(完整版)动物疫病检测样品采集、重大动物报告及采样表填写注意事项.doc

①禽泄殖腔拭子。向泄殖腔内插入经过灭菌的拭 子，深度保持在1～5 cm之间，轻轻旋转后就可将黏膜 表层的粪便、组织等刮取下来。于含有2 mL PBS液的 离心管中放置样品端，仔细密封后，保存于低温环境 中。目前，在高致病性禽流感等疫病监测过程中，通常 会选择本种样品采集方法。②禽喉气管拭子。从口腔向 咽的后部插入经过消毒灭菌的棉拭子，擦拭、旋转后于 缓冲液中保存拭子。③牛羊O-P液。动物口蹄疫监测、 PCR试验中经常采用本种方法。实施采样工作前，需在 1%氢氧化钠溶液或0.2%柠檬酸溶液中浸泡探杯，持续 3～5 min。利用清水对探杯进行冲洗，清水温度尽量与 动物体温保持一致。对每头动物进行采集后，皆需消 毒、清洗探杯，避免动物食道遭到酸碱灼伤。实施采样
Common Sample Collection Methods and Precautions for Animal Disease Monitoring
FANG Weihong （Animal Disease Prevention and Control Center of Jian'an District，Xuchang City，Xuchang Henan 461100，China）
0 引言
动物疫病监测、实验室诊断检测等工作皆需依据采 集到的动物样品来开展，检测、分析采集到的样品，能 帮助动物防疫机构对地区动物疫病流行状况充分了解， 高效研制与评估疫苗等，样品采集工作会对动物疫病监 测事业的发展产生直接影响。相关人员需深入学习与掌 握样品采集方面的知识技术，明确各个环节的注意要 点，不断提高样品采集水平。
Abstract：Through the development of animal disease monitoring，the effectiveness of the prevention and control of major animal diseases can be improved，and the safety of animal husbandry production and meat food safety can also be guaranteed．Sample collection is a key link in animal disease monitoring．The standardization and scientific nature of sample collection will have a direct impact on the results of animal disease monitoring．The staff should combine the monitoring items and content，choose a reasonable sample collection method，and strictly control the collection process to avoid irregularities，otherwise the sample quality will be affected． Keywords：animal disease monitoring，sample collection，matters needing attention

近年来，随着新发动物传染病的不断涌现，以及“老病”的继续肆虐，我国猪传染性疫病情况更加复杂，防控压力日益增大，严重危害着养猪业的健康发展，同时对养猪场造成巨大的经济损失。

目前，我国针对动物传染性疾病采取的防控原则为：预防为主，防治结合。

这就要求我们要搞好疫苗免疫接种工作，同时也要加强各种动物疫病病原体的检测，加强猪群一些传染性疫病抗体效价的检测，定期对疫苗免疫后进行抗体滴度的监测，做到以检测数据指导科学合理的制定免疫程序。

由于许多养猪场从业人员专业能力普遍较低，个人防护意识较弱，经常出现采集的样品不能用，或者由于存放、运输不当，造成样品的不合格，进而影响检测结果的准确性，偶尔也有养猪场工作人员在样品采集过程中感染某些动物疫病，现就采样前准备、临床样品采集、保存和送检方法，其他的一些注意事项做简要介绍。

一、采样前个人防护和器械准备1.个人防护。

样品采集人员要充分认识到猪群可能感染有一些烈性的人兽共患病，在样品采集的过程中可能会通过直接接触、受损的黏膜等途径伤及采集人员，也可能经采集人员将病原体带到外界造成扩散。

因此在样品采集前必须做好个人防护工作。

穿戴安全可靠的的防护服（尽可能使用一次性高级别防护服）、一次性手套、防护帽、医用口罩、护目镜、胶鞋等。

2.器械。

采集血液样品时尽可能使用一次性塑料采血针或真空采血管，分离组织样品时所有器械必须严格消毒，避免带入其他病原体。

应根据猪只大小选择采血针头的大小，同时，准备碘伏、记号笔、抓猪器、耳标等器具。

针对不同的采血对象选择合适针头；准备毛剪、消毒棉球、记号笔、自封袋等。

3.猪群。

对猪群采集血液样品最好在早晨，动物空腹时进行。

病死猪病理解剖应该有专业人员指导，谨慎操作，若发现血液凝固不良、天然孔出血等症状，怀疑为感染炭疽的病例时禁止解剖。

采集的动物临床样品应该具有群体代表性。

二、血液样品的采集血液是养猪场临床送检样品中最常检测的，主要是通过定期采集血液样品并分离血清进行一些动物疫病抗体水平的检测，用准确数据分析养猪场疫病防控压力，进而制定科学合理的免疫程序。

