一种海洋真菌_裂殖壶菌的营养成分分析_朱路英
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目录第一章前言 (1)第一节海洋真菌的研究现状 (1)第二节研究背景、目的和意义 (3)第三节研究方法和技术路线 (4)第二章海洋真菌的分离和液体发酵 (5)第一节海洋真菌的分离培养 (5)1.1 样品来源 (5)1.2 实验试剂和培养基组分 (5)1.3 实验仪器 (5)1.4 菌株的分离培养 (6)1.5 菌株的保藏 (6)1.6 菌种的活化、筛选 (6)第二节海洋真菌菌种发酵培养 (6)2.1 实验试剂 (7)2.2 实验仪器 (7)2.3 培养基制备 (7)2.4 高压蒸汽灭菌 (7)2.5 超净台接种 (8)2.6 摇床培养 (8)第三章海洋真菌菌种的提取分离有效成分 (9)第一节海洋真菌菌种的烘干粉碎 (9)1.1 收集培养物 (9)1.2 烘干 (9)1.3 粉碎 (9)第二节有效成分的提取分离 (9)2.1 乙酸乙酯提取 (9)2.2 旋蒸浓缩 (9)2.3 萃取 (9)2.4 二次旋蒸 (10)第四章海洋真菌发酵产物化学成分的纯化 (11)1.1 实验试剂 (11)1.2 实验器材 (11)1.3 操作与流程 (11)第五章海洋真菌发酵产物的化合物鉴定 (16)1.1 实验材料 (16)1.2 实验仪器 (16)1.3 结构分析 (16)第六章实验结果 (18)第七章讨论 (19)致谢 ....................................................................................错误!未定义书签。
参考文献 . (20)摘要由于病原微生物会产生越来越强的耐药性,如今已经严重威胁到人类的身体健康,因此,研发结构独特新颖、活性显著的新型药物已迫在眉睫。
由于近几十年对地面微生物的药物开发,以至于对地源微生物开发的难度越来越大,而海洋因其独特的生态环境,从而能孕育出多种多样的微生物种群,且具有产生新型生物活性物质的巨大潜力,为抗菌活性先导化合物的研究与发现提供了丰富的资源。
一种海洋真菌——裂殖壶菌的营养成分分析朱路英1,2,张学成2,*,王淑芳1,常林瑞1(1.鲁东大学生命科学学院,山东 烟台 264025;2.中国海洋大学海洋生命学院,山东 青岛 266003)摘 要:为评价海洋真菌裂殖壶菌的营养价值,测定该菌的基本营养成分、氨基酸组成及脂肪酸组成。
结果显示,在两种不同的氮源条件下,裂殖壶菌的总蛋白、总脂、总糖及灰分分别为9.35%、42.83%、5.27%、4.85%(豆粕水解物为氮源)和42.51%、18.98%、6.38%、5.72%(酵母提取物为氮源)。
以轮虫蛋白的必需氨基酸(EAA)为标准,裂殖壶菌的必需氨基酸指数EAAI >0.9,为轮虫的优质蛋白源,但精氨酸或异亮氨酸不能完全满足轮虫需要。
而以牡蛎蛋白的EAA 为标准,该菌的EAAI 为0.78~0.79,为牡蛎的可用蛋白源。
该菌中含有高水平的DHA ,含量可达14.29%,是一种优质的DHA 强化饵料。
另外,培养基中氮源种类的不同直接影响该菌的基本营养成分、氨基酸及脂肪酸组成。
关键词:裂殖壶菌;氨基酸组成;脂肪酸组成;营养价值Analysis of Nutritional Components of a Marine Fungus: Schizochytrium limaniumZHU Lu-ying 1,2,ZHANG Xue-cheng 2,*,WANG Shu-fang 1,CHANG Lin-rui 1(1. College of Life Sciences, Ludong University, Yantai 264025, China ;2. College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003, China)Abstract :In order to evaluate nutritional values of a marine fungus, Schizochytrium limanium , its basic nutritional components,amino acid and fatty