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多环芳烃降解菌的分离、鉴定及驯化研究

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多环芳烃降解菌的分离、鉴定及驯化研究

作者：李荣峰 赵碧川 陈丽君 王爱芳

来源：《安徽农学通报》2017年第18期

摘 要：该研究从百色大王岭原始森林生态环境的土壤和水中采样，进行了多环芳烃降解菌的分离、鉴定及驯化分析。结果表明，试验分离筛选出了能够降解多环芳烃——萘的A、B

2种微生物菌种，其中，菌种A菌落形态为光滑，乳白色，边缘整齐，呈乳状微粘性菌落，显微镜下观察为杆状；菌种B菌落形态为发散毛状，白色，显微镜下观察为丝状。并对筛选出的A、B2个菌种进行了生理生化鉴定和优化驯化试验，最适生长代谢环境条件为：最适温度25～28℃，最适转速120～150r/min，最适多环芳烃萘的浓度为300～320mL/L，最适pH值6.0～7.0，最适降解菌接种量10～15mL/100mL无机盐培养液，培养液体系中加入一定量的柠檬酸可提高降解速率。

关键词：多环芳烃；降解菌；分离；鉴定

中图分类号 X132 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2017）18-0013-04

Isolation and Identification of PAHs Degrading Bacteria

Li Rongfeng et al.

（College of Agriculture and Food Engineering，Baise College，Baise 533000，China）

Abstract：Isolation，identify and domestication about bacteria of degrading PAHs from the soil

andwater sampling in Bise Dawangling virgin forest ecological environment had been studied.The

results had separated A，B two microbial strains of degrading PAHs—naphthalene.And screened

A，B two specieswere identified on physiological and biochemical and optimized on condition

tests.The results showed that the optimum environmental conditions for growth and metabolism is the

optimum temperature of 25 ～ 28 ℃，the optimum speed of 120 ～ 150 r/min，the optimum

concentration on PAHs naphthalene of 300 ～ 320mL/L，optimum pH value of 6.0 to 7.0，the

optimal degrading bacteria inoculation of 10 ～ 15mL/100mL mineral medium.Broth system by

adding a certain amount of citric acid can increase the rate of degradation of PAHs.

Key words：PAHs；Bacteria of Degrading PAHs；Separation；Identify

多环芳烃（Polycyclic aromatic hydrocarbons，简称PAHs）是一类广泛分布于海洋环境中的含有2个或2个以上苯环，以线状、角状或簇状排列的稠环型有机污染化合物[1]。随着苯环数量的增加，其在环境中存在的时间越长，遗传毒性越高，现已成为全球重要的污染物之一，也是美国环保局制定的129种优先污染物中的一类[2]。环境中的PAHs存在于各种土壤、污水中，是一类难于降解的有机污染物，在适宜的情况下可能迁移到其他环境介质中，扩大污染龙源期刊网

源。随着现代化工业的发展，工厂废水排放系统的不完善，大量的烃类物质涌入江河湖海，严重威胁自然界的动植物以及人类的健康。如何治理及修复多环芳烃对环境造成的污染，已成为世界各国环境科学家研究的热点。现今，治理多环芳烃污染主要有物理、化学和生物几种方法，而普通的物理和化学修复污染存在各种问题，操作不当还会造成二次污染，而利用生物技术方法不仅可以消除烃类污染、净化环境，而且投资少，耗能小，具有广泛的经济价值，对人类社会来说也是利大于弊。目前，生物修复中土壤PAHs污染物生物治理的相关研究有较多报道[3～5]。土壤中有多种微生物可以利用PAHs作为碳源和能源或利用其他的物质作为共代谢底物进行多环芳烃的降解、矿化[6]。因此，筛选分离降解多环芳烃的优势菌种对于开展多环芳烃污染生态系统修复方面的研究工作具有非常重要的现实意义。

广西百色市自然保护区大王岭原始森林近年来作为主要以漂流著称的重要旅游胜地，每年都有大量的游客前往，而森林中存在一定的污染物质，特别是多环芳烃物污染逐渐严重，因此，研究原始森林中多环芳烃有机污染物的微生物降解显得尤为重要。本文针对大王岭原始森林的水质和土质进行微生物检测，筛选出能够降解多环芳烃——萘的菌类，并对其进行微生物形态学观察和生理生化鉴定，能了解森林存在的降解菌类型和分布情况，以期为多环芳烃污染的生物修复和治理提供有力支持。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 样品采集 从百色大王岭原始森林的土壤（未受污染区、受污染区的样品）、水体（未受污染区、受污染区的样品），分别采集到样品4份，编号，冰箱保存待用。

