附录XV 气相色谱相对质量校正因子

有关物质检查相对校正因子计算方法【讨论目的】现在的有关物质检查几乎都涉及到了特定杂质的检查，采用校正因子计算特定杂质越来越普遍，园子里面也很多战友讨论了很多。

但是一定还有跟我一样对此问题存疑的战友，或许过去认为已了解的战友也存在不够准确的认识。

【提出讨论】所提出讨论的问题也许你觉得很简单无聊，但非常希望你能参加讨论给出你的看法①现在问到你，校正因子计算公式，你如何回答？②为什么我们能看到的文献都是按公式（1）所得校正因子（如果是用这个公式，在计算时不能将杂质峰面积乘以校正因子，而是除以校正因子？）③我们是不是把校正因子和响应因子搞混淆了，校正因子与响应因子的倒数关系，是通过什么得到的？④中国药典中的规定和公式说明存在误导？带着这些问题，就查找到的信息汇总说明：1、公认的公式？？查了很多资料，包括园里讨论的，包括药检所老师所写文章，几乎大家说到相对校正因子的计算方法都为：F=（A杂/C杂）/（A样/C样）公式（1）这个公式在我所查到资料里可以认为是最普遍公认的公式2、中国药典的规定中国药典“加校正因子的主成分自身对照法”中规定计算方法：色谱图上各杂质的峰面积，分别乘以相应的校正因子后与对照溶液主成分的峰面积比较，计算各杂质含量。

这里规定的“校正因子”计算方法是按内标法校正因子：F=（A内标/C内标）/（A对照/C对照）公式（2）根据公式（2），我们直接把内标换成杂质，即得到与上面的公式（1）一样的公式，即认为是杂质斜率与主成分斜率的比值，得下面公式（3）F= 杂质斜率/ 供试品斜率公式（3）药典规定用F乘以杂质峰面积，假设通过该公式计算的校正因子是1. 5，则说明杂质峰的响应值要大于主成分，如果在计算时再将杂质峰面积乘以1.5，结果正确吗？那这个公式对吗？3、公式推导假设响应因子为k，则有k=A/m（单位质量的物质相当于多少峰面积），令杂质k杂=A杂/m杂，主成分k样=A样/m样，则主成分中杂质含量w=m杂/m样*100%，即有：w=（A杂/k杂）/（A样/k样）*100%=（k样/k杂）*（A杂/A样）* 100% 公式（4）根据药典，理论上，加校正因子以自身对照法计算杂质含量的公式简易表示应是：w=F * A杂/ A对公式（5）由公式（4）（5）两式可知，计算杂质时加入的校正因子F：F=k样/k杂=（A样/C样）/（A杂/C杂）公式（6）4、公式（6）和公式（1）的区别倒数关系，相对响应因子（RRF）与校正因子F的关系如下：F=1/RRF= Slope 主峰/ Slope imp 公式（7）其中：Slope imp是指对应杂质的斜率，Slope 主峰是指主峰的斜率。

