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大鼠服用朱砂后脑内氨基酸类递质含量的变化丁敬华;吴辉;张颖花;陈再兴;畅蓓;石松田;姜泓【期刊名称】《化学研究》【年(卷),期】2010(021)005【摘要】研究了朱砂对大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的影响.将32只Wistar大鼠随机分为低、中、高剂量组和对照组,朱砂灌胃给药14天后,采用高效液相色谱法测定大鼠脑组织中谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)和牛磺酸(Tau)的含量,并计算兴奋毒性指数(EI)的变化.与对照组相比较,脑组织中氨基酸类神经递质含量均呈下降趋势,其中Asp和Gly的中、高剂量组差异有统计学意义(P<0.05),Tau和GABA的高剂量组有统计学差异(P<0.05),Glu 和EI所有剂量组均有统计学差异(P<0.05).朱砂对氨基酸类神经递质具有一定的抑制作用.【总页数】4页(P82-84,87)【作者】丁敬华;吴辉;张颖花;陈再兴;畅蓓;石松田;姜泓【作者单位】中国医科大学,公共卫生学院,辽宁,沈阳,110001;中国医科大学,公共卫生学院,辽宁,沈阳,110001;中国医科大学,公共卫生学院,辽宁,沈阳,110001;中国医科大学,药学院,辽宁,沈阳,110001;中国医科大学,公共卫生学院,辽宁,沈阳,110001;中国医科大学,公共卫生学院,辽宁,沈阳,110001;中国医科大学,公共卫生学院,辽宁,沈阳,110001【正文语种】中文【中图分类】O613.63【相关文献】1.补肾益智方对老年痴呆症大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响 [J], 侯小梅;魏晶晶;陈志琼2.雄黄染毒后大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的变化 [J], 霍韬光;畅蓓;李维凯;杨卉蕾;张颖花;姜泓3.REM睡眠剥夺后大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的变化 [J], 李求实;王升旭4.草问荆总生物碱对大鼠脑内氨基酸类神经递质含量和纹状体内乙酰胆碱含量的影响 [J], 季宇彬;高世勇5.龙胆碱对高热惊厥模型大鼠脑内氨基酸类神经递质含量及海马区GABA_B、Glu 受体的影响 [J], 姚素媛;刘学伟;刘树民因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定百草枯染毒后小鼠脑组织中8种单胺类神经递质的含量变化昝富文; 解裴育; 贾昊然; 刘迎; 马莉【期刊名称】《《理化检验-化学分册》》【年(卷),期】2019(055)010【总页数】6页(P1126-1131)【关键词】高效液相色谱法; 荧光检测器; 单胺类神经递质; 小鼠脑组织; 百草枯【作者】昝富文; 解裴育; 贾昊然; 刘迎; 马莉【作者单位】河北医科大学公共卫生学院石家庄 050017; 河北省环境与人群健康重点实验室石家庄 050017【正文语种】中文【中图分类】O657.7百草枯(1,1′-二甲基-4,4′-联吡啶)又称克芜踪,属于有机杂环类触杀型除草剂,是我国乃至世界上应用最广泛的广谱高效除草剂,用量仅次于草甘膦。
百草枯虽然除草效果好,对环境、土壤无污染,但对人毒性大,成人口服20%(质量分数,下同)百草枯溶液时,中毒者病死率高达95%,口服大于15 mL以上者鲜见存活报道[1]。
百草枯在人体内经历了氧化还原循环反应,直接或间接地触发活性氧(ROS)和氮物种(RNS)的产生和氧化应激,可导致器官损伤[2]。
对于百草枯中毒,目前没有特效的药物来治疗[3-4],最终死亡多因器官的衰竭[5-6]。
单胺类神经递质包括儿茶酚胺类化合物,主要有去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺及其相关代谢产物左旋多巴、二羟基苯乙酸、高香草酸、5-羟基吲哚乙酸。
有报道指出,百草枯可穿过血脑屏障,损害脑组织[7],特别是多巴胺能神经元,还可能通过影响多巴胺的合成、储存、转运和降解等环节破坏多巴胺递质的稳态,引发神经元凋亡,从而导致帕金森样症状[8]。
因此,测定脑组织中单胺类神经递质的含量,并研究其含量随着百草枯中毒时间的变化情况,对毒物引起的神经毒性的研究具有重要的意义。
目前,单胺类神经递质的测定方法有很多,主要有放射酶学法、高效液相色谱法(HPLC)[9]、毛细管电泳法[10]、电化学分析法[11]。