acid compositions were analyzed. Results indicated that the contents of proteins, lipids, carbohydrates and ash in Schizochytrium limanium were 9.35%, 42.83%, 5.27% and 4.85% using soybean hydrolysates as nitrogen resource and 42.51%,18.98%, 6.38% and 5.72% using yeast as nitrogen resource, respectively. Using rotifer protein as the reference, essential amino acid index (EAAI) in Schizochytrium limanium were more than 0.90; using oyster protein as the reference, EAAI in Schizochytrium limanium were 0.78-0.79, which suggested that Schizochytrium limanium was the best quality protein material for rotifer and oyster. However, Schizochytrium limanium had limited amino acids such as Arg and Ile for rotifer. Totally 14.29% DHA was determined in Schizochytrium limanium , which also suggested it was a good DHA source. Moreover, nitrogen sources exhibited a direct effect on contents of nutritional components, amino acid and fatty acid compositions.Key words :Schizochytrium limanium ;amino acid composition ;fatty acid composition ;nutritional value中图分类号:S963.2 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2009)24-0272-04收稿日期:2009-06-28基金项目:鲁东大学学科建设经费资助项目作者简介:朱路英(1974-),女,讲师,博士,研究方向为生物化学。
富含DHA的裂殖壶菌作为饲料添加剂在动物生产中的应用陈秀丽;闵红艳;邓蒲媛;周世峰;佘桐【摘要】二十二碳六烯酸(DHA)是一种长链多不饱和脂肪酸,具有健脑、提高视力、抗癌、改善机体免疫等生理功能.裂殖壶菌是一类海洋真菌,细胞内富含大量DHA.因此,裂殖壶菌作为饲料添加剂被广泛的应用于畜牧业生产中.文章介绍了DHA来源、裂殖壶菌的生物活性以及在动物生产中的应用.【期刊名称】《饲料博览》【年(卷),期】2016(000)006【总页数】4页(P28-31)【关键词】DHA;裂殖壶菌;动物生产【作者】陈秀丽;闵红艳;邓蒲媛;周世峰;佘桐【作者单位】陕西省汉中市动物疾病预防控制中心,陕西汉中7230001;陕西省汉中市动物疾病预防控制中心,陕西汉中7230001;陕西省汉中市动物疾病预防控制中心,陕西汉中7230001;陕西省汉中市动物疾病预防控制中心,陕西汉中7230001;陕西省汉中市动物疾病预防控制中心,陕西汉中7230001【正文语种】中文【中图分类】S816.7;Q547脂类是生物生存和生长必不可少的一类营养物质,是构成细胞膜的重要结构成分,且在很多生物体的能量储存中起着重要作用。
一些多不饱和脂肪酸还是重要的生理活性物质,其中以DHA为代表的n-3类多不饱和脂肪酸在机体的营养、健康和发育等方面起重要作用。
传统DHA的来源是从深海鱼油中提取,但是这个过程存在产量有限、分离纯化困难和成本较高等问题。
裂殖壶菌(Schizochytrium)是一类属于破囊壶菌科的海洋真菌,含有丰富的DHA,其安全性已得到FDA的认可[1-2]。
而且裂殖壶菌能够在异养条件下大规模培养,易于商业化生产,其细胞内的DHA含量还可通过培养基及发酵工艺来控制。
因此裂殖壶菌成为一种理想的作为富含DHA的的新生资源。
本文综述了DHA和裂殖壶菌的生物功能及其在动物营养中的应用。
DHA分子式为C22H30O2,含有6个不饱和键,是具有众多生理功能的关键结构。
用富含DHA的裂殖壶菌对轮虫进行营养强化的研究宋晓金1,张学成1,朱路英1,李荻尔2(1.中国海洋大学海洋生命学院,山东青岛266003;2.青岛森淼实业有限公司,山东青岛266101)摘要:裂殖壶菌(Schiz ochy tr ium limanium)是一种高DHA含量的海洋真菌,本实验用裂殖壶菌对褶皱臂尾轮虫(B rachionus p licatilis)进行营养强化。
结果表明:3个实验组强化后轮虫体内的DH A/FA值和DH A含量均显著提高,DH A/FA值分别为5.98%、10.21%和13.44%,轮虫体内的DH A质量比分别为4.42,7.85,8.14mg/g,并于12h后达到最大值,超过12h后轮虫体内的D HA质量比及DH A/F A值开始下降。
对照组在实验过程中均未检出DH A。
各实验组的其他指标,如轮虫密度也显著高于对照组,并且实验组的怀卵率分别为34.8%、46.5%和53.7%,而对照组仅为20.1%。
关键词:营养强化;DH A;褶皱臂尾轮虫(Br achionus p licatilis);裂殖壶菌(Schiz ochy tr ium limanium)中图分类号:S963.21 文献标识码:A 文章编号:1000 3096(2007)12 0043 04裂殖壶菌(Schiz ochy tr ium limanium)属于真菌中的卵囊菌纲(Oo mycetes),破囊壶菌属(T hr aus tochy tr ium)。
营养体为单细胞,直径7~15 m,无性繁殖由孢子囊产生游动孢子,游动孢子具等长的双鞭毛。
裂殖壶菌是1996年日本学者H onda等[1,2]从西太平洋红树林地区分离到的,1998年O nal等用裂殖壶菌干粉喂养贝类,对其生长有明显的促进作用。
2000年Davis等用裂殖壶菌干粉作为饵料添加剂喂养牡蛎幼体,结果其生长速度比未加此添加剂的增加3.2%,增产效果明显;利用裂殖壶菌干粉作为饵料添加剂可满足受精卵发育期对多不饱和脂肪酸的需求。
裂壶藻在畜牧业生产中的应用冯春燕【摘要】裂壶藻是一种高DHA含量的海洋真菌藻类.裂壶藻可为动物提供DHA,发挥DHA在动物机体内的生理功能,促进动物的生长、发育和免疫力的改善,还可促进动物机体内DHA的累计,生产高DHA含量的肉蛋奶产品.文章介绍裂壶藻及其营养价值,论述裂壶藻在水产、家禽和反刍动物生产中的应用研究,对裂壶藻在应用中存在的问题和前景进行论述.【期刊名称】《饲料博览》【年(卷),期】2019(000)007【总页数】4页(P38-40,47)【关键词】裂壶藻;DHA;畜牧【作者】冯春燕【作者单位】上海美农生物科技股份有限公司,上海 201807【正文语种】中文【中图分类】S816.7DHA是二十二碳六烯酸n-3系多不饱和脂肪酸,其分子式为C22H30O2。
DHA 含有6个不饱和键,对人类生长和发育有着重要的作用和影响。
1978年,Dyerberg等进行流行病学调查,发现爱斯基摩人食用大量的海洋脂质,但其冠心病、心肌梗死和血液栓塞等病的发生率非常低[1]。
随后,DHA的研究迅速发展,大量研究支持这一观点。
Lopez发现喝富含DHA的牛奶可以降低血液中的胆固醇、LDL和甘油三酯,减少血管平滑肌细胞的增殖,减少动脉粥样硬化和血栓形成[2]。
多项研究结果表明,DHA可以有效抑制血栓的形成,降低心血管疾病的发生率[3]。
另一个值得关注的原因是DHA已被发现与生命密切相关,在视网膜和大脑的结构膜中发挥重要作用。
深海鱼油和藻类是DHA摄入的主要来源。
鱼油中DHA胆固醇含量高,有鱼腥味,其DHA的组成和含量,会因鱼的品种、季节、地理等因素发生变化,因此以鱼油为原料的DHA质量不稳定。
此外,海鱼还含有大量的有机污染物。
鱼油中还含有大量其他饱和脂肪酸和低不饱和脂肪酸,使得DHA的纯化困难,加工工艺复杂,从而增加了DHA的生产成本[4]。
