高氯酸非水滴定法胺值测定方法

胺值测量一、试剂0.1 mol/L高氯酸的醋酸溶液：称取14.5 g高氯酸，用滴管边搅拌边滴加入1000mL冰醋酸中，充分混匀。

滴定前用邻苯二甲酸氢钾醋酸溶液标定。

1.5 mol/L乙酰丙酮的DMF溶液：将15 mL 的乙酰丙酮溶解在90 mL DMF 中。

0.5 mol/L 氢氧化钾的异丙醇溶液：将15 g 氢氧化钾加入到500 mL 异丙醇中，充分溶解，并将溶液暴露在二氧化碳充足的空气中若干天，转移上方清夜用于滴定。

滴定前用邻苯二甲酸氢钾水溶液标定。

其余试剂均为分析纯试剂。

二、实验步骤2.1 总胺V1准确称取0.3 g 左右的样品，加入24 mL 冰醋酸、6 mL乙腈，溶解后，用高氯酸溶液进行电位滴定。

其计算公式：56.1*V1*C1/M2.2 叔胺V2准确称取0.3 g 左右的样品，加入15 mL 冰醋酸，溶解后加入15 mL 乙酸酐，室温下反应30 min。

再加入10 mL冰醋酸、5 mL 乙腈，用高氯酸溶液进行电位滴定。

其计算公式：56.1*V2*C1/M2.3 伯胺2.3.1 空白V3准确量取5 mL 1.5 mol/L乙酰丙酮的DMF溶液，加入30 mL DMF、5 mL 乙腈，混合均匀后，用氢氧化钾的异丙醇溶液进行电位滴定。

2.3.2 样品测试V4准确称取0.3 g 左右的样品，加入5 mL（需准确量取）1.5 mol/L乙酰丙酮的DMF溶液，水浴40℃反应30 min。

再加入30 mL DMF、5 mL 乙腈，混合均匀后，用氢氧化钾的异丙醇溶液进行电位滴定。

其计算公式：56.1*(V3-V4)*C2/M三、相关结果。

胺值的测定酸碱滴定法是目前测定胺类固化剂胺值的通用方法。

胺类固化剂(伯胺、仲胺、叔胺)都是电子给予体，是碱性化合物，在两性或酸性溶剂中呈碱性反应。

因此可利用其碱性，用酸标准溶液进行滴定来测定其含量，通常采用以下2种方法。

二、总胺值的测定方法(酸碱滴定法)1、盐酸-乙醇(或异丙醇等)滴定法此方法适用于碱性较大的脂肪胺，其原理为：RNH2+HCl→RNH3+Cl-R2NH+HCl→R2NH2+Cl-R3N+HCl→R3NH+Cl-2、高氯酸-乙酸滴定法对于芳香胺、改性胺等碱性较弱的胺，在醇溶液中滴定时，终点变色不敏锐，滴定误差较大。

采用高氯酸-乙酸滴定法则可获得更精确的结果，其原理为：RNH2+HClO4→RNH3+ClO4-R2NH+HClO4→R2NH2+ClO4-R3N+HClO4→R3NH+ClO4-从上述酸碱滴定原理可知，所测出的是胺类同化剂中所含伯胺、仲胺和叔胺的总胺值。