浅谈动物疫病监测样品采集、运送、保存应注意的问题近年来，实验室监测在重大动物疫病的诊断及防控中发挥了不可取代的重要作用。

而实验室监测结果的准确性、有效性除受实验方法、实验设备、监测试剂、实验操作等因素影响外，还要受到样品的采集、运输、保存等因素的影响。

样品的采集、运输、保存是监测工作顺利开展的基础，决定了实验结果的可靠性，检验结果能否反映疾病的主要病原、病因、一定程度上依赖于样品的代表性和质量。

实验室监测结果的准确性、有效性，是否能够反映出疫病的真实情况，都与检测样品的采集有重要关系。

笔者通过自己从事动物疫病监测工作多年的做法和体会，动物疫病监测样品采集、运送、保存应注意以下几方面的问题：1.样品采集要有代表性、合理性开展疫病监测工作采样时，要根据监测方案的整体要求、目的、方法和措施，结合当地区域分布，选择具有代表性的点或养殖场（户），做到采样布局合理，应尽可能全面、充分地反映总体的特征。

同时，还要考虑动物的日龄、饲养密度、体质强弱，地势特点、交通特点等因素。

只有这样采集样品，通过监测结果，才能综合评估出总体疫病流行、分布趋势。

2.样品采集要有时效性、适量性由于监测对象和监测项目的不同，样品采集是有时间要求的，应严格按监测对象和项目所要求的时间及时采样。

目前疫病监测主要通过检测抗体和病原两种方法。

但是，疫苗免疫或病原感染后，机体内的抗体或病原浓度在不同时期是不同的，往往监测到的数值是不一样的。

所以要根据监测的目的选取不同的时间采取样品，如果检测疫苗的保护效价，一般在免疫后10～15d采集。

监测病原时，由于感染初期病原在机体内存在较少，并在各组织内分布不均，所以要根据不同时期，采集不同部位的组织进行监测。

病死后的动物要立即采集样品，尤其夏季不应超过6h，冬季不能超过24h，拖延过久，则组织变性、腐败，影响监测结果。

另外，采集样品的数量要满足诊断监测的需要，并留有余地，以备必要的复检使用。

3.样品采集要有典型性、针对性动物疫病监测采集样品时，要根据检测的目的，以及实验室监测方法的不同，进行有针对性的采集样品。

动物疫病检测样品送检要求1样品采集1.1春秋两防样品采集1.1.1畜禽血清样品采集用真空采血管或者注射器采集动物血液3—5mL，倾斜放置到血液凝固后方可装袋（冬天最好在温和环境下放置以便血清的析出），然后在2000—3000转/分，5—10分钟即可分离到血清，将血清用1.5mL离心管分装，每管血清样品：家畜1～1.5 mL，家禽0.5～1.0 mL。

每个场（户）的样品用一个单独的采样袋进行包装，需在采样袋上注明乡镇名称、养殖场名称、样品种类和数量、采样时间等。

例如老鹰山街道办、大丰养殖场、猪血清30份、2017年4月20日。

1.1.2禽双棉拭子采集取无菌棉签2颗，分别插入禽喉头内/泄殖腔内转动3圈，取出放入2mL的无菌离心管中，去掉高出管壁部分，盖紧管盖，做好标记。

放入低温样品保存箱。

1.2疑似重大动物疫病样品采集1.2.1高致病性禽流感样品采集1.2.1.1活禽病料应包括气管和泄殖腔拭子10份，采集方法同1.1.2。

1.2.1.2采集病死禽或发病症状明显禽（不得少于5只）的气管、脾、肺、肝、肾和脑等组织样品。

1.2.1.3采集10份症状明显禽的血清样品，采集方法同1.1.1。

所有样品应密封于塑料袋或瓶中，置于有制冷剂的容器中运输，容器必须密封，防止渗漏。

样品若能在24小时内送到实验室，冷藏运输。

否则，应冷冻运输。

1.2.2口蹄疫样品采集1.新鲜水泡皮或组织样品（淋巴结、肌肉等）用装有50%甘油-磷酸盐缓冲液（PH7.4）2mL离心管密封保存。

1.2.3小反刍兽疫样品采集1.2.3.1无菌采集病羊眼棉试子、口棉拭子、鼻棉拭子，放入2mL的无菌离心管中，去掉高出管壁部分，盖紧管盖，做好标记。

放入低温样品保存箱。

1.2.3.2采集被扑杀或刚死亡病畜的脾、肠系膜和支气管淋巴结、肠黏膜、肺等组织。

1.2.3.3无菌采集全血，用常规方法分离血清。

样品采集后，置冰上冷藏尽快送至实验室。

1.3注意事项1.3.1疑似炭疽的病例禁止解剖炭疽病常呈地方性散发性流行，干旱或多雨，洪水涝积，吸血昆虫多等都是炭疽爆发的因素。

动物疫病实验室检验采样方法 (NY/T541-2002)1 范围本标准规定了动物疫病诊断实验室的样品采集方法。

本标准适用于病因(原)学、病理组织学、血清学、免疫学等实验室检验所需样品的采集。

2 样品采集的一般原则和采集前的准备2.1 样品采集所遵循的一般原则2.1.1 凡发现患畜(包括马、牛、羊及猪等)有急性死亡时，如怀疑是炭疽，则不可随意解剖，应采取患畜的血液，万不得已时局部解剖作脾脏触片的显微镜检查。

