《菊花的组织培养》PPT课件

消毒
药剂的消毒效果
植物材料的耐受能力
(4)培养基中生长素用量和细胞分裂素用量的比例会影 响细胞的分化方向，生长素用量与细胞分裂素用量的比 值在________(填图中序号)过程中最低。(5)若干天后发 现有的装置中长出幼苗，有的装置中培养失败还长出很 多杂菌②菌落，试分析可能的原因：
_________________________________________________ ___________________________________。
用培养基的主要成分包括大量元素、微量元素、 ___植__物___细__胞以的及全植能物性激素，并常添加_____作为凝固剂。
(3)图中①表示__________过_____有处机理物，此时既要考虑_____________琼__脂_，
又要考虑______________________，然后才能接种培养。 脱分化
D.植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
【自主学习2】
思考1：植物激素中生长素和细胞分裂素的使用顺
序不同，对使用实顺验序结果有何影响？ 实验结果
先生长素， 后细胞分裂素
有利于细胞分裂但不 分化
先细胞分裂素， 后生长素
细胞既分裂 也分化
同时使用
分化频率提高
【自主学习2】
思考2：以下培养基出现的现象反应了什么问题？
思考4：在选取菊花茎段时，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？ 细胞细胞分化程度低，细胞分裂能力强，容 易形成愈伤组织
【学以致用】
1.某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染， 为查找污染原因设计了4个实验，实验条件除图示 外其他均相同。下列各图表示实验结果，据图可得 出的初步结论是( )
B

离体的 植物器官、 脱分化 愈伤 组织 组织、细胞
根芽
离体的 植物器官、 脱分化 愈伤 再分化 根芽 组织 组织、细胞
离体的 植物器官、 脱分化 愈伤 再分化 根芽 组织 组织、细胞
植 物 体
一 基础知识
（二）影响植物组织培养的因素
一 基础知识
（二）影响植物组织培养的因素
1. 外植体的选取
一 基础知识
（二）影响植物组织培养的因素
1. 外植体的选取
不同植物的组织培养难度不同
一 基础知识
（二）影响植物组织培养的因素
1. 外植体的选取
不同植物的组织培养难度不同
同一种植物的材料年龄、保存时间的长短 不同，组织培养难度不同
一 基础知识
（二）影响植物组织培养的因素
1. 外植体的选取
不同植物的组织培养难度不同
专题3
植物组织培养
课题1 菊花的组织培养
专题3
植物组织培养
课题1 菊花的组织培养
一 基础知识
专题3
植物组织培养
课题1 菊花的组织培养
一 基础知识
（二）影响植物组织培养的因素
离体的 植物器官、 组织、细胞
离体的 植物器官、 组织、细胞
愈伤 组织
离体的 植物器官、 组织、细胞
愈伤 组织
离体的 植物器官、 脱分化 愈伤 组织 组织、细胞
5）花药离体培养应用的是_____________技术 其理论基础是___________。 答案：植物组织培养 细胞的全能性
（二）影响植物组织培养的因素 3. 不同植物激素使用顺序和使用量
4. 消毒 在培养的整个过程中，都需要是一个 无菌环境 5. pH、温度、光照
菊花： pH=5.8 温度控制在18 ~ 22℃ 每日光照1ห้องสมุดไป่ตู้h