通过微藻生产DHA,可以解决鱼油资源短缺和质量不稳定的问题。
微藻细胞脂肪酸组成简单,易于分离纯化,纯化后的DHA无鱼腥味,易于添加和食用。
碳、氮源浓度和培养时间对裂殖壶菌生长和脂肪酸组成的影响朱路英1,2,张学成1,宋晓金1,况成宏1,孙远征1(1.中国海洋大学海洋生命学院,山东青岛266003; 2.鲁东大学生命学院,山东烟台264025)摘 要: 对细胞干重的测定和应用气相色谱仪测定了不同碳、氮源浓度和不同培养时间下裂殖壶菌(Schizochytr ium limac inum)OU C88的生长和脂肪酸的组成。
结果表明,在含有9%的葡萄糖和6%的豆粕水解物的培养基中,细胞生物量达到最高,为25.92g /L ;在含有6%的葡萄糖和2%的豆粕水解物的培养基中,细胞总脂含量以及总脂中的DHA 含量均达到最高,分别为50.56%和35.83%。
另外,不同生长时期内裂殖壶菌的总脂含量和脂肪酸组成不同。
在培养到第4~5天,细胞的生物量、总脂以及DHA 产量均最高。
关键词: 裂殖壶菌;生物量;脂肪酸组成;碳氮源浓度;培养时间中图法分类号: Q 178.53;Q949.32 文献标识码: A 文章编号: 1672 5174(2007)02 293 06近年来,以DHA (Docosahexaenoic acid,C22:6n 3)和EPA(Eicosapentaenoic acid,C20:5n 3)为代表的n 3多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids,PUFAs)因对人类健康的有益影响而受到人们的高度重视。
研究表明,DHA 和EPA 具有预防心血管疾病、抗癌、抗炎等生理功能[1 4];另外,DHA 还是婴幼儿视觉和神经系统的正常发育所不可缺少的重要物质[5 6]。
由于某种酶的缺乏,人体不能从头合成DHA 和EPA,必须从食物中得以补充。
目前,市场上n 3PUFAs 的主要来源是深海鱼油,然而,鱼油由于资源有限、加工成本高、有腥味以及有其它脂肪酸的干扰等问题而很难满足日益增长的市场需求。
裂殖壶菌(Schiz ochytrium limacinum )是属于破囊壶菌科的一类海洋真菌,体内积累了大量的DHA,被认为是1种有潜力的DHA 的新资源[7 8]。
裂殖壶藻在水产养殖中的作用及其开发裂殖壶藻(Schizochytrium),又名裂殖壶菌、裂壶藻,属于真菌门、卵菌纲、水霉目、破囊壶菌科的一类海洋真菌,单细胞、球形(Nakahara 和Yokochi,1996)。
裂殖壶藻细胞富含大量对人体有用的活性物质,如油脂、色素、角鲨烯等。
对裂殖壶藻营养成分研究分析表明,其生化组分主要为脂类、蛋白和总糖,其中脂肪含量可占细胞干重50%以上,而ω-3 不饱和脂肪酸DHA 就高达20%以上(李美玉等,2012;朱路英等,2007)。
裂壶藻能够在异养条件下培养,易于大规模商业化生产,还可通过培养基及发酵工艺的调整来控制细胞内的DHA 含量,是一种富含DHA的重要资源。
1 裂殖壶藻在水产养殖中的应用途径研究表明,保证饲料中充足的DHA,可显着提高鱼、虾、蟹等水产动物对环境变化的忍耐力,降低白化病发病率,从而提高存活率,并促进生长发育。
国内一些裂殖壶藻产品的生产企业也相继开展了一系列裂殖壶藻DHA 的应用试验,主要是在水产饲料中的添加效果方面,表明裂殖壶藻DHA 对改善虹鳟、鲟鱼、石斑鱼的鱼卵孵化率,以及鱼苗成活率、肉质、肉色、饵料系数、鱼肉DHA含量等均具有良好的效果。
1.1 直接投喂新鲜藻液裂殖壶藻体型微小(4 ~13 μm),可作为水产动物苗种的直接开口饵料,其富含DHA 且易于培养、产量高。
直接投喂,相当于婴儿母乳,可作为一种高DHA 含量的优良强化饵料,提高苗种生长性能和成活率。
大量研究表明,多数虾蟹贝及部分鱼类的幼体阶段大多以植物性饵料为食,单细胞藻类的种类、数量与质量直接决定其人工育苗的成败(王维娜等,2000)。
孙杰等(2008)通过微藻与西施舌混养不仅降低了水体中氨氮质量浓度,而且提高了幼贝的成活率及生长量。
朱路英等(2009)研究表明,裂殖壶藻可作为海水仔稚鱼、牡蛎等贝类的一种高DHA 含量的优良强化饵料。
