微生物技能考核标准 (2)

深圳市职业技能鉴定微生物检定工考核大纲1、职业概况1.1、职业名称：微生物检定工职业定义：从事药品，食品，化妆品，日常化学品等行业微生物检定工作的人员。

1.2、职业等级：本大纲共设五个等级，分别为：初级工（国家职业资格五级）、中级工（国家职业资格四级）、高级工（国家职业资格三级）、技师（国家职业资格二级）、高级技师（国家职业资格一级）。

1.3、基本文化程度：生物、医药、食品、精细化工等专业及其相关专业中等专业学校（含中技、中职）毕业，或高中毕业经过岗位实践和专业培训。

1.4、培训期限要求：全日制职业学校教育，根据其培养目标和教学计划确定。

晋级培训期限：初级、中级、高级不少于200标准学时；技师和高级技师不少于180标准学时。

1.5、申报条件：参照《关于印发职业技能鉴定各职业报考条件的补充通知》（深职鉴办〔2013〕15号）执行1.6、鉴定方式、鉴定时间：（理论、实际操作考试方式与时间）本工种初、中、高级工采用理论知识笔试和技能操作考核两种形式鉴定，理论知识考试时间为90-120分钟，实际操作考核时间为120-180分钟。

技师考核采用理论知识笔试、技能操作考核和综合评价形式鉴定。

高级技师考核采用理论知识笔试、综合评价和业绩追踪形式鉴定。

本规范中知识要求、技能要求、综合评价和业绩跟踪的成绩各满分为100分，60分及以上者为合格。

1.7、考评人员与考生配比：（理论、实际操作考试考评人员与考生配比）1、理论知识考评原则上每20名考生配备1名考评员（20：1）。

2、实际操作考评原则上按5名考生配备1名考评员（5：1），且不少于2名考评员；每40名考生配备1名实验员。

2、基本要求：2．1、职业道德基本知识:身体健康无传染性疾病，有良好的卫生习惯和质量无差错意识、了解药品管理法、药品生产质量管理规范等法律与法规相关知识；有强烈的责任感。

2．2、基础理论知识：应用化学、应用微生物学、生物化学。

2．3、专业基础知识：药品、食品、化妆品及日化产品卫生标准。

微生物发酵工实际操作（Ⅰ）技能考试试卷
微生物分离
说明：
1、实际操作试卷满分Ⅰ30分，包括倒平板、平板划线分离及稀释平板涂布分离三部分技能考试，要求必须在规定的时间内完成。

考试每超1分钟扣1分，最多扣5分，超时超过5分钟，终止考试；提前交卷，不加分。

2、独立完成，不得相互询问或讨论。

3、实验记录必须清晰。

如果实验记录需要修改，必须经监考老师同意后才能修改，私自修改以零分处理。

4、考试成绩为操作过程评分、测定结果评分及考试时间评分之和。

考试内容与要求：
1、倒平板；
2、平板划线3个培养皿；
3、稀释平板涂布（100、10－1、10－2三个稀释度，每个稀释度各1个培养皿）；
4、送入培养箱培养；
5、40min内完成。

微生物发酵工实际操作（Ⅱ）技能考试试卷
菌种扩培及摇瓶发酵
说明：
1、实际操作试卷Ⅱ满分70分，共分五步完成，前四步为菌种扩培，第五步为扩培摇瓶的摇床发酵，该步到把摇瓶放到摇床上设置好参数开始发酵即可。

整个操作必须在规定的时间内完成。

考试每超1分钟扣1分，最多扣5分，超时超过5分钟，终止考试；提前交卷，不加分。

2、独立完成，不得相互询问或讨论。

3、考试成绩为操作过程评分及考试时间评分之和。

考试内容与要求：
1、菌种活化（转管）
2、试管斜面→摇瓶扩培
3、试管悬液（取1ml）→摇瓶扩培
4、母瓶（取5ml）→子瓶扩培
5、摇瓶发酵（30℃~32℃，200~300转/min，20h→摇瓶种子；3~5天，发酵结束，观察结果）
6、40min内完成。