只有在确定不是炭疽后，方可进行剖检。

2.1.2 采取病料的种类，根据不同的疾病或检验目的，采其相应的脏器、内容物、分泌物、排泄物或其他材料；进行流行病学调查、抗体检测、动物群体健康评估或环境卫生检测时，样品的数量应满足统计学的要求。

采样时应／jxjD,．谨慎，以免对动物产生不必要的刺激或损害和对采样者构成威胁。

在无法估计病因时，可进行全面的采集。

检查病变与采集病料应统筹考虑。

2.1.3 内肌病料的采取，如患畜已死亡，应尽快采集，最迟不超过6h。

2.1.4 血液样品在采集前一般禁食8h。

2.1.5 应做好人身防护，严防人畜共患病感染。

2.1.6 应防止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒和病害肉尸的处理。

2.2 使用器械的消毒刀、剪、镊子等用具煮沸消毒30min，使用前用酒精擦拭，用时进行火焰消毒。

器皿(玻制、陶制等)经103kPa高压30min，或经160C干烤2h灭菌；或放于0．5％一1％的碳酸氢钠(NaHCr~)水中煮沸10min 15rain，水洗后，再用清洁纱布擦干，保存于酒精、乙醚等溶液中备用。

注射器和针头放于清洁水中煮沸30rain。

一般要求使用“一次性”针头和注射器。

采取一种病料，使用一套器械与容器，不可用其再采其他病料或容纳其他脏器材料。

采过病料的用具应先消毒后清洗。

检查过传染性海绵状脑病的器械要放在2mol／L的氢氧化钠(NaOH)溶液中浸泡2h以上，才可再使用。

3 样品的采集3.1 血液3.1.1 采血部位大的哺乳动物可选用颈静脉或尾静脉采血，也可采胫外静脉和乳房静脉血。

动物疫病检测样品送检要求1样品采集1.1春秋两防样品采集1.1.1畜禽血清样品采集用真空采血管或者注射器采集动物血液3—5mL，倾斜放置到血液凝固后方可装袋（冬天最好在温和环境下放置以便血清的析出），然后在2000—3000转/分，5—10分钟即可分离到血清，将血清用1.5mL离心管分装，每管血清样品：家畜1～1.5 mL，家禽0.5～1.0 mL。

