微生物-沙门氏菌
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沈阳儿童医院PICU
2020-05-11
医院污物种类根据医院用品的危险性分类及其消毒、灭菌的原则医院日常清洁、消毒、灭菌工作
病理性
放射性
化学性各种感染性
创伤性
药剂
爆炸性一般生活性
患儿女,2个月15天,以“发热、腹泻4天”为主诉入院。病例简介
查体患儿于入院前4天总有无明显有瘾出现发热,体温最高
39.2℃,无寒战及抽搐,口服“对乙酰氨基酚”体温可降至
37.5℃,间隔月6-7小时反复发热,伴有腹泻,每日排7-8次黄绿色粘液变,口服“琥乙红霉素”0.1克,日2次,“电解质泡
腾片”随服,“酪酸梭菌二联活菌散”500mg,日2次,治疗4天
病情无好转,入院当天大便可见血丝,再次来我院,急诊以
“细菌性痢疾”为诊断收入院,患儿病后精神状态一般,有鼻塞,偶有喉中痰鸣,无咳嗽及喘息,人工喂养,配方奶
120ml/次,无呕吐及腹胀,尿量略少
T:36.9℃,P:154次/分,R:44次/分,BP:94/46mmHg,意识清楚,状态反应可,全身皮肤无黄染,皮肤弹性可,无皮疹及出
血点,全身浅表淋巴结无肿大。前囟平坦,2.0*2.0cm,对光反射
灵敏,无鼻扇,口唇粘膜略干燥、无发绀,口腔粘膜光滑,眼部粘
膜充血,颈软无抵抗,无三凹征,双肺叩诊轻音,双肺呼吸音粗糙,
心前区无隆起,心尖搏动范围正常,心浊音界无扩大,心率:154
次/分,节律齐,心音有力,心前区可闻及2/6级收缩期杂音,无心
包摩擦感,腹部略膨隆,柔软,无压痛,无包块,肝下界在中线肋
缘下1cm,质地软,脾肋下未触及。肠鸣音4次/分。现病史
根据医院用品的危险性分类及其消毒、灭菌的原则医院日常清洁、消毒、灭菌工作
治疗2020-04-29本院便常规:白细胞(高倍视野>40个/HPF)红细胞(高倍视野20-25个/HPF),潜血阳性。血常规:白细胞计数:11.9*109/L,中性粒细胞百分比54.5%,淋巴细胞百分比31.5%,CRP 14.36mg/L。胸
部正侧位DR:双肺纹理增强、左下肺纹理模糊,双肺透光度良好,双肺门
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌是一种广泛存在于自然界中的革兰氏阴性杆菌,可引起许多动物和人类的肠道感染。为了检验沙门氏菌的存在,可以采用以下一些常见的方法:
1.培养方法:沙门氏菌是一种需氧的微生物,在富含营养成分的寒凝琼脂或低酸性洗涤剂和生物素的培养基上培养。常用的培养基如VRB(XLD)琼脂、SS琼脂、MS琼脂等。培养基可以选择均匀地涂布在平板上,也可以用于液体培养。
2.表型特征:沙门氏菌的菌落通常呈现红色或无色,个别品系可能为粉红色。如在VRB琼脂上,沙门氏菌会变为红色或橙色。沙门氏菌也可以产生硫化氢,导致MS琼脂呈现黑色。
3.生化特性:沙门氏菌通常可以进行一些常规的生化测试,如产生气泡的气液反应,碳源利用测试和酸碱指示剂变色等。这些测试可以帮助进一步确认沙门氏菌的存在。
4.血清学方法:采用沉淀试验或血清凝集试验检测血清中的抗生素,以确定是否感染了沙门氏菌。这些试验通常利用鸡血清,鸡蛋白和羊血清制备的具有特异性的血清反应。
5. 分子生物学方法:沙门氏菌的检验还可以利用PCR技术进行,通过检测沙门氏菌特异性基因如invA基因的存在来确定沙门氏菌的存在。
6.抗生素敏感性试验:通过对沙门氏菌菌株进行抗生素敏感性测试,可以了解菌株对不同抗生素的抗性情况,为临床使用合适的抗生素提供参考。 除了以上提到的方法,还有其他一些检验方法如酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光PCR等也常被用于沙门氏菌的检验。这些方法不仅可以准确快速地检测沙门氏菌的存在,还可以区分不同菌株和进行进一步的流行病学分析。
总之,通过上述的方法,可以对沙门氏菌进行有效的检验,从而帮助人们及时判断感染情况并及时采取措施进行治疗和预防。
食品沙门氏菌检测
沙门氏菌为肠道细菌科,即引发食物中毒细菌。根据既有研究结果表明,因沙门氏菌导致的食物中毒病例占比较高,所以对食品中沙门氏菌检测的重要性逐渐突显出来,并且备受关注。而对食品沙门氏菌的检测需从多个角度展开分析,以解决食品安全问题。
1 沙门氏菌有哪些生物学特性?
