一、目的：规范药品检验方法确认与验证的管理，证明采用的方法适合相应的检测要求及在实验室条件下的适用性，保证检验结果准确、可靠。
二、适用范围：适用于中药和化学药品（包括物料和产品）的理化分析方法和仪器分析方法的确认与验证。
不适用于中药和化学药品（包括物料和产品）微生物分析方法的确认与验证。
三、相关职责：QC班组长：QC班组长根据检验方法的来源确定开展方法确认或验证。
由其本人或者其他有经验的检验人员起草方案；负责确认或验证方案的培训；安排有经验的人员参与方法确认或验证过程实施；对确认或验证过程中出现的偏差要严格按照相关管理规程的程序执行，如需要提出变更申请；对确认或验证工作中出现的问题及时纠正并记录；总结确认或验证报告。
QC主管：负责审核检验方法确认或验证方案，并对方案的执行过程进行追踪；负责组织偏差的调查，变更的审核；负责总结报告的审核。
化验室QA：监督各项目按照已制定的方案进行；参与确认或验证过程中的偏差调查；对提出的变更进行评估，确认变更的是否成立，跟踪变更实施。
QA主管：负责审核检验方法确认或验证方案，确保其法规符合性；参与偏差的调查，变更的审核；负责总结报告的审核。
验证专员：审核检验方法确认或验证方案；审核总结报告；负责验证证书的发放；负责方法确认或验证方案、记录和报告的整理、存档。
质量管理负责人：批准检验方法确认或验证方案；批准方案实施过程中出现的偏差和变更；批准总结报告。
四、制定依据：《药品GMP指南》（质量控制实验室与物料系统）、《药品生产质量管理规范》（2010年修订）、《中国药典》（2020年版）、《化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则》、ICH分析方法验证：正文和方法学Q2（R1 ）、中国药品检验标准操作规范（2010年版）（原子吸收分光光度法）。
五、内容：1、术语1.1方法验证方法验证系指根据检验项目的要求，预先设置一定的验证内容和验证标准要求，并通过设计合理的实验来验证所采用的分析方法是否符合检验项目的要求。
采用非法定分析方法，均应当进行方法验证（方法转移除外）。
1.2方法确认方法确认系指首次使用法定分析方法时，由现有的分析人员或实验室对分析方法中关键的验证指标进行有选择性的考察，以证明方法对所分析样品的适用性，同时证明分析人员有能力使用该法定分析方法。
2、分析方法验证与确认的适用范围、目的和发起时机表1 分析方法验证与确认的适用范围、目的和发起时机3.1分析方法验证的一般原则通常情况下，每个检测项目采用的分析方法均需要进行方法验证。
方法验证的内容应根据检测项目的要求，结合所采用分析方法的特点确定。
对于仅需按照实验室日常测试操作步骤即可测定的检验项目不需要进行验证，如外观、崩解时限、密度、重量、pH值、酸度、干燥失重、炽灼残渣、灰分、装量等。
需要进行验证的分析项目有四类：（1）鉴别试验、（2）杂质测定（限度或定量分析）、（3）含量测定（包括特性参数和含量/效价测定，其中特性参数如：药物溶出度、释放度等）、（4）其他特定检测项目（包括粒径分布、旋光度、分子量分布等）。
3.2分析方法验证指标验证指标：专属性、准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。
在进行分析方法验证时，须用标准物质进行试验。
由于分析方法具有各自的特点，并随分析对象而变化，因此需要视具体方法拟定验证的指标。
检验项目和验证指标可参考表2。
表2 检验项目和验证指标②如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充。
系统适用性试验主要是在进行色谱法验证时应当考虑。
③视具体情况予以验证。
④建立法定标准分析方法时，应进行重现性试验。
3.2.1专属性与系统适用性试验3.2.1.1专属性专属性系指在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，采用的分析方法能正确测定出被测物的能力。
鉴别反应、杂质检查、含量测定方法均应考察其专属性。
如方法专属性不强，应采用一种或多种不同原理的方法予以补充。
如检测具有旋光特性的活性物质，除采用非手性薄层色谱法或高效液相色谱法外，还增加了旋光度的检查。
3.2.1.1.1鉴别3.2.1.1.1.1理化鉴别反应应能区分可能共存的物质或结构相似的化合物。
即样品中含有被分析物时呈正反应，不含被测成分的供试品，以及结构相似或组分中的有关化合物，应均呈阴性反应。
3.2.1.1.1.2光谱鉴别试验对于红外鉴别试验，按照标准要求的方法或者光谱集中的方法进行试验，与光谱集或对照品红外光谱图一致，即符合要求，不需要进行方法验证。
对于紫外鉴别试验，试样（原料药或制剂）溶液在200nm～400nm（800nm）范围内进行波长扫描，在标准要求的波长处有最大吸收或最小吸收，空白溶剂或辅料在对应的波长处无最大吸收或最小吸收。
3.2.1.1.1.3色谱鉴别试验试样（原料药或制剂）溶液应与对照品溶液主成分色谱峰保留时间一致。
空白溶剂或辅料在该保留时间处不出干扰峰。
3.2.1.1.2含量测定和杂质测定3.2.1.1.2.1空白溶剂或辅料在该保留时间处不出干扰峰。
3.2.1.1.2.2在杂质可获得的情况下，可向试样（原料药或制剂）中加入一定量的杂质对照品，考察特定杂质与主成分及相邻峰能否得到分离。
3.2.1.1.2.3在杂质或降解产物不能获得的情况下，可用强光照射、高温、高湿、酸碱水解或氧化的方法进行强制破坏，以研究可能的降解产物和降解途径对含量测定和杂质测定的影响，可采用二极管阵列检测和质谱检测，进行峰纯度检查，并应计算物料守恒。
杂质检查应比对检出的杂质个数。
3.2.1.1.2.4接受标准采用的色谱法和其他分离方法，应附代表性图谱，以说明方法的专属性，并应标明各成分在图中的位置。
