应用ELISA法检测无偿献血者梅毒结果分析

兰州地区无偿献血人群梅毒抗体筛查结果分析罗蓉１，杨勇毅２（１．兰州市卫生学校，甘肃兰州７３００３０；２．甘肃省血液中心，甘肃兰州７３００４６）摘要：目的通过分析兰州地区无偿献血人群梅毒感染及分布情况，为招募安全血源提供帮助，有利于安全输血。

方法对该地区２００５年３４９６４住无偿献血者按其职业、学历、性别、婚姻及居住时间进行梅毒抗体筛查，并应用统计学方法处理分析。

结果３４９６４位无偿献血者血清不合格率为０．７％，不合格情况与职业有一定相关性，文化程度较低的人群不合格率较高，已婚者比未婚者的不合格率高，与性剐及居住时阃无显著性差异。

结论加强梅毒防治知识的宣传力度，在招募献血员时应适当考虑本地区人群结构分布特点，保障输血安全。

关键词：献血者；梅毒抗体；兰州地区中图分类号：Ｒ１９５文献标识码：Ｂ文章编号：１６７ｌ一１２４６（２００６）１２—０１１３—０２梅毒抗体的筛查是安全输血的主要检查指标之一，近年来梅毒发病率逐年上升，笔者为了解兰州地区无偿献血者的梅毒感染及分布情况，进一步阻断梅毒的血液传播途径，对本地区２００５年的３４９６４位无偿献血者按其职业、学历、性别、婚姻及居住时间进行梅毒抗体筛查分析，报告如下。

１材料与方法１．１栎本来熏献血者均为无偿献血者，主要包括职员、工人、农民、军人、学生、干部及其他人员，几乎涵盖了社会各类群体。

１．２试剂ＴＰ（上海科华，ＥＬＩＳＡ）；ｆＩＰ（北京万泰，ＥＬＩＳＡ）；所有试剂均由中国药品生物制品研究所鉴定合格，运输及储存方式正确，在有效期内使用。

１．３仪器Ｍｉｃｌａｂ—ＳＴＡＲ全自动加样机（瑞士哈美顿公司）；Ｍｉｄａｂ—ＦＡＭＥ全自动酶免系统（瑞士哈美顿公司）；Ａｕｓｌａｂ酶标仪管理软件。

１．４方法标本的处理及加样的程序必须符合实验室ＳＯＰ，用Ｍｉ．ｃｌａｂ—ＳＴＡＲ全自动加样机加样，用Ｍｉｃｌａｂ—ＦＡＭＥ全自动酶免系统作后处理。

按献血法规定，初检和复检必须用２种试剂进行单孔检测，对初、复检为阳性的标本（有一种试剂为阳性），进行双孔同种试剂复检，只要有一种试剂为阳性的按阳性结果处理。

化学发光与酶联免疫吸附实验检测献血者梅毒螺旋体结果分析摘要】目的：比较化学发光法（CLIA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）检测梅毒螺旋体（TP）特异性抗体的敏感性和特异性。

方法：对2017年10月9日—2017年11月1日期间3060例合格献血员标本进行酶联免疫法和化学发光法平行检测，阳性标本进行TPPA确证。

结果：TPPA确证阳性11例，阳性率0.3%。

以TPPA作为参照，TP-CLIA灵敏度100%，特异性99.73%， TP-ELISA 的灵敏度为90.0%,特异性为99.27%。

结论：TP-CLIA法敏感性高于TP-ELISA法，具有高敏感性和特异性，操作简便，易于自动化，适用在血站中批量检测梅毒螺旋体。

【关键词】梅毒螺旋体；化学发光法；酶联免疫吸附法；梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验【中图分类号】R759.1 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）31-0028-02梅毒是由苍白螺旋体引起的经血液传播的性传播疾病[1]。

随着近几年我国梅毒感染率不断攀升，同时在无偿献血者中检测梅毒感染率也呈现逐年上升，严重威胁输血安全和用血安全[2]。

血清学检测技术中，除酶联免疫吸附试验方法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）外，增加了化学发光免疫分析试验（chemiluminescence immunoassay，CLIA）的方法。