1.1.2 培养基配制 （1）无机盐培养基：（NH4）2SO4 1g，K2HPO4 2g，MgSO4·7H2O

0.5g，NaCl 0.1g，FeCl3 0.5g，CaCl2 0.5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。（2）萘-无机盐培养基：萘丙酮浓度分别为200，250，280，300，320，350mL/L萘丙酮，液体培养基富集菌种时每200mL无机盐培养基液加入10mL萘丙酮溶液，固体筛选培养基则在使用之前于固体培养基上滴萘丙酮溶液。

1.1.3 主要仪器和试剂 （1）主要仪器：全温振荡器（JBQ-2D，常州普天仪器制造有限公司），人工气候培养箱（LRH-300-GST，广州沪瑞明仪器有限公司），超净工作台（SW-CJ-2FD，苏净集团安泰公司），高压蒸汽灭菌锅（YXQ-LS-50S11，上海博迅实业有限公司），电子分析天平（FA2004，上海舜宇恒平科技仪器有限公司），数字式精密pH计（PHS-3C，上海精密科学仪器有限公司），双目生物显微镜（B204LEDR，上海比目仪器有限公司），冷冻高速离心机（TGL-16M，湖南湘仪）。（2）主要药品：萘，丙酮，葡萄糖，菲，柠檬酸，邻苯二甲酸，联苯，醋酸钠，α-萘酚，醋酸铅，二氯乙烷，无水硫酸钠，十二烷基苯磺酸钠，十二烷基硫酸钠。所有药品均为AR，分析纯。

1.2 试验方法 龙源期刊网

1.2.1 多环芳烃降解菌的富集培养 分离降解多环芳烃微生物采用单层平板划线分离法[7]。在无菌操作条件下，将采集到的10g土样和10mL水样分别加入200mL萘-无机盐培养液中（土样中加数粒玻璃珠将大块颗粒打碎），150r/min条件下震荡培养，7d后按体积比10%的接种量接种到新的培养基中，反复继代培养5次，以富集微生物生长菌。

1.2.2 多环芳烃降解菌的分离筛选 利用萘为唯一碳源的无机盐培养基进行微生物培养，使能利用萘的微生物存活下来，而其他微生物死亡的原理，从样品中分离筛选出多环芳烃降解菌。将富集培养后的培养液用稀释涂布法在萘-无机盐固体培养基平板上进行分离，并进一步反复划线分离在此培养基上生长出来的菌种。对能在萘-无机盐培养基上生长的微生物菌种进行形态学观察，包括菌落、菌苔、生活习性、生长速度、对环境的适应能力等，筛选出长势较好的微生物菌种，此菌种即为多环芳烃降解菌。

1.2.3 多环芳烃降解菌的生理生化鉴定 对分离筛选出的菌种进行生理生化实验鉴定。鉴定方法包括革兰氏染色、芽孢染色、荚膜染色、甲基红试验、乙酞甲基醇试验、葡萄糖发酵试验、过氧化氢酶试验和柠檬酸盐试验等。

1.2.4 多环芳烃降解条件的优化驯化

1.2.4.1 温度对多环芳烃降解的影响 温度是影响微生物生长代谢的重要因素，不同的温度使微生物产生不同的生理生化反应。分别移取10mL筛选出的2个菌种菌悬液至萘无机盐固体平板上，进行涂布无菌接种，置于分别设置为20℃、25℃、28℃、30℃、35℃和40℃6组培养温度的培养箱中培养，除温度外其他培养条件相同，每组温度每种菌种接种3个培养皿，经培养7d后，观察所有培养皿中接种菌种的生长情况。

1.2.4.2 转速对多环芳烃降解的影响 实验中多环芳烃降解体系为液相，在降解过程中振荡培养能加速降解菌对多环芳烃的降解过程，不同的转速下降解效果不同 [8]。分别移取10mL筛选出的2个菌种菌悬液至装有100mL萘无机盐液体培养基的250mL三角瓶中，置于分别设置转速为60、90、120、150、180、210r/min的摇床上进行振荡培养，除转速外其他培养条件相同，培养7d后划线接种于萘无机盐固体平板上，培养5d，观察降解菌的生长状况。

