立合适的动物模型显得尤为重要。

自20世纪90年代初以来，已经开始使用银屑病皮肤炎症的小鼠模型，以阐明构成人类疾病的机制[3]。

随着医学的发展以及银屑病的研究的不断深入，对动物模型的建构有了更深一步的认识。

理想的银屑病动物模型应当包括表皮的过度增生，T细胞的浸润、改变的血管状态和对目前的抗银屑病疗法的反应性。

众多建模方式中，局部诱导运用广泛，咪喹莫特为其中的代表药物，本文就其运用现状及优势和不足之处进行归纳。

咪喹莫特诱发银屑病的机制研究新进展临床报道咪喹莫特能诱发人银屑病，实验研究发现咪喹莫特能诱导鼠类银屑病样皮肤改变，且发现有不同的作用机制参与此过程。

本文对咪喹莫特诱导鼠类银屑病样皮肤变化过程中发现的作用机制进行综述，为探究银屑病复杂的发病机制和治疗提供新思路。

标签：咪喹莫特；银屑病；机制；炎症咪喹莫特（imiquimod）是由美国3M公司开发研制的咪唑喹啉胺类免疫应答调节剂，1997年最先在美国上市并成为FDA批准的第一个外用治疗外生殖器疣的免疫调节药物。

临床报道发现该药能诱发人类银屑病。

实验研究发现该药能诱导鼠类银屑病样皮肤变化，有不同的作用机制参与发病过程。

咪喹莫特是Toll 样受体（Toll-like receptor，TLR）激动剂。

TLR的激活有助于宿主免疫反应的发生，引起免疫调节因子的转录，进而引起一系列的炎症反应和免疫损伤；TLR 的激活可促进抗微生物肽的释放和获得性免疫反应的发生，促进获得性免疫反应的一种途径是通过增加树突状细胞（dendritic cell，DC）上共刺激分子的表达来活化T淋巴细胞，另一途径是影响细胞因子的产生和释放；TLR的激活可以引起细胞凋亡；TLR的激活可以促进氧化酶的表达和抑制抗氧化酶的表达；TLR 的激活还能活化对氧化还原敏感的细胞信号转导途径，从而促进炎细胞因子和趋化因子的表达。

本文对TLR激动剂——咪喹莫特诱导银屑病样皮肤变化的作用机制进行了综述。

1 IL-23/IL-17炎性反应轴辅助性T细胞17（Th17细胞）是一种新发现的CD4+效应T细胞，因分泌白细胞介素17（IL-17）而得名。

Th17细胞的生成通路称为IL-23/IL-17炎症反应轴[1]。

DC分泌白细胞介素23（IL-23）和抗肿瘤坏死因子α（TNF-α），两者都作用于Th17细胞使其分泌IL-17和TNF-α，而IL-17和TNF-α可以刺激角质形成细胞产生抗菌肽（S100A7、LL-37）、中性粒细胞趋化因子（CXCL1、2、3、5）、白细胞介素8（IL-8）和趋化因子20（CCL20）。

2021银屑病的神经免疫学研究进展范文 神经免疫学论文（专业范文8篇）之第四篇 摘要：银屑病是一种慢性炎症性皮肤病,其病因尚未完全阐明。

心理应激因素通过中枢神经系统、外周神经系统和皮肤下丘脑-垂体-肾上腺素轴,参与对银屑病的神经免疫调节。

神经免疫调节机制的探究对心理应激诱导银屑病发病机制的阐明有重要意义。

关键词：银屑病,应激,神经免疫学 银屑病是一种慢性炎症性疾病,银屑病的多基因遗传方式提示诸多因素参与其发生发展。

近年多项研究提示,40%～80%银屑病患者在经历应激事件时病情加重,50%中至重度银屑病患者认为抑郁情绪与银屑病病情病情加重有关[1]。

本文就神经免疫系统的调节机制在银屑病发病中的作用进行综述。

1中枢神经系统 下丘脑、垂体后叶和肾上腺释放的激素分别为:促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(GC)。

正常情况下,下丘脑—垂体—肾上腺轴(HPA)存在负反馈闭合调节环路[2]。

Vegas等[3]学者用罗彻斯特小鼠(自发性银屑病样皮损动物模型)研究发现,在应激下小鼠背根神经节内促炎神经肽,如P物质(SP)、钙调素基因相关肽(CGRP)、神经生长因子(NGF)和促炎细胞因子表达升高,但银屑病样皮损的发生反而减少。