每个场（户）的样品用一个单独的采样袋进行包装，需在采样袋上注明乡镇名称、养殖场名称、样品种类和数量、采样时间等。

例如老鹰山街道办、大丰养殖场、猪血清30份、2017年4月20日。

1.1.2禽双棉拭子采集取无菌棉签2颗，分别插入禽喉头内/泄殖腔内转动3圈，取出放入2mL的无菌离心管中，去掉高出管壁部分，盖紧管盖，做好标记。

放入低温样品保存箱。

1.2疑似重大动物疫病样品采集1.2.1高致病性禽流感样品采集1.2.1.1活禽病料应包括气管和泄殖腔拭子10份，采集方法同1.1.2。

1.2.1.2采集病死禽或发病症状明显禽（不得少于5只）的气管、脾、肺、肝、肾和脑等组织样品。

1.2.1.3采集10份症状明显禽的血清样品，采集方法同1.1.1。

所有样品应密封于塑料袋或瓶中，置于有制冷剂的容器中运输，容器必须密封，防止渗漏。

样品若能在24小时内送到实验室，冷藏运输。

否则，应冷冻运输。

1.2.2口蹄疫样品采集1.新鲜水泡皮或组织样品（淋巴结、肌肉等）用装有50%甘油-磷酸盐缓冲液（PH7.4）2mL离心管密封保存。

1.2.3小反刍兽疫样品采集1.2.3.1无菌采集病羊眼棉试子、口棉拭子、鼻棉拭子，放入2mL的无菌离心管中，去掉高出管壁部分，盖紧管盖，做好标记。

放入低温样品保存箱。

1.2.3.2采集被扑杀或刚死亡病畜的脾、肠系膜和支气管淋巴结、肠黏膜、肺等组织。

1.2.3.3无菌采集全血，用常规方法分离血清。

样品采集后，置冰上冷藏尽快送至实验室。

1.3注意事项1.3.1疑似炭疽的病例禁止解剖炭疽病常呈地方性散发性流行，干旱或多雨，洪水涝积，吸血昆虫多等都是炭疽爆发的因素。

益阳市兽医局
粪便、棉拭子和O/P液样品的采集
泄殖腔拭子的采集：将棉拭子插入泄殖腔内约1.5-
2cm,旋转后沾上粪便。 咽喉拭子、鼻腔拭子的采集：将灭菌的干棉拭子插 入口腔至咽的后部或鼻腔，轻轻擦拭并慢慢旋转将 拭子拔出，将棉拭子放入缓冲液内。 O/P液是从动物食道/咽喉刮取的黏膜样品，用特制 的食道探环刮取黏膜，放入样品保存液中。
也可以作为病原学试验的样品。 全血（抗凝血）：抗凝剂有肝素，阿氏液，枸橼酸 钠和4%EDTA，或者用玻璃珠，脱纤维蛋白。 血清：不加抗凝剂的血液，在室温静置2~4h（或 37℃1h）待血液完全凝固后，析出上清即为血清。 血浆：抗凝血混匀后，静置，上清即为血浆。
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检测样品的分类
细菌学检测样品：采集发病典型或刚死亡的整体动物送实验
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2.猪只的保定
种公母猪需要用保定绳固定，并且要求尽可能 吊得高一点，使猪的头颈与水平面呈 30度以上（如 图），既方便采血人员察看采血部位，又使前腔静 脉向外突出，静脉血充胀。 20千克以上的中大猪，由 1～2名饲养员用捉 猪器(或保定绳)拉住，头昂起，偏向右侧(如图)。 20千克以下的小猪，可由 1～2名饲养员抓起 、倒立，后背紧靠在栏架上（如图）。
益阳市兽医局
几种重要疫病的采样时机
禽流感、新城疫：发病初期采全血，泄殖腔\咽喉棉
拭子；后期采集新鲜粪便；剖剪后的气管，肺脏， 肾脏等 口蹄疫：全血，水泡皮，水泡液，O/P液及口腔分泌 物和咽喉棉拭子 猪瘟，猪伪狂犬，蓝耳病：全血，血清，组织病料 ：肺脏，脾脏，淋巴结，扁桃体，流产胎衣等，新 鲜精液或冷冻精液 猪流感：在发热期采集鼻咽棉拭子和肺组织病料。
益阳市兽医局
溶血程度不一的血清样

健康养殖·诊疗畜牧业环境 2020.2380摘　要：动物疫病研究能够为人类的疾病研究提供借鉴，本文密切结合实际，通过对动物疫病的实验室研究，运用样品采集法，综合采集了动物的组织和血液、分泌物和体液、排泄物等等，对其进行详细阐述研究，综合指出了采样中的相关技术标准，能够为基层的实际工作提供较大的帮助。

关键词：动物疫病研究；实验室样品采集；注意要点1　前言对动物疾病的研究能够有效地防控动物发生疾病，其中，动物样品的采集也至关重要，样品采集良好能够提升动物疫病的诊断正确率，并提高监测的质量水平，本文系统阐述了动物疫病实验室样品采集技术所遵循的原则、流程和运用，希望能为基层的实际工作带来一些启发。

2　采集样品应遵守的原则当发现患病的牲畜突然死亡时，在排除了人畜同患的疫病后，才能开展解剖工作。

人应做好防护工作，运用一系列的消毒杀菌方法，并佩戴防护面具，防止人员感染。

接下来应处理好尸体，对环境进行有序地消毒，预防疫病向外蔓延；精确记录样品的来源，运用合适的采集方案，使得前期工作精确无误，在采集样品时，应遵循无菌操作的原则，按照顺序采集，先采集暴露的样品和动物体表，再对其进行剖解采样。

3　口腔等呼吸系统体液的采集首先应用灭菌棉拭子蘸取采样部位，正向和反向旋转后，应马上将棉拭子浸入含有保存液的容器里，剪掉外露的棒，贴标签、写采样单，最后将其密封，将其处于低温的状态中进行保存，并尽快送到实验室。

4　采集血液4.1　采血部位和要求在牛羊、马属动物等身上，采血部位应该在尾静脉和颈静脉处，在猪身上，应在前腔静脉和耳静脉处采集。

在采血时，时刻保持无菌状态，在专业的采血器皿内来操作，按照监测项目的量来决定采血量的多少，一般情况下，大家畜在6～11ml，小家畜在2～6ml，禽类在1～2ml，同时，在采血前，应先用碘酒消毒杀菌，再用乙醇消毒，保证采血部位干净无污染，无病菌。

4.2　进行血清分离在室温状态下，将盛装有血液的器皿倾斜30°放置3～4h，等到血液呈现凝固状态时，将其竖直放置，析出血清，对其分离，并送去检验。

动物疫病监测样品的采集技术【摘要】样品采集是动物疫病监测和诊断工作顺利开展的前提和基础，样品的质量好坏决定着检测工作的成败，检测结果的准确性在一定程度上依赖于样品的代表性和质量。

这篇文章从不同检测对象出发，阐述了不同的采样技术要点，使我们在今后的工作中能更清楚地知道如何才能正确地采集到高质量的检测样品。

【关键词】动物疫病；监测样品；采集技术实验室监测在重大动物疫病的诊断和防控中发挥了重要作用，监测结果的准确性、有效性除受实验方法、实验设备、监测试剂、实验操作等因素影响外，送检样品的质量和数量的影响也很大。

下面将动物疫病检测样品的规范化采集技术简述如下。

1 样品采集要遵循的一般原则1.1 样品种类根据不同疫病或检验目的，分别采集相应的组织、器官、分泌物、排泄物等；在无法估计发病群体的病因时，可进行全面的样品采集。