1.2.4.3 多环芳烃浓度对降解的影响 多环芳烃萘作为降解物，为降解菌提供碳源，其浓度的大小对降解菌的生长代谢有着很大的影响。设置萘丙酮的浓度分别为200、250、280、300、320、350mL/L，分别移取10mL筛选出的2个菌种菌悬液至装有100mL不同浓度萘无机盐液体培养基的250mL三角瓶中，摇床振荡培养7d后划线接种于萘无机盐培养基固体平板上，28℃培养5d，观察降解菌的生长情况。

1.2.4.4 pH值对多环芳烃降解的影响 设置萘无机盐培养液的pH值分别为5.0，6.0，7.0，7.5，8.0，9.0其6组梯度，分别移取10mL筛选出的2个菌种菌悬液至装有100mL不同pH值萘无机盐液体培养基的250mL三角瓶中，摇床振荡培养7d后划线接种于萘无机盐培养基固体平板上，28℃培养5d，观察降解菌的生长情况。 龙源期刊网

1.2.4.5 降解菌接种量对多环芳烃降解的影响 接种量的多少也会影响到整个降解体系的降解效率。移取接种量分别为5mL、10mL、15mL、20mL、25mL、30mL筛选出的2个菌种菌悬液至装有100mL相同萘无机盐液体培养基的250mL三角瓶中，摇床振荡培养7d后划线接种于萘无机盐培养基固体平板上，28℃培养5d，观察降解菌的生长情况。

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多环芳烃降解菌的筛选、检测及对土壤中PAHs的降解特性

多环芳烃降解菌的筛选、检测及对土壤中PAHs的降解特性

多环芳烃降解菌的筛选、检测及对土壤中PAHs的降解特性

多环芳烃降解菌的筛选、检测及对土壤中PAHs的降解特性

引言：

多环芳烃（PAHs）是一类复杂的有机污染物，由两个或多个苯环在不同位置上连接形成。它们广泛存在于环境中，包括土壤、水体和空气中，并且经常由人类活动引起。由于PAHs的毒性和危害性，寻找有效的降解方法成为环境科学领域的研究热点。其中，利用多环芳烃降解菌对PAHs进行降解是一种非常有前景的方法。因此，本文将介绍多环芳烃降解菌的筛选、检测及其对土壤中PAHs的降解特性。

一、多环芳烃降解菌筛选

多环芳烃降解菌是一类具有特异性降解多环芳烃的微生物。筛选合适的降解菌应考虑以下几个因素：降解能力、菌株易培养、菌株的特异性，以及对环境的适应性。

1. 根据降解能力筛选：通过采集具有降解多环芳烃能力的样品，如土壤或废水，利用富集培养的方法，分离出能较高效降解目标PAHs的菌株。

2. 菌株的培养条件：菌株易培养是进行筛选的基本条件之一。对筛选出的菌株进行培养条件优化，如菌株适宜的温度、营养物质和pH。

3. 菌株的特异性：筛选出的菌株需要具有针对特定PAHs的降解能力，以确保其对目标PAHs的高效降解。

4. 菌株的适应性：菌株需要在不同环境条件下具有良好的适应性，以便在实际应用中进行土壤中PAHs的降解。 二、多环芳烃降解菌的检测

为了保证筛选出的多环芳烃降解菌的降解效果，需要对菌株进行检测。常用的检测方法包括降解菌的纯化、鉴定和降解活性的测定。

1. 降解菌的纯化：采用传统的菌落计数和传代培养方法，将筛选得到的菌株纯化。

2. 降解菌的鉴定：通过菌株的形态学、生理学和生化学特性，结合16S rRNA基因序列分析等方法，对筛选得到的菌株进行鉴定。

3. 降解活性的测定：利用色谱法或荧光分析法等检测方法，对菌株的降解活性进行测定，以评估其对PAHs的降解效果。

多环芳烃降解菌的筛选、鉴定及其特性

多环芳烃降解菌的筛选、鉴定及其特性

DOI:10.3969/j.issn.1001-5337.2019.3.092

*收稿日期:2018-10-11 基金项目:国家自然科学基金(31500087);山东省高等学校科技计划(J16LE03);河北省教育厅青年基金(SQ171077);曲阜师范大学国

家级大学生创新训练计划(201710446079). 通信作者:苏涛,男,1978-,博士,副教授;研究方向:土壤污染修复;E-mail:vincenttao2@.多环芳烃降解菌的筛选、鉴定及其特性*