《微生物技术》课程标准课程信息1.课程定位《微生物技术》课程是生物技术专业的一门专业基础课。

其功能是使学生掌握微生物的基本知识、基本理论和基本实验技能，达到利用有益微生物为生产服务，控制腐败微生物和病原微生物的活动。

2.课程设计理念本课程标准根据行业专家和专业教师对生物技术专业涵盖的岗位群所进行的任务和职业能力分析结果为依据选择内容，并以生产流程为主线编排课程内容，以彻底打破原来的学科模式课程设计思路，围绕工作任务选择和组织课程内容。

主要包括微生物操作的基本知识、基本技能，以及对微生物的生长及控制等内容。

课程内容的选取在考虑工作任务完成的需要的同时，还充分考虑了职业教育对理论知识学习的需要，并融合了相关职业标准对知识、技能和态度的要求。

每个工作任务的学习都以职业活动中所涉及的微生物基本单元操作为载体来设计活动，整合理论与实践，实现理论与实践的一体化。

教学过程中，要通过校内实训基地，仿真教学，校企合作等多种途径，采取工学交替等形式，充分开发学习资源，给学生提供丰富的实践机会。

3.课程目标3.1知识目标●熟悉微生物特点，大小，形态特征知识；●掌握微生物革兰氏染色原理；●掌握微生物的生长、繁殖规律；●掌握微生物菌种衰退的机理，并选择合适的方法进行复壮；●掌握对有益微生物的利用和对有害微生物的控制原理。

3.2能力目标●实验室的安全管理；●应熟练地掌握显微镜的使用技术；●微生物的纯培养技术；●培养基的配置和灭菌技术；●微生物的分离与接种技术；●菌种的保藏与复壮技术；3.3素质目标●正确的世界观、人生观、价值观，有纪律、有理想、有道德、有文化；●法制意识，遵守职业道德，诚实守信，责任意识，吃苦耐劳；●良好的人际交往、团队合作能力，一定的实践动手能力、分析和解决问题能力和创新能力4.课程内容和要求4.1课程内容设置4.2学习情境与要求4.3 考核建议4.4实现课程目标必需条件1）实训室主要设备：多媒体教学设备，显微镜以及辅助设备，微生物无菌操作设备，灭菌设备。

《食品微生物检验技术》课程标准课程名称：食品微生物检验技术 课程类型：专业核心课程 适用专业：食品营养与检测 课程学分：8 总学时：1441 课程定位食品微生物检验技术是食品营养与检测专业的一门工学结合的专业核心课程，是食品检验两大工作岗位群之一，实践性、技术性很强。

在掌握与食品卫生检验中的有关微生物特性的基础上，通过系统的检验方法，及时、准确地对食品样品作出食品卫生检验的报告，为食品安全生产及卫生监督提供科学依据。

2 课程目标1.能力目标1.1 掌握微生物检验过程中无菌操作规程；1.2 正确使用光学显微镜、高压蒸汽灭菌锅、干燥箱、均质器、超净工作台等微生物检验有关仪器和设备；基础化学食品生物化学食品检验校内生产训练食品微生物检验技术顶岗实习1、 食品微生物类群鉴别、测定技术；2、 食品微生物检验室建设；3、 食品卫生细菌学检验技术；4、 真菌学检验技术；5、 食品中常见病原微生物检验技术；6、 其他的微生物检验技术1.3 熟练掌握无菌操作技术、培养基制备技术、消毒灭菌技术、分离纯培养和接种技术、染色技术等微生物基本操作技能；1.4 掌握各类食品检样的菌落总数、大肠菌群、乳酸菌、霉菌和酵母菌、致病菌等常规项目的检测技术，能掌握罐头食品商业无菌的检验技术；1.5 熟练分析总结实验结果，并做出实验结果，并作出正确、规范的实验报告。

2.知识目标2.1 理解和掌握无菌操作技术特点，五大类微生物类群的形态特征，细菌的革兰氏染色的原理和方法，光学显微镜的工作原理和技术特点，培养基的配制原则和种类，微生物生长的规律以及影响微生物生长的因素；2.2 熟悉微生物检验的基本程序和要求；2.3 常规项目的检验的卫生学意义及检验程序；2.4 理解《中华人民共和国国家标准食品卫生检验方法微生物部分》（简称国标）；2.5 熟悉常见致病菌的生物学特性，能在食品检验中进行致病菌的鉴别；2.6 检验新技术基本原理。

3.素质目标3.1 培养学生自觉学习新技术、新知识的能力；3.2 重视培养学生的诚信品质、敬业精神和责任意识、遵纪守法意识、团结合作意识；3.3 提高学生的实践能力、创造能力、就业能力。

微生物学理论课考核及评分办法1．考核方式：考核方式分两部份：（1）测验理论知识：平时学生在空余时间自己应用“微生物学导师系统”上机分章节复习测验，熟悉概念，理清关系，掌握规律；教师通过服务器了解学生的掌握情况。

期末应用“微生物学导师系统”的测试功能测验学生掌握基本理论知识的情况或从试题库中抽提出卷。

（2）测验综合能力：学期中旬给学生布置课题：让学生通过查阅资料，应用所学知识，积极发挥创新思维能力，设计一个对人类社会有用的微生物新产品，学期下旬以项目可行性报告形式写出研制该产品的社会意义、经济意义、国内外的研究开发情况、研究路线、生产工艺、产品形式、产品质量标准等，期末以答辩形式开展课堂讨论，进行项目的论证。

2．成绩评定：成绩分布分4部份：(1) 平时成绩（10％）包括：上课纪律、上课发言、平时上机复习等。

(2) 项目报告书（40-20％）包括：查阅资料的全面性，设计思路的条理性，项目内容的新颖性，实验方案的科学性。

(3) 答辩情况（10％）包括：介绍项目的条理性，回答问题的准确性，应用知识的灵活性以及PPT质量。

成绩由各班级学生推荐5位同学组成评分小组进行评分，评分标准：学生参加答辩的态度6-1分；PPT质量2-1分，介绍及回答问题2-1分。

(4) 期末闭卷考试成绩（40-60％）：以学生掌握知识为原则，允许学生多次测验，以最高得分记入成绩。

微生物学实验考核及评分办法本课程为考查课，考核方法：平时实验考核和期末总考试相结合。

（一）平时考核（占总成绩60%）平时根据学生预习、操作、实验结果、实验态度和实验报告情况，以5分制给每位学生打一个成绩，待全部实验结束时，给出一个平时成绩，占总成绩60%。

其中实验报告占50%，其它考核内容占50%。

具体考核办法如下：（1）课堂提问：在讲解实验原理、操作重点和注意事项时，教师对学生进行适当的提问，以了解学生的预习情况和对已学知识技能的掌握情况，不能正确回答者记分降一级。

微生物实验技能试题及答案微生物实验技能测试题一、选择题（每题2分，共20分）1. 微生物实验室常用的消毒方法不包括以下哪项？A. 干热灭菌B. 紫外线照射C. 化学消毒剂D. 冷冻保存2. 培养基的pH值对微生物的生长影响很大，以下哪项不是调节pH值的方法？A. 加入酸或碱B. 使用缓冲溶液C. 改变培养基成分D. 增加培养温度3. 以下哪种微生物是严格厌氧的？A. 大肠杆菌B. 乳酸菌C. 酵母菌D. 金黄色葡萄球菌4. 微生物的计数方法中，不包括以下哪项？A. 稀释涂布法B. 显微镜直接计数法C. 血球计数板法D. 重量法5. 以下哪种培养基是选择性培养基？A. 肉汤培养基B. 琼脂培养基C. 麦康凯培养基D. 营养琼脂培养基6. 微生物实验室常用的灭菌方法有哪些？A. 干热灭菌B. 湿热灭菌C. 紫外线照射D. 所有选项都是7. 微生物培养时，以下哪种条件不是必需的？A. 适宜的温度B. 充足的氧气C. 适宜的pH值D. 营养物质8. 以下哪种微生物属于革兰氏阳性菌？A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 酵母菌D. 肺炎链球菌9. 微生物实验室中常用的无菌操作技术不包括以下哪项？A. 火焰灭菌B. 无菌操作台C. 无菌操作技术D. 化学消毒10. 以下哪种微生物属于病毒？A. 酵母菌B. 噬菌体C. 乳酸菌D. 曲霉答案：1-5 D B C D C 6-10 B D B B B二、填空题（每空1分，共10分）1. 微生物实验室常用的灭菌方法包括________、________和________。

答案：干热灭菌、湿热灭菌、化学消毒2. 微生物培养时需要的四大营养物质是________、________、________和________。

答案：水、无机盐、碳源、氮源3. 微生物实验室中常用的无菌操作技术包括________、________和________。

答案：无菌操作台、火焰灭菌、无菌操作技术4. 微生物计数时，常用的方法有________、________和________。

食品微生物检验技能试题一一、有两管菌种，一管为金黄葡萄球菌，一管为大肠杆菌，但标签已脱落，请通过染色实验将其分开。

（40分）1、涂片、干燥、固定（10分）2、染色（15分）3、镜检（10分）4、报告（5分）二、酱油中细菌总数的测定（60分）1、实验准备（20分）2、样品稀释与培养（20分）3、菌落计数方法（10分）4、菌落计数的报告（10分答案要点一、菌种区分1、涂片、干燥、固定（1）取两块洁净载玻片，分别在载玻片中央滴一滴生理盐水，用无菌操作分别挑取菌种于载玻片的水滴中，调匀涂成薄膜，直径1.5cm左右。

（2）干燥室温干燥或用电吹风吹干。

（3）固定涂片面上，在酒精灯上过火三次，使细胞质凝固，以固定细菌的形态，并使其不易脱落。

但不能在火焰上烤，否则，形态会破坏。

2、染色（1）初染加草酸铵结晶紫染色液染色1分钟，用水冲洗。

（2）媒染滴加碘液冲去残水，并用碘液覆盖1分钟，水洗。

（3）脱色将载玻片上的水甩干净，在载玻片下衬以白色背景，滴加95%的酒精脱色，直洗至流出的酒精刚刚不出现紫色为止（0.5分钟），立即用水冲净酒精。

（4）复染用番红染液染1-2分钟，水洗。

3、镜检干燥后，置显微镜下观察。

4、报告球状、染成紫色者为金黄葡萄球菌，杆状、染成红色者为大肠杆菌。

二、酱油中细菌总数的测定1、实验准备（1）酱油（2）1ml与10ml吸管将吸管洗净烘干，塞入少量脱脂棉，卷好防潮纸进行干热灭菌（160℃、2小时）或加压灭菌。

（121℃、30分钟）（3）平皿将平皿分为10个一卷，用防潮纸包好，同上述吸管一起进行灭菌。

（4）备一瓶90ml和三管9ml的生理盐水，配以松紧适度的棉塞，用防潮纸将口部包好，同上述材料一起进行加压蒸汽灭菌，但需使灭菌后仍能保持原有毫升数（也可应用生理盐水灭菌后直接吸取的办法）。

（5）培养基蛋白胨牛肉膏氯化钠琼脂培养基。

将培养基用碱液调至PH7.2-7.4,装入灭菌的试管中约15ml,进行加压灭菌后，保温45℃备用。