（三）接种 1、接种室消毒
污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关 重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒， 70％的酒精擦拭工 作台并用紫外线照射20分钟
2、无菌操作要求
所有的接种操作要在酒精灯火焰旁完成。 每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌。 接种后立即盖好瓶盖。
3、材料的切取和接种
（三）是否进行了统计、对照与记录
做好统计和对照，填好结果记录表，从第一步开始做好实 验记录。可以分组配制不同培养基，如诱导愈伤组织直接分化 丛芽的培养基，做不同培养基配方的实验比较。
（四）生根苗的移栽是否合格
关键是既要充分清洗根系表面的培养基，又不能伤及根系。 一般先使用无土栽培的办法，培养基要提前消毒。苗壮后再移 植到土壤。可通过统计成活率来衡量移栽水平。
三、结果分析与评价
（一）对接种操作中污染情况的分析
一般情况下，细菌污染可能是由接种人员造成的，如未戴 口罩，接种时说话，或手及器械消毒不严等。
（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化
观察实验结果，看是否培养出愈伤组织，记录愈伤组织的 出现时间。统计更换培养基后愈伤组织进一步分化成根和芽的 比例和时间。
思考：同专题2中微生物培养基的配方相
比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？
微无生机物物培养基以有机营养有为主机。物植物组
织培养MS培养基则以无机营养为主。
牛肉膏蛋白胨培养基
在MS培养基MS配培养制基好之后，常常需要加入植物激素
3、植物激素的影响
①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素
生长素类：2（，I4AA－）二、氯萘苯乙氧酸乙（酸N（AA2），、4－吲D哚）丁、酸吲（哚I乙BA酸） 细胞分裂素类：激 （动6素－（BAK）T）、、玉6米－素苄（基Z嘌T）呤 赤霉素类： 赤霉酸（GA3）

营养生殖包括：
4
扦插
5
嫁 接
6
压条
7
植物组织培养：
当植物细胞脱离了原来所在植物体的 器官或组织而处于离体状态时，在一定的 营养物质、激素（细胞分裂素、生长素）和其他外 界条件（温度、pH、光照、无菌等）的作用下，就 可能表现出全能性，发育成完整的植株， 这种培育新植株的方法，叫做植物的组织 培养。
②动物已分化的体细胞全能性受限制，但细 胞核仍具有全能性
植物细胞要表现全能性，步骤： 1.成熟细胞 → 分生细胞 → 胚状体 →完整植株 2.成熟细胞 → 愈伤组织 →出根出芽→完整植株
12
需要条件：
1.离体
2.一定的营养物质
3.植物激素：主要是生长素和细胞分裂素
4.适宜温度和pH 细胞全能性大小：
9
科学家在植物激素对器官建成，及改进培养基配方等方 面所取得的成果，极大地推动了组织培养技术的发展， 使这项技术可以实际应用于快速繁殖、品种改良等方面。 20世纪50年代初期，法国科学家利用组织培养技术成功 地脱除了染病大丽花植株所携带的病毒，从而为脱毒苗 的生产提供了一种可行的途径。现在凭借组织培养技术 来脱除植物的病毒已经在生产中广泛应用。20世纪50年 代中期，由于细胞分裂素的发现，使组织培养状态下外 植体芽的形态建成成为可人为调控的因素，从而使在组 织培养状况下进行植株再生成为现实。进入60年代以后， 组织培养技术在基础理论、实际操作方面不断取得进展， 相继在植物体细胞杂交、单倍体育种、种质资源保存、 快速育苗、人工种子制造、次生代谢物生产等方面有了 可喜的成果。时至今日，组织培养技术已经成为基础坚 实、易于掌握、应用面广的一种技术手段。
22
（二）影响植物组织培养的因素： 1．植物材料的影响：

一植物组织培养的基本过程
1、细胞分化
个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上 出现稳定性差异的过程
思考： 分化原因是什么？
在特定时间和空间条件下，基因 的选择性表达。
植物组织培养的基本过程
离体器官、 组织、细胞
脱分化
有丝分裂
根 愈 再分化 伤 组 芽 织
植 物 体
愈伤组织特点
细胞排列疏松无规则 高度液泡化
有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
以下培养基出现的现象说明什么问题？
生长素
/
细胞分裂素
高
利于根和愈伤组织的形成
适中 利于根芽的分化
3、激素配比对组织培养的影响
浓度、先后顺序、用量的比例
使用顺序
先生长素， 后细胞分裂素 先细胞分裂素， 后生长素
实验结果 易分裂但不分化 既分裂也分化 分化频率提高
本课题内容小结
细胞分化 植物体的组 织培养 基础知识 影响组织培养 的因素 细胞全能性
组织培养过程
营养 激素 环境条件
菊花 组织 培养
实验操作
MS固体培养基制备 外植体消毒 接种
培养
移栽 栽培
基本原理: 菊 花 的 组 织 培 养 基本过程:
细胞的全能性
脱分化 愈伤组织
再分化
影响因素： 材料性质、营养物质、 调节物质、环境条件 外植体的消毒 操作流程： 配制MS固体培 养基 栽培 移栽 培养 接种
土豆发芽
落地生根
1958，美国 斯图尔德
离体
细胞
组织培养
植株
在人工培养基上，离体培养植物的器 官、组织、细胞，并使其生长、增殖、分 化以及再生长成植株的技术。