1.2 样品数量在进行流行病学调查、抗体监测、动物群体健康评估或环境卫生检测时，样品数量应满足生物统计学的要求。

1.3 不可盲目解剖凡发现患畜有急性死亡，怀疑是炭疽病时则不能随意剖检，而应采取局部皮肤或耳尖的血液涂片镜检，排除炭疽病后方可解剖采样。

1.4 采样时间采死亡动物的病料要及时，以死亡后6h内最佳；对于感染传染病的则要在发病前期采样。

1.5 做好人身防护严防人畜共患病的感染，做好环境消毒和病害肉尸的处理，防止环境污染和疫病的传播。

2 样品采集2.1 血清学检测样品2.1.1 数量用一次性采血器或一次性注射器（5ml）从畜禽静脉抽取血液3ml 左右，在注射器内留一定空间。

2.1.2 部位猪从前腔静脉采血，牛、羊、马等动物从颈静脉或尾静脉采血，用量少时也可以从耳静脉抽取，家禽从翅静脉采血。

2.1.3 标注在采血瓶上贴上标签，注明种类、地址、编号、日期等。

2.1.4 血清分离将采血瓶倾斜45°放在室温下静置，待凝固后血清自然析出时吸出，或经离心分离后吸出血清，将其装入无菌瓶，在瓶上贴上标签。

关于动物检疫样品的采集和检疫方法【摘要】动物检疫样品的采集和检疫方法是保障动植物健康和食品安全的重要环节。

本文首先介绍了动物检疫样品采集方法，包括采样工具、采集时间和地点等方面的注意事项；其次详细描述了动物检疫样品的检疫方法，包括实验室检测和检疫处理流程；同时提出了样品保存和运输的要求，强调了保密性和标识的重要性；接着列举了常见动物检疫样品的处理方法，如病原体检测和虫害鉴定等；最后探讨了检疫标本的处理和处置，提出了遗传物质和化学物质的处理方法。

结论部分强调了动物检疫样品的采集和检疫方法对于防控疫病传播和保障民众健康的重要性，提出了规范化操作和技术提升是未来发展方向，总结了本文所涉及的主要内容和重点观点。

【关键词】动物检疫样品、采集方法、检疫方法、样品保存、运输要求、处理方法、标本处理、处置、重要性、发展方向、总结。

1. 引言1.1 研究背景动物检疫是保障农业生产、保护生态安全和人类健康的重要手段之一。

随着全球贸易活动的不断增加，动植物疾病的传播和风险也在增加。

对进出口动物及动物产品进行检疫监管，对有效防控疫病传播具有重要意义。

动物检疫样品的采集和检疫方法是保障检疫工作顺利进行的重要环节。

只有规范的采集方法和检测手段，才能确保样品的可靠性和准确性，从而有效防范疫病的传播和传入。

近年来，随着科技的不断进步和检疫法规的不断完善，动物检疫样品的采集和检疫方法也不断进行优化和提升。

仍然存在一些问题和挑战，如采集过程中可能受到外界环境的干扰，检测方法的灵敏度和准确性有待提高等。

有必要对动物检疫样品的采集和检疫方法进行深入研究和探讨，以不断提升我国动植物及其产品的检疫水平，维护国家的生态安全和人民的健康。

1.2 研究目的动物检疫样品的采集和检疫方法对于保护国家农业生产、防止动植物疫病传播、维护公共卫生和生态安全具有重要意义。

通过深入研究和总结该领域的相关知识和经验，旨在建立规范的动物检疫样品采集和检疫方法，提高检疫工作的效率和质量，减少疫病传播的风险，维护国家农业生产的稳定发展。

影 响 。并 且 样 品 的保 存 、运 输 、采 集 都是 检测 工 作 能否 顺 利进 行 行样 品采集 的时候 感 染病 原 ，造 成 事 故 的发生 。如果 是 像 炭疽 等
的基 础 ，充 分 决定 了检测 结 果 的可 靠 性 ，检测 结 果 是否 能 够有 效 疫病 则 不 能进 行解 剖 采样 ，而 是应 该 进行 耳尖 或 者是 局 部皮 肤 血
Байду номын сангаас
反 映 出疫 病 的 主要 病 因 、病 原 ，在 某 些程 度 上都 会依 赖 于 样 品 的 液 的采 取 。检 测后 发 现不 是 炭疽 才 可 以实 施解 剖 采取 样 品 。在 样
质 量 以及 代 表性 。而 检测 结 果 的有 效性 与 精 准性 ，到底 是 不是 可 品采 集 完毕 之 后 ，工 作人 员 要及 时针 对尸 体进 行 处理 ， 已经被 污
原 和抗 体 等 两种 方 式 方法 。可是 在 病原 感 染 和疫 苗 免疫 之后 ，机 装置 在 一个 容 器 里面 ，并 且 需要 及 时 的密 封 。如 果所 使 用 的是 塑
体 内 部 的病 原浓 度 和抗 体 在 不 同时 期都 是 不一 样 的 ，一 般 检测 显 料袋 ，则需 要 应用 两 层 ，还 要使 用 线进 行 分开 结 扎 塑料 袋 口，只
集 以便 进 行 样 品检 测 。病 死 动物 应该 立 即 进行 样 品采 集 ，特别 是 到检 测室 ；经 过冻 结冷 藏 的样 品必须 要在 ２４ｈ之 内运输 到达 。如果
在夏 天 ，切 记不 要超 过 ６ｈ，冬天 不要 超过 ２４ｈ。时 间耽误 的越长 ， 所 采集 的样 品无法 在２４ｈ以内运输 到 检测 室 ，就必 须要 在运 输 的过

