葡萄菌属的微生物学检验方法与原理
1.标本采集：根据葡萄球菌感染所致的疾病不同，可采集脓汁、渗出液、伤口分泌物、血液、尿液、粪便、痰液以及脊髓液等。
2.检验方法及鉴定（1）直接镜检：无菌取脓汁、痰、渗出物和脑脊液（离心后取沉渣）涂片，经革兰染色后镜检，如为革兰阳性球菌呈葡萄状排列可初步报告为："找到革兰阳性葡萄状排列球菌，疑为葡萄球菌".（2）分离培养：血液标本（静脉血约5ml）注入50ml葡萄糖肉汤或含硫酸镁肉汤增菌培养，迅速摇匀，以防凝固，置35℃，一般于24h后开始观察有无细菌生长，若均匀混浊，溶血及胶胨状生长，则接种于血琼脂，进一步鉴定，若无细菌生长，于48～72h后自行观察（一般以7天为限），并接种血琼脂，以确定有无细菌生长。血液标本也可注入商品血培养瓶培养。
脓汁、尿道分泌物、脑脊液离心沉淀物，通常可直接接种血琼脂。35℃18～24h培养，可见直径2～3mm，产生不同色素的菌落。金黄色葡萄球菌在菌落周围有透明的溶血环。
尿液标本，必要时作细菌菌落计数。
粪便、呕吐物应接种高盐卵黄或高盐甘露醇琼脂平板，经35℃18～24h培养，可形成细小菌落，48h后形成典型菌落。
（3）鉴定试验1）触酶试验：细菌产生的过氧化氢酶催化双氧水生成水和氧气，产生气泡。方法：取营养琼脂上的菌落置于洁净试管内或洁净玻片上，滴加3％H202溶液数滴，观察结果，如立即（1min内）有大量气泡产生为阳性，不产生或气泡量少为阴性。葡萄球菌属为触酶阳性。
2）血浆凝固酶试验：血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生的一种与其致病力有关的侵袭性酶，分游离型和结合型两种。其作用是使血浆中的纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞的吞噬。可分别用试管法和玻片法检测。玻片法用于粗筛，若玻片法为可疑或阴性结果，还需用试管法确证。使用的血浆为EDTA抗凝兔血浆。有商品化乳胶凝集试验。
3）甘露醇发酵试验。
第 1 页 共 2 页 食品微生物学检验沙门氏菌检验（三）
5.5.1 抗原的预备 普通采纳1.2%～1.5%琼脂培养物作为玻片凝集实验用的抗原。O血清不凝集时，将菌株接种在琼脂量较高的(如2%～3%)培养基上再检查；假如是因为Vi抗原的存在而阻挡了O凝集反应时，可挑取菌苔于1mL生理盐水中做成浓菌液，于酒精灯火焰上煮沸后再检查。H抗原发育不良时，将菌株接种在0.55%～0.65%半固体琼脂平板的中心，俟菌落扩散生长时，在其边缘部分取菌检查；或将菌株通过装有0.3%～0.4%半固体琼脂的小玻管1次～2次，自远端取菌培养后再检查。
5.5.2 多价菌体抗原(0)鉴定 在玻片上划出2个约1cm×2cm的区域，挑取1环待测菌，各放1/2环于玻片上的每一区域上部，在其中一个区域下部加1滴多价菌体(O)抗血清，在另一区域下部加入1滴生理盐水，作为对比。再用无菌的接种环或针分离将两个区域内的菌落研成乳状液。将玻片倾斜摇动混合1min,并对着黑暗背景举行观看，任何程度的凝集现象皆为阳性反应。 5.5.3多价鞭毛抗原(H)鉴定 同5.5.2。 5.5.4 血清学分型(选做项目) 5.5.4.1 0抗原的鉴定用A～F多价O血清做玻片凝集实验，同时用生理盐水做对比。在生理盐水中自凝者为粗糙形菌株，不能分型。被A～F多价O血清凝集者，依次用O4；O3、O10；O7；O8；O9；O2和O11因子血清做凝集实验。按照实验结果，判定O群。被O3、O10血清凝集的菌株，再用O10、O15、O34、O19单因子血清做凝集实验，判定E1、E2、E3、E4各亚群，每一个O抗原成分的最后确定均应按照O单因子血清的检查结果，没有O单因子血清的要用两个O复合因子血清举行核对。 不被A～F多价O血清凝集者，先用9种多价O血清检查，如有其中一种血清凝集，则用这种血清所包括的O群血清逐一检查，以确定O群。每种多价O血清所包括的O因子如下： 5.5.4.2 H抗原的鉴定 属于A～F各O群的常见菌型，依次用表6所述H因子血清检查第1相和第2相的H抗原。 表6 A～F群常见菌型H抗原表 不频繁的菌型，先用8种多价H血清检查，如有其中一种或两种血清凝集，则再用这一种或两种血清所包括的各种H因 第 2 页 共 2 页 子血清逐一检查，以第1相和第2项的H抗原。8种多价H血清所包括的H因子如下： 每一个H抗原成分的最后确定均应按照H单因子血清的检查结果，没有H单因子血清的要用两个H复合因子血清举行核对。