气相色谱内标法校正因子计算
气相色谱内标法校正因子计算的步骤如下：
1. 首先确定内标物质的纯度和浓度。

纯度可以通过红外光谱、NMR光谱等手段进行检测，而浓度可以通过紫外分光光度法、滴定法、重量法等方法进行测定。

2. 然后将内标物质与待测物质混合，以一定的比例进行洗脱和提取。

3. 将混合样品注入气相色谱仪进行分析。

在分离图谱中水平轴为时间，垂直轴为信号强度。

4. 在分离图谱中，找到内标物质和待测物质的峰（一般情况下，它们应该位于分离图谱的第一或第二个峰），并计算它们的相对保留时间。

5. 通过浓度比例计算内标物质和待测物质的峰面积比值，即校正因子。

具体公式为：校正因子 = 待测物质峰面积 / 内标物质
峰面积 * 内标物质浓度 / 待测物质浓度。

6. 将校正因子应用于待测样品中的待测物质浓度，校正后的浓度即为准确浓度。

气相色谱定量校正因子的计算
气相色谱定量校正因子的计算是一项非常重要的分析工作，在化学和生物领域中广泛应用。

下面将为大家介绍一下气相色谱定量校正因子的计算方法和步骤。

一、计算步骤
1. 样品制备
首先需要将待检测物质进行样品制备。

将样品溶解在适当的溶剂中，并进行预处理和预处理，以便于后续的测试。

2. 标准品制备
接下来需要制备标准样品，以便于后续进行测量和计算。

在此过程中需要确保标准样品的纯度和浓度准确度。

3. 气相色谱测量
进行气相色谱检测，并生成相应的数据。

然后在计算机上输入数据。

4. 计算校正因子
根据标准样品的浓度值和气相色谱峰面积的数据值，计算出标准样品的峰高和样品的峰高之比。

5. 计算待检测物的浓度
根据样品的峰高和计算出的校正因子，计算出待检测物的浓度，并进
行检查和修正。

二、计算公式
气相色谱定量校正因子的计算公式如下：
校正因子 = 标准样品的浓度值 / 标准样品的峰面积值
待测样品的浓度值 = 样品的峰面积值 ×校正因子
三、注意事项
在进行气相色谱定量校正因子的计算过程中，需要注意以下几点：
1. 样品制备的过程要严格控制，确保实验数据的准确性。

2. 制备标准样品时需要准确控制其纯度和浓度。

3. 在进行气相色谱测量时，需要确保此过程中温度和压力的稳定性，以减小误差。

4. 在计算校正因子和待检测物浓度时需进行检查和修正，确保数据的准确性。

以上就是气相色谱定量校正因子的计算方法和注意事项。

希望对大家有所帮助。

色谱定量分析中校正因子的使用在药物研发和QC岗位工作的人员在进行杂质定量时会经常遇到校正因子。

那么定量过程中为什么要使用校正因子、校正因子该怎么计算、得到的校正因子结果该怎么进行使用以及验证呢？下面小编将和大家一一进行分析这些问题，让大家透彻的了解校正因子。

1、为什么要使用校正因子？问题1：在做有关物质质量研究控制时，获得杂质是最让人头疼的一个问题，因有些杂质很难制备、稳定性差或者价格昂贵，难以长期提供杂质进行后续检测。

解决办法：因物质通过检测器时会有一个响应值，所以使用峰面积进行反应待测组分的含量就是一个很好的方法。

问题2：由于同一检测器对不同物质的响应值不同，所以当相同浓度的不同物质通过检测器时，产生的峰面积不一定相等，这种情况下使用峰面积进行反映待测组分的含量就会出现误差。

解决办法：为了消除这个误差，需要加入一个校正值，使得相同浓度的不同物质通过检测器时，产生的峰面积相等，以达到使用峰面积准确反映待测组分的含量，这个校正值就是我们常提到的校正因子。

举例如下：0.1mg/ml API的峰面积5000.1mg/ml 杂质峰面积是250测定某样品时检出API峰面积为500，待测组分为5。

当使用峰面积（面积归一化法）计算杂质的含量：5/500*100=1%当使用外标法进行计算杂质的含量：5*0.1/250/0.1*100=2%这样使用面积归一化法和外标法计算杂质结果就出现了误差。

当引入校正因子：500/250=2，进行计算杂质的含量：5*2/500*100=2%此时计算的结果就相吻合了。

以上就是我们在样品杂质定量时需要使用校正因子的原因。

2、校正因子的含义校正因子分为绝对校正因子和相对校正因子。

绝对校正因子：物质的检测量W与色谱响应值（峰面积等）A之间的比值相对校正因子：某物质i与所选定的参照物质s的绝对校正因子之比通常我们在实验过程中使用的就是相对校正因子，经常查阅USP药典的朋友会发现USP质量标准中使用的是响应因子，它是校正因子的倒数。