它没有反应出所含的伯氨基、仲氨基和叔氨基的相对含量，因此无法依据此胺值求出胺中的活泼氢当量。

显然，若能分别测出混胺中的伯氨基、仲氨基和叔氨基的含量，就能求出混胺的活泼氢当量及其理论用量。

此外还可根据伯胺值的变化来控制改性反应的终点，而能保证改性胺质量的稳定性。

用于定量测定伯胺的方法中，主要是基于伯氨基与羰基的反应或胺与亚硝酸的反应。

它主要包括伯氨基与羰基的反应或胺与亚硝酸的反应。

三、伯氨基含量的测定方法用于定量测定伯胺的方法中，主要是基于伯氨基与羰基的反应或胺与亚硝酸的反应。

1、与羰基反应的测定方法伯胺与醛或酮反应生成西弗碱和水，而仲胺和叔胺不发生此反应。

测定生成的水量或所消耗的醛或酮的量，即可求出伯氨基的含量。

RNH2+R'CHO→RN=CHR’+H2O伯胺醛西弗碱(醛缩胺)水再用甲醇钠的吡啶标准溶液滴定过量的水杨醛，求出伯氨基耗用的水杨醛量，进而算出伯氨基的含量。

也可将试样溶解于乙酸和二唔烷混和溶剂后，用2-乙基己醛的二恶烷标准溶液直接滴定。

胺值的滴定可以采用酸碱滴定法来进行测定。

以下是具体步骤：
准备相关试剂，例如0.15mol/L高氯酸冰醋酸标准溶液
和0.15mol/L高氯酸冰醋酸标准溶液的滴定剂等。

配置高氯酸滴定剂，将13mL高氯酸溶于500mL冰醋酸中，缓慢滴加入30mL醋酐，用冰醋酸稀释到1000mL，摇匀。

称取一定量的样品（如0.08g左右），将其溶于50mL
冰醋酸溶液中，搅拌待样品溶解后移入滴定杯置于滴定台上。

设置好仪器滴定方法及计算公式，用标定好的滴定剂进行滴定分析。

在分析结束后得到结果，通过计算公式计算胺值。

需要注意的是，具体操作步骤可能因实验条件和样品性质的不同而有所差异，建议在实验前查阅相关文献或咨询专业人士以获取更详细的信息。

酸碱滴定法是目前测定胺类固化剂胺值的通用方法。

胺类固化剂(伯胺、仲胺、叔胺)都是电子给予体，是碱性化合物，在两性或酸性溶剂中呈碱性反应。

因此可利用其碱性，用酸标准溶液进行滴定来测定其含量，通常采用以下2种方法。

二、总胺值的测定方法(酸碱滴定法)1、盐酸-乙醇(或异丙醇等)滴定法此方法适用于碱性较大的脂肪胺，其原理为：RNH2+HCl→RNH3+Cl-R2NH+HCl→R2NH2+Cl-R3N+HCl→R3NH+Cl-2、高氯酸-乙酸滴定法对于芳香胺、改性胺等碱性较弱的胺，在醇溶液中滴定时，终点变色不敏锐，滴定误差较大。

采用高氯酸-乙酸滴定法则可获得更精确的结果，其原理为：RNH2+HClO4→RNH3+ClO4-R2NH+HClO4→R2NH2+ClO4-R3N+HClO4→R3NH+ClO4-从上述酸碱滴定原理可知，所测出的是胺类同化剂中所含伯胺、仲胺和叔胺的总胺值。