王新廷①, 王 芸②, 赵传富①, 马圣超①

高云霄①, 张姣姣①, 司美茹①, 苏 涛①

(①曲阜师范大学生命科学学院,273165,山东省曲阜市;②河北广播电视大学数字化学习资源中心,050080,河北省石家庄市)

摘要:从黄河三角洲东营胜利油田附近石油污染的土壤中分离、筛选到菲降解菌共6株,并对其中降解率相对较高的菌株PAHs-1进行了生物学特性的研究,包括菌体形态特征、培养特征及生理生化特征的初步研究.通过形态观察、生理生化指标及16SrDNA序列分析,鉴定该菌株为短芽孢杆菌属.研究所筛选的PAHs-1能够以多环芳烃菲为唯一碳源和能源,7d内对菲(培养液浓度为50mg/L)的降解率达到62.09%.并通过试验确定了PAHs-1对菲的最佳降解pH为7.另外,研究中一系列试验表明随着外源碳源葡萄糖的加入,PAHs-1对菲的降解率呈微小的增大趋势,而随着菲浓度的增加,PAHs-1对菲的降解率呈减小趋势.

关键词:多环芳烃;菲;多环芳烃降解菌;生理生化;短芽孢杆菌中图分类号:X53 文献标识码:A 文章编号:1001-5337(2019)03-0092-05

多环芳烃(PAHs)是一类环境中广泛存在的

持久性有机毒害污染物,其污染来源和环境归趋已成为当前环境科学领域的研究热点[1].由于部分PAHs具有持久性、生物累积性、可远距离传输、致癌致突变性和内分泌干扰等特性[2],并可通过生物

多环芳烃的微生物降解

多环芳烃的微生物降解

多环芳烃的微生物降解

1、好氧降解：好氧生物降解过程也称为有氧呼吸，指微生物在有氧的情况下对污染物质的降解过程，是最主要的生物修复技术。好养细菌降解多环芳烃主要是通过产生双加氧酶作用于苯环，在芳环上加入两个氧原子，然后再经过氧化形成顺式二氢二羟基化菲，顺式二氢二羟基化菲继续脱氢形成单纯二羟基化的中间体，而后被进一步代谢为邻苯二甲酸等其他中间产物，有望最终降解为水和二氧化碳。

2、真菌对多环芳烃的降解可分为两种不同的机制：一是木质素降解酶系体系，二是单加氧酶降解体系。木质素降解酶系包括木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶，这些酶对底物的作用不具有特异性，能够氧化很多不同种类的有机物。真菌通过向胞外分泌木质素降解酶可将PAHs氧化成醌，然后经过加氢、脱水等作用使PAHs得到降解。

单加氧酶对PAHs的降解机制是在细胞色素P-450单加氧酶的催化作用下向多环芳烃苯环上加氧形成芳香环氧化物，然后经环氧化物水解酶催化水合形成反式二氢二羟基化中间体；催化加氧反应得到的有些芳香环氧化合物不稳定，将继续反应生成酚的衍生物，并与硫酸盐、葡萄糖、木糖或葡糖醛酸结合进行重排，得到高水溶性、低毒性的降解中间产物，其更容易被进一步降解。

3、总体而言，无论是细菌还是真菌，多环芳烃的好氧降解的第一步均是向苯环上加入氧原子，加氧的快慢决定微生物对PAHs降解的效率。 4、厌氧降解：厌氧微生物可以利用硝酸盐、硫酸盐、铁、锰和二氧化碳等作为其电子受体，将有机化合物分解成更小的组分，往往以二氧化碳和甲烷作为最终产物。与好氧降解相比，PAHs的厌氧降解进程较慢。当PAHs浓度偏高时，PAHs的厌氧降解明显被抑制。

混合菌降解土壤中多环芳烃的试验研究

混合菌降解土壤中多环芳烃的试验研究

农业环境科学学报２０１０，２９（６）：ｌ１１１—１１１６　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｏ—Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　