REM睡眠剥夺后大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的变化李求实;王升旭【期刊名称】《华南国防医学杂志》【年(卷),期】2002()3【摘要】目的:观察睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对大鼠脑组织γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(GLU)含量的影响。
方法:用小平台水环境法(flower pot technique)对大鼠进行连续96h快速动眼相(rapid eye movement,REM)睡眠剥夺,以正常饲养组及大平台组为对照,高效液相色谱法测定睡眠剥夺后大鼠额叶皮质、脑干、下丘脑等脑区GABA、GLU含量的变化。
结果:睡眠剥夺后大鼠各脑区脑组织GABA含量。
GABA/GLU值均较对照组明显增高(P<0.01),而GLU含量在脑干、下丘脑两脑区亦较对照组明显增高(P<0.05)。
结论:睡眠剥夺导致大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量及比例的改变,是睡眠剥夺过程的神经生物学机制之一。
【总页数】3页(P1-3)【关键词】睡眠剥夺;谷氨酸;y-氨基丁酸【作者】李求实;王升旭【作者单位】第一军医大学中医系针灸骨伤教研室【正文语种】中文【中图分类】Q42【相关文献】1.舒心安神膏对睡眠剥夺大鼠脑组织中单胺类神经递质含量的影响 [J], 徐福平;黄鹂;原嘉民;冯怡;杨志敏2.雄黄染毒后大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的变化 [J], 霍韬光;畅蓓;李维凯;杨卉蕾;张颖花;姜泓3.睡眠剥夺对大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的影响 [J], 王升旭;李求实4.荧光高效液相色谱法测定三种失眠模型大鼠脑组织氨基酸类神经递质的含量 [J], 涂星;郜红利;卢映;吴俊洪5.托吡酯对急性脑缺血后大鼠脑皮层氨基酸类神经递质含量的影响及神经保护作用[J], 刘姜冰;石静萍;赵薛旭;李作汉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
急性酒精中毒对清醒大鼠海马DG区部分氨基酸递质含量的影响许银花;崔松彪;潘德熙;吴光【期刊名称】《中风与神经疾病杂志》【年(卷),期】2009(26)4【摘要】目的本实验研究清醒状态下大鼠急性大量灌胃乙醇后海马齿状回(dentate gyrus,DG)区细胞外液部分氨基酸类神经递质含量的变化.方法将成年Wistar大鼠(270±30g)12只随机分成对照组(n=6)和酒精组(n=6).酒精组大鼠胃内灌入50%食用酒精,每次0.5ml,每10min灌1次,直到大鼠出现酒精中毒状态为止.对照组给予同等剂量的生理盐水.各组动物用脑内微量透析法及高效液相色谱法测定海马DG区细胞外液中的几种氨基酸类神经递质的含量,包括谷氨酸(glutamate,Glu)、天冬氨酸(aspartate,Asp)、谷氨酰胺(Glutamine,Gin)、甘氨酸(Glycine,Gly)、牛黄酸(Taurine,Tan)和丙氨酸(Alanine,Ala).结果与对照组相比,急性酒精中毒时大鼠海马DG区细胞外液中的Asp、Glu和Gly的含量均明显增加(P<0.05),而Gln、Tau和Ala含量无明显变化(P>0.05);结论急性酒精中毒与海马DG区Asp、Glu和Gly含量增加有关.【总页数】3页(P464-466)【作者】许银花;崔松彪;潘德熙;吴光【作者单位】延边大学附属医院神经内科,吉林,延吉,133000;延边大学附属医院神经内科,吉林,延吉,133000;延边大学医学院生理学教研室,吉林,延吉,133000;延边大学附属医院神经内科,吉林,延吉,133000【正文语种】中文【中图分类】R745.1【相关文献】1.双氢麦角碱对急性酒精中毒大鼠海马DG区氨基酸含量的影响 [J], 许银花;吴光;郑雪梅;崔松彪2.慢性酒精中毒对清醒大鼠相关脑区部分氨基酸含量变化的影响 [J], 郑雪梅;许银花;金东春;崔松彪;吴光3.酒精戒断对清醒大鼠海马DG区部分兴奋性氨基酸的影响 [J], 杨庆华;崔松彪;姜海英;金元哲;吴光4.磨牙缺失对大鼠海马氨基酸类神经递质含量的影响 [J], 江青松;吕亚林;吴敏节;姜婷;张建军5.长期给酒精对清醒大鼠海马部分兴奋性氨基酸含量变化的影响 [J], 兰艳;杨庆华;姜海英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中脑损伤后大鼠大脑皮层氨基酸递质的变化
