高中生物课件3.1 菊花的组织培养

菠萝的愈伤组织
人参的愈伤组织
三、影响植物组织培养的因素
（1）植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会 影响实验结果 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
（2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条 件的要求相对特殊，需配置不同的培养基 MS培养基主要成分包括： A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等
（3）植物激素的影响 ①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和 赤霉素 生长素类： 2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、 吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、 吲哚丁酸（IBA）
细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤 （ 6－BA）、玉米素（ZT） 赤霉素类： 赤霉酸（GA3）
②生长素和细胞分裂素作用 植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在 的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势 使用顺序 先使用生长素，后使用 细胞分裂素 先使用细胞分裂素后使 用生长素 同时使用 实验结果 有利于细胞分裂，但不 利分化 细胞既分裂也分化 分化频率提高
2、配置培养基 ① 配制培养液
② 调PH
③培养基的分装 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此 不必添加植物激素 3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸 汽灭菌
（二）外植体消毒 1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝
2、消毒 ①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷 洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右 ② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数 为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外 植体取出，在无菌水中清洗 ③消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质 量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在 无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液

【答案】：D
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【配对练习 2】愈伤组织是生根还是生芽均与细胞分裂素 同生长素的比例有关。有利于诱导根的分化时，细胞分裂素/生 长素的比值( A．低 )
B．相等
D．不确定
C．高
解析：利于诱导根的分化时，生长素/细胞分裂素的比值要 高，即细胞分裂素/生长素的比值应该为低。 答案：A
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植物的组织培养技术
【例 1】用高度分化的植物细胞、组织或器官进行组织培
养可以形成愈伤组织，下列叙述错误的是( )
A．该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B．该愈伤组织的细胞没有全能性 C．该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的 D．该愈伤组织可以进行再分化形成丛芽
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【名师点拨】：植物组织培养过程：离体的植物细胞、组织
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与植物组织培养相关的基础知识 1．理论基础 (1)细胞具有全能性：生物体的每一个细胞都含有该物种所 特有的全套基因，都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 (2)细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构 和生物功能上形成稳定性差异的过程。 2．愈伤组织：原来已经分化的细胞，重新分裂，形成没有 组织结构、分裂快、结构疏松、颜色浅而透明、高度液泡化的
或器官―→愈伤组织―→根、芽―→植物体。离体的植物细胞、 组织或器官分裂形成愈伤组织，这一过程叫脱分化，脱分化离 不开细胞分裂。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高 度液泡化的无定形状态的薄壁细胞。愈伤组织经过再分化形成 丛芽，最后可培养成完整的植物体，这反映了愈伤组织的细胞 具有全能性。从离体的植物细胞、组织或器官形成愈伤组织， 虽然新个体还没有长出来，但是全能性依然存在。 【答案】：B
→栽培
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影响植物组织培养的因素 植物的种类 1．材料：________________ 、年龄、保存时间长短等。 2．营养 微量元素 。 (1)无机营养：大量元素、____________ (2)有机营养：甘氨酸、烟酸、____________ 、肌醇以及蔗 维生素 糖等。 生长素 3．激素：____________ 和细胞分裂素。 4．pH：________ 5.8 左右。 5．温度：18～22 ℃。 6．光照：每日光照 12 h。

No MS salts
No sign of regeneration from explant at all.
MS salts reduced to 0.47 g. l-1
Some root growth but reduced development of shoots
MS salts increased to 9.52 g. l-1
2018/5/22
Sucrose increased to 5%
Shoots have developed over the surface of the explant, along with roots from the lower surface. The result is comparable with the control medium
2018/5/22
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四、试剂和器材
1、材料 新鲜胡萝卜茎 2、试剂 MS培养基 10%亚硫酸溶液
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四、试剂和器材
MS培养基配制方法
2018/5/22
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四、试剂和器材
3、仪器 高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养箱 4、玻璃器皿 试剂瓶(50、100、1000ml)、三角瓶(100ml)、 刻度吸管(0.5、1、5、10ml)、培养皿 5、用具 镊子、解剖刀、接种针、记号笔、封口膜
五、操作步骤
培养基配制(I )—母液配制：
2、微量元素母液(100倍液) 分别称取 100 倍用量的微量无机盐，依次溶解 于800ml重蒸水中，加水定溶到1000ml。 3、铁盐母液（100倍液） 称取 100 倍用量的 Na2-EDTA( 乙二胺四乙酸钠 ) 和 FeSO4· 7H2O ，溶于 800ml 重蒸水中，最后定容 到1000ml。

接
件的要求往往不同。
3．生长素和细胞分裂素与植物细胞分裂、分化的关系
使用顺序
实验结果
先使用生长素，后使用细胞分 有利于细胞分裂，但细胞不 栏
裂素
分化
目 链
接
先使用细胞分裂素，后使用生 长素
细胞既分裂也分化
同时使用
分化频率高
生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对植物细胞 发育方向的影响：
生长素__＞____细胞分裂素：有利于根的分化。
接
请思考：
1．用组织培养技术繁殖菊花的基本原理和过程分别是
什么？
栏
2．影响菊花组织培养的因素有哪些？具体的实验操作
目 链
步骤包括哪些？
接
栏 目 链 接
一、植物组织培养的基本过程
1．原理
(1)细胞全能性：细胞具有_全__能__性___。生物体的每一个细
胞都含有该物种所特有的全套遗__传__信__息__，都有发育成为完整 栏
D．抗菌素对外植体消毒效果较好，消毒时间较长， 去除难易程度适中
变式 训练
解析：70%酒精对外植体消毒效果好，外植体放入其中
摇动2～3次，6～7 s，去除易；0.1%氯化汞有剧毒，消毒效
果最好，时间短，但消毒后难以去除残余的汞；10%过氧化
氢消毒效果好，且易分解成无毒化合物，用时5～15
min；抗
培养温度控制在_1_8_～__2_2_℃_，且每日用_日__光__灯___光照12 h。
栏
5．移栽和栽培
目
链
移 栽 前 用 流 水 清 洗 根 部 的培养___基_____ ， 将 幼 苗 移 植 到 接
_消__过__毒___的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗长