高效液相色谱法鉴定西洋参保健食品中的人参皂甙_周美玲

HPLC法测定西洋参类保健食品中人参皂苷成分的含量研究史志刚;李倩【期刊名称】《中国处方药》【年(卷),期】2015(13)10【摘要】目的对HPLC法测定西洋参类保健食品中人参皂苷成分含量的结果进行研究.方法选择四种不同类型的西洋参类保健食品,应用HPLC法对其中的人参皂苷成分含量进行测定,分析该方法测量西洋参类保健食品中人参皂苷成分含量的可靠性.结果人参皂苷成分Rg1、Re、Rb1在测定范围内均呈现出良好的线性关系;加样回收试验显示人参皂苷Rg1、Re、Rb1的平均回收率分别为99.4%、101.6%、100.4%,RSD分别为4.62%、1.63%、1.49%.结论将HPLC法应用于西洋参类保健食品人参皂苷成分含量的测量中,测定结果可靠、准确、重现性好,且该方法操作简单、分离效果佳,值得在西洋参类保健食品质控工作中选择应用.【总页数】2页(P33-34)【作者】史志刚;李倩【作者单位】鞍山市食品药品检验所,辽宁鞍山 114006;鞍山市食品药品检验所,辽宁鞍山 114006【正文语种】中文【相关文献】1.HPLC法测定含三七类保健食品中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量 [J], 张治军;钟名诚;黄秋华2.HPLC法测定西洋参类保健食品中人参皂苷成分的含量 [J], 郝自新;程世云3.HPLC法测定不同产地西洋参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量 [J], 李岚;陈华4.HPLC-PAD法测定西洋参类保健食品中10种皂苷的含量 [J], 吴晓云;刁飞燕;李秀慧;刘春霖;李启艳5.HPLC-PAD法测定西洋参类保健食品中10种皂苷的含量 [J], 吴晓云;刁飞燕;李秀慧;刘春霖;李启艳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法测定人参补气胶囊中人参皂苷的含量目的建立人参补气胶囊中人参皂苷Rg1的高效液相色谱检测方法。

方法高效液相色谱条件为：色谱柱：Diamonsil C18（150 nm×4.6 nm，5μm），流动相：乙腈—水（25︰75），紫外检测波长：204 nm，流速为1.0 mL/min，柱温为30℃，进样量为10μL。

结果以峰面积A为纵坐标，浓度C为横坐标，计算得到回归方程Y=793 513X—7 482，R2=0.999 7，结果显示人参皂苷Rg1在0.100～0.902 mg/mL浓度范围内，其浓度与峰面积具有良好的线性关系，另外本法测定的精密度、稳定性、重复性及加样回收率考察均具有较好结果。

结论本研究建立的人参补气胶囊中人参皂苷含量的高效液相色谱法具有快速、稳定性，可以用于本药物中人参皂苷Rg1的含量测定。

标签：人参补气胶囊；高效液相色谱法；人参皂苷；含量检测人参补气胶囊是由人参，红参须，生晒参3味中药材制成的中药胶囊制剂[1]，具有大补元气、补益脾肺、生津安神的功效，临床主要用于肺虚咳喘、津伤口渴、久病体虚、失眠惊悸等症[2]。

随着本制剂在临床的应用不断增加，对本药物的质量控制也成为了一项值得关注的问题。

本研究采用高效液相色谱法进行了人参补气胶囊中人参皂苷Rg1的含量测定，确立了对于Rg1在本制剂中含量的测定方法，其结果快速、准确、重复性较好，现报道如下。

1?仪器与试剂Agilent 1200高效液相色谱仪；乙腈（上海国药集团，色谱纯）；去离子水（自制）；其他试剂均为分析纯；人参皂苷Rg1对照品（中国药品生物制品检定所）；人参补气胶囊（广东宏兴集团股份有限公司宏兴制药厂，批号：120204）。

2?方法与结果2.1?色谱条件与系统适用性色谱柱：Diamonsil C18（150 nm×4.6 nm，5μm），流动相：乙腈—水（25∶75），紫外检测波长：204 nm，流速为1.0 mL/min，柱温为30℃，进样量为10μL。

高效液相色谱法测定西洋参冲剂中人参皂甙Rb1的含量
李治洪;张莹
【期刊名称】《天津药学》
【年(卷),期】1998(010)001
【摘要】采用固相萃取净化技术及高效液相色谱法，测定西洋参冲剂中人参皂甙
Ｒｂ１的含量。

结果在１２．５￣２００μｇ／ｍｌ范围内，Ｒｂ１的含量现峰面积呈良好的线性，平均回收率及ＲＳＤ分别为：１０１．３±３．２％（０．４ｍｇ，ｎ＝５），１０１．２±２．６％（０．２ｍｇ，ｎ＝５）；９９．０±４４％（０．１ｍｇ，ｎ＝５）。

最小检出量为０．３μｇ，本法简便、快速、准确。

【总页数】3页(P79-81)
【作者】李治洪;张莹
【作者单位】深圳市药品检验所;天津市药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定银花感冒冲剂中绿原酸含量 [J], 陈述;席桂同
2.高效液相色谱法测定消炎利胆冲剂中虎杖苷的含量 [J], 白梓静;齐广才;刘珍叶;
刘福梅
3.高效液相色谱法测定银花感冒冲剂中绿原酸含量 [J], 李建芳;黄劲通
4.高效液相色谱法测定消炎利胆冲剂中芍药苷的含量 [J], 白梓静
5.高效注相色谱法测定西洋参冲剂中人参皂甙Rb1的含量 [J], 李治洪;张莹
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高效液相色谱法测定人参保健酒中11种人参皂苷含量胡杨;李先芝;毛琼丽;刘洋;严玲;朱艳;石豪【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2024(43)3【摘要】该研究建立了高效液相色谱法(HPLC)同时测定人参保健酒中11种人参皂苷(人参皂苷Rg1、Re、Rf、Ra2、Rb1、Rc、Ra1、Ro、Rb2、Rb3、Rd)的方法。