常鹏飞;王忠诚;张颖
【期刊名称】《卒中与神经疾病》
【年(卷),期】1999(006)003
【摘要】目的：了解中脑损伤后大脑皮层氨基酸递质的变化及其与大脑功能状态
的关系。
方法：采用立体定向电解损伤大鼠中脑的模型，用高效液相色谱法测定中脑损伤后3小时、12小时大鼠脑皮层氨基酸含量。
结果：中脑损伤后3、12小时大脑皮层氨基酸含量明显降低，这种变化与大脑功能的抑制性变化有一致性。
结论：中脑损伤后大鼠脑皮层氨基酸递质明显减少，可能与大脑皮层抑制性变化有关。
【总页数】1页(P173)
【作者】常鹏飞;王忠诚;张颖
【作者单位】
【正文语种】中文
【相关文献】
1.雄黄染毒后大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的变化 [J], 霍韬光;畅蓓;李维凯;杨卉蕾;张颖花;姜泓
2.中脑损伤后大鼠大脑皮层氨基酸递质的变化 [J], 常鹏飞;王忠诚;张颖
3.急性颅脑损伤后脑脊液中递质类氨基酸变化 [J], 水涛;只达石;张赛
4.致痫大鼠脑脊液中氨基酸类神经递质含量的变化 [J], 王炜;汪卫国;何善述;朱家祥;周厚伦;朱长庚
5.急性乙醇中毒大鼠大脑皮层氨基酸类递质的变化及吡拉西坦的干预研究 [J], 郝
小娇;程丽霞;程秀臻
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葛根素对急性乙醇中毒大鼠脑内神经递质及行为学的干预作用崔淑芹【摘要】目的:检测急性乙醇中毒大鼠经葛根素干预后多脑区(皮层、小脑、海马和纹状体)超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及谷氨酸(Glu)的含量,观察大鼠的行为学变化,探讨葛根素对急性乙醇中毒大鼠的干预作用.方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、乙醇中毒组(高、中、低剂量组)和葛根素干预组(干预中剂量乙醇中毒),检测各组大鼠皮层、小脑、海马和纹状体内SOD、MDA、Glu含量和转棒实验.结果:与对照组比较,乙醇中毒组大鼠各脑区SOD活性和Glu含量降低,MDA含量升高(P ＜0.05或P＜0.01),且SOD和MDA的变化具有剂量依赖性,大鼠棒上停留时间缩短(P＜0.01)；与乙醇中毒组比较,葛根素干预组大鼠各脑区SOD活性和Glu含量升高,MDA降低(P＜0.05或P＜0.01),其中海马的变化幅度最大,大鼠棒上停留时间延长(P＜0.05或P＜0.01).结论:葛根素对急性乙醇中毒大鼠脑氧自由基和Glu有干预作用,对乙醇中毒大鼠行为学有调控作用.【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》【年(卷),期】2012(038)004【总页数】4页(P665-668)【关键词】急性乙醇中毒;多脑区;氧自由基;谷氨酸;行为学;葛根素【作者】崔淑芹【作者单位】德州学院医学系,山东德州253023【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R332有研究[1-3]表明：乙醇中毒与氧化应激密切相关，后者是指体内活性氧的产生与清除失衡所导致的组织和细胞的氧化损伤，丙二醛(malondialdehyde,MDA)是体内氧自由基攻击生物膜中的多价不饱和脂肪酸引发过氧化作用的最终产物，可引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合，具有细胞毒性，其含量高低间接反映机体细胞受自由基攻击的严重程度，超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)是体内重要的抗氧化酶，其活性的高低可反映机体清除氧自由基的能力。
戊四氮致痫大鼠脑内氨基酸含量的测定
张宇浩;汪昕
【期刊名称】《中国临床医学》
【年(卷),期】2006(013)006
【摘要】目的:探讨氨基酸类神经递质在癫痫发病中的作用.方法:采用反相高效液
相色谱(HPLC)荧光法检测了戊四氮(PTZ)致痫大鼠和正常大鼠海马、皮层脑组织中Asp、Glu、GABA、Gly的含量变化.结果:PTZ致痫组与正常对照组相比,海马Asp、Glu及GABA含量略增高,但统计学上无显著差异(P＞0.05);皮层Asp和Glu含量
明显增高(P＜0.05),GABA略增高,但统计学上无显著差异(P＞0.05).结论:兴奋性和抑制性氨基酸在癫痫发病中具有重要的作用,可能参与癫痫的发生和发展.