重大动物疫病样品的采集及前处理一、采集样品的重要性采集检测样品是诊断检测工作的重要内容。

采样的时机是否适宜，样品是否具有代表性，样品处理、保存、运送是否合适及时，与检验结果的准确性、可靠性关系极大。

二、样品采集原则•1、动物疫病样品采集遵循适时、典型、无菌、适量和生物统计的原则。

•2 、对急性死亡的患畜（马、牛、羊及猪等），若怀疑是炭疽等烈性传染病时，从耳尖或四肢未梢血管取血制成涂片，染色镜检，在排除炭疽后方能剖检采样。

•3、根据不同的检验要求进行样品采集，采取包括相应的组织器官、内容物、分泌物、排泄物或其他材料。

•4、进行流行病学调查、抗体监测、动物群体健康评估或环境卫生检测时，样品数量应满足生物统计学的要求。

•5 、无法估计病因时，可对组织器官、分泌物和排泄物进行系统全面的的采集。

•6 、如患畜（禽）已死亡，应尽快采集样品，死亡时间夏天不得超过6h，冬天不超过24h. •7、动物剖检中应做好人身防护，严防人畜共患病感染。

•8、采集病原微生物样本的工作人员应防止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒和动物尸体的处理。

•9、对样本的来源、采集过程和方法等作详细记录。

三、器械准备•1、器械的选择根据采集样品的需要，分别选择不同的器械、容器等器材。

•2、器材无菌处理2.1 金属器械可采用高压、干热、煮沸消毒30min。

临用时75%酒精拭擦，或用时进行火焰消毒。

2.2 器皿（玻制、陶制等）经103kPa高压30min，或160℃干烤2h灭菌，或经0.5%～1%碳酸氢钠水中煮沸10min～15min，再用无菌纱布擦干，无菌保存备用。

3、采样单、笔、防护用品等的准备。

4、消毒药物准备。

四、血清样品的采集和处理•牛——颈静脉、尾根静脉•羊——颈静脉•猪——小猪用前腔静脉、大猪站立式采前腔静脉•禽——正常用翅静脉（还可用心脏或桥静脉联合血窦）•大型动物采血量分别为5毫升，家禽的采血量为2-3 毫升。

血样收集于无菌的试管或采血器中，于37℃放置30分钟，以促进血液的凝固及血清的渗出，然后置于4℃过夜，在2000-4000rpm 离心5分钟，取血清装到灭菌的指形管或青霉素小瓶中。

使 凝 集 不 明显 。缓 冲 液 （Ｂ ） Ｐ Ｓ 尽可 能现 配现 用 ， ４ ６ 不要人 为延长 孵育 时 间，导致 非特 异性 结 ． 合紧附于反应孔周 围，难 以清洗彻底 。 浓度和 酸碱度 要准确 。
． ２４ Ｈ试验 过程 ①在 使用 微量 移 液器 时 ，吸 ４ ７ 采 用手 工洗板 时 ，要 注 意孔与 孔之 间液 体 ． Ｉ 头要安装 牢 固，防止漏气 ；②移 液器滴头不要 离 的交叉污染 。 开液面 ，防止产生气泡 ，造 成移液量不准 ：③ 使 ４ ８ 使用洗板机 洗板时 ，要保证洗 液注满各孔 ， ． 选择干净 、 用过和未 使用过 的加样头分 开放 ；④ 病毒悬液和 洗 板针畅通 ，洗完板 后最好在吸水纸 （ 红细胞悬 液在使用前注意摇匀 ，防止加入 时浓度 无或少尘 的吸水材料） 上拍干 。 高低不一 ，人 为造成误差 ，保证每 一孔 中加入 的 ４ ９ 显 色剂尽 量在 临用前 配制 ，坚 持不用 过期 ． 浓 度准 确一 致 ；⑤ 反应温 度 不 能太 高 ，若在 ３ 显色剂 ，肉眼可见颜色 的显色剂不能用 。 ７ ｏ（ Ｃ 如温 箱） 下进 行 ，会影 响检测结果 ；⑥ 标准抗 ５ 凝集试验 注意事项 原稀 释 液浓 度必 须 为 ４个 Ｈ Ａ单位／５ ｌ ２ ，必须 ５ １ 某 些细 菌当制 成细菌 悬液 时很 不稳 定 ，在 ． 每天制备 并在试验 前滴定 ；⑦孵育 时间要严格控 没有特 异性抗体存在 下，亦 可发生凝集 ，谓之 白
响细菌 或病毒分 离：⑤ 组织样本要装 在 １ ｌ ５ｍ 或 箱 内保存 ，不可过久 ，要力求新鲜 。 ５ ｌ Ｐ管中，密封 ，防止泄露污染 ；⑥２ ２ ２ ２ 除鸡血清 以外 ，用 鸡红细 胞检测 哺 乳动 ０ｍ Ｅ ４ｈ内 ．． 送抵 实验室 ，加冰块保温容器 中运送 ；⑦２ ４ｈ不 物和 水禽 的血清 时需要除去存在于血清 中的非特

