f食品中合成着色剂的测定 4.28(1)

浅谈食品检测中合成着色剂的测定方法摘要：俗话说“民以食为先，食以安为先”。

随着近些年一些食品安全事故的相继曝光，食品安全成为全社会普遍关注的一个热点话题，食品检测作为把控食品安全的一道重要关卡，它的重要性不言而喻。

在食品监测的诸多项目里，对于食品着色剂的检测是其中的一个重要内容，因为它的安全性直接关乎广大消费者的饮食安全，故而备受重视。

鉴于此种状况，本文作者全面而系统的分析了食品安全检测中关于着色剂的检测方法，希望能对提高食品安全监测有所裨益。

不妥之处，敬请相关专业人士批评指正。

关键词：食品检测；合成着色剂；测定方法食品安全大如天，而与食品安全相对应的则是食品安全危害，它大致可以分为以下几类：物理危害、化学危害和生物危害。

我们目前所接触到的食品安全事故多数是化学危害。

按照我国政府颁布的关于食品添加剂的相关法律规定，对于允许使用的食品添加剂按照规定的使用剂量添加使用，一般是不会对人产生危害的，但是如果使用了在食品添加剂名单之外的其他添加剂，或者是明确禁止使用的添加剂，或者是超过规定剂量使用了允许使用的添加剂，这些措施都会造成食品安全事故危害的发生。

一、何为合成着色剂作为食品添加剂使用的着色剂，它的主要功能就是用来改善食品的色彩，使食品看起来色泽更加艳丽，以达到在视觉上刺激人们食欲的目的，它是一种相对比较传统的食品色彩调节方法。

根据有关机构的市场调查发现，消费者在购买一些无法直接试吃的食品时，一般会首先考虑食品的色、香、味、形等物理特征。

另外，根据一些科研就够的研究显示，食品的色彩对人们食欲的有刺激作用居于其他物理特征之首。

故而，食品生产机构为了增加产品的销量，于是就在食品色彩上大做文章，食品着色剂也就被广泛的应用于各种食品中。

如果人体摄入过多则会产生非常大的危害。

若想对各种各样的食品进行是否含有合成着色剂的安全检测，那么就必须采用恰当的检测方式。

加入食品中的着色剂来源各不相同，有些是天然形成的，有些则是后期经过化学合成的，目前在使用的食品着色剂就包括上述两种。

液相色谱法测定食品中合成着色剂作者：***来源：《食品安全导刊·下》2024年第05期摘要：目的：建立一种液相色谱法测定食品中合成着色剂的方法。

方法：用乙醇氨水溶液提取食品中的合成着色剂，经固相萃取柱净化后，用液相色谱仪（配二極管阵列检测器）测定，外标法定量。

结果：11种合成着色剂在0.2～10.0 μg·mL-1线性关系良好，线性相关系数为0.999 4～1.000 0，加标回收率为94.2%～109.6%，相对标准偏差在0.55%～5.52%。

柠檬黄、喹啉黄、日落黄、胭脂红、新红和赤藓红的检出限均为0.5 mg·kg-1，定量限均为1.5 mg·kg-1；苋菜红、诱惑红、亮蓝、酸性红和靛蓝的检出限均为0.3 mg·kg-1，定量限均为1.0 mg·kg-1。

结论：该方法的重复性好、灵敏度高、实用性强，可以同时测定食品中多种合成着色剂的含量。

关键词：合成着色剂；液相色谱法；固相萃取Determination of Synthetic Colorants in Food by Liquid ChromatographyZHU Xiaolei（Guangdong Dongguan Quality Supervision & Testing Center， Dongguan 523000， China）Abstract： Objective： To establish a method for the determination of synthetic colorants in food by liquid chromatography. Method： The synthetic colorants in food were extracted with ethanol ammonia solution， purified by solid phase extraction column， determined by liquid chromatography （ with diode array detector ）， and quantified by external standard method. Result： The linear range of 11 synthetic colorants was 0.2～10.0 μg·mL-1， the linear correlation coefficient was 0.999 4～1.000 0， the recovery rate was 94.2%～109.6%， and the relative standard deviation was 0.55%～5.52%. The detection limits of tartrazine， quinoline yellow， sunset yellow， carmine， new red and erythrosine were 0.5 mg·kg-1， and the limits of quantification were 1.5 mg·kg-1. The limits of detection of amaranth， allura red， brilliant blue， acid red and indigo were 0.3 mg·kg-1， and the limits of quantitation were1.0 mg·kg-1. Conclusion： The method has good repeatability， high sensitivity and strong practicability， and can simultaneously determine the content of various synthetic colorants in food.Keywords： synthetic colorants; liquid chromatography; solid-phase extraction着色剂在食品加工过程中可以改善食品的口感和外观，但过量使用会对人们的健康造成不良影响。