采用Agilent SB C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温28℃,人参皂苷的检测波长203 nm,进样量10μL的条件进行测定。

结果表明,11种人参皂苷在各自浓度范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9999),检出限在1.52~3.03 mg/L,定量限在4.59~9.18 mg/L,该方法精密度试验、稳定性试验、重复性试验结果相对标准偏差(RSD)均小于5%,平均加标回收率95.39%~101.96%,RSD为0.07%~2.46%。

该方法操作简单,准确度高,重复性好,可用于人参保健酒中11种人参皂苷含量测定。

【总页数】5页(P229-233)【作者】胡杨;李先芝;毛琼丽;刘洋;严玲;朱艳;石豪【作者单位】劲牌有限公司;劲牌有限公司中药保健食品质量与安全湖北省重点实验室【正文语种】中文【中图分类】TS262.1;R284【相关文献】1.高效液相色谱法测定心脉素注射液中20(S)-人参皂苷Rg2和20(R)-人参皂苷Rg2构型异构体的含量2.超高效液相色谱法同时测定人参酒中六种人参皂苷的含量3.固相萃取-超高效液相色谱法测定人参中5种原人参二醇型人参皂苷的含量4.高效液相色谱法测定人参茎叶浸膏及人参根中的人参皂苷含量5.双内标高效液相色谱法测定人参中3种人参皂苷的含量因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

HPLC法测定不同产地西洋参中人参皂苷Rb1、Re、Rg1的含量目的采用高效液相色谱法测定不同产地西洋参中人参皂苷Rb1、Re 、Rg1的含量，对比云南丽江西洋参与其他产地西洋参中人参皂苷Rb1、Re 、Rg1的含量差异。

方法C18柱为色谱柱，流动相采用乙腈-0.1%磷酸溶液为缓冲液，梯度洗脱，流速为1.1mL/min，检测波长为203nm，柱温为40℃。

精密吸取溶液各10μL注入高效液相色谱仪中测定。

结果人参皂苷Rb1、Re、Rg1在测定范围内有良好的线性关系，它的平均回收率分别为99.70、101.19、100.27%，RSD分别为2.3、2.1、1.7%。

结论该方法准确可靠、便于操作且重现性好，应用性强。

不同产地西洋参的化学成分大致相同，但各含量间却存在显著差异，其中吉林靖宇和云南丽江的三种单体皂苷总含量相对较高。

标签：HPLC 西洋参人参皂苷Rb1、Re 、Rg1西洋参P.quinquefolium L.是多年生宿根名贵药材，具有补气养阴、清热生津的功效，原产于北美洲东部的阔叶林带，具有与中国人参较相似的生态环境，在生产过程中忌地性极强。

上世纪50年代末，云南省丽江鲁甸乡引种东北人参成功，被植物学家称之为“北参南移”的创举，1984年又成功种植了西洋参[1]。

目前，这里已经成为全中国黄河以南唯一、也是最大的人参、西洋参种植基地[2]。

本文采用高效液相色谱法对不同产地西洋参进行含量测定，对比西洋参含量差异，以期对引种30年后的云南丽江西洋参资源进行质量评价，为丽江西洋参资源的利用和开发提供理论基础。

1 仪器与材料戴安UltiMate3000高效液相色谱仪，精密电子天平BSA223S-CW（北京塞多利斯科学仪器有限公司），CQ250超声波清洗器0030（上海超声波仪器厂）。

人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rb1对照品均购于中国药品生物制品检定所，乙腈为色谱纯试剂，水为超纯水，其他试剂均为分析纯，丽江西洋参药材采自丽江市玉龙县鲁甸乡某参场，其它西洋参药材为各产地市售。