【总页数】2页(P877-878)
【作者】张宇浩;汪昕
【作者单位】复旦大学附属中山医院神经内科,上海,200032;复旦大学附属中山医
院神经内科,上海,200032
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.褪黑素、5-羟色胺对戊四氮致痫大鼠脑内一氧化氮合酶表达的影响 [J], 刘艳;金延安;刘俐敏
2.天麻素对戊四氮致痫大鼠脑内血管的保护作用 [J], 穆朝娟;张涛
3.不同剂量氯喹对戊四氮慢性致痫大鼠脑内谷氨酸受体2表达的影响 [J], 荆丽丽;谭宏伟;于静;杨冰;吴淑华;李建民
4.氯喹对戊四氮致痫大鼠脑内神经递质表达的影响 [J], 于宁;赵玉红;荆丽丽;吴淑华;曹璋
5.天麻素穴位注射对戊四氮致痫模型大鼠脑内海马区凋亡调控因子Bcl-2、Caspase-3表达的影响 [J], 肖飞; 刘鹏; 程光宇; 毕海洋; 于楠楠
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牛磺酸对染锰所致大鼠丘脑氨基酸类神经递质改变的干预作用耿立敏;郭松超;雷丹青;陆彩玲;何以源【摘要】目的:探讨牛磺酸对染锰所致大鼠丘脑氨基酸类神经递质改变的干预作用.方法:按随机方法将SD大鼠分为空白对照组、染锰组、预防组、治疗组和治疗对照组,共5组.染锰组、预防组、治疗组和治疗对照组大鼠腹腔注射MnCl2·4H2O 20 mg/kg·d-1,其中预防组大鼠同时腹腔注射牛磺酸200 mg/kg·d-1,空白对照组腹腔注射等容量生理盐水,连续8周,每周5 d,染锰组、预防组和空白对照组试验终止.然后,治疗组大鼠继续腹腔注射牛磺酸200 mg/kg·d-1,治疗对照组大鼠腹腔注射等容量生理盐水,连续8周.最后一次注射后24 h处死大鼠,切取丘脑.用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定样品中的蛋白含量,用高效液相色谱(HPLC)紫外检测法测定大鼠脑丘脑谷氨酸(glutamic acid,Glu)、谷氨酰胺(glutamine,Gln) 和γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA) 的含量.结果:染锰8周后,染锰组Glu含量比空白对照组含量高,差异有统计学意义(P<0.05);染锰组Gln和GABA含量比空白对照组低,差异有统计学意义(P<0.05).牛磺酸预防8周时,预防组Glu含量比染锰组含量低,差异有统计学意义(P<0.05);预防组Gln和GABA含量比染锰组高,差异有统计学意义(P<0.05).牛磺酸治疗8周后,治疗组Glu含量均比治疗对照组含量低,治疗组Gln和GABA含量均比治疗对照组含量高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:锰可致大鼠丘脑Glu升高,Gln和GABA减低,牛磺酸对锰所致大鼠丘脑Glu、Gln和GABA的改变有干预作用.%To explore the effects of taurine on amino acid neurotransmitters in thalamus of manganese-exposed rats. Methods: Male Sprague Dawley rats were randomly divided into 5 groups. The rats in manganese chloride, prevent, treated, and control groups were injected i. p. with MnCl2 o 4H2O 20 mg/kg o d-1 and the rats in blank group wereinjected with saline 5 d/week for 8 weeks. At the same time, the rats in prevent group were injected with taurine 200 mg/kg o d-1. And then, the rats in treated group were injected with taurine 200 mg/kg o d-1 and the rats in control group were injected with saline 5 d/week for 8 weeks. Twenty-four hours after the last injection, the rats were executed and the thalamus was cut off. Protein concentrations in the thalamus were determined using a BCA protein assay kit, and the concentrations of glutamic acid (Glu), glutamine (Gin) and gamma-aminobutyric acid (GABA) in the thalamus were detected by the high performance liquid chromatography (HPLC) ultraviolet detection technique. Results : After 8 weeks of manganese treatment, the manganese chloride group had higher Glu concentration than the blank group ( P <0. 05) and the blank group had higher concentration of Gin and GABA than thernmanganese chloride group (P < 0. 