食用合成色素的测定核心提示：天然食品及食品原料多数本身具有特有的色泽和香味，人们在长期的生活习惯中也认识了各种食品应有的色泽，食品的色泽已经成为食品天然食品及食品原料多数本身具有特有的色泽和香味，人们在长期的生活习惯中也认识了各种食品应有的色泽，食品的色泽已经成为食品的一个重要感官指标。

然而，食品在保存及加工过程中，其色泽往往会有不同程度的变化，为了改善食品的色泽，使食品尽可能恢复原来的颜色，除采取一定护色措施外，往往还得添加一定量的食用色素，进行着色。

食用色素就来源可分成两大类：天然色素和合成色素天然色素的优缺点：1、优点：⑴其色素是从一些动物、植物组织中提取出来；⑵安全性高；2、缺点：⑴稳定性差（对光、热、酸、碱等条件敏感）；⑵着色能力差；⑶难以调出任意的色泽；⑷资源短缺，不能满足食品工业的需求；⑸价格昂贵。

合成色素优缺点：1、优点：⑴资源十分丰富（来自于煤焦油及其副产品）；⑵稳定性好、色泽鲜艳、着色力强、能调出任意颜色；⑶价格低廉；⑷应用广泛；2、缺点：⑴毒性较大（因为属合成所以毒性大，有的甚至致癌）；⑵食用剂量加以限制。

对合成色素在测定时采用的几大步骤如下：样品前处理→提纯→分离→鉴别（何种色素）→定量（此色素含量是否超标）⑴前处理方法有：前处理不外乎是将样品打浆或者将着色部分用刀刮下，定容、吸附、解吸等方法处理；⑵提纯的方法（1）羊毛染色法：此法应用较广泛，主要是简单，材料容易弄到，操作也方便。

缺点为：要在热的酸性条件下吸附色素，用氨溶液解吸色素时，往往色素起变化。

当溶液中含量低时（色素含量低），用羊毛染色法吸附色素不完全，回收率低；（2）聚酰胺粉法：此法是分离两种以上的色素，是目前比较理想的方法，因为食品中大多数使用拼色。

聚酰胺粉在酸性溶液中能与人工合成色素牢固地结合，并能在很稀的溶液中吸附色素，但对天然色素的吸附不紧密，能被甲醇-甲酸洗脱下来；中心以化工行业技术需求和科技进步为导向，以资源整合、技术共享为基础，分析测试、技术咨询为载体，致力于搭建产研结合的桥梁。

食品中人工合成着色剂的测定摘要：在日常试验用HPLC测定食品品中人工合成着色剂的国家标准GB/T5009.35- 2003时，我们发现该方法测定高蛋白质油脂等固态样品的前处理方法以及梯度洗脱程序存在一定的不足，因此，对该方法的前处理以及梯度洗脱程序加以改进，使得样品前处理简便快捷，六种色素回收率均在90%以上，而且延长了色谱柱的寿命。

关键词：人工合成着色剂 HPLC 食品前处理Through daily test with HPLC determination food products in the artificial synthesis colors agent of national standard GB/T5009.35-2003， we found law determination high protein oil，solid samples of processing method and gradient wash program exists must of insufficient， therefore， on the method of processing and gradient wash program be improved， makes samples processing easy shortcut， six kind of pigment recovery are in 90% above， and extended the spectrum column of life人工合成着色剂作为一种添加剂广泛用于食品中，GB2760-2011对其使用有明确的限量标准，但在市场上却时有发现这些人工合成着色剂被滥用，如染色馒头，所以对它的检测监管是相当重要的，测定这些人工合成着色剂方法有高效液相色谱法、薄层色谱法等[1] ，但无论哪一种方法都涉及样品前处理。

国标法第一法是用HPLC测定合成着色剂，将食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和峰面积比较进行定量[1] 。