ＨＰＬＣ－ＰＡＤ法测定西洋参类保健食品中１０种皂苷的含量吴晓云ꎬ刁飞燕ꎬ李秀慧ꎬ刘春霖ꎬ李启艳(山东省食品药品检验研究院ꎬ山东济南２５０１０１)摘要:目的㊀建立同时测定西洋参类保健食品中人参皂苷Ｒｇ１㊁Ｒｇ２㊁Ｒｇ３㊁Ｒｂ１㊁Ｒｂ２㊁Ｒｂ３㊁Ｒｃ㊁Ｒｄ㊁Ｒｅ㊁Ｒｆ含量的高效液相色谱－二极管阵列检测法(ＨＰＬＣ－ＰＡＤ)ꎮ方法㊀采用ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)色谱柱ꎻ以乙腈(Ａ)－水(Ｂ)为流动相进行梯度洗脱ꎻ流速１.０ｍＬ ｍｉｎ－１ꎻ检测波长２０３ｎｍꎻ柱温３５ħꎮ结果㊀１０种人参皂苷的浓度在其各自线性范围内ꎬ与峰面积呈良好的线性关系ꎬｒ值均ȡ０.９９ꎮ该方法平均回收率为９３.０％~１０１.８％ꎬＲＳＤ均小于４.０％(ｎ＝６)ꎮ结论㊀本法准确可靠㊁灵敏度高㊁重现性好ꎬ可作为西洋参类保健食品的质量控制方法ꎮ关键词:高效液相色谱－二极管阵列检测法ꎻ保健食品ꎻ西洋参ꎻ人参皂苷中图分类号:Ｒ９２７.２㊀文献标识码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２０)０６－０３３６－００５ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２０.０６.００６Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ１０ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓｉｎｈｅａｌｔｈｆｏｏｄｏｆＰａｎａｘＱｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍｂｙＨＰＬＣ－ＰＡＤＷＵＸｉａｏｙｕｎꎬＤＩＡＯＦｅｉｙａｎꎬＬＩＸｉｕｈｕｉꎬＬＩＵＣｈｕｎｌｉｎꎬＬＩＱｉｙａｎ(ＳｈａｎｄｏｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌꎬＪｉｎａｎ２５０１０１ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｎＨＰＬＣ－ＰＡＤｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ１０ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ(ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｇ１ꎬＲｇ２ꎬＲｇ３ꎬＲｂ１ꎬＲｂ２ꎬＲｂ３ꎬＲｃꎬＲｄꎬＲｅａｎｄＲｆ)ｉｎｈｅａｌｔｈｆｏｏｄｏｆＰａｎａｘｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀ＴｈｅａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｏｎａｎａｎａｌｙｔｉｃａｌｃｏｌｕｍｎＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)ｗｉｔｈｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎｂｙａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ(Ａ)－ｗａｔｅｒ(Ｂ)ꎬａｔｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｏｆ２０３ｎｍａｎｄａｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１.０ｍＬ ｍｉｎ－１.Ｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ３５ħ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀Ａｌｌｃａｌｉ￣ｂｒａｔｉｏｎｃｕｒｖｅｓｓｈｏｗｅｄｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｔｙｗｉｔｈｉｎｔｈｅｉｒｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｓ(ｒȡ０.９９).Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｗｅｒｅｂｅｔｗｅｅｎ９３.０％~１０１.８％ꎬＲＳＤ<４.０％(ｎ＝６).