研究者推测,这一现象可能由应激后糖皮质激素的分泌增加介导。

随后研究发现,糖皮质激素受体阻滞剂可以逆转这种现象,这表明糖皮质激素分泌的增加可以减少银屑病样皮损的发生。

据此推测银屑病患者应激后病情恶化可能源于其本身HPA轴的缺陷以及糖皮质激素分泌减少,从而无法抵消慢性应激的促炎作用。

近期研究[4]发现银屑病患者HPA轴功能障碍,以及明显降低的血糖皮质激素浓度(包括基线水平和压力诱导后水平),均可以印证这一推测。

内源性促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)是HPA轴的重要化学递质。

应激状态下,中枢来源的CRF通过无髓C纤维或有髓Ad-神经纤维传入神经释放到达皮肤[5]。

《纳米气泡氢水预处理对咪喹莫特诱导银屑病小鼠的影响》篇一一、引言银屑病，又称牛皮癣，是一种常见的慢性炎症性皮肤病，其特征为皮肤红斑、鳞屑形成及瘙痒等症状。

当前，针对银屑病的治疗手段虽多，但尚无根治的特效药。

近年来，纳米技术及纳米气泡氢水在生物医学领域的应用备受关注。

本研究通过使用纳米气泡氢水预处理来探索其对咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型的影响。

二、材料与方法1. 材料本实验选用的主要材料包括咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型、纳米气泡氢水及必要的实验设备。

2. 方法（1）建立咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型；（2）将小鼠随机分为两组，对照组和实验组，实验组采用纳米气泡氢水进行预处理；（3）通过不同的时间点观察小鼠的皮肤状况，包括红斑、鳞屑等；（4）利用生化指标及免疫学指标分析小鼠的病情变化；（5）进行数据分析，对比两组小鼠在预处理后的差异。

三、实验结果1. 皮肤状况观察通过不同时间点的观察，我们发现实验组小鼠在接受纳米气泡氢水预处理后，其皮肤的红斑、鳞屑等症状明显减轻，且症状缓解的速度较对照组快。

2. 生化及免疫学指标分析通过对生化及免疫学指标的分析，我们发现实验组小鼠在接受纳米气泡氢水预处理后，其炎症因子水平显著降低，表明炎症反应得到缓解。

此外，实验组小鼠的皮肤屏障功能也得到了一定程度的修复。

3. 数据分析与比较通过数据分析，我们发现实验组与对照组在接受不同处理后，其病情变化存在显著差异。

实验组小鼠在接受纳米气泡氢水预处理后，其病情缓解程度明显高于对照组。

四、讨论本研究结果表明，纳米气泡氢水预处理对咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型具有显著的改善作用。

这可能与纳米气泡氢水的抗氧化、抗炎及修复皮肤屏障等功能有关。

纳米气泡氢水能够通过改善皮肤微环境，降低炎症反应，从而减轻银屑病的症状。

此外，纳米气泡氢水还可能通过其他机制对银屑病的治疗产生积极影响。

五、结论本研究通过实验证明，纳米气泡氢水预处理对咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型具有显著的改善作用，为银屑病的治疗提供了新的思路和方法。