混合菌降解土壤中多环芳烃的试验研究　

陈海英，丁爱中，豆俊峰，杜勇超，范福强　

（北京师范大学水科学研究院，地下水污染控制与修复教育部一　程研究中心，北京１００８７５）　

摘要：ＰＡＨｓ生物降解程度受多种因素影响。通过筛选驯化ＰＡＨｓ降解菌，研究混合菌对土壤中菲、芘、苯并（ａ）蒽、苯并（ｂ）荧葸、　苯并（ｋ）荧蒽、茚并（１，２，３－ｃｄ）芘的生物降解性能，并考察污染时间对土壤中ＰＡＨｓ降解效果的影响。结果表明，筛选的混合菌具有　很强的ＰＡＨｓ降解能力，缩短了ＰＡＨｓ生物降解的半衰期，且ＰＡＨｓ起始降解速率较快，之后趋于平缓。２７　ｄ内土壤中的菲、芘、苯并　（ａ）蒽、苯并（ｂ）荧蒽、苯并（ｋ）荧蒽、茚并（１，２，３－ｃｄ）芘的平均降解率分别为９８．１４％、８９．９７％、８８．４７％、６３．５５％、６５．２４％、６０．４９％，其中　菲在５　ｄ之内的降解率高于９３％。污染２１０　ｄ的土壤中各ＰＡＨｓ的起始降解速率高于污染５０　ｄ的土壤，因此污染时间越长，ＰＡＨｓ　生物降解的停滞期越短。　关键词：ＰＡＨｓ；ＰＡＨｓ降解菌；生物降解；污染土壤；接触时间　中图分类号：Ｘ１７２　文献标志码：Ａ　文章编号：１６７２—２０４３（２０１０）０６—１１１１－０６　

