检验标本接受程序文件-PCR标准操作规程

标本采集、运送、接收、拒收及保存程序第一部分 HPV检测标本1 目的：保证HPV标本的质量。

2 范围：临床采集、运送、接收及实验操作人员。

3 内容：3.1 HPV标本采集标准操作流程3.1.1由经过宫颈脱落细胞标本采集专业培训的妇科医生用窥阴器或阴道张开器暴露宫颈（取样前先用棉签擦去宫颈分泌物）。

3.1.2将专用宫颈刷以适中力度接触于宫颈口，轻轻转动宫颈刷使其顺时针旋转3-5圈，并停留数秒钟。

3.1.3慢慢取出宫颈刷，将其放入标有病人编号的专用标本管中，折断其刷柄，拧紧瓶盖。

3.2 HPV标本采集注意事项3.2.1月经期不可采集标本（减少给受检者的损伤）。

3.2.2月经正常妇女，在月经来潮后10～18天为最佳检查时间。

3.2.3不可在碘试验和醋酸试验之后采集样本（可能会抑制PCR反应）。

3.2.4取标本前48小时内不要作阴道冲洗，不要用避孕药膏等阴道内用药物（可能会抑制PCR反应）。

3.2.5取标本前48小时最好不要行性生活（可能出现一过性假阳性）。

3.2.6样本采集后，注意避免交叉污染。

3.3 HPV标本运送的标准操作流程所有临床标本在采集后立即送至实验室放在2~8℃保存。

3.4 HPV标本接收的标准操作流程3.4.1 HPV标本由实验室标本室进行接收，查对是否贴有标签、标本是否有洒落、破损，查对标本、申请单信息、刷卡信息是否相符，有异常情况的标本，视为拒收标本，应填写《标本拒收登记表》并根据情况处理。

3.4.2标本室实验人员对接收的标本进行编号，（此编号为样本唯一编号），然后与PCR实验室人员进行交接并实行严格登记制度。

3.4.3 PCR实验室人员对已接收的标本按正常标本、血性标本、粘液标本进行分类登记。

3.4.4 由指定人员对接收的标本进行常规涂片用显微镜查看是否有上皮细胞，细胞数量在每视野≥3个为可进行HPV检测的标本。

3.4.5对于特殊的样本（包括危重病人或急出报告的标本等），实行“首接”负责制，及时处理，并进行登记。

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pcr检查操作流程PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种用于复制DNA片段的技术，它可以在短时间内扩增出数百万份目标DNA片段。

PCR检查操作流程是一个非常重要的实验步骤，它需要严格的操作和精确的控制，以确保实验结果的准确性和可靠性。

首先，进行PCR检查前需要准备好所有必要的试剂和设备，包括PCR试剂盒、PCR仪、PCR管、DNA模板、引物等。

接着，将PCR 试剂盒中的Master Mix均匀混合，并分装到每个PCR管中。

然后，加入DNA模板和引物到PCR管中，轻轻摇匀混合。

接下来是PCR反应的温度循环步骤。

首先是变性步骤，将PCR 管放入PCR仪中，加热至95°C，使DNA双链解旋成两条单链。

然后是退火步骤，降温至55-65°C，使引物与目标DNA片段结合。

最后是延伸步骤，加热至72°C，让DNA聚合酶在引物的引导下合成新的DNA链。

PCR反应完成后，需要进行PCR产物的分析和检测。

可以通过琼脂糖凝胶电泳或实时荧光定量PCR等方法来检测PCR产物的数量和大小。

最后，根据实验设计和研究目的，对PCR结果进行解读和分析，得出结论并撰写实验报告。

在进行PCR检查操作流程时，需要注意以下几点：首先是严格控制实验条件，避免污染和误操作对实验结果的影响；其次是准确计量试剂和DNA模板，确保PCR反应的准确性和稳定性；最后是及时记录实验数据和结果，以备后续分析和验证。

总的来说，PCR检查操作流程是一个复杂而重要的实验步骤，需要熟练的操作技巧和严格的实验控制，只有这样才能保证PCR实验的准确性和可靠性，为科研工作提供有力的支持。