雷公藤内酯醇改善IMQ诱导的银屑病样小鼠模型症状的初步探究朱震宇;周逸颉;陈霭如;吉丽娜;郑伟娟;华子春【期刊名称】《南京大学学报：自然科学版》【年(卷),期】2018(54)5【摘要】银屑病是一种以角质形成细胞过度增殖和异常分化为主要病理特征的慢性炎症性皮肤病,非甾体类免疫抑制剂雷公藤多苷是目前临床使用的治疗银屑病的主要药物之一.雷公藤内酯醇能够抑制人永生化表皮细胞株HaCaT细胞的增殖,因此可能通过增殖抑制作用来减缓银屑病的症状.利用5%咪喹莫特乳膏诱导的银屑病样小鼠模型,对雷公藤内酯醇抑制表皮细胞增殖的作用进行初步探究.经腹腔注射20μg·kg-1及100μg·kg-1雷公藤内酯醇后,银屑病模型小鼠背部皮肤的红斑和皮肤鳞屑等症状均出现不同程度的减轻.皮损区HE(hematoxylineosin)染色结果证实雷公藤内酯醇能明显抑制表皮细胞的过度增殖;免疫组化结果显示雷公藤内酯醇抑制了表皮细胞中增殖细胞核抗原的表达.对皮损区进行Western blot和RT-PCR 分析,结果提示雷公藤内酯醇抑制了STAT3和PD-L1的激活.此外雷公藤内酯醇还抑制了TNF-α和IL-17A的表达.【总页数】9页(P992-1000)【关键词】雷公藤内酯醇;银屑病模型;咪喹莫特;STAT3;增殖细胞核抗原【作者】朱震宇;周逸颉;陈霭如;吉丽娜;郑伟娟;华子春【作者单位】南京大学生命科学学院;医药生物技术国家重点实验室【正文语种】中文【中图分类】Q593【相关文献】1.雷公藤内酯醇对应激小鼠抑郁样行为及脑源性神经营养因子的调节作用 [J], 陈力超;潘笑宇;费宁;连乐竞;许笑笑;吴飞燕;潘建春2.雷公藤内酯醇诱导Balb／C小鼠自身移植物抗宿主病 [J], 陈捷;杨瑞芬3.咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的组织学及免疫学特征初步探究 [J], 黄钟洲;陈小彦;徐敏;艾雪忱;唐增奇;郭庆4.雷公藤内酯醇对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌炎症相关因子的影响 [J], 陈楠楠; 毕懿康5.雷公藤内酯醇LLDT-8在抗GBM抗体诱导小鼠肾炎中的疗效作用及对Fc受体介导淋巴细胞活化的调控机制 [J], 祁青;何世君;唐炜;左建平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

Vγ4~+γδ~+T细胞对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮炎的影响研究研究背景银屑病是一种常见病,其中最常见的类型为寻常型银屑病,临床主要表现为鳞屑性红斑。

遗传、感染、内分泌紊乱、免疫系统异常等多种致病因素均可导致银屑病的发生;皮损好发于面部、躯干及四肢,易反复,严重影响患者的身心健康。

T细胞主要参与细胞免疫,在识别抗原、分化为效应细胞以及记忆细胞等方面有着极其重要的作用。

分化的效应细胞具有分泌淋巴因子并与靶细胞结合发挥免疫效应的作用,分化的记忆细胞具有分化成效应T细胞的功能,这使得T细胞能够保护机体免于感染、物理、化学等多方面的伤害。

也正是由于T细胞具有重要的防御作用,因此T细胞参与的细胞免疫系统的紊乱与异常将导致自身免疫系统疾病发生的发生,如银屑病、系统性红斑狼疮、天疱疮等。

虽然目前对于这些免疫系统疾病的研究有很多,但关于Vγ4~+γδ~+T细胞在表皮内对银屑病发病的作用国内外均未见报道。

由于前期的文献已报道Vγ4T细胞对银屑病样皮炎有促进作用,结合我们前期预实验结果:清除BABL/c鼠体内的Vγ4T细胞后,咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎减轻。

在本课题中,我们利用Vγ4T细胞清除鼠,探讨Vγ4~+γδ~+T细胞在表皮内对银屑病样皮炎的作用;同时探讨了第二次利用咪喹莫特诱导银屑病样皮炎后真皮内的Vγ4~+γδ~+T细胞对银屑病样皮炎的影响。

我们推测在Vγ4T细胞清除鼠,无论是第一次利用咪喹莫特乳膏诱导的银屑病样皮炎还是第二次利用咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎均会减轻。

目的本课题研究拟通过构建不同状态下的小鼠银屑病样皮炎模型,探索Vγ4T细胞在银屑病样皮炎中发挥作用的机理,为进一步明确银屑病发病机制提供新的思路。

方法1.分组及构建Vγ4清除鼠雌性6-8周C57BL/6鼠随机分为两组,即野生组、Vγ4清除组;Vγ4清除组采用腹腔注射Vγ4清除抗体,野生组采用腹腔注射等体积PBS缓冲液;Vγ4清除组真皮内使用流式细胞仪检测不出Vγ4T细胞即为建模成功。