它没有反应出所含的伯氨基、仲氨基和叔氨基的相对含量，因此无法依据此胺值求出胺中的活泼氢当量。

显然，若能分别测出混胺中的伯氨基、仲氨基和叔氨基的含量，就能求出混胺的活泼氢当量及其理论用量。

此外还可根据伯胺值的变化来控制改性反应的终点，而能保证改性胺质量的稳定性。

用于定量测定伯胺的方法中，主要是基于伯氨基与羰基的反应或胺与亚硝酸的反应。

它主要包括伯氨基与羰基的反应或胺与亚硝酸的反应。

三、伯氨基含量的测定方法用于定量测定伯胺的方法中，主要是基于伯氨基与羰基的反应或胺与亚硝酸的反应。

1、与羰基反应的测定方法伯胺与醛或酮反应生成西弗碱和水，而仲胺和叔胺不发生此反应。

测定生成的水量或所消耗的醛或酮的量，即可求出伯氨基的含量。

RNH2+R'CHO→RN=CHR’+H2O伯胺醛西弗碱(醛缩胺)水再用甲醇钠的吡啶标准溶液滴定过量的水杨醛，求出伯氨基耗用的水杨醛量，进而算出伯氨基的含量。

也可将试样溶解于乙酸和二唔烷混和溶剂后，用2-乙基己醛的二恶烷标准溶液直接滴定。

实验名称：胺值含量的测定实验日期：2023年3月10日实验地点：化学实验室实验目的：通过本实验，学习并掌握胺值含量的测定方法，了解胺值在化学工业中的应用。

实验原理：胺值是衡量有机化合物中胺类物质含量的指标。

本实验采用滴定法测定胺值，利用盐酸与胺类物质发生中和反应，通过消耗盐酸的体积计算出胺值。

实验仪器与试剂：1. 仪器：滴定管、锥形瓶、移液管、烧杯、玻璃棒、滤纸等。

2. 试剂：盐酸标准溶液（0.1mol/L）、氢氧化钠标准溶液（0.1mol/L）、甲基橙指示剂、无水乙醇、苯、丙酮等。

实验步骤：1. 准备标准溶液：准确称取0.5g氢氧化钠，溶于100mL水中，配制成0.5mol/L氢氧化钠标准溶液。

2. 标准曲线绘制：分别取0.1mol/L盐酸标准溶液2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL于锥形瓶中，加入甲基橙指示剂2滴，用0.5mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至溶液颜色由红变黄，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积。

3. 样品测定：准确称取0.5g样品于锥形瓶中，加入无水乙醇10mL，振荡溶解，加入苯5mL，振荡萃取，静置分层，取下层苯溶液于另一个锥形瓶中，加入甲基橙指示剂2滴，用0.1mol/L盐酸标准溶液滴定至溶液颜色由红变黄，记录消耗盐酸标准溶液的体积。

4. 计算胺值：根据消耗盐酸标准溶液的体积，按照下列公式计算样品的胺值：胺值（mg/g）=（C1×V1×M1）/W式中：C1为盐酸标准溶液的浓度（mol/L）；V1为消耗盐酸标准溶液的体积（mL）；M1为盐酸的摩尔质量（36.5g/mol）；W为样品质量（g）。

实验结果与分析：1. 标准曲线绘制：绘制标准曲线，得出标准曲线方程为：y=0.4286x-0.0134，相关系数R2=0.9999。

2. 样品测定：根据实验结果，样品的胺值为X mg/g。

3. 结果分析：根据实验结果，样品的胺值符合实际要求，说明本实验测定方法可靠。

胺值测量一、试剂0.1 mol/L高氯酸的醋酸溶液：称取14.5 g高氯酸，用滴管边搅拌边滴加入1000mL冰醋酸中，充分混匀。

滴定前用邻苯二甲酸氢钾醋酸溶液标定。

1.5 mol/L乙酰丙酮的DMF溶液：将15 mL 的乙酰丙酮溶解在90 mL DMF 中。

0.5 mol/L 氢氧化钾的异丙醇溶液：将15 g 氢氧化钾加入到500 mL 异丙醇中，充分溶解，并将溶液暴露在二氧化碳充足的空气中若干天，转移上方清夜用于滴定。

滴定前用邻苯二甲酸氢钾水溶液标定。

其余试剂均为分析纯试剂。

二、实验步骤2.1 总胺V1准确称取0.3 g 左右的样品，加入24 mL 冰醋酸、6 mL乙腈，溶解后，用高氯酸溶液进行电位滴定。

其计算公式：56.1*V1*C1/M2.2 叔胺V2准确称取0.3 g 左右的样品，加入15 mL 冰醋酸，溶解后加入15 mL 乙酸酐，室温下反应30 min。

再加入10 mL冰醋酸、5 mL 乙腈，用高氯酸溶液进行电位滴定。

其计算公式：56.1*V2*C1/M2.3 伯胺2.3.1 空白V3准确量取5 mL 1.5 mol/L乙酰丙酮的DMF溶液，加入30 mL DMF、5 mL 乙腈，混合均匀后，用氢氧化钾的异丙醇溶液进行电位滴定。

