急性毒性试验

第３８卷第３期　２００７年６月　东北农业大学学报　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　３８（３）：３８０－３８３　Ｊｕｎｅ　２００７　文章编号１００５—９３６９（２００７）０３—０３８０—０４　硝基苯对小鼠急性毒性试验的研究　

邢厚娟，王海波，王　敏，徐世文　（东北农业大学动物医学院，哈尔滨１５００３０）　摘要：用Ｗｅｉｌ　ｓ表的平均移动法进行了ＮＢ对雌性小鼠和雄性小鼠ＬＤ　的测定。以组间距（对数剂量差值）为　ｄ－－－Ｏ．２，测得ＮＢ对雄性小鼠经口服的ＬＤ５０为５２５．８９６２　ｍｇ‘ｋｇ～ＢＷ，９５％可信限为４１７．７３４２￣６６２．０６４０　ｍｇ。ｋｇ　ＢＷ；　以组间距（对数剂量差值）为ｄ＝０．０６６７，测得ＮＢ对雌性小鼠经口服的ＬＤ５０为７７１．９６９２　ｍｇ・ｋｇ－　ＢＷ，９５％可信限为　７１４．８２５４￣８３３．６８１２　ｍｇ・ｋｇ～ＢＷ。　关键词：硝基苯；急性毒性；小鼠；ＬＤ　中图分类号：ＴＱ０８６．５；￥９９４．６　文献标识码：Ａ　

硝基苯（Ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｅｎｅ，ＮＢ）是化工产业中应用　广泛的化工原料，危险标记为１４，属剧毒品，毒　性为其他化合物的２０～３０倍，具有致突变性。已　有资料表明，ＮＢ可对造血、肝、肾及中枢神经系　统造成损伤【　。临床已发现，ＮＢ被人体皮肤吸收　或从呼吸道吸人其蒸汽后会引起高铁血红蛋白血　症、溶血等，甚至引起死亡　。为评价ＮＢ对人类　的潜在危险程度，本试验以昆明小鼠为受试动物，　通过灌胃染毒，进行了半数致死量（ＬＤ卯）的测定。　１　材料与方法　．　１．１试验受试物　ＮＢ选用上海凌峰化学试剂有限公司的批号为　０４０４１０，分析纯ＡＲ，纯度为９９．９％。　１．２试验动物及处理　１．２．Ｉ试验动物及管理　选用体重（２１＋３）ｇ的昆明小鼠为受试动物。　常规饲养，自然干燥，鼠粮由哈尔滨兽医研究所实　验动物中心提供。　１，２．２预备试验　将小鼠随机分为４组，雌雄各半，按灌序法测　得小鼠灌胃最小１００％致死量为９４４　ｍｇ・ｋｇ～ＢＷ。　试验发现硝基苯对雌、雄小鼠毒性敏感性有明显差　收稿日期；２００６—０３—３１　基金项目：黑龙江省教育厅资助项目（ＹＪＳＣＸ２００７－００４３ＨＬＪ）　作者简介：邢厚娟（ｚ９８ｏ－），女，黑龙江人，硕士研究生，研究　方向为环境毒理学。　通讯作者Ｅ－ｍａｉｈ　ｘｕｓｈｉｗｅｎｌ０１＠ｓｏｈｕ．ｅｏｍ　异，经口染毒后，雄性小鼠先出现死亡，并且在　５９０　ｍｇ・ｋｇ　ＢＷ剂量组，雌性小鼠没有出现死亡。　在预试验中还发现硝基苯具有很强的溶血作用。　１．２．３正式试验　按Ｗｅｉｌ　ｓ设计，雄性小鼠试验是将１６只小鼠　随机分为４组，每组４只［５－６１，组间剂量对数差值为　０．２。第１、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组小鼠灌服ＮＢ的剂量分别　为２３０．４７，３６８．７５，５９０，９４４　ｍｇ・ｋｇ－　ＢＷ。雌性小　鼠试验是将１６只小鼠随机分为４组，每组４只，　组间剂量对数差值为０．０６６７。第１、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组　小鼠灌服ＮＢ的剂量分别为５９０，６８７．８６，８０２．０５　和９４４　ｍｇ・ｋｇ－　ＢＷ。试验鼠在灌服毒物之前隔夜禁　食，灌服毒物后禁食２　ｈ，ＮＢ用花生油按比例稀　释灌服。在此期间，每１３记录小鼠的饮食、饮水情　况，并观察小鼠的临床表现和死亡只数，剖检死亡　鼠。试验共进行７　ｄ。　１．３数据处理　按以下公式计算，ｌｇＬＤ５０＝Ｄ　（１＋ｆ）；￣ｌｇＬＤ５０＝　ｄ×８ｆ。式中：Ｄ一最小剂量对数值；ｄ一两剂量组间　值；产组合总体反应系数；８ｆ＿－计算可信度系数。　２结果与分析　２．１临床表现　整个试验期内，对照组小鼠一切正常（见图１），　第１、Ⅱ组在灌服ＮＢ后９　ｈ内精神状况良好，之　后表现为轻度精神沉郁、食欲减退，持续９—１２　ｈ　