1.2 作为配合饲料的营养添加剂规模化培养富含DHA 的裂殖壶藻,经过处理可作为仔鱼等基础饲料的营养强化添加剂,即微藻DHA 饲料。
裂殖壶菌鲨烯合酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达朱路英;朱清华;张学成【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2010(031)019【摘要】为探讨裂殖壶菌烯合酶基因的克隆,以及在大肠杆菌中的表达.采用简并引物与RACE相结合的方法从裂殖壶菌(Schizochytrium limacinum)中克降出鲨烯合酶基因.分析表明该基因的cDNA全长包括1672个核苷酸,编码一个含446个氨基酸的开放阅读框;在裂殖壶菌中以单拷贝的形式存在.同源分析显示裂殖壶菌鲨烯合酶的氨基酸序列中含有5个保守基序.将裂殖壶菌鲨烯合酶的cDNA序列连接到原核表达载体pGEX-4T-3上构建融合表达载体,并在大肠杆菌BL21中进行IPTG 诱导表达,SDS-PAGE及Western blotting分析结果显示,诱导表达出的融合蛋白主要以包涵体的形式存在,其相对分子质量与预期相符;且融合蛋白具有一定的免疫原性.【总页数】5页(P263-267)【作者】朱路英;朱清华;张学成【作者单位】鲁东大学生命科学学院,山东,烟台,264025;中国海洋大学海洋生命学院,山东,青岛,266003;德州学院生物系,山东,德州,253023;中国海洋大学海洋生命学院,山东,青岛,266003;中国海洋大学海洋生命学院,山东,青岛,266003【正文语种】中文【中图分类】Q786【相关文献】1.啤酒酵母鲨烯合酶基因的克隆及其基因表达载体的构建 [J], 张建红2.啤酒酵母鲨烯合酶基因的克隆及其基因表达载体的构建 [J], 冯丽玲;卢文婕;曾庆平3.青蒿鲨烯合酶基因的克隆、结构分析与大肠杆菌表达 [J], 刘彦;叶和春;王红;李国凤4.转青蒿反义鲨烯合酶基因对烟草鲨烯合酶基因表达的影响 [J], 张毅;刘彦;王红;叶和春;李国凤5.藜麦β-香树酯醇合酶和鲨烯合酶基因的克隆与表达 [J], 姜晓东;李新凤;郝艳平;赵靓;吕晋慧;贾举庆;张春来因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
一种海洋真菌——裂殖壶菌的营养成分分析朱路英1,2,张学成2,*,王淑芳1,常林瑞1(1.鲁东大学生命科学学院,山东 烟台 264025;2.中国海洋大学海洋生命学院,山东 青岛 266003)摘 要:为评价海洋真菌裂殖壶菌的营养价值,测定该菌的基本营养成分、氨基酸组成及脂肪酸组成。
结果显示,在两种不同的氮源条件下,裂殖壶菌的总蛋白、总脂、总糖及灰分分别为9.35%、42.83%、5.27%、4.85%(豆粕水解物为氮源)和42.51%、18.98%、6.38%、5.72%(酵母提取物为氮源)。
以轮虫蛋白的必需氨基酸(EAA)为标准,裂殖壶菌的必需氨基酸指数EAAI >0.9,为轮虫的优质蛋白源,但精氨酸或异亮氨酸不能完全满足轮虫需要。
而以牡蛎蛋白的EAA 为标准,该菌的EAAI 为0.78~0.79,为牡蛎的可用蛋白源。
该菌中含有高水平的DHA ,含量可达14.29%,是一种优质的DHA 强化饵料。
另外,培养基中氮源种类的不同直接影响该菌的基本营养成分、氨基酸及脂肪酸组成。
关键词:裂殖壶菌;氨基酸组成;脂肪酸组成;营养价值Analysis of Nutritional Components of a Marine Fungus: Schizochytrium limaniumZHU Lu-ying 1,2,ZHANG Xue-cheng 2,*,WANG Shu-fang 1,CHANG Lin-rui 1(1. College of Life Sciences, Ludong University, Yantai 264025, China ;2. College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003, China)Abstract :In order to evaluate nutritional values of a marine fungus, Schizochytrium limanium , its