目录Table of Contents一、目的Objective -------------------------------------------------------------------------------------------2二、适用范围Scope -----------------------------------------------------------------------------------------2三、职责Responsibilities -----------------------------------------------------------------------------------2四、工作程序Contents --------------------------------------------------------------------------------------2五、相关文件Related Documents -------------------------------------------------------------------------3六、相关记录Related Records -----------------------------------------------------------------------------3七、历史修订记录Revisions ------------------------------------------------------------------------------3八、附录Appendix ------------------------------------------------------------------------------------------4文件审批记录Review And Approval1 目的为了规范食品中合成着色剂的检测。

浅谈食品检测中合成着色剂的测定方法俗话说“人是铁，饭是钢，一顿不吃饿得慌”，可见食品对于人类的重要性。

随着全球经济的高速发展，食品安全成了民众关心的大事，如何才能确保食品安全则成为热点问题，其中作为食品安全的一种监控手段，食品检测的重要性就在过程中凸显出来了。

食品中的着色剂的检测是食品检测中的一项重要检测项目，受到了相关部门的高度关注。

鉴于此，作者全面分析了食品检测中合成着色剂的检测方法，以期提高食品检测的效率，保障食品安全。

标签：食品检测；合成着色剂；测定方法与食品安全相对的就是食品安全危害，食品安全危害可以大致分为生物危害、化学危害和物理危害。

食品添加剂就是化学危害的一个重要来源。

按照国家食品添加剂的管理规定，对允许使用的添加剂按照规定量添加使用不会对人产生危害，但是对于在食品添加剂名单上明确规定不可以添加或是超量添加允许添加的添加剂，都会产生食品安全危害。

合成着色剂目前的使用范围广、用量大，长期过量摄入会对人体产生很大的危害。

但是要想对为数繁多的食品进行是否含有合成着色剂的检测，则需要采取适宜的测定方法，方可提高检测效率，提高监管力度和监管的有效性，从而打击违法添加有害物质的行为，保障人民的生命安全。

1 合成着色剂概述着色剂作为食品添加剂使用的主要作用就是改变食品的色彩，是一种相对传统的食品色彩调节方法。

根据市场调查分析，消费者在购买食品时，一般会考虑食品的色、香、味、形情况，同时，根据研究显示，食品的色彩对于人的食欲有刺激作用，可以勾起消费者的购买欲。

因此，食品生产商为了所生产食品的销量，在食品色彩上大下功夫，着色剂也就被广泛的应用开来。

近年来，国际国内的食品安全事故频发，其中不乏着色剂的滥用导致的食品安全事故。

事故频发导致了民众对于着色剂产生了怀疑与强力排斥，同时也受到了国家相关部门的关注与大力监督治理，在消费者的排斥与国家部门的监管下，着色剂滥用的情况得到了一定的遏制。

但是一些不法商家为了经济利益，不惜冒着触犯法律的风险，试图通过食品检测的漏洞来避免不法行径被发现。

一、编制目的为规范食品中合成着色剂的检验方法，编制本指导书。

二、适用范围本作业指导书规定了饮料、配置酒、硬糖、蜜饯、淀粉软糖、巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂（不含铝色锭）的测定方法。

本作业指导适用于饮料、配制酒、硬糖、蜜饯、淀粉软糖、巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂（不含铝色锭）的测定。

三、编制依据GB5009.35-2016《食品中合成做着色剂的测定》四、实验原理食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取，制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。

五、试剂和材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1 试剂5.1.1甲醇（CH3OH):色谱纯。