他克莫司通过抑制Th17治疗咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型樊超;向华国;陈宏翔【摘要】目的研究他克莫司对银屑病小鼠模型中Th17和相关细胞因子表达的影响.方法以咪喹莫特(imiquimod,IMQ)诱导建立银屑病样的小鼠模型.采用组织病理分析研究银屑病样皮损炎症状况;流式细胞仪分析循环血中T细胞的水平;免疫组化法检测细胞因子水平;Western blot法分析体外分离的T细胞中Jak/Stat3的表达;实时定量RT-PCR检测RORc-t mRNA的表达.结果他克莫司治疗能改善IMQ诱导的角质形成细胞的增殖,减少银屑病皮损处浸润的CD3+T细胞数,减少循环血中CD4+和CD8+T细胞数,并降低循环血中炎性细胞因子(IL-17A、TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-10、IL-4和IL-2)水平.此外,他克莫司可抑制Th17细胞分化和体外分离的T细胞分泌IL-17A,抑制Th17细胞中的Jak/Stat3信号通路,上调银屑病皮损处细胞信号抑制因子1(SOCS1)的表达.结论他克莫司对银屑病的治疗作用可能是通过抑制Th17相关炎症,减轻银屑病样皮损实现的.【期刊名称】《华中科技大学学报（医学版）》【年(卷),期】2016(045)005【总页数】7页(P484-489,495)【关键词】银屑病;他克莫司;辅助性T细胞17;咪喹莫特【作者】樊超;向华国;陈宏翔【作者单位】深圳市福永人民医院皮肤科,深圳518103;深圳市福永人民医院皮肤科,深圳518103;华中科技大学同济医学院附属协和医院皮肤科,武汉430022【正文语种】中文【中图分类】R758.63银屑病是一种多基因遗传背景下的免疫异常疾病，因其具有发病率较高和主要累及青壮年等特点而在皮肤科临床备受重视。

从病理学上看，角质形成细胞增殖和分化的异常，角质层中性粒细胞聚集所形成的Munro微脓疡以及真皮浅层血管周围以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润是银屑病的三个最主要的特点[1]。

咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的组织学及免疫学特征初步探究黄钟洲;陈小彦;徐敏;艾雪忱;唐增奇;郭庆【摘要】目的:研究咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的皮肤组织学及免疫学特征.方法:将20只BALB/c小鼠随机分为造模组和对照组,每组10只.所有小鼠背部剃毛后,造模组小鼠于背部皮肤及单侧耳部每日涂抹共计62.5 mg的5％咪喹莫特乳膏1次,连续7d,空白组小鼠涂抹等量凡士林.每日记录小鼠PASI评分及耳部厚度,并于末次涂药24 h后处死,取背部皮肤进行多聚甲醛固定,行HE染色及Ki-67免疫组化分析.取脾脏称重,以流式细胞术检测脾脏中的Th细胞亚群.结果:造模组小鼠于第二天逐渐出现红斑、鳞屑、皮肤增厚及耳部肿胀,其PASI评分随造模时间延长而增加.造模组小鼠皮损出现银屑病样病理改变,其表皮厚度明显增加(t=15.12,P＜0.001),且Ki-67阳性率明显上升,每个高倍镜视野下阳性细胞数目明显增加(t=10.50,P＜0.001).造模组小鼠脾脏重量和细胞计数较对照组明显增加,且Th1、Th17细胞亚群的比例及绝对计数较对照组明显上升(P值均＜0.05),Th2细胞比例及计数无明显变化(P值均＞0.05).结论:咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型可较好地模拟寻常型银屑病的临床、组织病理和免疫学特征,是一种有效的银屑病模型.【期刊名称】《皮肤性病诊疗学杂志》【年(卷),期】2019(026)002【总页数】6页(P61-66)【关键词】银屑病动物模型;咪喹莫特;Ki-67;Th1细胞;Th17细胞【作者】黄钟洲;陈小彦;徐敏;艾雪忱;唐增奇;郭庆【作者单位】中山大学孙逸仙纪念医院皮肤科,广东广州510120;中山大学孙逸仙纪念医院皮肤科,广东广州510120;中山大学孙逸仙纪念医院皮肤科,广东广州510120;中山大学孙逸仙纪念医院皮肤科,广东广州510120;中山大学孙逸仙纪念医院皮肤科,广东广州510120;中山大学孙逸仙纪念医院皮肤科,广东广州510120【正文语种】中文【中图分类】R758.63银屑病(psoriasis)，俗称牛皮癣，是皮肤科最常见的慢性炎症性皮肤病，在世界范围内患病率约为2%，在中国约0.5%[1]。

咪喹莫特诱导血热型银屑病模型体内微环境变化观察段亚倩;王宇航;张玉桐;马佳蕊;赵忻未;曹朵;赵菊梅;张正祥【期刊名称】《延安大学学报（医学科学版）》【年(卷),期】2024(22)1【摘要】目的评价采用干姜、肉桂灌胃结合咪喹莫特乳膏涂抹,建立血热型银屑病动物模型的皮损和体内微环境变化情况。