经口急性毒性试验

※<(一)目的>

化学毒物经口急性毒性试验是研究化学物毒性效应的基本试验。奉实习的目的是学习急性毒性试验的实验设计原则，学会经口灌胃技术、随机分组方法，掌握主要的LD50计算方法和急性毒性分级标准。

※<(二)原理>

选择健康的实验动物，根据体重按随机分组的方法，依据LD50计算的设计原则将动物分成数个染毒组。一次或24h内多次给予受试物后，了解动物所产生的急性毒性反应及其严重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因，观察受试物毒性反应与剂量的关系，求出半数致死剂量(LD50)，并根据LD50值将受试物进行急性毒性分级。

※<(三)内容>

1．健康小鼠或大鼠的选择，性别的辨认。

2．称重、编号和随机分组方法。

3．受试化学物溶液的配制。

4．小鼠和大鼠经口灌胃操作技术．

5．毒性体征的观察、LD50计算和毒性分级

※<(四)材料和试剂>

1.实验动物 健康成年小鼠或大鼠若干只。

2.器材 灌胃针(大鼠、小鼠适用)、注射器(0.25，1.2，5m1)、吸管(0.1，0.2，0.5，1，2，10ml)、容量瓶(10，25，50ml)、烧杯(10，25，50ml)、滴管、电子天平(感应量1／10000g)、动物体重秤、外科剪刀、镊子。 3.试剂 受试物(由指导教师自定)，苦味醒酒精饱和液，o．5％品红溶液或其他染色剂．

※<(五)操作步骤>

1．健康动物的选择。

2．性别辨认。

3.动物称重、编号和分组；

(1)称重；称量大、小鼠体重的秤，其感应量需在0.1g以下，并经过校正。称量时注意轻抓轻放动物，避免激惹，等动物安静后记录体重读数，以g表示。

(2)编号：以染色法编号。用苦味醒酒精饱和液为染料。以黄色为个位数号码，红色为十位数号码。一股以头部为1号，按顺时针依次右前肢为2号，右腰为2号，右后肢为4号，尾根部为5号，右后肢为s号，左腰为7号，左前肢为8号，后背为9号，10号为在头部染红色标记，11号在右前肢染红色和黄色标记各一，依次类推。

第３３卷第１期　２０１２年１月１日　水产养殖　

Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ　Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．１　

Ｊａｎ．１，２０１２　

ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００４—２０９１．２０１２．０１．０ｌ１　

胡秀彩．．２，边延峰３，周　捷　，吕爱军　（１．徐州师范大学生命科学学院，江苏徐州２２１１１６；２．江苏省药用植物生物技术重点实验室，江苏徐州２２１１１６；　

３．天津生机集团股份有限公司，天津３００３８４）　

摘要：为探究消毒液和农药对斑马鱼的毒性与安全评价，首次选用高锰酸钾、甲醛、精碘和卡螨死四种试剂进行急性毒　

性试验，以２４～９６　ｈ半致死浓度（Ｌｃ　）判断斑马鱼对四种药物的敏感性。结果表明，２４、４８、７２、９６　ｈ的ＬＣ５０，高锰酸钾分别　勾　１．１５、１．１２、１．１２、１．１１　ｍｇ／Ｌ；甲醛为４８、４５、４５、４０　ｍｇ／Ｌ；精碘分别为７．８ｘ１０￣，５．８ｘ１０￣．５．６ｘ１０￣，５．３ｘｌＯ　ｍｇ／Ｌ；卡螨死分别为１．９５￣　