5.1.2 正乙烷（C6H14）。

5.1.3 盐酸（HCl）。

5.1.4冰醋酸（CH3COOH）。

5.1.5 甲酸（HCOOH）5.1.6 乙酸铵（CH3COONH4）。

5.1.7柠檬酸（C6H8O7 〃H2O）。

5.1.8硫酸钠（Na2SO4）。

5.1.9 正乙醇（C4H10O）。

5.1.10 三正辛铵（C24H51N）。

5.1.11 无水乙醇(CH3CH2OH).5.1.12氨水（NH3〃H2O):含量20%-25%。

5.1.13 聚酰胺粉（尼龙6）：过200μm（目）筛。

5.2 试剂配置5.2.1 乙酸铵溶液( 0.02mo l/L):称取1.54g乙酸铵,加水至1000mL,溶解,经0.45μm微孔滤膜过滤。

5.2.2 氨水溶液:量取氨水2mL,加水至100mL,混匀。

5.2.3 甲醇-甲酸溶液( 6+4,体积比):量取甲醇60mL,甲酸40mL,混匀。

5.2.4柠檬酸溶液:称取20g柠檬酸,加水至100mL,溶解混匀。

5.2.5无水乙醇-氨水-水溶液(7+2+1,体积比):量取无水乙醇70mL、氨水溶液20mL、水10mL,混匀。

5.2.6 三正辛胺-正丁醇溶液:量取三正辛胺5mL,加正丁醇至100mL,混匀。

国标《食品中合成着色剂的测定》历次修订浅析
李广;顾敏;张锋
【期刊名称】《中国食品》
【年(卷),期】2024()10
【摘要】人工合成着色剂是通过化学反应人工合成的一种有机染料,具有着力强、色彩鲜亮、易调色、成本低廉等特点,被广泛应用于食品行业。

合成着色剂主要由苯、萘等有机化合物制成,人体吸收后会在体内积蓄、分解,对人体有潜在致癌性。

因此,我国出台了相关规定对合成着色剂的使用进行规范,也颁布了国标《食品中合成着色剂的测定》,规定了食品中合成着色剂的检测方法。

经查询,国标《食品中合成着色剂的测定》最早于1985年颁布,随后于1996年、2003年、2016年、2023年进行了四次修订。

【总页数】3页(P94-96)
【作者】李广;顾敏;张锋
【作者单位】甘肃省分析测试中心
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.液相色谱–串联质谱法测定谷类食品中5种合成着色剂
2.液相色谱法测定食品中合成着色剂苋菜红、胭脂红结果的不确定度评定
3.HPLC法测定保健食品胶囊壳中
合成着色剂含量4.一种用于测定食品中合成着色剂含量的液相检测方法5.高效液相色谱法同时测定食品中9种合成着色剂
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食品中合成着色剂的测定方法食品中合成着色剂主要是以人工方法进行化学合成的有机色素类，按其化学结构不同可分为偶氮类色素和非偶氮类色素，偶氮类色素按溶解性不同又可分为油溶性和水溶性两类。

合成类色素中还包括色淀。

食品中合成着色剂的种类很多，国际上允许使用的有30余种，我国允许使用的主要有苋菜红、胭脂红、赤藓红、新红、玫瑰红、柠檬黄、日落黄、亮蓝、靛蓝、牢固绿等。

6.1高效液相色谱法1)原理食品中的合成着色剂经聚酰胺吸附法或液一液分配法提取后，制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。

利用高效液相色谱法测定食品中合成着色剂的最小检出量为：新红5ng、柠檬黄4ng、苋菜红6ng、胭脂红8ng、日落黄7ng、赤藓红18ng、亮蓝26ng。

当进样量为0.025g样品时，最低检出浓度分别为0.2、0.16、0.24、0.32、0.28、0.72、1.04mg／kg。

2)仪器和试剂(1)仪器高效液相色谱仪，带紫外检测器。

(2)试剂⑴正己烷。

分析纯。

⑵盐酸。

分析纯。

⑶乙酸。

⑷甲醇：经滤膜(0.45μm)过滤。

⑸聚酰胺粉(尼龙6)：过200目筛。

⑹乙酸铵溶液(0.02mol／L)：称取1.54g乙酸铵，加水至1 000mL，溶解，经滤膜(0.45μm)过滤。

⑺氨水：量取氨水2mL，加水至100mL，混匀。

⑻甲醇一甲酸(6+4)溶液：量取甲醇60mL，甲酸40mL，混匀。

⑼柠檬酸溶液：称取20g柠檬酸(C6H8O7•H2O)，加水至100mL，溶解混匀。

⑽无水乙醇一氨水一水(7+2+1)溶液：量取无水乙醇70mL、氨水20mL、水10mL，混匀。

⑾三正辛胺正丁醇溶液(5％)：量取三正辛胺5mL，加正丁醇至100mL，混匀。

⑿饱和硫酸钠溶液。

⒀pH6的水：水加柠檬酸溶液调pH到6。

⒁合成着色剂标准溶液：准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、新红、赤藓红、亮蓝、靛蓝各0.1000g，置100mL容量瓶中，加pH6的水到刻度。