空白溶剂及辅料均不得干扰特定杂质和主成分的测定。
在杂质可获得的情况下，色谱法中特定杂质与主峰和相邻峰之间的分离度应符合要求。
强制破坏试验时，色谱法中特定杂质与主峰和相邻峰之间的分离度应符合要求；采用二极管阵列检测和质谱检测，峰纯度应符合要求；物料守恒应在90%～110%范围内；杂质检查应比对检出的杂质个数。
3.2.1.2系统适用性试验3.2.1.2.1试验方法在进行色谱分析方法验证时，有必要将分析仪器与实验操作、测试样品等一起当作完整的系统进行评估。
系统适用性便是对整个系统进行评估的指标。
系统适用性试验参数的设置需根据被验证方法类型而定。
色谱分析方法的系统适用性试验通常包括理论板数、分离度、灵敏度、拖尾因子和重复性等五个参数。
其中进行重复性验证时，可对用于含量测定的对照品溶液或其他系统适用性试验溶液重复进样分析，比较其峰面积RSD来确认精密度是否符合要求。
3.2.1.2.2接受标准理论板数、分离度、灵敏度、拖尾因子应符合品种项下的方法要求，若为新建立的方法，上述参数可根据实际验证的数值确定。
除另有规定外，待测物质色谱峰与相邻色谱峰之间的分离度应不小于1.5。
定量测定时，灵敏度溶液信噪比应不小于10；定性测定时，灵敏度溶液信噪比应不小于3。
以峰高作定量参数时，除另有规定外，拖尾因子（T）应在0.95〜1.05之间。
以峰面积作定量参数时，严重拖尾会影响基线和色谱峰起止的判断和峰面积积分的准确性，应根据验证的数据在品种正文项下对拖尾因子作出规定。
重复性试验时，连续进样6次峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0%，可视进样溶液的浓度和/或体积、色谱峰响应和分析方法所能达到的精度水平等，对相对标准偏差适当放宽。
3.2.2检测限（LOD）检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。
对于限度试验和定性鉴别应进行检测限试验，检测限没有定量意义。
根据不同检验方法，可以采用下列不同方法测得检测限。
3.2.2.1直观法用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。
本法主要适用于非仪器分析方法。
3.2.2.2信噪比法用于能显示基线噪声的分析方法，即把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，计算出能被可靠地检测出的被测物质最低浓度或量。
一般以信噪比为3:1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。
此外，检测限溶液应连续测定3次，计算峰面积的RSD。
本法主要适用于色谱法。
3.2.2.3基于空白响应值标准偏差和标准曲线斜率法按照LOD=3.3δ/S公式计算。
式中LOD：检测限；δ：测定11次空白响应值的标准偏差；S：标准曲线的斜率。
本法主要适用于光谱法。
3.2.2.4数据要求应附测试图谱（如有），应说明测试过程和检测限结果。
此外，检测限溶液峰面积（或响应值）的RSD应≤20%（n=3）。
3.2.3定量限（LOQ）定量限系指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应符合准确度和精密度要求。
对微量或痕量药物分析、定量测定药物杂质和降解产物时，应确定方法的定量限。
根据不同检验方法，可以采用下列不同方法测得定量限。
3.2.3.1直观法用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地定量测定的最低浓度或量。
本法主要适用于非仪器分析方法。
3.2.3.2信噪比法用于能显示基线噪声的分析方法，即把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，计算出能被可靠地定量的被测物质的最低浓度或量。
一般以信噪比为10:1时相应浓度或注入仪器的量确定定量限。
此外，定量限溶液应连续测定6次，计算保留时间和峰面积的RSD。
本法主要适用于色谱法。
3.2.3.3基于空白响应值标准偏差和标准曲线斜率法按照LOD=10δ/S公式计算。
式中LOD：检测限；δ：测定11次空白响应值的标准偏差；S：标准曲线的斜率。
此外，定量限溶液应连续测定6次，计算响应值的RSD。
本法主要适用于光谱法。
3.2.3.4数据要求应附测试图谱（如有），应说明测试过程和定量限结果。
此外，定量限溶液保留时间的RSD应不得过1.0%，峰面积（或响应值）的RSD应符合精密度项下相应浓度的重复性RSD要求。
3.2.4线性、范围线性系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈比例关系的能力。
范围系指分析方法能达到精密度、准确度和线性要求时的高低限浓度或量的区间。
3.2.4.1试验方法应在设计的范围内测定线性关系。
可用同一对照品贮备液经精密稀释，或分别精密称取对照品，制备一系列对照品溶液的方法进行测定，至少制备5个不同浓度水平（原料药和制剂的含量测定可为标准浓度的50%～150%（或200%）；杂质的定量测定可为定量限浓度～限度浓度的150%（或200%）），每个浓度各1份，每份溶液分别测定2次。
以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。
必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。
3.2.4.2数据要求应列出线性图、回归方程、相关系数和|b|/y值（其中b为回归方程的截距，y为100%浓度时按照回归方程计算的y值）。