Ｃｏｎｃｌｕｔｉｏｎ㊀ＴｈｉｓｍｅｔｈｏｄｗａｓａｃｃｕｒａｔｅꎬｈｉｇｈｌｙｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅꎬａｎｄｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏｃｏｎｔｒｏｌｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｈｅａｌｔｈｆｏｏｄｏｆＰａｎａｘＱｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＨＰＬＣ－ＰＡＤꎻＨｅａｌｔｈｆｏｏｄꎻＰａｎａｘＱｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍꎻＧｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ㊀㊀西洋参为五加科人参属植物ꎬ是名贵的中药材ꎬ人参皂苷是其主要活性成分ꎬ主要有人参皂苷Ｒｇ１㊁Ｒｂ１㊁Ｒｂ２㊁Ｒｃ㊁Ｒｄ和Ｒｅ等ꎮ以西洋参为原料的保健食品具有缓解体力疲劳ꎬ增强免疫力㊁抗氧化和抗肿瘤等作用[１]ꎮ目前ꎬ西洋参类保健食品的剂型有硬胶囊㊁软胶囊㊁片剂和口服溶液等ꎬ主要以总皂苷作为标志性成分ꎬ总皂苷的测定主要采用香草醛－高氯酸或硫酸显色后用紫外分光光度法测定[２]ꎬ该方法存在专属性差ꎬ操作复杂和干扰因素多等缺点ꎮ为此ꎬ徐灿辉等[３]改进了西洋参类保健食品中人参皂苷测定方法ꎬ建立了西洋参类保健食品中７种参皂苷含量高效液相色谱(ＨＰＬＣ)测定的方法ꎮ此外ꎬ人参皂苷测定方法还有超高效液相色谱(ＵＰ￣ＬＣ)[４]㊁高效液相色谱－质谱联用法(ＨＰＬＣ－ＭＳ)[５－６]等ꎮ在众多资料中ꎬ主要研究西洋参根茎叶提取物中人参皂苷含量ꎬ但对西洋参类保健食品中１０种人参皂苷含量测定的报道较少ꎮ本试验通过参考西洋参药材中皂苷测定的有关文献[７－９]ꎬ建立高效液相色谱法同时测定多种剂型西洋参类保健食品中１０种人参皂苷ꎬ为质量标准的提升提供依据ꎮ１㊀试验部分１.１㊀仪器㊀液相色谱仪(Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０高效液相色谱仪ꎬ美国安捷伦公司)ꎬ配二极管阵列检测器㊀作者简介:吴晓云ꎬ女ꎬ主管药师ꎬ研究方向:保健食品化妆品检验ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｗｕｘｉａｏｙｕｎ８２３＠１２６.ｃｏｍ㊀通信作者:李启艳ꎬ女ꎬ博士研究生ꎬ副主任药师ꎬ研究方向:保健食品化妆品检验ꎬＴｅｌ:０５３１－８１２１６７０８ꎬＥ－mail:152****8118＠１６３.ｃｏｍ(ＰＡＤ)ꎻ电子天平(ＭｅｔｔｌｅｒＴｏｌｅｄｏＭＳꎬ梅特勒－托利多)ꎻ数控超声波清洗器(ＫＱ－５００ＤＥ型ꎬ昆山市超声仪器有限公司)ꎻ恒温水浴锅(北京永光明)ꎮ１.２㊀试药与供试品㊀乙腈(色谱纯ꎬＨｏｎｅｙｗｅｌｌ)ꎻ甲醇(色谱纯ꎬＨｏｎｅｙｗｅｌｌ)ꎻ超纯水ꎻ正丁醇(分析纯ꎬ国药集团)ꎻ氨水(分析纯ꎬ国药集团)ꎮ标准品:人参皂苷Ｒｂ１㊁Ｒｂ２㊁Ｒｂ３㊁Ｒｇ１㊁Ｒｇ３㊁Ｒｄ㊁Ｒｅ由中国食品药品检定研究院提供ꎬ含量分别为９５.９％㊁９３.８％㊁９７.０％㊁９６.３％㊁１００％㊁９４.４％㊁９７.４％ꎬ人参皂苷Ｒｇ２㊁Ｒｃ㊁Ｒｆ由上海甄准生物科技有限公司提供ꎬ含量分别为９８.０２％㊁９９.１１％㊁９９.６２％ꎮ供试品均由市场购得ꎬ名称与剂型见表１ꎮ表１㊀１２种供试品的名称和剂型名称剂型Ｓ０１康富来牌西洋参口服液口服溶液Ｓ０２金日牌西洋参口服液口服溶液Ｓ０３新光牌西洋参口服液口服溶液Ｓ０４日圣牌西洋参氨基酸口服液口服溶液Ｓ０５无限能牌西洋参胶囊硬胶囊Ｓ０６雪佳牌西洋参珍珠胶囊硬胶囊Ｓ０７康富丽牌洋参淫羊藿软胶囊软胶囊Ｓ０８福来了牌西洋参含片片剂Ｓ０９喜之源牌西洋参含片片剂Ｓ１０金日牌西洋参含片片剂Ｓ１１康富来牌洋参含片片剂Ｓ１２百合康牌螺旋藻洋参片片剂２　方法与结果２.１㊀色谱条件㊀色谱柱:ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)ꎻ流动相:乙腈(Ａ)－水(Ｂ)ꎬ梯度洗脱(０~４０ｍｉｎꎬ１７％Ａң１９％Ａꎻ４０~６０ｍｉｎꎬ１９％Ａң２９％Ａꎻ６０~７５ｍｉｎꎬ２９％Ａꎻ７５~１００ｍｉｎꎬ２９％Ａң４０％Ａꎻ１００~１０５ｍｉｎꎬ４０％Ａң１７％Ａ)ꎻ流速１.０ｍＬ ｍｉｎ－１ꎻ检测波长２０３ｎｍꎻ柱温３５ħꎻ进样量:１０μＬꎮ２.２㊀对照品储备液及对照品混合工作液配制㊀分别精密称定人参皂苷Ｒｇ１㊁Ｒｇ２㊁Ｒｇ３㊁Ｒｂ１㊁Ｒｂ２㊁Ｒｂ３㊁Ｒｃ㊁Ｒｄ㊁Ｒｅ㊁Ｒｆ对照品适量ꎬ置于２５ｍＬ量瓶中ꎬ用甲醇溶解并定容ꎬ制成人参皂苷单体浓度分别为２.４０９㊁２.１４１㊁０.０４７１２㊁１.９４７㊁１.７５８㊁２.１３８㊁２.２５０㊁２.０６２㊁２.０７７㊁２.００８ｍｇ ｍＬ－１的对照品储备液ꎮ分别取１０种人参皂苷对照品储备液适量ꎬ加甲醇稀释制成６个浓度的混合对照品工作液ꎮ２.３㊀供试品溶液的制备２.３.１㊀片剂㊁胶囊剂供试品溶液的制备㊀片剂㊁胶囊剂ꎬ取内容物研磨混匀后ꎬ片剂２ｇꎬ胶囊剂１ｇꎬ精密称定ꎬ置于１００ｍＬ锥形瓶中ꎬ精密加水饱和正丁醇５０ｍＬꎬ密塞ꎬ放置过夜ꎬ超声处理(功率２５０Ｗꎬ频率５０ｋＨｚ)３０ｍｉｎꎬ滤过ꎬ弃去初滤液ꎬ精密量取续滤液２０ｍＬꎬ用氨试液洗涤两次ꎬ每次２０ｍＬꎬ正丁醇提取液蒸干后ꎬ残渣加甲醇适量使溶解ꎬ作为供试品溶液ꎮ２.