食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定1范围本标准规定了饮料㊁配制酒㊁硬糖㊁蜜饯㊁淀粉软糖㊁巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂(不含铝色锭)的测定方法㊂本标准适用于饮料㊁配制酒㊁硬糖㊁蜜饯㊁淀粉软糖㊁巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂(不含铝色锭)的测定㊂2原理食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取,制成水溶液,注入高效液相色谱仪,经反相色谱分离,根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量㊂3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6682规定的一级水㊂3.1试剂3.1.1甲醇(C H3O H):色谱纯㊂3.1.2正己烷(C6H14)㊂3.1.3盐酸(H C l)㊂3.1.4冰醋酸(C H3C O OH)㊂3.1.5甲酸(H C O O H)㊂3.1.6乙酸铵(C H3C O O N H4)㊂3.1.7柠檬酸(C6H8O7㊃H2O)㊂3.1.8硫酸钠(N a2S O4)㊂3.1.9正丁醇(C4H10O)㊂3.1.10三正辛胺(C24H51N)㊂3.1.11无水乙醇(C H3C H2O H)㊂3.1.12氨水(N H3㊃H2O):含量20%~25%㊂3.1.13聚酰胺粉(尼龙6):过200μm(目)筛㊂3.2试剂配制3.2.1乙酸铵溶液(0.02m o l/L):称取1.54g乙酸铵,加水至1000m L,溶解,经0.45μm微孔滤膜过滤㊂3.2.2氨水溶液:量取氨水2m L,加水至100m L,混匀㊂3.2.3甲醇-甲酸溶液(6+4,体积比):量取甲醇60m L,甲酸40m L,混匀㊂3.2.4柠檬酸溶液:称取20g柠檬酸,加水至100m L,溶解混匀㊂3.2.5无水乙醇-氨水-水溶液(7+2+1,体积比):量取无水乙醇70m L㊁氨水溶液(3.2.2)20m L㊁水10m L,混匀㊂3.2.6三正辛胺-正丁醇溶液(5%):量取三正辛胺5m L,加正丁醇至100m L,混匀㊂3.2.7饱和硫酸钠溶液㊂3.2.8p H6的水:水加柠檬酸溶液调p H到6㊂3.2.9p H4的水:水加柠檬酸溶液调p H到4㊂3.3标准品3.3.1柠檬黄(C A S:1934-21-0)㊂3.3.2新红(C A S:220658-76-4)㊂3.3.3苋菜红(C A S:915-67-3)㊂3.3.4胭脂红(C A S:2611-82-7)㊂3.3.5日落黄(C A S:2783-94-0)㊂3.3.6亮蓝(C A S:3844-45-9)㊂3.3.7赤藓红(C A S:16423-68-0)㊂3.4标准溶液配制3.4.1合成着色剂标准贮备液(1m g/m L):准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄㊁日落黄㊁苋菜红㊁胭脂红㊁新红㊁赤藓红㊁亮蓝各0.1g(精确至0.0001g),置100m L容量瓶中,加p H6的水到刻度㊂配成水溶液(1.00m g/m L)㊂3.4.2合成着色剂标准使用液(50μg/m L):临用时将标准贮备液加水稀释20倍,经0.45μm微孔滤膜过滤㊂配成每毫升相当50.0μg的合成着色剂㊂4仪器和设备4.1高效液相色谱仪,带二极管阵列或紫外检测器㊂4.2天平:感量为0.001g和0.0001g㊂4.3恒温水浴锅㊂4.4 