PCR技术的广泛应用已经在许多领域取得了重要的成果，如医学诊断、疾病治疗、基因工程等，为人类健康和生活质量的提高做出了重要贡献。

PCR检查操作流程的规范化和标准化将进一步促进PCR技术的发展和应用，为科学研究和医学实践提供更多的可能性和机会。

浙江省X X 医院临床基因扩增检验实验室管理程序和标准操作程序(SOP)起草人：XXX批准人：XXX起草日期：2003年2月10号目录1.目录---------------------------------------------------12.C001 手套使用及左右手分开原则 ------------------------ 32. C002 实验耗材的质检方法--------------------------------53. C003 试剂的质检操作程序--------------------------------64. C004 实验室常用溶液的配制标准程序----------------------75. C005 标本的验收和保存标准程序--------------------------96. C006 样品编号操作程序---------------------------------127. C007 实验台摆放规范-----------------------------------158. C008 样品处理操作程序---------------------------------179. C009 核酸扩增荧光检测实验和结果分析标准操作程序-------1910. C010 实验有效性判断----------------------------------2311. C011 实验室室内质控标准操作程序----------------------2512. C012 实验室化学试剂及废弃物处理，生物防护措施--------3013. I001 LightCycler的使用、维护和校准操作程序-----------3314. I002 加样器使用、维护和校准的标准操作程序-------------3715. I003 离心机的使用、维护和校准操作程序----------------4216. I004 超净工作台使用和维护的标准操作程序--------------4517. I005恒温水浴箱使用和维护的标准操作程序---------------4618. I006 旋涡振荡器使用和维护的标准操作程序--------------4819. I007 冰箱使用和维护的标准操作程序--------------------4920. I008 仪器故障时的标记、放置的标准操作程序------------5021. I009 检验结果报告标准操作程序------------------------51１22. I010 实验室清洁标准操作程序--------------------------5323. M001核酸扩增荧光检测实验室规章制度-------------------5424. M002 内务制度----------------------------------------5725. M003 实验室人员的培训程序----------------------------6026. M004 实验人员行为规范--------------------------------6127. M005 抱怨处理----------------------------------------6328. M006 记录管理文件------------------------------------65２1 目的核酸扩增荧光检测实验室中，实验人员常要接触各种传染性标本（如乙肝病毒、结核杆菌等），作为一项最基本的防护措施，实验过程中必须戴手套操作，这是要遵守的原则。

PCR的操作及注意事项一、PCR简介PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种常用的分子生物学实验技术，用于扩增特定的DNA片段。