３.２㊀口服溶液供试品溶液的制备㊀口服溶液ꎬ精密量取８.０ｍＬ供试品至分液漏斗中ꎬ用水饱和正丁醇振摇提取３次ꎬ每次１０ｍＬꎬ合并正丁醇提取液ꎬ用氨试液洗涤２次ꎬ每次１０ｍＬꎬ正丁醇提取液蒸干后ꎬ残渣加甲醇适量使溶解ꎬ作为供试品溶液ꎮ２.４㊀线性关系考察㊀分别取６个浓度的混合对照品工作液ꎬ进样１０μＬꎬ记录峰面积ꎬ以对照品浓度Ｘ(μｇ ｍＬ－１)为横坐标ꎬ对照品的峰面积Ｙ为纵坐标ꎬ绘制标准曲线ꎬ求得回归方程ꎮ得到１０种人参皂苷在相应线性范围内均具有良好的线性ꎬ相关系数都在０.９９以上ꎬ结果见表２ꎮ表２㊀标准曲线方程的结果成分标准曲线方程相关系数(ｒ)线性范围/μｇ ｍＬ－１Ｒｇ１Ｒｇ２Ｒｇ３Ｒｂ１Ｒｂ２Ｒｂ３ＲｃＲｄＲｅＲｆＹ＝１.７７０Ｘ＋４.６１３Ｙ＝３.０８４Ｘ＋２.０２１Ｙ＝２.３８１Ｘ－０.３５８４Ｙ＝２.３７７Ｘ＋２９.６７Ｙ＝２.４３３Ｘ＋１.３１９Ｙ＝２.５２０Ｘ＋２.２１０Ｙ＝２.８０６Ｘ＋３.６２９Ｙ＝２.３０３Ｘ－１２.９３Ｙ＝２.８５６Ｘ＋６.０６３Ｙ＝３.９８２Ｘ＋２.２５７０.９９９９０.９９９９０.９９９９０.９９９８０.９９９９０.９９９９０.９９９９０.９９９８０.９９９９０.９９９９４.８１８~２４０.９４.２８２~２１４.１１.１７８~４７.１２３.８９４~１９４.７３.５１６~１７５.８４.２７６~２１３.８４.５００~２２５.０４.１２４~２０６.２４.１５４~２０７.７４.０１６~２００.８２.５㊀试样重复性试验㊀准确量取６份口服溶液供试品(Ｓ０１)８.０ｍＬ至分液漏斗中ꎬ以下按 ２.３.２ 项下方法操作ꎬ制备供试品溶液ꎮ准确称取６份胶囊剂供试品(Ｓ０５)１ｇꎬ６份片剂供试品(Ｓ０８)２ｇꎬ置于１００ｍＬ锥形瓶中ꎬ以下按 ２.３.１ 项下方法操作ꎬ制备供试品溶液ꎮ分别取３种剂型供试品溶液１０μＬ注入液相色谱仪ꎬ以保留时间定性ꎬ测定峰面积ꎬ计算供试品中１０种人参皂苷的含量ꎮ３种剂型供试品中人参皂苷含量ＲＳＤ(ｎ＝６)均小于３％ꎬ结果表明方法重复性良好ꎬ结果见表３ꎮ２.６㊀系统适应性考察㊀取１０种人参皂苷混合对照品工作液１０μＬ进样ꎬ计算１０种人参皂苷的理论板数ꎮ得到人参皂苷Ｒｇ３㊁Ｒｇ１㊁Ｒｅ㊁Ｒｆ㊁Ｒｇ２㊁Ｒｂ１㊁Ｒｃ㊁Ｒｂ２㊁Ｒｂ３㊁Ｒｄ的理论板数分别为１０３４２７㊁５０７３２㊁１０４４９０㊁１５７２８４㊁１２０４５７㊁８２８７６㊁２５３４４０㊁２６０９９１㊁４１０６２８㊁２３９５５４ꎬ分离度分别为５.４㊁１.６㊁３２.６㊁１５.１㊁２.２㊁４.０㊁４.８㊁１.６㊁８.０ꎮ对于供试品ꎬ虽然存在基质干扰影响分离度ꎬ但是３种剂型供试品中１０种人参皂苷均能达到基线分离ꎬ分离度均能达到１.５以上ꎮ表３㊀重复性试验结果剂型口服溶液(Ｓ０１)胶囊剂(Ｓ０５)片剂(Ｓ０８)含量平均值/ｍｇ ｍＬ－１ＲＳＤ(％)含量平均值/ｍｇ ｇ－１ＲＳＤ(％)含量平均值/ｍｇ ｇ－１ＲＳＤ(％)Ｒｇ３０.０２０２.６０.９３５２.４０.２１１２.３Ｒｇ１０.０４０２.０４.６７３１.９０.１２２２.５Ｒｅ０.０５１１.７１９.３２５２.１０.２３４１.７Ｒｆ０.０２１２.９－－－－Ｒｇ２０.２９６０.６２.６５２１.３０.２１７１.４Ｒｂ１０.４３５０.６４８.６２６０.７０.４２４１.２Ｒｃ０.１５９１.０１１.８４２１.１１.７４６１.７Ｒｂ２０.１２０１.２２.１６１１.６１.４７１１.５Ｒｂ３０.０５４２.６３.６５４２.３３.０３０２.５Ｒｄ０.４８１０.８２１.５００１.３０.８２９１.８㊀注: － 表示未检出或低于定量限２.７㊀精密度试验㊀取１０种人参皂苷混合对照品工作液１０μＬ连续进样５次ꎬ以测得的峰面积响应值作评价标准ꎬ得到１０种人参皂苷的ＲＳＤ(ｎ＝５)均小于３.０％ꎬ表明在本方法仪器条件下ꎬ仪器精密度良好ꎮ２.８㊀稳定性试验㊀分别取供试品Ｓ０１㊁Ｓ０５㊁Ｓ０８ꎬ按 ２.３ 项下方法操作ꎬ得到供试品溶液ꎬ室温下放置２４ｈꎬ分别在０㊁２㊁４㊁８㊁１２㊁２４ｈ取１０μＬ进样ꎬ得到１０种人参皂苷峰面积ＲＳＤ(ｎ＝６)都在３.０％以内ꎬ表明供试品溶液在２４ｈ内稳定ꎮ２.９㊀回收率试验㊀准确量取６份已知含量的供试品(Ｓ０１)４.０ｍＬ至分液漏斗中ꎬ分别精密加入人参皂苷对照品储备液适量(对照品加入量与供试品中各人参皂苷含量之比为１ʒ１)ꎬ以下按 ２.３.２ 项下方法操作ꎬ即可得到加标溶液ꎮ准确称取已知含量的供试品(Ｓ０５)０.５ｇꎬ供试品(Ｓ０８)１ｇꎬ各６份ꎬ分别精密加入人参皂苷对照品储备液适量(对照品加入量与供试品中各人参皂苷含量之比为１ʒ１)ꎬ置于１００ｍＬ锥形瓶中ꎬ以下按 ２.３.１ 项下方法操作ꎬ即可得到加标溶液ꎮ取１０μＬ注入液相色谱仪ꎬ以保留时间定性ꎬ测定峰面积ꎬ得到１０种人参皂苷的平均加样回收率(ｎ＝６)ꎬＲＳＤ均小于４.