2017年卫生部临床检验中心在全国采供血机构开展化学发光检测试点工作，本站是其中试点之一，用国产新波化学发光仪进行检测。

现将运行情况报道如下。

1.材料与方法1.1 样本来源自2017年10月9日—2017年11月1日期间，本站18-55周岁无偿献血者献血中留存的3060根血液样品。

1.2 仪器与试剂STAR全自动加样系统、FAME24/20全自动酶联免疫处理系统（瑞士哈米顿公司产品）、Easycute MiNi全自动时间分辨荧光免疫分析仪、TP-ELISA检测试剂：厦门英科新创新投有限公司；批号：2017067514.北京万泰生物药业股份有限公司；批号：N20170411。

梅毒是由苍白密螺旋体的苍白亚种即梅毒螺旋体(treponema pallidum, TP)所引起的一种古老的性传播疾病，我国20世纪60年代已基本消灭，80年代起又死灰复燃，且呈逐年增多之势[1]。

选择简单、快速、高敏感性和特异性诊断方法，对尽早诊断梅毒、控制传染源具有重要意义。

对梅毒的检测，相关实验室现在仍以非梅毒螺旋体抗原血清实验(RPR、TRUST)为主，只有部分实验室开始采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测梅毒螺旋体抗体。

本研究用ELISA和明胶凝集法诊断试剂(TPPA)对400份标本进行了检测，现将结果分析如下。

1 材料与方法1.1 标本来源共400份血浆标本，全部为性病门诊的就诊者。

1.2 试剂梅毒螺旋体抗体酶联免疫法诊断试剂盒，北京万泰公司。

梅毒螺旋体抗体明胶凝集法诊断试剂(TPPA)，日本富士生物株式会社生产。

上述试剂均在有效期内使用，严格按试剂盒说明书操作1.3 主要仪器酶标仪，Stat Fax2100、洗板机，Stat Fax2600美国倍肯公司。

1.4 统计学处理采用配对计数资料的χ2检验。

2 结果经ELISA检测，400份血清标本中，有96份为阳性;用TPPA试剂检测，阳性标本92份，弱阳性标本6份，将弱阳性计为阳性结果，共有98份阳性标本，结果见表1。

表1 400份标本ELISA和TBPA检测结果比较两种检测方法相比较，经统计学处理，χ2=0.25，P>0.05，结果差异无统计学意义。

若以TPPA作为确认结果，400份标本中阳性98份，阴性302份。

其中ELISA无假阳性，假阴性2份;梅毒 ELISA的敏感性、特异性分别为98.0%(96/98)和100%(302/302)。

3 讨论用于梅毒检测的ELISA试剂盒现已非常普遍，我们的研究表明，ELISA与TPPA有较高的重复性。

在总共400份标本中，以TPPA结果为参照，ELISA有2份假阴性，即只有2份漏检。

梅毒 ELISA的敏感性、特异性均较高。

・２２８・中国皮肤性病学杂志２００６年４月第２０卷第４期ＣｈｉｎＪＤｅｒｍＶｅｎｅｒｅｏｌ，Ａｐｒ．２００６，Ｖ０１．２０，Ｎｏ．４ｓｙｐｈｉｌｉｓｉｎｐｒｅｇｎａｎｃｙ［Ｊ］．ＯｂｓｔｅｔＧｙｎｅｃｏｌ，１９９９，９３（１）：５－８．［收稿日期］２００５—１１－１６［修回日期】２００６－０１－１２［５］ｉａｒｋｉｎＪＡ，ＬｉｔＬ，ＴｏｎｅｙＪＡ．Ｒｅｃｏｇｎｉｚｉｎｇａｎｄｔｒｅａｔｉｎｇｓｙｐｈｉｌｉｓｉｎｐｒｅｇ－ｎａｎｃｙ［Ｊ］．ＭｅｄｓｃａｐｅＷｏｍｅｎｓＨｅａｌｔｈ，１９９８，３（１）：５—８．泰安市无偿献血者梅毒血清学检测情况分析ＴｈｅＳｅｒｕｍＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＴａｉ粕ＢｌｏｏｄＤｏｎｏｒｓ’ＴＰＴｅｓｔ苏涛１，郭建光１，王云２ＳＵＴａｏ，ＧＵＯＪｉａｎｇ－ｇｕａｎｇ，ＷａｎｇＹｕｎ［摘要］目的了解无偿献血者中梅毒血清学检测情况，为保证血液安全提供有效的预防控制措施。