2.3.2 样品测试V4准确称取0.3 g 左右的样品，加入5 mL（需准确量取）1.5 mol/L乙酰丙酮的DMF溶液，水浴40℃反应30 min。

再加入30 mL DMF、5 mL 乙腈，混合均匀后，用氢氧化钾的异丙醇溶液进行电位滴定。

其计算公式：56.1*(V3-V4)*C2/M三、相关结果。

.1仪器和试剂烘箱、分析天平(万分之一)、量筒(100mL、10mL)、锥形瓶(250mL)、酸式滴定管、干燥器。

70％高氯酸(分析纯)、冰乙酸(分析纯)、纯苯(分析纯)、醋酸酐(分析纯)、邻苯二甲酸氢钾(基准物)，甲基紫(指示剂)。

1.2配制溶液指示剂：0.1％甲基紫冰乙酸溶液。

溶剂：冰乙酸:纯苯=2:l1.3标准溶液的配制量取70％高氯酸溶液4.3mL，溶于500mL分析纯冰乙酸中，然后再取分析纯醋酸酐7.5mL，分数次加入，摇动至混合均匀，放置过夜，使与高氯酸中含的水分反应，转变为醋酸，即为[c(HCl04)=0.1mol/L(0.1N)]高氯酸标准溶液。

1.4标定称取0.2～0.3g己于105～llO℃烘至恒质量的基准物邻苯二甲酸氢钾，准确至0.0001g，置于干燥的锥形瓶中，加入50mL冰乙酸，温热溶解，加入3～4滴甲基紫指示剂，用配制好的高氯酸标准溶液[c(HCl04)=0.1mol/L]滴定至溶液由紫色变为纯蓝色，即为终点。

1.5计算c(HCl04)=m/(V×0.2042)式中：c(HCl04)——高氯酸标准溶液的浓度，mol/L；m——邻苯二甲酸氢钾的质量，g；V——消耗的高氯酸标准溶液体积，mL；0.2042——与1.00mL高氯酸标准溶液[c(HCl04)=0.1mol/L]相当的以克表示的邻苯二甲酸氢钾的质量。

注：本溶液使用前标定。

标定高氯酸标准溶液时的温度应与使用该标准溶液滴定时的温度相同。

1.6测定方法精确称取适量的样品(聚酰胺树脂)，置于250mL锥形瓶中，加入约25mL冰乙酸一纯苯溶剂，摇动至完全溶解后，(如样品不容易溶解时，可稍微加热然后让它冷却到室温)，加入甲基紫指示剂3～4滴，用[c(HCl04)=0.1mol/L]高氯酸标准溶液滴定至溶液由紫色转变成纯蓝色，即为终点。

1.7计算AN(mgKOH/g)=(cV×56.1)/m式中：C——高氯酸标准溶液的浓度，mol/L；V——消耗的高氯酸标准溶液体积，mL：M——样品的质量，g；56.1——每摩尔氢氧化钾的质量。

一、概述1.定义：非水溶液滴定法即在非水溶剂中进行的滴定分析方法。

一些很弱的酸或碱以及某些盐类，在水溶液中进行滴定时，没有明显的滴定突跃，难于掌握滴定终点；另外还有一些有机化合物，在水中溶解度很小，因此，以水作溶剂的滴定分析受到一定的限制。

所以，滴定分析法逐渐采用了各种非水溶剂（包括有机溶剂与不含水的无机溶剂）作为滴定分析的介质，不仅能增大有机化合物的溶解度，而且能改变物质的化学性质（例如酸碱性及其强度），使在水中不能进行完全的滴定反应能够顺利进行。

2.分类非水溶液滴定法除有酸碱滴定外，尚有氧化还原滴定、络合滴定及沉淀滴定等，而在药物分析中，以非水溶液酸碱滴定分析法用得最为广泛。

3.非水溶液酸碱滴定法：是利用非水溶剂的特点来改变物质的酸碱相对强度，即在水溶液中呈弱酸性或弱碱性的化合物，由于酸碱度太弱，不可能得到滴定的终点。

如果选择某些适当的非水溶剂为溶剂使化合物增加相对的酸度成为强酸，或者增加相对的碱度成为强碱，就可以顺利地进行滴定的分析方法。

4.应用：本法主要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐或有机酸盐以及有机酸碱金属盐类药物的含量，也用于测定某些有机弱酸含量。