０％ꎬ结果见表４ꎮ表４㊀回收率结果剂型成分口服溶液(Ｓ０１)胶囊剂(Ｓ０５)片剂(Ｓ０８)试样平均含量/ｍｇ平均回收率(％)ＲＳＤ(％)试样平均含量/ｍｇ平均回收率(％)ＲＳＤ(％)试样平均含量/ｍｇ平均回收率(％)ＲＳＤ(％)Ｒｇ３０.０８０９６.３２.１０.４６８９３.３１.９０.２１１９７.９２.５Ｒｇ１０.１６０９８.２３.３２.３３７９９.１２.８０.１２２９５.０２.６Ｒｅ０.２０４９６.６３.２９.６６６１００.３３.１０.２３４１０１.８３.６Ｒｆ０.０８４９８.８１.０－１０１.２１.５－１０１.３３.４Ｒｇ２１.１８４９４.４１.０１.３２７９３.７１.７０.２１７１００.４２.１Ｒｂ１１.７４０９６.４１.５２４.３２３９６.５１.４０.４２５９５.５２.４Ｒｃ０.６３６９４.４１.３５.９２３９８.２２.５１.７５０９６.２２.６Ｒｂ２０.４８０９６.０２.３１.０８１９３.９２.４１.４７４９７.５２.８Ｒｂ３０.２１６９３.０２.５１.８２８１００.１２.６３.０３６１０１.２３.２Ｒｄ１.９２４９３.３１.５１０.７５４９８.６２.２０.８３１９４.０２.４㊀注: － 表示未检出或低于定量限２.１０㊀检出限与定量限㊀Ｓ/Ｎ＝３时ꎬ得到检出限ＬＯＤꎬ人参皂苷Ｒｇ１㊁Ｒｇ２㊁Ｒｇ３㊁Ｒｂ１㊁Ｒｂ２㊁Ｒｂ３㊁Ｒｃ㊁Ｒｄ㊁Ｒｅ㊁Ｒｆ检出限分别为０.００２４㊁０.００２１㊁０.００２９㊁０.００１９㊁０.００１８㊁０.００２１㊁０.００２２㊁０.００２１㊁０.００２１㊁０.００２０μｇꎻＳ/Ｎ＝１０时ꎬ得到定量限ＬＯＱꎬ定量限分别为０.００６０㊁０.００５４㊁０.００７４㊁０.００５０㊁０.００４４㊁０.００５３㊁０.００５６㊁０.００５２㊁０.００５２㊁０.００５０μｇꎮ２.１１㊀供试品的测定㊀取１２批供试品ꎬ按照按 ２.３ 制备供试品溶液ꎬ每批平行处理２份ꎬ按上述色谱条件进行测定ꎬ将峰面积代入 ２.４ 线性回归方程计算含量ꎬ结果见图１~２及表５ꎮ表５㊀供试品中１０种成分含量测定结果含量/ｍｇ ｍＬ－１或ｍｇ ｇ－１编号Ｓ０１Ｓ０２Ｓ０３Ｓ０４Ｓ０５Ｓ０６Ｓ０７Ｓ０８Ｓ０９Ｓ１０Ｓ１１Ｓ１２Ｒｇ３０.０２００.００９０.０１００.０７８０.９３５０.１６９０.４９４０.２１１０.２１２０.２７５０.４１７０.４８９Ｒｇ１０.０４００.０７１０.０１５－４.６７３０.７６７１.７２２０.１２２０.２０９０.６７４０.８９３０.４３６Ｒｅ０.０５１０.２４００.０６６－１９.３２５１.４１８４.１２７０.２３４０.７０９３.０８５３.８０９１.３５０Ｒｆ０.０２１－－０.０１９－０.０２５－－－－０.０１６－Ｒｇ２０.２９６０.０６２０.１４７－２.６５２０.５４５１.０２４０.２１７０.１１３０.０８４０.２３９０.２６１Ｒｂ１０.４３５０.６６５０.６３１－４８.６２６１.３５４０.４０７０.４２４０.１０２６.７７７８.６３３－Ｒｃ０.１５９０.１２００.０８３－１１.８４２０.６５６０.６７５１.７４６０.６３７２.０６６２.７６６０.０９３Ｒｂ２０.１２００.０３９０.０１９－２.１６１０.３６１１.９８７１.４７１０.３８２０.３３９０.４８７０.５３６Ｒｂ３０.０５４０.０９５０.０２３－３.６５４０.３６９６.７５８３.０３０１.５６５０.５９００.８３４２.２２９Ｒｄ０.４８１０.２７３０.２３８－２１.５００１.４９８６.０１６０.８２９０.９７６３.２０３３.７５２３.１５４合计１.６８１.５７１.２３０.１０１１５.３７７.１６２３.２１８.２８４.９１１７.０９２１.８５８.５５㊀注: － 表示未检出或低于定量限㊀１.Ｒｇ３(２０.０ｍｉｎ)ꎻ２.Ｒｇ１(４５.０ｍｉｎ)ꎻ３.Ｒｅ(４５.８ｍｉｎ)ꎻ４.Ｒｆ(６５.９ｍｉｎ)ꎻ５.Ｒｇ２(７７.６ｍｉｎ)ꎻ６.Ｒｂ１(８０.０ｍｉｎ)ꎻ７.Ｒｃ(８３.６ｍｉｎ)ꎻ８.Ｒｂ２(８６.９ｍｉｎ)ꎻ９.Ｒｂ３(８７.８ｍｉｎ)ꎻ１０.Ｒｄ(９３.０ｍｉｎ)图１㊀１０种人参皂苷对照品图谱㊀１.Ｒｇ３(２０.０ｍｉｎ)ꎻ２.Ｒｇ１(４５.０ｍｉｎ)ꎻ３.Ｒｅ(４５.８ｍｉｎ)ꎻ４.Ｒｆ(６５.９ｍｉｎ)ꎻ５.Ｒｇ２(７７.６ｍｉｎ)ꎻ６.Ｒｂ１(８０.０ｍｉｎ)ꎻ７.Ｒｃ(８３.６ｍｉｎ)ꎻ８.Ｒｂ２(８６.９ｍｉｎ)ꎻ９.Ｒｂ３(８７.８ｍｉｎ)ꎻ１０.Ｒｄ(９３.０ｍｉｎ)图２㊀供试品Ｓ０１中１０种人参皂苷图谱３　讨论３.１㊀前处理考察㊀由于保健食品剂型种类多ꎬ而每种剂型的基质比较复杂ꎬ导致１０种人参皂苷更难同时分离ꎮ首先ꎬ通过比较３种不同的提取试剂ꎬ水饱和正丁醇㊁甲醇和乙醇ꎬ最终得到水饱和正丁醇提取效率最高ꎮ其次ꎬ选用水饱和正丁醇分别采用回流提取㊁液－液萃取㊁浸泡放置过夜超声提取和直接超声提取４种提取方式进行比较ꎬ结果表明:对于片剂和胶囊剂ꎬ浸泡过夜超声提取与回流提取得到皂苷含量最高ꎬ又因为前者操作简单ꎬ且提取的多糖等杂质较少ꎬ最终采用浸泡过夜超声提取ꎻ对于口服溶液ꎬ回流提取与液－液萃取都能得到较高总皂苷含量ꎬ优先选取重现性好且操作较简单的处理方法ꎬ因此采用水饱和正丁醇振摇多次萃取ꎮ３.