１０－７、１．２３ｘ１０￣、０．６５ｘ１０－７、Ｏ．６２ｘ１０－Ｔｍｇ／Ｌ。高锰酸钾、甲醛、精碘和卡螨死的安全质量浓度（ＳＣ）分别为１．０７、１１．８、０．９６ｘ１０。和　１．４８×１０－６　ｍｇ，【Ｊ。参照我国化学物质对鱼类毒性分级标准，判定高锰酸钾对斑马鱼急性毒性为ＩＩ级，甲醛为ＩＩＩ级，精碘和卡螨死　

对斑马鱼急性毒性为Ｉ级。　关键词：斑马鱼；急性毒性；半致死浓度；安全质量浓度　中图分类号：Ｑ１７６　文献标识码：Ａ　文章编号：１００４—２０９１（２０１２）０ｌ一００４３—０５　

斑马鱼（Ｂｒａｃｈｙｄａｎｉｏ　ｏ）作为一种模式生物，　

除了具有经济、观赏价值外，目前已成为研究脊椎　

动物胚胎发育及对外界环境变化，如紫外线、重金　

属盐类、农药、消毒液、工业污水、放射性物质等对　

人类影响的良好研究材料，是一种极好的实验模式　

鱼　

高锰酸钾是一种外用消毒药物，通过强氧化性　

五种农药对小鼠的急性毒性试验

绪论

随着现代农业的飞速发展，农药的应用越来越广泛，在农林作物的病虫防治中,农药一直发挥着巨大作用,尤其是本世纪60-70年代,人们大量使用农药,几乎使粮食产量增长一倍,但随着农药长期的、大量的、不合理的使用,导致了对环境的严重污染并对人体健康产生极大的影响。它们对动、植物和人类的危害越来越严重。一方面它们可以直接进入生物体内引起急性、慢性中毒和畸变，同时还通过径流、排污、挥发等途径进入土壤、大气和水体，引起各种生态环境下生物的死亡，并通过食物链的富集影响人类的食品安全。 目前，因农药使用与管理失控而引发的一系列水域环境污染以及食品安全等问题，已引起政府相关部门和业内学者的广泛重视。当前，随着有机氯农药的禁用，菊酯类和有机磷类等成为我国目前使用较广泛的农药。

《中华人民共和国农药管理条例》指明，农药是指用于预防、消灭或者控制危害农业、林业的病、虫、草和其他有害生物以及有目的地调节植物、昆虫生长的化学合成物或者几种物质混合物及其制剂。农药残留是指农药使用后残存于环境、生物体和食品中的农药及其衍生物和杂质的总称。动植物在生长期间、食品在加工和流通中均可受到农药的污染，导致食品中农药残留。

相关报道表明，农药利用率一般为10%，约90%的残留在环境中，过多地使用农药，大量未被利用的农药经过降雨、农田渗滤和水田排水等进入水体，同时，还有大量散失的农药挥发到空气中，最后汇入水域，沉降积淀在土壤中，通过农作物吸收和食物链进入人体进行累积，并对人体健康造成危害。目前中国一些食品，如茶叶、大米、肉、蛋等食品中农药残留量常超过规定标准，过多的残留量对人体健康会造成危害。为此，论述农药残留对人体健康的危害效应及其毒理机制和防治措施，以期对防治食品中农药残留对人体健康的危害提供理论依据。

在哺乳类实验动物中，由于小鼠个体小，饲养管理方便，生产繁殖快，质量控制严格，价廉可以大量供应，又有大量的具有各种不同特点的近交品系，突变品系，封闭群及杂交一代动物，小鼠实验研究资料丰富参考对比性强；更重要一点乃是全世界科研工作者均用国际公认的品系和标准的条件进行试验，其实验结果的科学性、可靠性、重复性高，自然会得到国际认可。