经验交流 家庭心理医生 Ｆａｍｉｌｙ ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｏｃｔｏｒ ２０１４年１月第１期
志贺茵属的微生物学检验分析
孙向利
（黑龙江省计划生育科学研究所 黑龙江 哈尔滨 １５００２０）
摘要：对志贺茵属的物生物学检验方法及临床意义进分析，属包括痢疾志贺茵、福氏志贺菌、鲍氏志贺茵及宋内志贺茵四个种。
其中痢疾志贺茵引起的茵痢症状最重，宋内志贺茵最轻，以福氏和宋内志贺茵引起的茵痢最为多见。本茵属均可致细茵性痢疾或
慢性腹泻，慢性患者和恢复期带茵常见。
关键词：志贺菌属；物生物检验；临床意义
【中图分类号】Ｒ４４６．５ 【文献标识码】Ｂ 【文章编号】１６７２—８６０２（２０１４）０１—０１９８—０１
志贺菌属包括痢疾志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌、宋内 １．３．４于血清学鉴定工作中，应注意下述事项：本属各菌除
志贺菌通称痢疾杆菌，能产生内毒素和肠毒素，为细菌性痢疾的福氏１ａ、ｌｂ、２ｂ、３、４ａ和５型细菌以及宋内菌外，均具有Ｋ抗原 病原菌…。急性中毒性痢疾多见于小儿，消化道症状常不明显， （包膜抗原），其共同特点是能阻抑细菌与０血清的凝集作用。
主要表现为全身中毒症状，高热、休克。失于正确诊断和治疗， 因此，如遇有生化反应符合痢疾杆菌而又不与各种痢疾血清发
病死率很高。对２０１２年６０例志贺菌属的微生物检验分析如下。生凝集时，则可能有Ｋ抗原的存在。此时，可将菌落用生理盐水
１临床资料 制成浓厚菌液，隔水煮沸１ｈ，以破坏Ｋ抗原。待冷后，再按顺序
１．１一般资料：本组收治的６０例粪便标本立即送检。 重作玻片凝集试验。进行玻片法凝集试验时，如所用血清合乎
１．２标本采集：尽量在早期（使用抗生素前），采集患者新要求，则所有阳性结果，应于血清与菌液混合后立即出现，至多
鲜粪便或脓血黏液便床边接种，否则应将标本保存于３０％甘油不迟于Ｉｍｉｎ，且所显示的凝集颗粒亦极明显而较粗大。如果遇
缓冲盐水或卡一布运送培养基内，并尽快送检。中毒性菌痢患有凝集反应出现迟缓或凝集颗粒细微时，则应考虑是否为共同
沙门氏菌基本知识及检测方法
沙门氏菌属(Salmonella)是肠杆菌科的一个大属，有2000多个血清型，我国发现的约有100个。沙门氏菌广泛存在于猪、牛、羊、家禽、鸟类、鼠类等多种动物的肠道和内脏中.1880年Eberth首先发现伤寒杆菌,1885年Salmon分离到猪霍乱杆菌,由于Salmon发现本属细菌的时间较早，在研究中的贡献较大，遂定名为沙门氏菌属Salmonella 。本属细菌绝大多数成员对人和动物有致病性，能引起人和动物的败血症与胃肠炎,甚至流产，并能引起人类食物中毒，是人类细菌性食物中毒的最主要病原菌之一。
根据沙门氏菌的致病范围，可将其分为三大类群。第一类群：专门对人致病。如伤寒沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌（甲型、 乙型、丙型）。第二类群：能引起人类食物中毒--食物中毒沙门氏菌群,如鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、纽波特沙门氏菌等。第三类群：专门对动物致病,很少感染人,如马流产沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌。致病性最强的是猪霍乱沙门氏菌(Salmonella
cholerae)，其次是鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)和肠炎沙门氏菌（Salmonella enteritidis）。
一、 沙门氏菌属的生物学特征：
1。形态染色特性：G-无芽孢杆菌。大小通常为 0。7～1.5μm ×2.0～5。0μm，菌端钝圆，散在，偶有短丝状，无荚膜,除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外均有周身鞭毛，能运动，绝大多数菌株有菌毛。需氧或兼性厌氧菌,生长温度范围为10~42℃，最适生长温度为37℃，适宜pH为6。8～7。8，对营养要求不高，在普通培养基中生长旺盛，胆盐可促进其生长.
2。培养特性：需氧或兼性厌氧菌；生长温度范围为10~42℃,最适生长温度为37℃;适宜pH为6.8～7。8；对营养要求不高，在普通培养基中生长旺盛；胆盐可促进其生长。
§普通琼脂：圆形、光滑、无色半透明、边缘整齐或不太整齐的中等大小(2 ～ 4mm)菌落。鸡白痢、鸡伤寒、猪副伤寒、甲型副伤寒沙门氏菌等只能长成细小菌落。