二、原理：酸碱质子理论(一)有关酸碱的定义有三种学说1.Arrhenius 的电离学说凡化合物溶于水中能电离生成H＋离子的是酸，能电离生成OH－离子的是碱。

H＋ + OH－=== H2O酸碱反应即为中和，这种学说在水溶液中很适用，但在非水溶液中考虑离子平衡问题就受到限制。

2.刘易斯（Lewis）的电子理论把酸碱反应看成是电子对转移共享的反应，认为酸是一个电子对的接受者，它接受一对电子以构成配位鍵；碱是一个电子对的供给者，它供给酸一对电子以构成配位鍵。

A + :B → A:B任何物质，凡能从其它的分子或离子接受电子对组成一个安定生成物的，都是酸。

任何物质，凡能供给它种分子或离子以电子对而组成一个安定生成物的，都是碱。

中和反应是酸和碱形成配位鍵的反应。

高氯酸滴定法（中英文版）1. Equipment and Instruments设备和仪器1) Automatic Titer自动效价2) System Manager系统管理器3) Wide mouth beaker 100 ml 宽口烧杯100ml4) Messcylinder 50 ml 量筒50 ml5) Injector 2 ml (with rubber stopper) 注射器2ml(带胶塞)6) Electronic Chemical Balance电子化学天平2. Reagents试剂1) Acetonitrile solution (Acetic acid special grade 20 ml/ 3L)乙腈溶液(醋酸专用级20ml / 3L)2) Acetic acid (Special grade)乙酸(特级)3) 0.1 mol/L, Perchloric acid solution (Acetic acid solution: HClO439 ml/ 3L)0.1 mol/L高氯酸溶液(醋酸溶液:HClO4 39 ml/3L)4) Indicator : Crystal violet solution (1g/L Acetic acid solution)指示剂:结晶紫溶液(1g/L醋酸溶液)3. Procedure过程1) Take a 17ml of acetonitrile soln. into a beaker ( 100 ml), previously washed and dried.取17ml乙腈溶液到100ml烧杯中，先洗净、烘干。

2) Measure the weight of the injector (2 ml) previously washed and dried, with rubber stopper containing a 0.5g of the sample, down to a place of decimals (0.1 mg).测量之前清洗和干燥的注射器(2ml)的重量，和橡胶塞含0.5g样品，精确到小数点(0.1 mg)。

制药GMP管理文件引用标准：《中华人民共和国药典》（2005年版二部附录）。

一、目的：为规定非水溶液滴定法的检验方法和操作要求，特制定本操作规程。

二、适用范围：适用于公司检品采用非水溶液滴定法的质量检测。

主要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐或有机酸盐，以及有机酸碱金属盐药物的含量，也用于测定某些有机弱酸的含量。

三、责任者：质检员。

四、正文：1 试剂：1.1 高氯酸（AR）1.2 冰醋酸（AR）1.3 结晶紫（AR）2 仪器和用具：2.1 滴定管（10ml）2.2 具塞锥形瓶2.3 分析天平（万分之一）3 定义：非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行滴定的方法。

4 原理：非水介质中酸碱滴定，主要以质子理论的酸碱概念为基础，凡能放出质子的物质是酸，能接受质子的物质是碱，它们的关系可用下式表示：HE=A-＋H+酸碱质子在非水溶液中，游离的质子（H+）不能单独存在，而是与溶剂分子结合成溶剂合质子，酸碱中和反应的实质是质子的转移，而质子转移是通过溶剂合质子实现的。

溶剂对酸碱的强度影响很大，非水溶液中的酸碱滴定利用这个道理，使原来在水溶液中不能滴定的某些弱酸弱碱，经选择适当溶剂，增强其酸碱性后，便可以进行滴定。

5 操作步骤：除另有规定外，精密称取供试品适量[约消耗高氯酸滴定液（0.1mol/L）8ml]，加冰醋酸10~30ml使溶解，加各药品项下规定的指示液1~2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定。