05). After 8 weeks of taurine prevention, the manganese chloride group had higher Glu concentration than the prevent group ( P <0. 05) and the prevent group had higher concentration of Gin and GABA than the manganese chloride group ( P <0. 05). After 8 weeks of taurine treatment, the control group had higher Glu concen-rntration than the treated group ( P <0. 05) and the treated group had higher concentration of Gin and GA-BA than the control group ( P <0. 05). Conclusion: The neurotransmitter levels of Glu are increased and the neurotransmitters levels of Gin and GABA are decreased in thalamus of rats by the manganese exposure. The taurine has the intervention effect to thetransformation of Glu, Gin and GABA neurtrosis in thalamus of manganese-exposed rats.【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】2012(029)005【总页数】4页(P660-663)【关键词】牛磺酸;锰;丘脑;氨基酸类神经递质【作者】耿立敏;郭松超;雷丹青;陆彩玲;何以源【作者单位】广西医科大学公共卫生学院,南宁,530021;广西医科大学实验动物中心;广西医科大学科学实验中心;广西医科大学公共卫生学院,南宁,530021;广西医科大学公共卫生学院,南宁,530021【正文语种】中文【中图分类】R-332锰（Manganese，Mn）是正常机体所必需的微量元素，也是常见的神经性毒物。
第２３卷第２期化 学 研 究中国科技核心期刊２０１２年３月ＣＨＥＭＩＣＡＬ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ｈｘｙｊ＠ｈｅｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ雄黄染毒后大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的变化霍韬光，畅 蓓，李维凯，杨卉蕾，张颖花，姜 泓＊（中国医科大学公共卫生学院，辽宁沈阳１１０００１）摘 要：研究了雄黄对大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的影响．将３２只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为对照组（０．５％ＣＭＣ－Ｎａ）以及低剂量（０．３ｇ／ｋｇ）、中剂量（０．９ｇ／ｋｇ）、高剂量（２．７ｇ／ｋｇ）雄黄染毒组，通过连续灌胃给予雄黄混悬液两周．采用高效液相色谱－柱前衍生化法测定了大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的变化．结果表明，与对照组比较，低剂量组大鼠脑组织中丝氨酸、甘氨酸和γ－氨基丁酸含量明显增加．中、高剂量组大鼠脑组织中同型半胱氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸和天冬氨酸含量明显比对照组的低．总体而言，雄黄可对大鼠脑组织氨基酸类神经递质产生影响，氨基酸类神经递质可能是雄黄毒性作用的靶点之一．关键词：雄黄；大鼠；脑组织；氨基酸类神经递质中图分类号：Ｏ ６１３．６３文献标志码：Ａ文章编号：１００８－１０１１（２０１２）０２－００８７－０４Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｒｅａｌｇａｒ ｏｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓｉｎ ｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｒａｔｓＨＵＯ Ｔａｏ－ｇｕａｎｇ，ＣＨＡＮＧ Ｂｅｉ，ＬＩ Ｗｅｉ－ｋａｉ，ＹＡＮＧ Ｈｕｉ－ｌｅｉ，ＺＨＡＮＧ Ｙｉｎｇ－ｈｕａ，ＪＩＡＮＧ Ｈｏｎｇ＊（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ，Ｃｈｉｎａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１０００１，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｒｅａｌｇａｒ ｏｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ ｉｎ ｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓｏｆ ｒａｔｓ ｗａｓ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．