ＰＡＨｓ　ＢｉＯｄｅｇｒａｄａｔｉ０ｎ　ｉｎ　Ｓｏｉｌ　ｂｙ　Ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉｓｏｌａｔｅｄ　Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ　ＣＨＥＮ　Ｈａｉ—ｙｉｎｇ，ＤＩＮＧ　Ａｉ—ｚｈｏｎｇ，ＤＯＵ　Ｊｕｎ—ｆｅｎｇ，ＤＵ　Ｙｏｎｇ—ｅｈａｏ，ＦＡＮ　Ｆｕ—ｑｉａｎｇ　（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｗａｔｅｒ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅ￣ｉｔｙ，Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　Ｇｒｏｕｎｄｗａｔｅｒ　Ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ　Ｃｏｌｌｔｒｏｌ　ａｎｄ　Ｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎ，　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１００８７５，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｒａｔｅ　ａｎｄ　ｅｘｔｅｎｔ　ｏｆ　ｐｏｌｙｃｙｃｌｉｃ　ａｒｏｍａｔｉｃ　ｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎｓ（ＰＡＨｓ）ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｓｏｉｌ　ａｒｅ　ａｆｆｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｆａｃｔｏ￣，ｍａｉｎｌｙ　ｉｎ—　ｃｌｕｄｉｎｇ　ｃｏｎｔａｃｔ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ，ｓｏｉｌ—ＰＡＨｓ　ｃｏｎｔａｃｔ　ｔｉｍｅ，ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ，ｔｈｅ　ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｅｆｆｉ—　ｃｉｅｎｃｖ　ｏｆＰＡＨｓ　ｍｉｘｔｕｒｅｓ（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ　ｏｆｐｈｅｎａｎｔｈｒｅｎｅ，ｐｙｒｅｎｅ，ｂｅｎｚ（ａ）ａｎｔｈｒａｃｅｎｅ，ｂｅｎｚｏ（ｂ）ｆｌｕｏｒａｎｔｈｅｎｅ，ｂｅｎｚｏ（ｋ）ｆｌＵＯＩａｎｔｈｅｎｅ　ａｎｄ　ｉｎｄｅｎｏ　（１．一ｃ　）ｗｉｔｈ　．，２　３　ｄ）ｐｙｒｅｎｅ　ｔｈｅ　ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｘｅｄ　ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｃｏｎｓｏｒｔｉａ　ｗａｓ　ｓｔｕｄｉｅｄ　Ｔｈｅ　ｍｉｘｅｄ　ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｃｏｎｓｏｒｔｉａ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ＰＡＨｓ　ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ　ｓｏｉｌ，ｍａｉｎｌｙ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ，Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ，Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ，Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ，Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ，Ｐｈｙｌｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ，　Ｃｈｒｙｓｅｏｂａｃｔｅｒｉ“ｍ　ａｎｄ　Ｍｉｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｍｉｘｅｄ　ｎｆｉｃｒｏｂｉａｌ　ｃｏｎｓｏｒｔｉａ　ｗｅｒｅ　ｃａｐａｂｌｅ　ｏｆ　ｍｉｎｅｒａｌｉｚｉｎｇ　ＰＡＨｓ，　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｈａｌｆ　ｌｉｆｅ　ｏｆ　ｐｈｅｎａｎｔｈｒｅｎｅ，ｐｙｒｅｎｅ，ｂｅｎｚ（ａ）ａｎｔｈｒａｃｅｎｅ，ｂｅｎｚｏ（ｂ）ｆｌｕｏｒａｎｔｈｅｎｅ，ｂｅｎｚｏ（ｋ）ｆｌｕｏｒａｎｔｈｅｎｅ　ａｎｄ　ｉｎｄｅｎｏ（１，２，３一ｃｄ）ｐｙｒｅｎｅ　ｉｎ　ｓｏｉｌ　ｗａｓ　６．１２，８．２５，８．７４，１９．３１，２０．０６　ａｎｄ　２２．２８　ｄａｙｓ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｉｎｉｔｉａｌ　ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅｓｅ　ＰＡＨｓ　ｗｅｒｅ　ｆａｓｔｅｒ　ａｔ　ｔｈｅ　ｂｅｇｉｎ—　ｎｉｎｇ　ｓｔａｔｅｓ．ｔｈｅｎ　ｂｅｃａｍｅ　ｓｌｏｗｅｒ　ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ　ｏｆ　１７　ｄａｙｓ．Ｔｈｅ　ａｖｅｒｓｇｅ　ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｏｆ　ｐｈｅｎａｎｔｈｒｅｎｅ，ｐｙｒｅｎｅ，ｂｅｎｚ（ａ）ａｎ—　ｔｈｒａｃｅｎｅ，ｂｅｎｚｏ（ｂ）ｆｌｕｏｒａｎｔｈｅｎｅ，ｂｅｎｚｏ（ｋ）ｆｌｕｏｒａｎｔｈｅｎｅ　ａｎｄ　ｉｎｄｅｎｏ（１，２，３一ｃｄ）ｐｙｒｅｎｅ　ａｆｔｅｒ　２７　ｄａｙｓ　ｗａｓ　９８．１４％，８９．９７％，８８．４７％，６３．５５％，　６５．２４％ａｎｄ　６０．４９％．ｒｅｓｐｅｅｔｉｖｅｌｙ．Ｍｏｒｅ　ｔｈａｎ　９３％ｏｆ　ｐｈｅｎａｎｔｈｒｅｎｅ　ｗａｓ　ｄｅｇｒａｄｅｄ　ｗｉｔｈｉｎ　ｔｈｅ　ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ　ｏｆ　５　ｄａｙｓ．Ｔｈｅ　ｉｎｉｔｉａｌ　ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆｐｙｒｅｎｅ，ｂｅｎｚ（ａ）ａｎｔｈｒａｃｅｎｅ，ｂｅｎｚｏ（ｂ）ｆｌｕｏｒａｎｔｈｅｎｅ，ｂｅｎｚｏ（ｋ）ｆｌｕｏｒａｎｔｈｅｎｅ　ａｎｄ　ｉｎｄｅｎｏ（１，２，３一ｃｄ）ｐｙｒｅｎｅ　ｉｎ　ｓｏｉｌ　ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ　ｆｏｒ　２１０　ｄａｖｓ　ｗａｓ　０．８４７　５，０．８９８　５，０．３０２　８，Ｏ．１　９７　６　ａｎｄ　Ｏ．１　３７　８　ｍｇ・ｋｇ一　・ｄ～，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｉｌｅ　ｉｎｉｔｉａｌ　ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅｓｅ　ＰＡＨｓ　ｉｎ　ｓｏｉｌ　ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ　ｆｏｒ５０　ｄａｙｓ　ｗａｓ　０．４５１　６，０．６６２　８，０．１９６　４，０．１６５　３　ａｎｄ（）．０９３　６　ｍｇ・ｋｇ一　・ｄ～，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｌａｇ　ｐｈａｓｅ　ｏｆｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｓｈｏｒｔｅｒ　ｗｉｔｈ　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ　ｓｏｉｌ－ＰＡＨｓ　ｃｏｎｔａｃｔ　ｔｉｍｅ．　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＰＡＨｓ；ＰＡＨｓ　ｄｅｇｒａｄｅｒｓ；ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ；ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ　ｓｏｉｌ；ｃｏｎｔａｃｔ　ｔｉｍｅ