沙门氏菌会对人和动物的健康带来严重危害,是十分常见的致病菌。此病菌的型别诸多且抗原复杂,其对于外界环境的抵抗性较为明显,而且能够在食品中存活较长时间,在粪便内的存活时间达到1-10个月之久。
沙门氏菌的传播路径一般包括肉产品、禽和蛋等,在身体状况的基础上,还和菌株血清型存在一定关联,会严重危害老人与孩童,或者是免疫有缺陷的人。所以说,有必要对容易被污染的食品进行分类型地管理,以免沙门氏菌对我们的身体健康造成负面影响。
2 检测沙门氏菌的国标方法如何?
现阶段,根据国家规定对沙门氏菌进行检测的方法被称作是国标方法。而这种检测方法的步骤较为繁杂,需经过增菌→增菌→分离→生化试验→血清学检定等多个环节完成。正是因为国标检测沙门氏菌的程序复杂,所以需要耗费较多的时间与精力,一般在4-7天之间才能够获得所要的检测结果。
3 采用分子生物学方法检测沙门氏菌
第一种,扩增片段长度多态性技术的应用。这种对沙门氏菌进行检测的技术相对便利且快速,可以获得稳定且可靠性较高的结果,因而在检测微生物方面的应用较为常见。在众多研究中,针对沙门氏菌株展开了扩增片段长度多态性指纹分析,并了解到血清型的差异所获得的扩增片段长度多态性指纹图也有所差异,具有较高的分辨率,进而对不同的菌株进行有效地区分。
第二种,聚合酶连反应技术的应用。聚合酶连反应技术本身敏感性与特异性较为突出,且应用十分便捷,同样被使用在检测微生物方面。大部分研究者通过对聚合酶连反应技术的合理运用,开展了沙门氏菌的检测工作。在对聚合酶连反应技术进行应用的过程中,对食品中的沙门氏菌进行检测,在和增强化学发光反应相互结合的基础上,即可实现交杂扩增产物的目的,最终实现了检测方法的成功研发。
沙门氏菌的检验
食品学院 14食品质量与安全1班
刘文敏 柳基炜 卫杰恒 温紫君
摘要:本实验采用GB/的检测方法测定鸡场中的沙门氏菌。通过本实验学习沙门氏菌的检测方法和技术,了解沙门氏菌的一些生化特性;本实验先用显色培养基找出可疑菌落,再做生化试验找出可疑的典型性的沙门氏菌,再通过血清学试验最终确定是否为沙门氏菌属。
关键词:沙门氏菌 接种 生化试验 血清学鉴定
前 言
沙门氏菌病是公共卫生学中具有重要意义的人畜共患病种之一,其病原沙门氏菌属于肠道细菌科。沙门氏菌是一个统称,泛指 2000 多种有紧密连系的细菌,包括引起食物中毒,导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。虽然只有少数人因沙门氏菌而患病,但是,在世界范围内的细菌性食物中毒事件中,由沙门氏菌引起的占大多数。因此,采用科学、合理的方法检验食品中沙门氏菌,已经成为了人们最关心的问题之一[1]。国标法是目前中国规定的食品中沙门氏菌的标准检测方法,也是基层实验室普遍采用的检测方法,它根据沙门氏菌的生长特点和生化特性,采取前增菌、增菌、分离、生化试验和血清学鉴定5个步骤进行[2]。
1 材料与方法
实验材料
均质器、三角烧瓶、平皿、玻璃棒、接种棒
恒温培养箱:36℃±1℃,42℃±1℃
吸管:1 mL(具 mL刻度)、10mL(具刻度或微量移液器及吸头
电子天平PL602-S,梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;
手提式不锈钢压力蒸汽灭菌锅SYQ-DSX-280B,上海申安医疗器械厂
试剂药品
鸡肠、靛基质试剂、沙门氏菌O和H诊断血清、API20E生化试剂盒或VITEKGNI生化鉴定卡 培养基
蛋白胨水(BPW)、四硫磺酸钠煌绿(TTB)、亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液、亚硫酸铋(BS)琼脂、HE琼脂、三糖铁琼脂、蛋白胨水、尿素琼脂、氰化钾、氰化钾对照、赖氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶对照、甘露醇、山梨醇、β-D半乳糖苷(ONPG)培养基