G3垂融漏斗㊂5分析步骤5.1试样制备5.1.1果汁饮料及果汁㊁果味碳酸饮料等:称取20g~40g(精确至0.001g),放入100m L烧杯中㊂含二氧化碳样品加热或超声驱除二氧化碳㊂5.1.2配制酒类:称取20g~40g(精确至0.001g),放入100m L烧杯中,加小碎瓷片数片,加热驱除乙醇㊂5.1.3硬糖㊁蜜饯类㊁淀粉软糖等:称取5g~10g(精确至0.001g)粉碎样品,放入100m L小烧杯中,加水30m L,温热溶解,若样品溶液p H较高,用柠檬酸溶液调p H到6左右㊂5.1.4巧克力豆及着色糖衣制品:称取5g~10g(精确至0.001g),放入100m L小烧杯中,用水反复洗涤色素,到巧克力豆无色素为止,合并色素漂洗液为样品溶液㊂5.2色素提取5.2.1聚酰胺吸附法:样品溶液加柠檬酸溶液调p H到6,加热至60ħ,将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状,倒入样品溶液中,搅拌片刻,以G3垂融漏斗抽滤,用60ħp H为4的水洗涤3次~5次,然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3次~5次(含赤藓红的样品用5.2.2法处理),再用水洗至中性,用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3次~5次,直至色素完全解吸,收集解吸液,加乙酸中和,蒸发至近干,加水溶解,定容至5m L㊂经0.45μm微孔滤膜过滤,进高效液相色谱仪分析㊂5.2.2液-液分配法(适用于含赤藓红的样品):将制备好的样品溶液放入分液漏斗中,加2m L盐酸㊁三正辛胺-正丁醇溶液(5%)10m L~20m L,振摇提取,分取有机相,重复提取,直至有机相无色,合并有机相,用饱和硫酸钠溶液洗2次,每次10m L,分取有机相,放蒸发皿中,水浴加热浓缩至10m L,转移至分液漏斗中,加10m L正己烷,混匀,加氨水溶液提取2次~3次,每次5m L,合并氨水溶液层(含水溶性酸性色素),用正己烷洗2次,氨水层加乙酸调成中性,水浴加热蒸发至近干,加水定容至5m L㊂经0.45μm微孔滤膜过滤,进高效液相色谱仪分析㊂5.3仪器参考条件5.3.1色谱柱:C18柱,4.6mmˑ250mm,5μm㊂5.3.2进样量:10μL㊂5.3.3柱温:35ħ㊂5.3.4二极管阵列检测器波长范围:400n m~800n m,或紫外检测器检测波长:254n m㊂5.3.5梯度洗脱表见表1㊂表1梯度洗脱表时间m i n流速m L/m i n0.02m o l/L乙酸铵溶液%甲醇%01.095531.0653571.00100101.0010010.11.0955211.09555.4测定将样品提取液和合成着色剂标准使用液分别注入高效液相色谱仪,根据保留时间定性,外标峰面积法定量㊂6分析结果的表述试样中着色剂含量按式(1)计算:X=cˑVˑ1000mˑ1000ˑ1000(1)式中:X 试样中着色剂的含量,单位为克每千克(g/k g);c 进样液中着色剂的浓度,单位为微克每毫升(μg/m L);V 试样稀释总体积,单位为毫升(m L);m 试样质量,单位为克(g);1000 换算系数㊂计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留两位有效数字㊂7精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%㊂8其他方法检出限:柠檬黄㊁新红㊁苋菜红㊁胭脂红㊁日落黄均为0.5m g/k g,亮蓝㊁赤藓红均为0.2m g/k g (检测波长254n m时亮蓝检出限为1.0m g/k g,赤藓红检出限为0.5m g/k g)㊂。