气相色谱相对质量校正因子引用方式对归一化法计算
质量分数的影响
气相色谱相对质量校正因子引用方式对归一化法计算质量分数的影响:
一、气相色谱相对质量校正因子引用方式
1、标准样品外校：以全谱范围内不同组分的含量均匀度计算校正因子，且不考虑实验条件，其优点在于对不同分析仪器，不同谱线和不同批
次样品，在保证重复性的前提下，均能够得到比较精确的校正因子。

2、标准样品内校：以谱线的相对敏感度计算校正因子，且考虑实验条件，其主要优点在于在改变实验环境的情况下，可以比较快速的重新
计算出校正因子，比较以实验有一定的灵活性。

二、归一化法计算质量分数的影响
1、类别混合效应：当不同样品类别或不同样品源杂糅在一起时，由于
其间的峰可能有一定的重叠，这样用归一化法计算出的质量分数就会
受到影响。

2、峰背景差异：当样品的同一信号强度受到不同的组成物的峰数量的
影响时，所得的归一化后的信号强度也会受到风险，有可能会导致不
正确的质量分数。

3、标准样品不全：当不同样品具有不同信号时，而该信号却缺乏相应
标准样品时，这样计算出的质量分数就不尽准确。

三、结论
气相色谱相对质量校正因子引用方式对归一化法计算质量分数的影响是不可忽视的。

标准样品外校可以保证不同分析仪器，不同谱线和不同批次样品的重复性高，而标准样品内校比较有灵活性；此外，归一化法计算出的质量分数受到类别混合效应、峰背景差异、标准样品不全等影响，因此在获取准确有效的质量分数时要格外注意。

气相色谱校正因子的计算公式
一、面积法校正因子
面积法校正因子又称为外标法校正因子，是以标准物质为参照物来计
算的校正因子。

其计算公式如下：
校正因子=标准物质的含量/标准物质的峰面积
其中，标准物质的含量是事先已知的，可以通过称量、配制等方法得到；标准物质的峰面积则是经过气相色谱仪进行峰面积积分所得。

在计算时，需要将待测物质与标准物质分别进行气相色谱分析，将它
们的峰面积和含量带入上述公式计算校正因子，即可得到待测物质的含量。

二、内标法校正因子
内标法校正因子是将一个内标物质作为参照物来计算的校正因子。

内
标物质应具有与待测物质性质相似，但在色谱图上有明显区分的特点。

其
计算公式如下：
校正因子=待测物质的含量/待测物质的峰面积÷内标物质的峰面积某
内标物质的含量
其中，待测物质的含量是需要进行测定的；待测物质的峰面积是从气
相色谱仪中直接得到的；内标物质的峰面积和含量也应该在事先的实验中
进行测定，并且在待测物质中加入一个已知浓度的内标物质来进行含量计算。

需要注意，内标物质的浓度应该与待测物质相同，尽量减小不确定因
素的干扰。

此外，内标物质的峰面积应该与待测物质的峰面积相差不大，
以保证校正因子的准确性。

综上所述，气相色谱校正因子的计算需要进行实验，选择合适的校正方法和参照物质，并保证实验条件的稳定性和准确性，才能得到可靠的分析结果。

实验六 气相色谱测定校正因子气相色谱法是采用气体作为流动相的一种色谱法。

当流动相携带欲分离的混合物流经色谱柱中的固定相时，由于混合物中各种组分的性质不同，与固定相之间的作用力存在差异，因而使组分在柱内以不同的速度移动，滞留时间有长有短，依次流出色谱柱而得到分离。