方法采用ＴＰ—ＥＬＩＳＡ法检测所有标本，并进行初、复检两次检测，对梅毒血清学检测情况按不同性别、年龄、职业、学历进行统计分析。

结果４８６４７例无偿献血者梅毒抗体阳性共１０８例，阳性率为０．２２％，各年度阳性率逐年增高并且差异有显著性（ｘ２＝６．３５，Ｐ＜Ｏ．０５）。

阳性率在性别、学历中差异无显著性，在年龄、职业中差异具有显著性。

结论献血前对高危人群应劝其放弃献血，并尽量从低危人群中采集血液，同时必须加强检验工作的规范化管理，从而保证血液安全。

【关键词］梅毒；无偿献血者；ＴＰ－ＥＬＩＳＡ［中图分类号］Ｒ７５９．１［文献标识码］Ｂ［文章编号］１００１—７０８９（２００６）０４—０２２８—０１梅毒螺旋体（ＴＰ）的检测是采供血机构筛查无偿献血者的项目之一，为了解梅毒血清学检测阳性在无偿献血者中的分布情况，笔者对泰安市２００２年～２００４年无偿献血者梅毒血清学检测情况做了统计分析，现报告如下。

１资料和方法１．１标本来源泰安市２００２年～２００４年无偿献血者共４８６４７例，全部体检合格。

两种方法检测梅毒抗体结果分析1材料与方法1.1材料与方法：本血库2004~2006年的无偿献血者血样8 400份；阳性对照及阴性对照血清各28份（由本省临检中心提供的已知梅毒抗体检测结果的血清盘）。

1.2试剂与仪器：梅毒螺旋体抗体检测ELISA试剂盒由上海科华有限公司生产，批验合格，在有效期内使用；梅毒螺旋体检测胶体金试剂盒由厦门新创技术有限公司生产，批批检合格，在有效期内使用；ELX-800型梅标仪及ELX-800型洗板机。

2试验方法8 400份血样的检测ELISA法取献血者血清严格按试剂盒说明书进行操作；金标试纸条则直接取其全血严格按说明书进行检测。

筛选结果呈阳性者再用TPHA进行确证。

而32份对照血清则直接取血清用上述试剂及方法进行检测。

3结果8 400份无偿献血者血样中ELISA法测出梅毒抗体34份（经TPHA确认仍为阳性），阳性率0.40%，符合率100%；金标试纸条测出梅毒抗体阳性32例，阳性率0.38%，符合率94.1%（漏检的2份血样ELISA法测其OD值分别为0.27及0.31，为弱阳性）。

对血清盘中的28份阳性对照血清进行检测ELISA法测出阳性结果28份，符合率为100%；金标试纸条测出阳性结果27份，符合率为96.4%（漏检的1份标本用ELISA法测其OD值为0.19）。

对28份阴性对照血清进行检测，两种方法的阳性检出结果均为0份，符合率为100%。

检测结果见表1、2。

4讨论金标快速诊断试纸条作为一项新型体外诊断技术，近年来发展迅速，特别是医学检验中取得了广泛应用，梅毒金标检测试剂条的原理是在硝酸纤维素膜上预包被特异性梅毒基因重组抗原，再对硝酸纤维素膜检测线和对照线依此包被特异性梅毒基因重组抗原和羊抗鼠IgG，分别作为特异性梅毒抗体的检测线和对照组。

具有检测操作简单，特异性强，灵敏度高的特点，从本实验可看出其对梅毒抗体的检测灵敏度及特异性均与ELISA法接近（本实验中漏检的3份血样用ELISA法测均为弱阳性）。