食品中着色剂含量的测定一、实验原理：水溶性酸性合成着色剂在酸性条件下被聚酰胺吸附，而在碱性条件下被解吸附，再用纸色谱或薄层色谱法进行分离后，与标准比较定性定量，最低检出量为5ug，点样量为1g，样品最低检出含量约为50mg/kg。

二、实验原料：果冻三、仪器与试剂：聚酰胺粉（尼龙6），乙醇（50%），乙醇氨溶液，PH=6的水，柠檬酸溶液（200g/L），正丁醇—无水乙醇—氨水（1%）（6+2+3），着色剂混合标准液，烧杯，吸管等四、实验步骤：1、样品处理：称取10g已粉碎的样品，加30ml水，温热溶解，若样液PH较高，用柠檬酸溶液（200g/L）调PH到4左右。

2、吸附分离：将处理后所得的溶液加热到70℃，加入1g聚酰胺粉充分摇匀，用柠檬酸溶液（200g/L）调PH=4。

使着色剂完全被吸附，若溶液还有颜色可再加一些聚酰胺粉。

将吸附着色剂的聚酰胺粉全部转入漏斗中过滤，用PH=4的70℃的水反复洗涤，每次20ml，边洗边搅拌。

若含有天然着色剂，再用甲酸—甲醇溶液洗涤1~3次，每次20ml至溶液无色为止，再用70℃的水多次洗涤至流出液为中性，洗涤过程中必须充分搅拌。

然后用乙醇—氨溶液分3次解吸全部着色剂，收集全部解吸液于水浴上除氨。

将上述溶液置水浴上浓缩至2ml后移入10ml容量瓶中，用乙醇（50%）洗涤容器，洗液转移入容量瓶中并稀释至刻度10ml。

3、定性：取色谱用纸，在距底边2cm起始线上分别点3~10ul样品溶液，1~2ul着色剂标准液分别盛有正丁醇—无水乙醇—氨（1%）和正丁醇—吡啶—氨水（1%）展开剂的层析缸中，用上行洗展开，待溶剂前沿展至15cm处，将滤液取出，于空气中晾干与标准斑比较定性，也可取样0.5ml样液在起始线上从左至右点成条状，纸的左边点着色剂标液，依次展开，晾干后定性，靛蓝在碱性条件下易褪色，可用甲乙酮—丙酮—水作展开剂。

五、思考题：1、为什么在用聚酰胺吸附时要用柠檬酸将PH调至4？2、为什么要用70℃热水流至流出液到中性？。

食品检测中合成着色剂的测定方法作者：王峰来源：《中国科技博览》2016年第14期[摘要]随着社会的快速进步，经济的迅猛增长，食品行业也迅速的繁荣发展起来，随着人们生活水平与质量的不断提高，食品种类与形态更是形形色色。

许多食品生产厂商为了追求更多的经济效益，满足消费者对食品味觉和视觉的需求，会在食品中增加各种添加剂。

民以食为天，食品的安全问题现今已成为社会的大众关注的重点。

为了保障市场上各种食品不会对消费者的健康造成恶劣的影响，相关部门需要加强管理与监测。

合成着色剂是食品检测环节中的关键环节，其检测、鉴定方式是否科学合理直接影响检测的效果。

[关键词]食品检测；合成着色剂；测定方法中图分类号：F407.44 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）14-0204-01引言在众多的食品安全问题发生之后，食品安全问题已经成为全民关注的热门话题。

双汇，上海福喜，三鹿等著名品牌都曾出现过严重的食品安全问题，这也让公众对食品的安全产生极大的担忧。

结合现今的食品市场的具体情况来看，食品安全的确存在较多的问题，一些不良的商家为了谋取更多的利润，往往忽视食品的品质与安全，违背国家相关规范和标准，在食品中添加超量的食品合成着色剂，这些不符合标准的食品也必然会给消费者带来较大的危害。

一、合成着色剂的简要概述1.1 着色剂的分类着色剂是食品添加剂中的重要一员，按照来源可以分为天然着色剂和合成着色剂两种。

天然着色剂顾名思义就是从动物以及植物中提取的天然色素，大多是植物的色素。

最常见的天然着色剂有辣椒红、红曲红。

姜黄、胡萝卜素以及焦糖色素等。

其特点是不易分散且相溶性不高，一般价格高于合成着色剂。

由于食品行业的发展十分迅速，天然色素的价格、易褪色的性质等方面都无法满足现代食品工业的要求。

十九世纪开始，人工合成着色剂登上了历史的舞台，深受食品生产商的青睐。

由于合成着色剂是化工生产的产品，因此颜色较之天然色素更胜一筹，且颜色持久性更长，价格更低。

食品科学学‎院本科实验‎项目实验7 食品中着色‎剂的测定1 实验目的(1) 学习各类色‎素测定的原‎理与方法；(2) 掌握纸层析‎定性法与提‎纯色素的定‎量法。

2 实验原理聚酰胺是具‎有二极性的‎化合物，水溶性酸性‎染料在酸性‎条件下被聚‎酰胺吸附，而在碱性条‎件下解吸附‎，再用纸色谱‎法或薄层色‎谱法进行分‎离后与标准‎比较定性、定量。

3 试剂与仪器‎主要试剂：聚酰胺粉(尼龙6)、硫酸（1：10）、甲醇-甲酸溶液（6：4）、甲醇、20％柠檬酸溶液‎、10％钨酸钠溶液‎、石油醚、海砂、乙醇-氨溶液、50％乙醇溶液、硅胶G、盐酸（1：10）、5％氢氧钠溶液‎、碎瓷片、展开剂[a、正丁醇-无水乙醇-1％氨水(6：2：3)；b、正丁醇-吡啶-1％氨水(6：3：4)；c、甲乙酮-丙酮-水(7：3：3)；d、甲醇-乙二胺-氨水(10：3：2)；e、甲醇-氨水-乙醇(5：1：10)；f、2.5％柠檬酸钠-氨水-乙醇(8：1：2)。