３２Ｗｉｓｔａｒ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｃａｔｅｇｏｒｉｚｅｄ ｉｎｔｏ ｃｏｎｔｒｏｌ，ｌｏｗ ｄｏｓａｇｅ，ｍｏｄｅｒａｔｅ ｄｏｓａｇｅ，ａｎｄ ｈｉｇｈ ｄｏｓａｇｅ ｒｅａｌｇａｒ ｔｒｅａｔｅｄ ｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅ ｒｅａｌｇａｒ ｔｒｅａｔｅｄ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｒｅａｌｇａｒ ｂｙ ｇａｓｔｒｉｃ ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ａｔ ａ ｄｏｓａｇｅ ｏｆ ０．３ｇ／ｋｇ，０．９ｇ／ｋｇ，ａｎｄ ２．７ｇ／ｋｇ，ａｎｄｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｏｒａｌｌｙ ｇｉｖｅｎ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ０．５％ｓｏｄｉｕｍ ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ（ＣＭＣ－Ｎａ）ｆｏｒ ２ｗｅｅｋｓ．Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｔｈｅｒａｔｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｍｅａｎｓ ｏｆ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｉｎ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈｐｒｅｃｏｌｕｍｎ ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｓ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｓｅｒｉｎｅ，ｇｌｙｃｉｎｅ ａｎｄγ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄ ｉｎ ｌｏｗ ｄｏｓｅ ｒｅａｌｇａｒ ｔｒｅａｔｅｄ ｇｒｏｕｐ ａｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｅｌｅｖａｔｅｄ ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ；ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ａｓｐａｒｔａｔｅ，ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，ｇｌｕｔａｍｉｎｅ ａｎｄ ｓｅｒｉｎｅ ｉｎ ｍｏｄｅｒａｔｅ ａｎｄ ｈｉｇｈｄｏｓｅ ｒｅａｌｇａｒ ｔｒｅａｔｅｄ ｇｒｏｕｐｓ ａｒｅ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．Ｉｎ ｏｎｅｗｏｒｄ，ｒｅａｌｇａｒ ｈａｓ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ ｉｎ ｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｒａｔｓ，ａｎｄ ａｍｉｎｏａｃｉｄ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒ ｍａｙ ｂｅ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｘｉｃ ｔａｒｇｅｔｓ ｏｆ ｒｅａｌｇａｒ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｒｅａｌｇａｒ；ｒａｔ；ｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓ；ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ 雄黄为硫化物类矿物，作为药用在我国已有上千年的历史，主要成分为二硫化二砷（Ａｓ２Ｓ２）［１］．近些年，收稿日期：２０１１－０７－２３．基金项目：国家自然科学基金（８１０７３１４４）；辽宁省自然科学基金（２００９２１３３）；辽宁省教育厅高等学校科研资助项目（Ｌ２０１０７０８）．作者简介：霍韬光（１９８３－），女，讲师，博士，研究方向：含重金属矿物药毒作用机制研究．＊通讯联系人．８８ 化 学 研 究２０１２年由于未能科学合理的应用，由雄黄引起的不良反应或慢性砷中毒事件时有报道［２－３］．研究表明，砷可引起认知障碍、智力低下等神经行为异常［４］，因此，雄黄及含雄黄中成药对中枢神经系统的毒性引起了人们的广泛关注．氨基酸类神经递质在中枢神经系统中具有重要作用．已有文献报道砷可影响脑组织中氨基酸类神经递质含量［５－６］，而雄黄对脑组织中氨基酸类神经递质的影响还未见报道．作者采用高效液相色谱法测定雄黄染毒后大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的变化，为探讨雄黄对中枢神经系统的毒性机制提供依据．１ 实验部分１．１ 药品、材料与仪器市售雄黄（成大方圆药店），天冬氨酸（Ａｓｐ）、谷氨酸（Ｇｌｕ）、同型半胱氨酸（Ｈｃｙ）、谷胺酰胺（Ｇｌｎ）、丝氨酸（Ｓｅｒ）、甘氨酸（Ｇｌｙ）、牛磺酸（Ｔａｕ）、γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）对照品、丹磺酰氯（Ｓｉｇｍａ公司），乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯．初断乳Ｗｉｓｔａｒ大鼠３２只（中国医科大学实验动物部），体重５０±１０ｇ，雌雄各半．高效液相色谱仪（美国Ｗａｔｅｒｓ公司），包括６００Ｅ型输液泵，２４８７型紫外检测器，Ｅｍｐｏｗｅｒ ２色谱数据工作站．ＥＲ－１８２Ａ全自动电子天平（十万分之一）（日本Ａ＆Ｄ公司）；组织匀浆器（ＩＫＡ广州仪科实验室技术有限公司）；３Ｋ－１８超速冷冻离心机（Ｓｉｇｍａ公司）；ｐＨ－３ｃ型酸度计（上海精密科学实业有限公司）；ＸＷ－８０Ａ旋涡混合器（上海精科实业有限公司）；Ｌ－１２８Ｂ型试管氮吹浓缩仪（北京来亨科贸有限公司）；Ｅａｓｙｐｕｒｅ纯水系统（美国Ｂａｒｎｓｔｅａｄ公司）．１．２ 色谱条件色谱柱为Ｔｈｅｒｍｏ ＯＤＳ ｃｏｌｕｍｎ（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ ｉｄ，５μｍ）；流动相Ａ相为磷酸二氢钠－磷酸氢二钠缓冲液（ｐＨ ７．２），Ｂ相为乙腈，梯度洗脱；０～７ｍｉｎ，Ｂ相由１４％变化至２０％；７～１４ｍｉｎ，Ｂ相由２０％变化至２７％；１４～２５ｍｉｎ，保持Ｂ相２７％．检测波长２５４ｎｍ，柱温２５℃，流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ，进样量２０μＬ．１．３ 标准储备液的配制精密称取０．１ｍｍｏｌ氨基酸对照品，用碳酸钠缓冲液（ｐＨ ９．５）溶解并定容至１００ｍＬ容量瓶中，得浓度为１ｍｍｏｌ／Ｌ的氨基酸储备液．１．４ 动物分组及给药Ｗｉｓｔａｒ大鼠３２只，体重５０±１０ｇ，雌雄各半．按体重随机分成４组，每组８只．以０．５％羧甲基纤维素钠（ＣＭＣ－Ｎａ）水溶液为混悬介质，对照组（０．５％ＣＭＣ－Ｎａ）、实验用药组（０．３ｇ／ｋｇ，０．９ｇ／ｋｇ，２．７ｇ／ｋｇ）灌胃给药，每日１次，连续给药２周．在动物灌胃期间每３天称重１次，调节灌胃剂量．所有动物均自由饮水和进食普通饲料．最后一次灌胃２ｈ后，１０％水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，迅速开颅取大脑（冰浴下进行）．１．５ 样品处理、测定与统计分析称取脑组织０．１ｇ加入２ｍＬ乙腈匀浆２ｍｉｎ，于４℃离心１０ｍｉｎ（１３ ０００ｒ／ｍｉｎ），取出上清液，在氮气流下吹干（４０℃）．残渣溶于０．４ｍＬ碳酸钠缓冲液中（ｐＨ ９．５），涡旋１ｍｉｎ，加入０．２ｍＬ丹磺酰氯（１０ｍｍｏｌ／Ｌ），涡旋３０ｓ，在６５℃水浴避光反应２５ｍｉｎ．冷至室温后过０．２２μｍ滤膜，进样２０μＬ，测定各组大鼠脑组织中氨基酸类神经递质的含量．采用ＳＰＳＳ统计软件处理，数据用ｍｅａｎ±ＳＤ表示，用单因素方差分析（ＡＮＯＶＡ）比较各染毒组与对照组大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的统计学差异，以Ｐ＜０．０５作为检验的显著性差异．２ 结果与讨论２．１ 色谱行为在上述色谱条件下进样分析，标准溶液和脑组织样品的色谱图见图１．由图１可见，８种氨基酸类神经递质在２５ｍｉｎ内实现了完全分离，脑组织中内源性物质不干扰测定．２．２ 标准曲线与精密度精密量取储备液适量，用碳酸钠缓冲溶液稀释，得标准系列溶液．在上述色谱条件下，取８种氨基酸类物质标准溶液经丹磺酰氯衍生化后进样分析．以各组分标准物质的峰面积为纵坐标（Ｙ），以各组分的浓度为横坐标（Ｘ，μｇ／Ｌ）进行回归运算，得到线性回归方程（见表１）．在上述色谱条件下，连续６次测定同一标准溶液，计算６次测定所得峰面积的ＲＳＤ值，结果ＲＳＤ均小于２％，表明仪器精密度良好．第２期霍韬光等：雄黄染毒后大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的变化８９（Ａ）标准溶液（Ｂ）脑组织样品图１ 氨基酸类神经递质色谱图Ｆｉｇ．１ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ表１ 氨基酸类神经递质标准曲线Ｔａｂｌｅ １ Ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅｓ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ氨基酸范围（μｍｏｌ／Ｌ）线性方程ＲＡｓｐ ０．５～１００ Ｙ＝７７６．５ Ｘ－４２５．１ ０．９９７ ６Ｇｌｕ ０．５～１００ Ｙ＝９２４．２ Ｘ－６１３．８ ０．９９８ ９Ｈｃｙ ５０～８００ Ｙ＝７４９．３ Ｘ－４ １４９ ０．９９９ １Ｇｌｎ １０～２００ Ｙ＝８００．３ Ｘ＋２ ０２０ ０．９９９ ３Ｓｅｒ ０．５～１００ Ｙ＝１ ０３１ Ｘ＋９６．９０ ０．９９８ １Ｇｌｙ ０．５～１００ Ｙ＝３ ２０５ Ｘ－５９５．７ ０．９９９ ６ＧＡＢＡ ５０～８００ Ｙ＝１ ４９２ Ｘ－１ ８３１ ０．９９９ ９Ｔａｕ ５０～８００ Ｙ＝１ ０６４ Ｘ＋１２ ４２１ ０．９９７ ３２．３ 雄黄染毒大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的变化对照组、雄黄染毒组大鼠脑组织中氨基酸类神经递质的含量见表２．经统计分析发现低剂量雄黄染毒组大鼠脑组织中Ｓｅｒ、Ｇｌｙ和ＧＡＢＡ含量明显增加．中、高剂量雄黄染毒组大鼠脑组织中Ｈｃｙ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ和Ａｓｐ含量明显低于对照组．表２ 脑组织中氨基酸类神经递质含量Ｔａｂｌｅ ２ Ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ ｉｎ ｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓＡｓｐ Ｇｌｕ Ｈｃｙ Ｇｌｎ对照组（ｎ＝８）２．