２㊀流动相及梯度的选择㊀本文对甲醇－水ꎬ乙腈－水和乙腈－０.１％磷酸溶液３种不同流动相进行比较ꎬ结果表明ꎬ人参皂苷在低波长范围内检测时ꎬ乙腈比甲醇背景噪音低ꎬ可获得较好的分离效果ꎬ并且乙腈与水混合黏度小ꎬ可以有效降低系统压力ꎬ而加入磷酸对整体分离情况没有明显改善且磷酸盐对色谱柱损耗大ꎬ最终选择乙腈－水作为最佳流动相ꎮ１０种人参皂苷中Ｒｇ１和ＲｅꎬＲｂ２和Ｒｂ３较难分离ꎮ人参皂苷Ｒｇ１和Ｒｅ极性非常相似ꎬ较难分离ꎬ且供试品在人参皂苷Ｒｇ１和Ｒｅ附近有杂质干扰ꎬ最终选择合适梯度ꎬ在４５ｍｉｎ左右达到基线分离ꎮＲｂ２和Ｒｂ３是同分异构体ꎬ并且两者含量很低ꎬ容易包裹在杂质峰中ꎬ本试验在保证峰形和柱效的前提下完成了两种皂苷的基线分离ꎮ故最终采用梯度洗脱使每种皂苷达到较好分离效果ꎮ３.３㊀样品测定结果分析㊀由表５可见ꎬ１２批供试品１０种皂苷含量之和差异很大ꎬ含量最高的为硬胶囊ꎬ片剂和软胶囊次之ꎬ口服溶液最低ꎮ每批供试品中ꎬ单种人参皂苷占１０种皂苷比例各不相同ꎬ经过分析发现ꎬＲｂ１㊁Ｒｃ㊁Ｒｄ㊁Ｒｅ４种所占比例最大ꎬ７批供试品含这４种皂苷比例为６７.０％~８８.５％ꎬ４批供试品的比例为３９.０％~５３.８％ꎬ１种供试品(Ｓ０４)比例为０ꎮ对于供试品(Ｓ０４)ꎬ根据«保健食品检验与评价技术规范»(２００３年版)中规定的紫外分光光度法进行总皂苷检测ꎬ得到总皂苷含量为８０ｍｇ １００ｍＬ－１ꎮ本文建立的ＨＰＬＣ－ＰＡＤ法可对西洋参类保健食品中皂苷成分进行初步鉴定ꎬ最终用紫外分光光度法进行总皂苷检测ꎮ４　结论本文共收集口服溶液㊁片剂和胶囊剂１２批西洋参类保健食品ꎬ通过测定其线性范围㊁系统适用性㊁重复性㊁精密度㊁稳定性㊁检出限㊁定量限和回收率试验ꎬ结果令人满意ꎮ试验表明ꎬ在本文供试品制备方法和色谱条件下ꎬ人参皂苷Ｒｇ３㊁Ｒｇ１㊁Ｒｅ㊁Ｒｆ㊁Ｒｇ２㊁Ｒｂ１㊁Ｒｃ㊁Ｒｂ２㊁Ｒｂ３㊁Ｒｄ能够达到完全分离ꎬ所建立的方法操作简便ꎬ重复性好ꎬ可以用来对以西洋参为原料的保健食品进行质量控制ꎮ参考文献:[１]㊀尚金燕ꎬ李桂荣ꎬ邵明辉ꎬ等.西洋参的药理作用研究进展[Ｊ].人参研究ꎬ２０１６ꎬ２８(６):４９－５１.[２]杜金凤ꎬ宋鉴达ꎬ朱传翔ꎬ等.比色法测定人参保健饮料中人参总皂苷含量[Ｊ].现代食品ꎬ２０１７ꎬ６(１１):７９－８０. 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反相高效液相色谱法测定人参皂甙Compound-K的含量周伟;罗振时;周珮【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2005(023)003【摘要】人参皂甙compound-K(C-K)在人参中的含量极低,但它是其他含量较高的人参皂甙Rb1和Rb2等在人体肠道内的主要降解产物和最终吸收形式,具有很高的生物活性.采用反相高效液相色谱法测定了人参总皂甙发酵液中C-K的含量.色谱条件为:反相C18柱;乙腈-水(体积比为48∶52)溶液为流动相,流速1.0 mL/min;紫外检测波长203 nm;柱温35 ℃;外标法定量.结果表明:C-K的质量浓度为0.05～0.8 g/L时,其峰面积与质量浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.9998.方法的检测限(S/N=3)为2.5 mg/L,峰面积测定值的相对标准偏差(n=6)为2.20%.测定栽培人参总皂甙及三七茎叶总皂甙微生物发酵液中C-K的平均加标回收率(n=3)分别为98.6%和99.7% .该方法快速简便,准确可靠,可用于C-K的制备研究及药物开发.【总页数】3页(P270-272)【作者】周伟;罗振时;周珮【作者单位】复旦大学药学院生物合成教研室,上海,200032;复旦大学药学院生物合成教研室,上海,200032;复旦大学药学院生物合成教研室,上海,200032【正文语种】中文【中图分类】O658【相关文献】1.RP-HPLC测定洋参二醇皂甙注射液中人参皂甙Rb3的含量 [J], 秦桂莲;徐飞;赵雪梅;崔道云;陈燕萍2.反相高效液相色谱法测定三七伤药片中人参皂甙Rg1的含量 [J], 陈承英3.反相高效液相色谱法测定人参固体发酵产物三种人参皂苷含量 [J], 王睿;邱智东;石薇;赵红迪;董雪莲4.反相高效液相色谱法测定三七伤药片中人参皂甙Rg1的含量 [J], 陈承英5.反相高效液相色谱法测定益气强身胶囊中人参皂苷Re和人参皂苷Rg_1的含量[J], 肖金芳;周建红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法快速测定保健品中6种人参皂苷的含量居广琳（福建省产品质量检验研究院，福建福州 350002）摘　要：目的：快速高效检测非人参及其加工品为主要原料的保健品中6种人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1的含量。