ELISA法在诊断梅毒螺旋体感染中的临床检验价值分析1. 引言1.1 梅毒螺旋体感染疾病背景梅毒是一种由梅毒螺旋体感染引起的性传播疾病，主要通过性接触传播。

梅毒螺旋体是一种螺旋状细菌，可以侵入人体黏膜或破损皮肤，引起感染。

梅毒的传播速度很快，且容易在人群中蔓延，给社会卫生带来严重威胁。

梅毒的临床表现多样化，早期症状可能不明显，包括梅毒性溃疡、梅毒性淋巴结炎等。

如果不及时治疗，梅毒可能会引起严重的并发症，如梅毒性脑膜炎、梅毒性心脏病等，甚至危及生命。

1.2 ELISA法在梅毒螺旋体感染中的应用ELISA法在梅毒螺旋体感染中的应用主要体现在其对病原体蛋白质的高度特异性识别能力。

通过将患者血清样本与梅毒螺旋体的特定蛋白质进行反应，ELISA法可以快速准确地检测出患者体内的抗体水平，从而确定是否感染梅毒螺旋体。

ELISA法还可以用于追踪患者在治疗过程中抗体水平的变化，评估治疗效果和预测疾病复发情况。

其高灵敏度和高特异性为临床诊断提供了可靠的依据，尤其对于早期诊断和治疗的重要性更是不可忽视。

ELISA法在梅毒螺旋体感染的诊断中具有重要的应用价值，为临床医生提供了有效的检测工具，有助于提高诊断准确性和治疗效果。

【2000字】2. 正文2.1 ELISA法原理及检测方法ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的免疫学技术，用于检测体液中特定抗体或抗原的存在。

ELISA法的原理是利用固相（如微孔板）上特异性抗体与待检测物质结合，然后再用与被检测物质相关的酶标记抗体结合，并通过酶底物的反应来定量检测目标物质的含量。

ELISA法的检测方法主要分为间接法、夹心法、竞争法和直接法等几种。

不同的方法可以根据实际需要选择，具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点。

在诊断梅毒螺旋体感染中，ELISA法的优势在于其高度敏感性和特异性，可以准确检测出体内的螺旋体抗体，提高了诊断的准确性和可靠性。

ELISA法还可以通过自动化和高通量检测系统来提高效率，适用于大规模筛查和临床诊断。

塞用医筮苤查！Ｑ！！生！！旦箜！堡鲞筮垫塑（甸型２』旦丛！：Ｑ！！！！！！：！塑！：Ｙ！！：！兰：№：垫（！！！！旦量！！翌！塑旦！Ｙ１２今后应加强农民的健康教育，把好乡村卫生所医疗器械的消毒关，切断其传播途径。

３．４严把血液质量检测关，加强健康教育丙肝的高危人群是受血者或接受血制品者，所以必须认真做好献血者的抗一ＨＣＶ检测，但其方法本身有一定的局限性，它并不能完全排除ＨＣＶ的携带者，所以各血站要严格把好血液质量的检测关，同时，临床上也要改变输血观念，凡可输、可不输血者则不输，能少输者则不输，尽最大可能不要输血。

推广成份输血、自体输血。

同时还要加强人群的健康教育，以达到预防ＨＣＶ传播的目的。

参考文献：［１］陈均．昆明地区无偿与有偿献血者血液检测结果比较［Ｊ］．临床输血与检验：２００２，２（１）：３１．［２］李瑞兰．天津地区献血者抗－ＨＣＶ感染情况调查［Ｊ］．中国输血杂志，１９９９，１２（２）：１１４．（收稿日期：２００７－０７－０２）两种梅毒螺旋体检测方法的对比分析董继业１，师旭敏２（１．运城市中心血站，山西运城０４４０００；２．运城市第三人民医院，山西运城０４４０００）［摘要］目的：探讨在采供血机构的血液梅毒螺旋体检测中，用抗一ＴＰＥＬＩＳＡ法替代非特异性的ＴＲＵＳＴ法的可行性。

方法：用抗一ＴＰＥＬＩＳＡ法和ＴＲＵＳＴ法同时检测６０６７７份血标本，并对两种方法的检测结果进行对比分析。

结果：抗一ＴＰＥＬＩＳＡ试剂检出阳性率明显高于ＥＬｌＳＡ法，同时抗一ＴＰＥＬＩＳＡ法阴性（ＴＲＵＳＴ法检测阳性）经ＴＰＰＡ法鉴定有阳性结果。

结论：虽然抗一ＴＰＥＬＩＳＡ法的特异性和灵敏度明显高于ＴＲＵＳＴ法，尚不能完全取代ＴＲＵＳＴ法，但两种方法可相互补充。

［关键词］无偿献血；梅毒螺旋体；反应素；抗一ＴＰ［中图分类号］１１３７７＋．１［文献标识码］Ｂ［文章编号］１６７１－５０９８（２００７）２，８－３９００－０２梅毒螺旋体（Ｔ．ｐａｌｌｉｄｕｍ，ＴＰ）属于密螺旋体属苍白螺旋体的苍白亚种，是引起人类梅毒的病原体。