生产指导ＬＩＶＥＳＴＯＣＫＡＮＤＰＯＵＬＴＲＹＩＮＤＵＳＴＲＹＮｏ．１２，２０２２动物疫病常见样品的采样方法及注意事项江　蕾，黎纯敏，曾育麟（西昌市动物疫病预防控制中心，四川西昌６１５０００）摘　要：随着社会发展，动物疫病表现的症状越来越复杂。

动物疫病的诊断与防控需要兽医实验室进行相应的动物疫病试验支持，其中，样品的采集质量是动物疫病诊断与防控的基石。

主要针对常见动物的血样、组织样品及拭子等动物疫病常见样品的采样原则、操作方法及注意事项进行探讨。

关键词：基层兽医人员；动物疫病样品；采样原则；采样方法；采样注意事项ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０２２．１２．０１０　引言随着社会发展，动物交易方式方法越来越多，动物疫病随着动物交易与运输，流传速度越来越快，流传范围也越来越广，表现症状也越来越复杂。

动物疫病的诊断与防控已无法完全依靠肉眼判断的结果进行，需要兽医实验室进行相应的动物疫病试验支持。

基层兽医人员在接到动物疫病发生报告或排查过程中发现动物疫病时，须第一时间到达动物疫病发生现场进行流行病学调查，并根据不同的动物疫病检测要求采集不同的样品送兽医实验室进行相应检测试验。

所以，基层兽医人员对动物疫病样品的采集质量是动物疫病的诊断与防控的基石。

本文主要针对动物的血样、组织样品及拭子等动物疫病常见样品的采样原则、操作方法及注意事项进行探讨。

　采样的一般原则１．１　活畜禽１）血液样品：在采样前一般禁食８ｈ，然后根据采样对象、检验目的及所需的血量确定采血的方法与采血部位。

禁止采集血肿部位血液。

２）体表样品：采集病变部位与健康部位的交界处、病变部位。

３）拭子：拭子须在指定部位充分旋转。

４）血纸：血液量须浸透采集纸片。

５）粪便：必须是新鲜粪便。

１．２　动物尸体１）血液。

凡是血液凝固不良、天然孔出血的病死动物，首先排除炭疽，然后采集耳尖血。

２）组织样品。

①应从胸腔到腹腔，先采实质脏器，最后采腔肠器官等部位，尽量无菌采集，避免外源性污染。

动物疫病实验室检测规范化流程1.样品采集：首先，必须根据具体的检测需求进行样品采集。

根据不同的疫病类型，可能需要采集动物的血液、尿液、粪便、组织等样品。

采样过程需要在洁净的环境中进行，避免交叉污染。

3.样品处理：接收样品后，需要进行样品处理。

这可能包括样品的预处理、离心、稀释等操作。

样品处理的目的是为了提取目标物质，并准备好进行后续实验的样品。

4.DNA/RNA提取：对于一些疫病，需要提取样品中的DNA或RNA。

DNA/RNA提取的方法因样品类型而异。

目前，常用的DNA/RNA提取技术包括酚-氯仿法、磁珠法及商业化试剂盒提取等。

5.聚合酶链反应（PCR）：PCR是一种常用的检测方法，可用于检测目标病原体的DNA或RNA。

在PCR反应中，需要制备适当的PCR试剂和引物，根据反应湿度和时间在温控仪中进行PCR反应。

6.结果分析：PCR反应后，需要进行结果分析。

常用的方法包括凝胶电泳、酶联免疫吸附实验（ELISA）和即时PCR分析等。

这些方法可以显示出PCR反应后的目标产品，以判断样品是否含有目标疫病。

7.数据记录和结果报告：对于每个样品，都需要记录结果数据。

这些记录应包括检测结果、样品处理步骤、实验参数和备注等信息。

最终，这些数据应以适当的形式进行结果报告。

8.质量控制：为确保结果的准确性和可靠性，实验室应该执行严格的质量控制措施。

这包括采用阳性和阴性对照样品、检测线性范围等。

质控数据应记录并纳入最终的结果分析中。

9.仪器维护和校准：实验室的仪器和设备应定期进行维护和校准，以保证其良好的工作状态，并且有助于减少内部变异和提高准确性。

10.回顾和改进：实验室应该定期回顾其操作流程和结果，以发现潜在的问题和改进的空间。

这可能包括技术交流、培训和采用新技术等。

总的来说，动物疫病实验室的检测规范化流程需要包括样品采集、处理、分析和结果报告等环节。

这些流程应按照科学的方法进行，并且要进行质量控制和仪器维护。

规范化的流程能够确保实验室的工作结果准确可靠，有助于提高疫病检测的效率和科研水平。

动物疫病常见样品的采样方法及注意事项2.新疆伊犁巩留县阿克吐别克镇农业（畜牧业）发展服务中心 835407摘要:随着社会发展，动物交易方式方法越来越多，动物疫病随着动物交易与运输，流传速度越来越快，流传范围也越来越广，表现症状也越来越复杂。