方法48只8周龄健康BALB/c小鼠(雌雄各半)随机分为正常对照组和银屑病模型组。

第1天起,模型组给予0.9 g/mL干姜、肉桂水煎液,按0.1 mL/10 g·d剂量灌胃,对照组给予生理盐水0.1 mL/10 g·d剂量灌胃,持续12 d。

灌胃第6天起,模型组背部涂抹咪喹莫特乳膏42 mg,对照组背部涂抹等量凡士林乳膏,每天观察皮损情况,持续7 d。

第13天,小动物麻醉机麻醉后,采集两组小鼠血液,ELISA法检测两组小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素21(interleukin-21,IL-21)、白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)含量变化;取两组小鼠背部涂抹处皮肤,制作病理学组织切片观察皮损情况。

结果模型组小鼠涂抹部位皮肤表皮增厚,表面凹凸不平,有红斑散在分布。

显微镜下显示表皮角化不全、棘层增厚、皮脂腺增多;血清中TNF-α、IFN-γ、IL-21、IL-17水平均升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。

结论BALB/c小鼠经干姜、肉桂水煎液灌胃12 d,期间第6天起背部加涂咪喹莫特乳膏,连续涂抹7d,成功构建的血热型银屑病动物模型,皮损变化和体内微环境改变符合银屑病患者特点。

【总页数】5页(P15-19)【作者】段亚倩;王宇航;张玉桐;马佳蕊;赵忻未;曹朵;赵菊梅;张正祥【作者单位】延安大学医学院【正文语种】中文【中图分类】R965【相关文献】1.凉血活血胶囊对咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮损的干预作用2.解毒药与凉血药配伍对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的干预作用3.树突状细胞在咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型中的表达及凉血解毒方的干预作用4.他克莫司通过抑制Th17治疗咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型5.清热凉血方对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型JAKs/STATs通路表达影响的研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

imq银屑病模型原理银屑病是一种慢性炎症性自身免疫性皮肤病，其发病机制至今尚不完全清楚。

在动物模型中，使用imiquimod（IMQ）诱导的银屑病模型被广泛应用于研究银屑病的发病机制和药物治疗。

IMQ是一种Toll 样受体7（TLR7）激动剂，可以模拟宿主的免疫应答，诱导炎症和角化异常，从而在小鼠皮肤上产生银屑病样病变。

IMQ银屑病模型的原理主要包括以下几个方面：首先，IMQ通过激活TLR7通路，刺激树突状细胞和其他抗原提呈细胞释放炎症因子，如TNF-α、IL-12、IL-23等。