2、配制培养基 ① 配制培养液 ② 调PH
③培养基的分装
3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起 进行高压蒸汽灭菌
（二）外植体消毒
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 2、消毒
①流水冲洗 ② 酒精处理 ③消毒液处理
（三）接种 1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接
（二）影响植物组织培养的因素 1.外植体的选取 ① 不同植物的组织培养难度 ② 同一种植物的不同组织培养难度 （ 材料的年龄、保存时间） 2.培养基的配制(MS培养基) 大量元素、微量元素、有机物、植物激素 （生长素、细胞分裂素 ）
a、植物激素使用顺序对分化的影响
使用顺序 结果
先生长素，后细胞分裂素
脱分化和再分化；
3.通过联系农业生产实际，培养学生活学
活用，理论联系实际的能力。
（一）植物组织培养的基本过程： 植物组织培养概念：在无菌和人工控制条件下， 将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配
置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产
生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 又称：植物离体培养
D.人们可以从愈伤组织中提取所需物质
2.植物组织培养过程中的脱分化是指( C )
A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞
B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程
C.植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生 愈伤组织的过程 D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程
3.胡萝卜的韧皮部细胞通过组织培养，能发育
先细胞分裂素，后生长素
有利于细胞分裂但不分化
细胞既分裂也分化
同时使用
分化频率提高
b、植物激素使用量对分化的影响 生长素/细胞分裂素比值 结果

第四十一页，共五十七页。
实验(shíyàn)具体操作过程
〔四〕培养(péiyǎng) 无菌箱中培养(péiyǎng)，定期消毒，保持适宜的温度， 光照
第四十二页，共五十七页。
➢接种后的锥形瓶放在培 养箱或培养(péiyǎng)室中培养
。 (péiyǎng) ➢培养条件：18-22℃，
每日光照12小时。
2、培养基的配制(pèizhì)(MS培养基) ➢大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S ➢微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co ➢有机物：甘氨酸、烟酸(yān suān)、肌醇、维生素、蔗糖等 ➢植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
第十五页，共五十七页。
你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物 培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显(míngxiǎn)
第四十九页，共五十七页。
实验(shíyàn)具体操作过程
〔六〕栽培(zāipéi) 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况， 适时浇水、施肥(shī féi)，直至开花
〔三〕接种(jiēzhòng) 1、接种(jiēzhòng)室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子， 接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾 使空气消毒，酒精擦洗工作台并用紫外线照射 20分钟。
第三十三页，共五十七页。
实验(shíyàn)具体操作过程
2、无菌操作(cāozuò)要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械
使后代(hòudài)细胞形成完整植株个体的能力。
植物细胞表现(biǎoxiàn)出全能性的条件：
①离体状态
②在一定的营养物质、激素和其他外界条件〔光 照、温度〕
第五页，共五十七页。
二、实验原理
3、细胞(xìbāo)分化 ①定义： 在植物的个体发育过程中，细胞(xìbāo)在形

人工种子
二、实验操作 （一）制备MS固体培养基
MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般 使用4。C保存配制好的培养基母液来制备
1、配置各种母液
①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓 缩100倍，常温保存
②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一 般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液
③用母液配制培养基时，需要根据各种母液 的浓缩倍数，计算用量
③实例 已分化的植物细胞，仍具有全能性 高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能 性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性， 这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的 遗传物质 ④全能性的比较: 受精卵>生殖细胞>体细胞
（3）植物组织培养 细胞离体 ①必要条件： 一定的营养物质、激素和其他 外界条件
③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例 对植物细胞发育方向的影响 生长素 > 细胞分裂素： 有利于根的分化 生长素 < 细胞分裂素： 有利于芽的分化，抑 制根的分化 生长素 ＝ 细胞分裂素： 促进愈伤组织生长
（4）pH、温度、光照
pH控制在5.8左右，温度控制在18－22。C,每 日用日光灯照射12h
②原理: ③相关概念: 外植体：从活植物体上切下进行培养的那部 分细胞、组织或器官 细胞的全能性
脱分化：
再分化：
愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡 化的、成无定形状态的薄壁细胞
人参的愈伤组织
菠萝的愈伤组织
2、影响植物组织培养的因素
（1）植物材料的选择
烟草和胡萝卜的组织培养较为容易
② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体 积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－ 7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗

菊花组织培养课件
REPORTING
• 菊花组织培养简介 • 菊花组织培养技术 • 菊花组织培养的步骤 • 菊花组织培养的优缺点 • 菊花组织培养的应用前景
目录
PART 01
菊花组织培养简介
REPORTING
WENKU DESIGN
组织培养的定义
01
组织培养是一种通过人工模拟植 物体内环境，将植物组织或细胞 培养成完整植株的技术。
基因工程与转基因植物
通过组织培养技术可以生产某些具有重要 价值的次生代谢产物，如药用植物的有效 成分等。
通过组织培养技术可以将外源基因导入植 物细胞或组织中，获得转基因植株，为植 物育种提供新的途径。
PART 02
菊花组织培养技术
REPORTING
WENKU DESIGN
材料的选取与处理
选取健康、无病虫害 的菊花植株作为外植 体来源，确保其遗传 稳定性。
抗病性强
通过组织培养，可以在短时间内大量繁殖菊花，大大缩短了繁 殖周期。
组织培养可以有效地保持菊花的优良性状，使得新繁殖的菊花 品种在形态、生长和开花等方面与原品种一致。
组织培养不受季节限制，可以在任何时间进行，使得菊花繁殖 更为灵活。
通过组织培养得到的菊花植株，抗病性强，生长健壮，易于管 理。
缺点
选择健康、无病虫害的菊花植株 ，采集生长旺盛的嫩茎或侧芽作
为外植体。
器具消毒
将实验器具、培养皿、玻璃瓶等彻 底清洗干净，并进行高温或紫外线 消毒，确保无菌操作。
培养基制备
根据实验需求，选择适宜的MS培养 基，添加适量的植物生长调节剂和 蔗糖，03
外植体接入
技术要求高
组织培养技术要求高， 需要专业的技术人员进 行操作，且设备投入较

3、菊花的组织培养实验操作
（1）制备MS固体培养基
（2）外植体消毒 （3）接种 （4）培养 （5）移栽 （6）栽培
五
巩固练习
课后检测题各组抢答，答对者加1分。答错不 扣分。
1．下列有关植物细胞与组织培养的叙述中，错误的 是( A ) A．花药、胚不能作为组织培养的材料 B．植物细胞具有全能性 C．外植体是指用于培养的植物组织或器官 D．外植体可诱导出愈伤组织 2．下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是( D ) A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生 长和分化 C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成 愈伤组织 D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的 愈伤组织基因相同
植物组织培养技术
课题1 菊花的组织培养
课堂PK游戏
全班分为四个小组，课堂分为五个环节
• • • • • 温故知新 吾日三省吾身 博学审问 归纳总结 巩固练习
小组累计得分最高组胜出
一
温故知新
学生复习以前学过的有关植物组织培养的 相关知识，并且预习新课内容，然后对老 师提出的问题作出回答，答对组得1分。
6 你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中 微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有 哪些明显的不同？
答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必 需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞 的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满 足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后 所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营 养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需 提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长 必须的大量元素和微量元素两大类。
3．植物组织培养依据的原理、培养过程的顺 序及诱导的植物激素分别是( A ) ①体细胞的全能性 ②离体的植物器官、组 织或细胞 ③根、芽 ④生长素和细胞分裂 素 ⑤生长素和乙烯 ⑥愈伤组织 ⑦再分 化 ⑧脱分化 ⑨植物体 A．①，②⑧⑥⑦③⑨，④ B．①，②⑦⑥⑧③⑨，⑤ C．①，⑥②⑨⑧③⑦，⑤ D．①，②⑨⑧⑥⑦③，④