动物疫病的诊断与防控已无法完全依靠肉眼判断的结果进行，需要兽医实验室进行相应的动物疫病试验支持。

基层兽医人员在接到动物疫病发生报告或排查过程中发现动物疫病时，须第一时间到达动物疫病发生现场进行流行病学调查，并根据不同的动物疫病检测要求采集不同的样品送兽医实验室进行相应检测试验。

所以，基层兽医人员对动物疫病样品的采集质量是动物疫病的诊断与防控的基石。

基于此，本篇文章对动物疫病常见样品的采样方法及注意事项进行研究，以供参考。

关键词:基层兽医人员;动物疫病样品;采样原则;采样方法;采样注意事项引言为有效促进养殖业健康发展，维护公共卫生安全，各地区结合本地畜禽养殖实际情况，完善动物疫病应急预案，组织并制定疫病防治规划，以此保障畜禽产品的有效供给。

在这一过程中，动物疫病监测在整个动物疫病防控体系中体现出重要价值.1样品采集所遵循的基本原则患病动物出现急性死亡时，要限制活动，禁止开放解剖，确诊为炭疽后才能进行解剖取样。

采样过程中应先从胸腔到腹腔取实质器官，再取肠道器官，并选择无菌采集方式，避免对外环境的污染。

既要选择采集典型的、明显的患病材料，也要根据诊疗结果和监测目的，采集不同的患病材料。

为保证试验的准确性，不得采集使用过药物的动物样本。

如果动物死亡，取样应在死亡后6小时内完成。

采集血样前，动物需禁食8小时，然后根据检验目的和取样对象确定血样数量。

采样人员在采样过程中要做好自身防护工作，避免感染人畜共患病。

采样后应集中处理废弃物，并对采样环境进行消毒，避免对周围生态环境造成污染。

在采集过程中，坚持先筛查后采样、尽快采样、无菌操作、合理选择采样和生物安全防护的原则。

2采样方法2.1采血方法采血主要针对猪、牛、羊和禽，不同的动物采血部位与采样器械均不同。

重大动物疫病样品的采集及前处理一、采集样品的重要性采集检测样品是诊断检测工作的重要内容。

采样的时机是否适宜，样品是否具有代表性，样品处理、保存、运送是否合适及时，与检验结果的准确性、可靠性关系极大。

二、样品采集原则•1、动物疫病样品采集遵循适时、典型、无菌、适量和生物统计的原则。

•2 、对急性死亡的患畜（马、牛、羊及猪等），若怀疑是炭疽等烈性传染病时，从耳尖或四肢未梢血管取血制成涂片，染色镜检，在排除炭疽后方能剖检采样。

•3、根据不同的检验要求进行样品采集，采取包括相应的组织器官、内容物、分泌物、排泄物或其他材料。

•4、进行流行病学调查、抗体监测、动物群体健康评估或环境卫生检测时，样品数量应满足生物统计学的要求。

•5 、无法估计病因时，可对组织器官、分泌物和排泄物进行系统全面的的采集。

•6 、如患畜（禽）已死亡，应尽快采集样品，死亡时间夏天不得超过6h，冬天不超过24h. •7、动物剖检中应做好人身防护，严防人畜共患病感染。

•8、采集病原微生物样本的工作人员应防止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒和动物尸体的处理。

•9、对样本的来源、采集过程和方法等作详细记录。

三、器械准备•1、器械的选择根据采集样品的需要，分别选择不同的器械、容器等器材。

•2、器材无菌处理2.1 金属器械可采用高压、干热、煮沸消毒30min。

临用时75%酒精拭擦，或用时进行火焰消毒。

2.2 器皿（玻制、陶制等）经103kPa高压30min，或160℃干烤2h灭菌，或经0.5%～1%碳酸氢钠水中煮沸10min～15min，再用无菌纱布擦干，无菌保存备用。

3、采样单、笔、防护用品等的准备。

4、消毒药物准备。

四、血清样品的采集和处理•牛——颈静脉、尾根静脉•羊——颈静脉•猪——小猪用前腔静脉、大猪站立式采前腔静脉•禽——正常用翅静脉（还可用心脏或桥静脉联合血窦）•大型动物采血量分别为5毫升，家禽的采血量为2-3 毫升。

血样收集于无菌的试管或采血器中，于37℃放置30分钟，以促进血液的凝固及血清的渗出，然后置于4℃过夜，在2000-4000rpm 离心5分钟，取血清装到灭菌的指形管或青霉素小瓶中。