方法：以75%甲醇为提取剂超声提取，采用高效液相色谱法测定。

结果：6种人参皂苷在0.1～1.0 mg·mL-1线性关系良好；人参皂苷 Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1在阿拉伯糖粉中的加标回收率分别为93.1%、95.3%、94.8%、94.1%、98.6%和93.9%；在力保健牛磺酸功能饮料中的加标回收率分别为90.8%、94.6%、93.0%、91.7%、98.0%和92.1%；在蜂胶软胶囊中的加标回收率分别为91.1%、95.0%、92.3%、92.7%、98.4%和92.5%。

结论：本法能快速高效提取并测定非人参及其加工制品为主要材料的保健品中6种人参皂苷的含量。

关键词：保健品；人参皂苷；液相色谱Rapid Determination of Six Ginsenosides in Health Productsby HPLCJU Guanglin(Fujian Inspection and Research Institute for Product Quality, Fuzhou 350002, China) Abstract: Objective: To quickly and efficiently detect the content of six ginsenosides Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, and Rg1 in health products mainly made from non ginseng and its processed products. Method: The extracts were ultrasonically extracted with 75% methanol as the extractant and determined by high performance liquid chromatography (HPLC). Result: The six ginsenosides exhibited good linear relationships within the range of 0.1 mg·mL-1 to 1.0 mg·mL-1; the recovery rates of ginsenosides Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, and Rg1 in arabinose powder were 93.1%, 95.3%, 94.8%, 94.1%, 98.6%, and 93.9%; the recovery rates of Lipovitan taurine functional beverages were 90.8%, 94.6%, 93.0%, 91.7%, 98.0%, and 92.1%; the recovery rates of propolis soft capsules were 91.1%, 95.0%, 92.3%, 92.7%, 98.4%, and 92.5%. Conclusion: This method can quickly and efficiently extract and determine the content of six ginsenosides in health products mainly made from non ginseng and its processed products the main materials.Keywords: health products; ginsenoside; high performance liquid chromatography人参皂苷是人参、西洋参等人参属植物中被证实具有增强体质、调节神经、延缓衰老及抗肿瘤等功效的有效成分[1-2]。