]：供薄层色谱‎用、色素标准品‎（胭脂红；苋菜红；柠檬黄；靛蓝；日落黄；亮蓝：纯度均为6‎0％。

）。

主要仪器：分光光度计‎、微量注射器‎或色素吸管‎、展开槽（25×6×4cm）、层析缸、薄层板（5×20cm）、电吹风机、水泵。

4 操作与结果‎(1) 样品处理①果味水、果子露、汽水：吸取50.0毫升样品‎于100毫‎升烧杯中，汽水需加热‎驱除二氧化‎碳。

②配制酒：吸取100‎.0毫升样品‎于烧杯中，加碎瓷片数‎块，加热驱除乙‎醇。

③硬糖：蜜饯类，淀粉软糖：称取5.0或10.0克粉碎的‎样品，加30毫升‎水，温热溶解，若样液PH‎值较高，用20％柠檬酸溶液‎调至PH4‎左右。

④含蛋奶的样‎品a奶糖：称取10.0克粉碎均‎匀的样品，加30毫升‎乙醇-氨溶液溶解‎，置水浴上浓‎缩至约20‎毫升，立即用1：10硫酸调‎溶液至微酸‎隆再加1.0毫升1：l0硫酸，加1毫升l‎0％钨酸钠溶液‎，使蛋白质沉‎淀，过滤，用少量水洗‎涤，收集滤液。

食用合成色素的测定自然食品及食品原料多数本身具有特有的色泽和香味，人们在长期的生活习惯中也熟悉了各种食品应有的色泽，食品的色泽已经成为食品的一个重要感官指标。

然而，食品在保存及加工过程中，其色泽往往会有不同程度的变化，为了改善食品的色泽，使食品尽可能恢复原来的颜色，除实行肯定护色措施外，往往还得添加肯定量的食用色素，进行着色。

食用色素就来源可分成两大类：自然色素和合成色素自然色素的优缺点：1、优点：⑴ 其色素是从一些动物、植物组织中提取出来；⑵ 平安性高；2、缺点：⑴ 稳定性差（对光、热、酸、碱等条件敏感）；⑵ 着色力量差；⑶ 难以调出任意的色泽；⑷ 资源短缺，不能满意食品工业的需求；⑸ 价格昂贵。

合成色素优缺点：1、优点：⑴ 资源非常丰富（来自于煤焦油及其副产品）；⑵ 稳定性好、色泽艳丽、着色力强、能调出任意颜色；⑶ 价格低廉；⑷ 应用广泛；2、缺点：⑴ 毒性较大（由于属合成所以毒性大，有的甚至致癌）；⑵ 食用剂量加以限制。

对合成色素在测定时采纳的几大步骤如下：样品前处理提纯分别鉴别（何种色素）定量（此色素含量是否超标）⑴ 前处理方法有：前处理不外乎是将样品打浆或者将着色部分用刀刮下，定容、吸附、解吸等方法处理；⑵ 提纯的方法（1）羊毛染色法：此法应用较广泛，主要是简洁，材料简单弄到，操作也便利。

缺点为：要在热的酸性条件下吸附色素，用氨溶液解吸色素时，往往色素起变化。

当溶液中含量低时（色素含量低），用羊毛染色法吸附色素不完全，回收率低；（2）聚酰胺粉法：此法是分别两种以上的色素，是目前比较抱负的方法，由于食品中大多数使用拼色。

聚酰胺粉在酸性溶液中能与人工合成色素坚固地结合，并能在很稀的溶液中吸附色素，但对自然色素的吸附不紧密，能被甲醇-甲酸洗脱下来；（3）离子交换法（4）分子筛分别法⑶ 目前分别方法（1）滤纸层析法；（2）薄层层析法；（3）柱层析法；（4）电泳法⑷ 色素鉴定方法（1）采纳纸层析法进行定性（与标准样进行对比 Rf）；（2）采纳薄层层析、比色的方法进行定量。