basic nutritional components,amino acid and fatty acid compositions were analyzed. Results indicated that the contents of proteins, lipids, carbohydrates and ash in Schizochytrium limanium were 9.35%, 42.83%, 5.27% and 4.85% using soybean hydrolysates as nitrogen resource and 42.51%,18.98%, 6.38% and 5.72% using yeast as nitrogen resource, respectively. Using rotifer protein as the reference, essential amino acid index (EAAI) in Schizochytrium limanium were more than 0.90; using oyster protein as the reference, EAAI in Schizochytrium limanium were 0.78-0.79, which suggested that Schizochytrium limanium was the best quality protein material for rotifer and oyster. However, Schizochytrium limanium had limited amino acids such as Arg and Ile for rotifer. Totally 14.29% DHA was determined in Schizochytrium limanium , which also suggested it was a good DHA source. Moreover, nitrogen sources exhibited a direct effect on contents of nutritional components, amino acid and fatty acid compositions.Key words :Schizochytrium limanium ;amino acid composition ;fatty acid composition ;nutritional value中图分类号:S963.2 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2009)24-0272-04收稿日期:2009-06-28基金项目:鲁东大学学科建设经费资助项目作者简介:朱路英(1974-),女,讲师,博士,研究方向为生物化学。
E-mail :ly zh u @123.co m *通讯作者:张学成(1939-),男,教授,研究方向为海洋生物学。
E-mail :xczhang@在水产养殖业中,饵料所含的营养对水产动物种苗的成活率、生长速率及抗逆、抗病能力有很大影响[1-2]。
目前,轮虫和卤虫无节幼体是广泛使用的海洋仔稚鱼的重要天然饵料。
但是,常用的几种轮虫和卤虫体内普遍缺乏海洋仔稚鱼必需的n-3多不饱和脂肪酸(PUFA),因此,生物饵料营养强化技术在海洋鱼类育苗生产中受到关注,以轮虫和卤虫无节幼体为载体,增加仔稚鱼对 n-3 PUFA 的摄入量[3]。
目前,大量培养轮虫的常用饵料有微藻,如小球藻、酵母类、乳化鱼油微粒或微囊等。
小球藻含有高水平的二十碳五烯酸(EPA)和二十碳四烯酸(AA)但缺乏二十二碳六烯酸(DHA)[3];一些酵母类所含的n-3 PUFA 由于含量的限制仍然满足不了仔稚鱼的需要[3]。
因此,寻找天然的更有效的生物饵料添加剂已成为人们研究热点之一。
日本研究者从西太平洋红树林地区分离到了一株富含D H A 的海洋真菌—裂殖壶菌(S c h i z o c h y t r i u m l i m a n i u m )。
该菌属于真菌中的卵囊菌纲、破囊壶菌属,营养体为单细胞,球形,直径7~15μm [4]。