并将滴定的结果用空白试验校正。

6 注意事项：6.1 配制高氯酸时，若用于易乙酰化的供试品测定，必须测定本液的含水量，再用水或乙酐调节至本液的含水量为0.01%~0.2%。

6.2 若滴定样品与标定高氯酸滴定液时的温度差别超过10℃，则应重新标定；若未超过10℃，则可根据下式将高氯酸滴定液的浓度加以校正。

N 1=)(0011.01010t t N -+式中：0.0011为冰醋酸的膨胀系数； t 0：标定高氯酸液时的温度，℃； t 1：滴定样品时的温度，℃； N 0：t 0时高氯酸液的浓度，mol/L ；N 1：t 1时高氯酸液的浓度，mol/L 。

胺基测试方法溶解液的配制：将苯酚1000g（2瓶）于恒温水槽中加热解，倒入2000ml 烧杯中，再加入500ml异丙醇，用搅拌棒搅拌均匀，待溶液降到室温后装瓶备用。

滴定液的配制：准确移取8.5ml高氯酸于1000ml无水乙醇溶液中配成0.1mol/L高氯酸乙醇溶液滴定液的标定：准确称取已于100度烘箱中干燥过的邻苯二甲酸氢钾o.15克于250ml烧杯中，加入70ml冰乙酸，充分搅拌溶解后，将电极和搅拌子置于溶液中，选择高氯酸标定的方法，输入称取邻苯二甲酸氢钾样品质量，按ST ART仪器开始自动用新配好高氯酸乙醇溶液进行滴定，滴定结束后空白的数据会自动储存，用于本次配制高氯酸乙醇溶液滴定测试时使用。

胺基含量测试：准确称取1克样品于250ml磨口平底烧瓶中，用50ml量筒加入40ml苯酚-异丙醇溶解，放入搅拌子，至于带加热的磁力搅拌器上，连接上冷疑管，打开冷却水，开启加热及搅拌，将定时器设置40分钟（注意不要有样粒挂到烧瓶侧壁上，影响测试结果），溶解结束后，稍冷却后将已溶解的样液转移至100ml烧杯中，再用20ml苯酚-异丙醇溶液荡洗烧瓶之后一并转移至100ml烧杯中。

每天首次测量时，在程序中选择人工控制-加液设4-准备，进行排空，就绪后返回到测试页面，输入样品质量，按照用水-乙醇-氯仿溶液的顺序冲洗电极头及滴液管，之后将电极及滴液管置于待测样品的溶液中，按ST ART仪器自动开始测量（在测量过程中要观查测试曲线是否正常），结束后测试结果会自动输出，之后按照用氯仿-乙醇-水溶液的顺序进行冲洗电极及滴液管。

仪器自动输出的结果为胺基的含量，单位：mol/t。

环氧固化剂胺值的测定环氧固化剂胺值的测定张兰芬周秀丽摘要：介绍了高氯酸非水滴定法标准溶液的配制，试剂选用、测定及计算，目的是提高胺值测定的准确性、科学性。

关键词：环氧固化剂；胺值；测定方法O前言环氧树脂的固化反应是通过加入固化剂来实现的。

固化剂大多是直接参加反应而结合在漆膜结构中，当采用聚酰胺树脂为固化剂时，其分子结构内含有活泼的氨基，可在常温下与环氧树脂中的环氧基反应，交联而成网状结构。

确定聚酰胺树脂与环氧树脂的配比，必须考虑胺值的大小。

而表征聚酰胺树脂中氨基的含量常以胺值来表示，即指中和每l g样品所需的酸，以与其相当的氢氧化钾毫克数来表示(mgKOH／g)。

以往测定胺值采用c(HCl)=0．1 mol／L(0．1N)的盐酸-乙醇液滴定，该方法只适用于脂肪胺，用以测定聚酰胺树脂时则胺值偏低，终点显示不明显。

目前国外主要采用高氯酸非水滴定法(non aqueous titration)，作者根据该方法经过大量的分析试验对比，结果验证了其具有准确、测试方便、快速等特点，下面简略介绍用高氯酸非水滴定法的测定过程。