当被分离的组分随载气流出色谱柱后，根据流出组分的物理或化学性质，选用合适的检测器予以检测，便可得到电信号随时间变化的流出曲线，即色谱图。

根据色谱图中各组分色谱峰的出峰时间，可进行组分的定性分析；根据峰面积或峰高，可进行组分的定量分析。

（一）实验目的1、学习气相色谱的原理和使用方法，了解气相色谱分析条件的选择和确定方法，并学习根据出峰情况来改变色谱条件。

2、学习用色谱分析，进行定量和定性的方法，学会求取液相分析物校正因子及计算含量的方法和步骤。

了解气相色谱仪及热导池检测器的原理，了解分离条件的选择和确定。

（二）实验原理1 归一定量法当试样中各组分能够完全分离，且均能在色谱图上出峰时，可采用归一化法进行定量，其定量计算公式为：根据各组分Wi=fiAi,可得（三） 实验装置及试剂产物的分析由于比较复杂，含有多种成分，一般不能用滴定或折光仪分析，而采用气相色谱法。

实验所用的色谱柱固定相为101白色担体，固定液为邻苯二甲酸二壬酯，固定液含量一般为10%。

需要测定的样品分别为乙醇，乙酸，水和乙酸乙酯，色谱采用热导池检测器，出峰顺序为水，乙醇，乙酸，乙酸乙酯。

汽化室温度200℃，柱箱温度为140℃，检测器温度180℃，桥电流140mA ，衰减1，进样量0.6微升。

实验试剂无水乙醇（分析纯），含量99.0% 冰乙酸（分析纯），含量99.0% 乙酸乙酯（分析纯），含量99.0% 浓硫酸（化学纯）含量>98.0% 四 实验步骤1.打开色谱载气的氮气钢瓶，检查压力表读数是否大于2.5Mpa ，如果不是，则应更换氢气瓶。

调节氮气减压阀的压力为0.3Mpa ，检查色谱后面的稳压阀是否打开并调到合适位置，此时，色谱仪前面的两个压力表应该能调节到0.15Mpa 左右。

气相色谱内标法校正因子计算气相色谱是一种分析技术，用于分离和识别化合物。

在气相色谱分析中，内标法是一种常用的定量方法。

内标法中，我们常常需要计算校正因子。

这篇文章将介绍气相色谱内标法校正因子的计算方法。

一、内标法原理内标法是一种用内标化合物测定样品中目标化合物含量的方法。

在内标法中，我们加入一个已知浓度的内标化合物到样品中，然后通过比较目标化合物和内标化合物的峰面积，来确定样品中目标化合物的含量。

二、校正因子的定义在内标法中，我们需要通过计算校正因子来确定样品中目标化合物的含量。

校正因子是指内标化合物的峰面积和目标化合物的峰面积之比。

这个比值通常用一个数字表示，它告诉我们每个内标分子与目标分子之间的比例关系。

校正因子通常用K表示。

K = (Ais/Ai)/(As/A)其中，Ais是内标化合物的峰面积，Ai是内标化合物的量，As是样品中目标化合物的峰面积，A是样品的量。

三、计算校正因子的步骤以下是计算校正因子的步骤：1.首先准备一个已知浓度的内标溶液。

2.将内标溶液中的一定量的内标加入到样品中。

3.将样品制备成气相色谱可分析的样品。

4.进行气相色谱分析，并记录内标与目标化合物的峰面积。

5.计算校正因子。

例如，对于一种药物化合物来说，我们可以将氢化可的松（corticosteroid）作为内标化合物。

我们准备一个氢化可的松100μg / mL的溶液。

然后将10 μL内标溶液和10 μL待测样品溶液混合。

将混合液制备成气相色谱可分析的样品。

进行气相色谱分析，并分别记录氢化可的松和待测化合物的峰面积。

假设氢化可的松的峰面积为8000，待测化合物的峰面积为5000。

那么校正因子K就是：K = (8000/100)/(5000/10) = 1.6四、偏差对校正因子的影响在实际操作中，我们需要关注偏差对校正因子的影响。

偏差可以来自于样品制备和气相色谱分析过程中的各种因素。

如果存在严重的偏差，计算出的校正因子可能会有误差，导致目标化合物的含量被错误地估计。