目前人们对裂殖壶菌的研究主要集中在DHA的生产上[5-6],而在其他方面做的研究非常有限。
鉴于裂殖壶菌有望被作为一种直接或间接的生物饵料进行开发应用,因此,有必要对裂殖壶菌的营养成分进行分析。
确定生物饵料的营养价值,通常把其所含的必需氨基酸的量以及n-3 PUFA作为主要选择指标[7]。
本研究分析了裂殖壶菌的主要生化组分、氨基酸组成和PUFAs的种类及含量,并对两种不同氮源条件下培养的裂殖壶菌的营养成分做比较,以期为评价裂殖壶菌作为生物饵料的营养价值及质量管理提供理论数据。
1 材料与方法1.1材料与培养基裂殖壶菌菌株(Schizochytrium limacinum)为日本大阪发酵研究所提供的菌株S. limacinum SR21经紫外诱变后得到。
基本培养基:60g/L的葡萄糖,20g/L酵母提取物,天然海水/蒸馏水50%(V/V),pH7.0。
1.2方法1.2.1不同氮源对裂殖壶菌营养成分的影响测定的两种氮源分别为40g/L的豆粕水解物和20g/L 的酵母提取物,其他成分同基本培养基。
将两种含不同氮源的培养基培养的裂殖壶菌进行营养成分比较,观察氮源对裂殖壶菌营养成分的影响。
1.2.2样品处理将菌种置于基本培养基中,28℃条件下振荡培养4d,离心后冷冻干燥,得干燥的菌粉进行以下各节的分析。
1.2.3营养成分分析105℃常压干燥,重量法测定水分;烧灼氧化,重量法测定灰分;凯氏定氮法测定粗蛋白含量(粗蛋白质=总氮×6.25);索氏抽提法测定总脂;硫酸-苯酚法测定总糖。
1.2.4氨基酸组分分析样品用6mol/L HCl水解24h,以氨基酸自动分析仪进行测定。
1.2.5氨基酸数据分析必需氨基酸指数是指饵料蛋白质的必需氨基酸组成与参比蛋白质的必需氨基酸组成的加权比较值:EAAI= a/A×b/B×c/C×……i/I式中:a、b、c、…、i分别代表饵料蛋白质的某种必需氨基酸在总氨基酸中的百分含量;A、B、C、…、I分别代表轮虫或牡蛎蛋白质中某种必需氨基酸在其总氨基酸中的百分含量;n为计算式中涉及到的必需氨基酸的数目。
1.2.6脂肪酸(FA)分析应用脂肪酸甲酯的气相色谱分析法,采用安捷伦6890气相色谱仪对样品进行脂肪酸测定,再通过外标法计算出各脂肪酸的含量。
色谱条件为:氮气为载气,起始柱温为170℃,1min后以15℃/min的速度升至230℃,保持23min。
进样口温度为250℃,检测器温度为260℃。
采用不分流进样,进样量为1μl。
2 结果与分析2.1裂殖壶菌的主要营养成分注:样品A表示以豆粕水解物为氮源培养出的裂殖壶菌;样品B表示以酵母提取物为氮源培养出的裂殖壶菌。
下同。
营养成分细胞中的含量(%)样品A样品B 总蛋白9.3542.51总脂42.8318.98总糖 5.27 6.38灰分 4.85 5.72表1 裂殖壶菌的主要营养组分Table 1 Basic nutritional components in Schizochytriumlimacinum从表1可以看出,裂殖壶菌菌体中主要为蛋白质和脂类。
而且,裂殖壶菌的生化组分与培养条件直接相关,不同氮源条件下生长的裂殖壶菌其生化组分明显不同。
在氮源为豆粕水解物的条件下培养的裂殖壶菌其细胞内主要成分是脂类,含量达42.83%,蛋白含量较低,为9.35%;而以酵母提取物为氮源培养的裂殖壶菌细胞中蛋白含量高达42.51%,而脂类含量相对较低,为18.98%。
两种氮源条件下产生的总糖和灰分含量也有所差别。
2.2氨基酸组成分析两种氮源条件下培养的裂殖壶菌蛋白质中氨基酸的组成相同,但相对含量差别明显(表2)。
以豆粕水解物为氮源,裂殖壶菌细胞中总氨基酸为7.38%,含有常见的16 种氨基酸(色氨酸因酸处理而被破坏),包括必需氨基酸10种及非必需氨基酸6种(表2) ,其中,必需氨基酸占总氨基酸的42.41%;从氨基酸组成上看,谷氨酸含量最高,为总氨基酸的20.87%,其次为天冬氨酸(14.91%)、缬氨酸(9.35%)和亮氨酸(6.91%),含量最低的依次为精氨酸和组氨酸。
在以酵母提取物为氮源的条件下,氨基酸总量较高为39.7%,氨基酸的种类与前者相同,其中,总氨基酸中谷氨酸含量最高,为33.63%,其次为精氨酸(13.35%)、天冬氨酸(7.15%)、赖氨酸(5.79%)和亮氨酸(5.57%),而蛋氨酸和组氨酸含量最低;总氨基酸中必需氨基酸含量为43.31%。