l实验部分1．1仪器和试剂烘箱、分析天平(万分之一)、量筒(100 mL、10 mL)、锥形瓶(250 mL)、酸式滴定管、干燥器。

70％高氯酸(分析纯)、冰乙酸(分析纯)、纯苯(分析纯)、醋酸酐(分析纯)、邻苯二甲酸氢钾(基准物)，甲基紫(指示剂)。

1．2配制溶液指示剂：0.1％甲基紫冰乙酸溶液。

溶剂：冰乙酸:纯苯=2:l1．3标准溶液的配制量取70％高氯酸溶液4．3 mL，溶于500 mL分析纯冰乙酸中，然后再取分析纯醋酸酐7．5 mL，分数次加入，摇动至混合均匀，放置过夜，使与高氯酸中含的水分反应，转变为醋酸，即为[c(HCl04)=0．1 mol／L(0.1N)]高氯酸标准溶液。

1．4标定称取0．2～0．3 g己于105～llO℃烘至恒质量的基准物邻苯二甲酸氢钾，准确至0．0001 g，置于干燥的锥形瓶中，加入50 mL冰乙酸，温热溶解，加入3～4滴甲基紫指示剂，用配制好的高氯酸标准溶液[c(HCl04)=0．1 mol／L]滴定至溶液由紫色变为纯蓝色，即为终点。

α-氨基酸含量的测定一、实验目的1．掌握非水滴定法的基本原理与特点。

2．学习非水滴定法的基本操作。

二、实验原理α-氨基酸的α位碳原子上连有氨基和羧基，故为两性物质，但在水溶液里两者离解趋势很小，溶液酸碱性均不明显（如氨基乙酸的羧基电离H+的K=2.5×10-10 ,氨基接收H+的a=2.2×10-12），故在水溶液中无法进行准确的滴定。

但在非水介质中有可能被准确滴定。

如Kb在冰醋酸体系中，用HClO的HAc溶液作滴定剂，结晶紫作指示剂，可准确滴定α-氨基酸。

4滴定后生成物为呈酸性的α-氨基酸的高氯酸盐。

结晶紫在强酸性介质中为黄色，pH=2左右为蓝色，pH＞3时为紫色，因而在此强酸滴定弱碱的反应中，一般选由紫色变为稳定的蓝绿色或蓝色为终点，若溶液呈现绿色或黄色则滴定过量，在确定终点时，可用电位计作参比。

冰醋酸，待样若试样难溶于冰醋酸，可加入一定量甲酸作助溶剂，也可加入过量HClO4-。

品溶解完全后用NaAc-冰醋酸返滴过量的HClO4-冰醋酸滴定剂常用邻苯二甲酸氢钾作基准物质进行标定，反应为：HClO4在标定中KClO有可能被析出，但不影响标定结果。

4本法主要针对α氨基酸的氨基进行测定，也可以针对羧基来测定，如在二甲基甲酰胺等碱性溶剂中，以甲醇钾或季胺碱（RNOH）等标准溶液来滴定，指示剂可选百里酚蓝，终点颜色由黄变蓝。

三、主要仪器和试剂1. 仪器：3.000mL微型滴定管，50mL容量瓶，20mL锥形瓶，干燥小烧杯。

2. 试剂：-冰醋酸(0.1mol/L)：在低于25℃的250mL冰醋酸中缓慢边搅拌边加入2mL原装(1)HClO4，混匀后小心加入4mL乙酸酐，搅拌均匀，冷至室温，放置过夜使水分与（70%～72%）HClO4乙酸酐反应完全。

(2)邻苯二甲酸氢钾基准物质：在105～110℃条件下干燥2h，在干燥器中用广口瓶保存备用。

(3)结晶紫(2g·L-1)冰醋酸溶液(4)冰醋酸(A.R)(5)乙酸酐(A.R)(6)甲酸(A.R)(7)α-氨基酸试样四、实验步骤1．HClO4冰醋酸滴定剂的标定准确称取0.5g左右KHC8H4O4于小烧杯中，加入30mL冰醋酸，溶解后定量转移至50mL容量瓶内，用冰醋酸稀释至刻度，摇匀。