这些炎症因子激活Th1、Th17和γδ T 细胞，促进炎症反应的发生。

其次，IMQ还可以直接作用于角质层细胞，引起细胞的增殖和角化异常，导致角质形成过程中的异常细胞迁移和沉积，最终形成鳞屑。

此外，IMQ还可以促进自身免疫反应，使免疫细胞对皮肤抗原产生过敏反应，增强自身免疫性皮肤病的发展。

IMQ银屑病模型的建立是通过在小鼠背部皮肤涂抹IMQ膏剂，每日重复使用一定剂量的IMQ，通常可以在短时间内形成银屑病样病变。

在建立模型的过程中，需注意不同小鼠品系的敏感性差异，以及IMQ浓度和使用频率对模型稳定性的影响。

此外，还需要加强对小鼠皮肤的观察，及时调整IMQ的使用剂量和频率，保证模型的稳定性和可重复性。

IMQ银屑病模型在银屑病研究中具有重要的应用价值。

首先，通过该模型可以模拟银屑病的发病过程，揭示其发病机制。

研究表明，IMQ诱导的银屑病模型与银屑病患者皮肤组织中的病变相似，具有角化异常、炎症细胞浸润和免疫反应异常等特点。

其次，IMQ银屑病模型还可以用于评价银屑病的治疗效果。

研究人员可以通过对模型小鼠施用不同药物或治疗方法，评价其对银屑病病变的影响，为新药研发和临床治疗提供依据。

近年来，IMQ银屑病模型已经被广泛用于银屑病的药物筛选和临床效果评价。

通过该模型可以快速评估各种抗炎药、免疫调节剂和生物治疗药物对银屑病的疗效和安全性，为临床治疗提供参考。

银屑片治疗小鼠银屑病的实验研究韩姗姗;李辉;党翔吉;牛倩倩;陈梦钰;焦海胜【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2014(036)012【摘要】目的考察银屑片(萆薢、当归、红花、栀子等)对银屑病样小鼠模型的治疗作用.方法采用咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样模型及鼠尾鳞片颗粒层模型,观察银屑片对皮损形态学变化及对表皮颗粒层形成的影响.结果咪喹莫特模型组小鼠皮肤出现红斑、鳞屑、皮肤增厚现象,皮损组织表现为棘层增厚、角化不全.与模型组相比,银屑片各剂量组小鼠银屑病样皮损症状减轻,银屑病皮损面积和疾病严重程度(PASI)评分降低,角化不全和表皮增厚现象得到改善,增殖细胞核抗原(PCNA)的表达有所降低.与正常对照组相比,银屑片各剂量组对小鼠鼠尾鳞片颗粒层的形成有促进作用.结论银屑片对上述小鼠银屑病模型具有一定的治疗作用.【总页数】4页(P2463-2466)【作者】韩姗姗;李辉;党翔吉;牛倩倩;陈梦钰;焦海胜【作者单位】兰州大学药学院,甘肃兰州730000;兰州大学药学院,甘肃兰州730000;兰州大学药学院,甘肃兰州730000;兰州大学药学院,甘肃兰州730000;兰州大学药学院,甘肃兰州730000;兰州大学第二医院药学部,甘肃兰州730030【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.丹槐银屑浓缩丸对小鼠银屑病模型的病理实验研究 [J], 王学军;陶以成;刘长发2.腺病毒介导的SOCS3对银屑病小鼠模型治疗的实验研究 [J], 曾凡杞;廖明;张志云;李永双;胡波;刘梦琼3.消银汤治疗银屑病小鼠模型的实验研究 [J], 史勇;李冬梅;肖井雷4.高分子微针导入联合卡泊三醇软膏治疗小鼠银屑病的实验研究 [J], 梁玲;陈博智;沈长兵;崔勇;郭新东5.复方银屑颗粒治疗小鼠银屑病模型的实验研究 [J], 谭梦晖;金若敏;庞惠芳;周志兰;韩正宾;许伟国因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

银屑病模型小鼠肠道 Th17细胞及相关细胞因子的研究胡文娟;闫玉红;陈海明;卢传坚【期刊名称】《广东医学》【年(卷),期】2016(037)013【摘要】目的：探讨咪喹莫特诱导的银屑病模型小鼠肠道免疫功能情况。

方法25只雌性SPF级C57BL／6小鼠随机分为正常组和模型组，模型组每天予5％的咪喹莫特乳膏62.5 mg外涂背部皮肤，连续5 d，正常组未予任何处理。

对模型组小鼠进行皮损矫正后的银屑病皮损面积和严重程度（PASI）评分及病理切片观察，流式细胞术检测肠系膜淋巴结Th17细胞表达情况，ELISA法检测肠黏膜细胞因子白细胞介素（IL）－17、IL－23、IL－6、肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的含量。

结果模型组背部皮肤出现典型的银屑病样皮疹改变；模型组脾脏指数较正常组升高（P＜0.05），肠黏膜IL－17、IL－23、IL－6、TNF－α的含量明显高于正常组（P＜0.05），肠系膜Th17细胞的表达也明显高于正常组（ P＜0.01）。

结论咪喹莫特诱导的银屑病模型小鼠存在肠道免疫功能异常，提示肠道免疫功能可能与银屑病的发病有关。

【总页数】4页(P1925-1928)【作者】胡文娟;闫玉红;陈海明;卢传坚【作者单位】广州中医药大学第二临床医学院广州510405;广东省中医院皮肤科广州510120;广东省中医院皮肤科广州510120;广东省中医院皮肤科广州510120【正文语种】中文【相关文献】1.槌果藤提取物对CIA小鼠模型Treg和Th17细胞及相关细胞因子的影响 [J], 应旭旻;周夏娟2.消银合剂对银屑病小鼠模型血清Th17细胞相关因子表达的影响 [J], 李舒佳;闵仲生;朱晓芳;赵莎3.银屑病中Th17细胞及相关细胞因子的作用及研究进展 [J], 杨建松4.Th17细胞及相关细胞因子在系统性硬化病小鼠模型中的表达及意义 [J], 雷玲;钟小宁;赵铖;米存东;李佳荃;曾晶晶5.不同中医证型银屑病外周血Th17/Treg细胞和相关细胞因子的表达及与病情的相关性 [J], 周振兴;周茹;洪燕英;郭宏林;孙立蕴;曹阳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。