２７±０．８２ ９．５６±１．９４ １ ２７４．６６±１５９．２５ ６３．７９±６．４９低剂量组（ｎ＝８）２．８７±０．５３ ７．８５±１．９８ １ ４４５．３０±７４．６６ ９０．７８±２４．１６中剂量组（ｎ＝８）２．３４±０．５１ ７．４２±１．８０ １ ０３６．７８±１５７．２１＊４９．８５±６．７８＊高剂量组（ｎ＝８）０．８３±０．２２＊８．８９±３．３５ ６６４．１２±４２５．１５＊４０．５４±７．７７＊Ｓｅｒ Ｇｌｙ ＧＡＢＡ Ｔａｕ对照组（ｎ＝８）６．０６±０．８０ ９．４１±１．４９ ５７．３７±３．９８ ３２２．３３±３０．２３低剂量组（ｎ＝８）１４．５６±２．６１＊１６．３９±２．２１＊８９．２６±１５．４３＊３９５．５０±６６．５６中剂量组（ｎ＝８）５．０６±０．７３＊１０．９６±１．３７ ５２．６５±９．１８ ２９２．８７±３７．８７高剂量组（ｎ＝８）３．０３±１．８３＊５．５９±２．８２ ５３．０６±１３．２３ ３０４．３７±７３．５３ ＊Ｐ＜０．０５２．４ 衍生化条件的选择影响衍生化反应效率的因素包括衍生化缓冲液的ｐＨ、反应时间、衍生化反应温度和衍生化试剂浓度．作者在实验中考察了衍生化缓冲盐种类（碳酸盐和磷酸盐）、ｐＨ（９．０～１１．０）、衍生化反应温度（５０～７０℃）、反应时间（１５～４５ｍｉｎ）和衍生化试剂浓度，结果发现以ｐＨ ９．５的碳酸盐为衍生化缓冲液，与０．２ｍＬ １０ｍｍｏｌ／Ｌ的丹磺酰氯在６５℃反应２５ｍｉｎ的条件下各氨基酸的衍生化效率最大．２．５ 实验结果分析氨基酸类神经递质在中枢神经系统中发挥重要作用．本研究发现低剂量雄黄染毒组大鼠脑组织中ＧＡ－ＢＡ和Ｇｌｙ含量增加．ＧＡＢＡ和Ｇｌｙ是中枢神经系统主要的抑制性神经递质，然而，有文献报道未成熟大鼠９０ 化 学 研 究２０１２年脑中ＧＡＢＡ和Ｇｌｙ发挥兴奋性作用［７］，所以低剂量雄黄染毒组大鼠脑组织中ＧＡＢＡ和Ｇｌｙ含量的增加可能提示低剂量的雄黄具有兴奋性神经毒性．Ａｓｐ和Ｇｌｎ为中枢神经系统主要的兴奋性神经递质，它们能激活ＮＭＤＡ受体，在学习和记忆中发挥重要作用．实验中发现中、高剂量雄黄染毒组大鼠脑组织中Ａｓｐ和Ｇｌｎ含量明显低于对照组，提示中、高剂量雄黄可能对学习、记忆能力产生影响．本研究表明，氨基酸类神经递质可能是雄黄神经毒性作用的靶点之一．参考文献：［１］国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）［Ｓ］．北京：中国医药科技出版社，２０１０：３１６．［２］郭集军，潘金城．长期大量服用牛黄解毒片致慢性砷中毒及黑皮病１例报告［Ｊ］．中国职业医学，２００３，３０（２）：７．［３］刘恩生，李玉珍．含雄黄中成药致慢性砷中毒２例［Ｊ］．药物不良反应杂志，２００５，（４）：２７６．［４］ＲＯＤＲＩＧＵＥＺ Ｖ Ｍ，ＬＩＭＯＮ－ＰＡＣＨＥＣＯ Ｊ Ｈ，ＣＡＲＲＩＺＡＬＥＳ Ｌ，ｅｔ ａｌ．Ｃｈｒｏｎｉｃ ｅｘｐｏｓｕｒｅ ｔｏ ｌｏｗ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｉｎｏｒｇａｎｉｃ ａｒｓｅｎｉｃｃａｕｓｅｓ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｓｙｓｔｅｍｓ ｉｎ ｔｈｅ ａｌｂｉｎｏ ｒａｔ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｏｌ Ｔｅｒａｔｏｌ，２０１０，３２（６）：６４０－６４７．［５］ＮＡＧＡＲＡＪＡ Ｔ Ｎ，ＤＥＳＩＲＡＪＵ Ｔ．Ｒｅｇｉｏｎａｌ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｂｒａｉｎ ｂｉｏｇｅｎｉｃ ａｍｉｎｅｓ，ｇｌｕｔａｍａｔｅ，ＧＡＢＡ，ａｎｄＧＡＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｄｕｅ ｔｏ ｃｈｒｏｎｉｃ ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｏｒｇａｎｉｃ ａｒｓｅｎｉｃ ｉｎ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ａｎｄ ａｄｕｌｔ ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｂｕｌｌ Ｅｎｖｉｒｏｎ Ｃｏｎｔａｍ Ｔｏｘｉ－ｃｏｌ，１９９３，５０（１）：１００－１０７．［６］ＮＡＧＡＲＡＪＡ Ｔ Ｎ，ＤＥＳＩＲＡＪＵ Ｔ．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｏｐｅｒａｎｔ ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｂｒａｉｎ ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ ｅｓｔｅｒａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｒａｔｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇｃｈｒｏｎｉｃ ｉｎｏｒｇａｎｉｃ ａｒｓｅｎｉｃ ｉｎｔａｋｅ［Ｊ］．Ｈｕｍ Ｅｘｐ Ｔｏｘｉｃｏｌ，１９９４，１３（５）：３５３－３５６．［７］ＣＬＡＲＫ Ｄ Ｌ，ＢＯＵＴＲＯＳ Ｎ Ｎ，ＭＥＮＤＥＺ Ｍ Ｆ．Ｔｈｅ ｂｒａｉｎ ａｎｄ ｂｅｈａｖｉｏｒ［Ｍ］．１００Ｂｒｏｏｋ Ｈｉｌｌ Ｄｒｉｖｅ Ｗｅｓｔ Ｎｙａｃｋ，ＮＹ１０９９４－２１３３：Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，２０１０：２１－２２．。