PCR技术的广泛应用，使得其操作和注意事项变得尤为重要。

本文将介绍PCR的操作步骤以及需要注意的事项。

二、PCR的操作步骤1. DNA提取首先，需要从样本中提取目标DNA。

常用的提取方法包括酚氯仿法、热碱法和商业DNA提取试剂盒。

在提取DNA的过程中，应注意减少污染，保持工作区域清洁。

2. PCR反应液的配制将PCR反应液的各种试剂按照实验方案的要求配制好，主要包括模板DNA、引物、dNTPs、缓冲液和聚合酶。

保持试剂的新鲜和纯净，避免重复冻融。

3. PCR反应的设置将PCR反应液分装到反应管中，可根据需要设置多个反应管。

注意反应管的密封性，避免样品蒸发和污染。

同时，设定PCR反应的温度程序，包括变性、退火和延伸的温度和时间。

4. PCR反应的程序将反应管放入PCR仪中，启动PCR程序。

确保PCR仪的温度控制准确可靠，保持反应过程的稳定性。

根据目标DNA片段的大小，调整PCR的循环次数，一般为25-35个循环。

5. PCR产物的分析PCR反应结束后，可以通过各种方法对PCR产物进行分析，常用的方法包括琼脂糖凝胶电泳和DNA测序。

分析结果能够验证PCR扩增的特异性和产物的纯度。

三、PCR操作的注意事项1. 高品质的DNA模板PCR反应的成功与否与DNA模板的质量有很大关系。

因此，在进行PCR实验前，应确保使用高质量的DNA模板，如通过琼脂糖凝胶电泳进行检测。

2. 引物的设计和质量PCR反应中使用的引物应具有较高的特异性和准确性。

在设计引物时，应避免引物间的互补性，以免出现非特异扩增。

同时，引物的质量也很重要，选择高纯度的引物可以提高PCR反应的成功率。

3. 操作区域的消毒与隔离为了避免PCR反应过程中的污染，应定期对实验区域进行消毒，如操作台面、工作台和仪器表面。

PCR实验室试剂的质检标准操作程序1.目的：保证每批用于临床实验的试剂的质量良好，符合要求。

2.适用范围：各种用于临床实验的核酸扩增荧光检测试剂（HBV、HCV、HPV、CT）。

3.负责人：操作人：4.程序：4. 1收到试剂后，目测试剂是否处在冻存状态。

4. 2核对试剂品种和数量并检查包装：外包装（厂名厂址、、批准文号、批号和有效期等）;内包装（试剂瓶完整性、试剂配备品种完整性、使用说明书有否等）。

4. 3及时将试剂转入-20.。

冰箱保存。

将上述检测核对情况在记录本上登记。

4. 4最迟在前批次试剂存量尚可维持常规实验一周时，按如下要求对新批号试剂进行效验实验。

4. 5效验实验：4. 5. 1要求设置：空白对照、阴性对照、阳性对照、室内质控各一，阳性标准品梯度（104、105、106、108）。

4. 5. 2出现如下情况中任何一种的，判断为试剂不合格，不能用于临床检测：a）空白对照出现扩增。

如扩增曲线CT值大于25，需重复实验确证试剂污染。

b）阳性对照和阳性标准品均未检出，或阳性对照未检出而阳性标准品检出率大幅下降，表示试剂失效或检测灵敏度大幅下降。

4. 5. 3阳性对照未检出，阳性标准品检测正常，提示样品提取液可能存在问题。

重复新旧提取液阳性对照实验，确定提取液失效问题。

更换提取液后该批试剂方可使用。

4. 5. 4空白对照无扩增，阴性对照有扩增，排除其他污染可能性后，提取液存在污染可能。

单独用提取液点样上机，出现扩增，需更换提取液后方可使用该批试剂。

4. 5. 5阳性对照检出，阳性标准品未检出或扩增曲线明显系统性CT值偏大5个循环以上。

提示阳性标准品存在问题。

更换阳性标准品后该批试剂方可投入使用。

4. 5. 6空白对照、阴性对照无扩增，阳性对照正常检出，阳性标准品导出的标准曲线之斜率（-2.9〜-3.9）、截距（26〜34）、相关性（-0.99）均在使用范围内，表明该批试剂良好，可以投入临床使用。

1.目的对标本采集前患者的准备、标本采集、接收、保存进行规范，以控制各环节可能出现的误差，确保检验结果准确可靠。

2.范围核酸检测的所有标本。

3.职责由PCR实验室负责制定程序文件，由专业技术人员负责执行。

4.内容4.1标本采集4.1.1血液标本：4.1.1.1原始标本采集的标本类型是静脉血，根据不同检测项目选用不同类型的一次性真空采集管。

全血或血浆标本采用EDTA抗凝的紫色真空采血管，不可使用肝素或肝素盐抗凝，此类抗凝剂能强烈抑制Taq酶的活性。

血清标本采用不含抗凝剂的真空采血管。

4.1.1.2用于RNA检测的标本，应用核酸专用管或无RNase的采集管，应尽快送检，以立即分离血清为好，将血清转移至1.5ml无RNA酶的无菌离心管中，冷藏或冷冻保存，以避免RNA的降解。

标本若不能及时检测，应保存于-20℃，并避免标本的反复冻融。

4.1.2分泌物标本：4.1.2.1尿道：对男性患者，先用生理盐水清洗尿道口，将男用取材拭子插入尿道内2cm-4cm，旋转10-20秒再取出，以采集到粘膜上皮细胞。

对女性患者，可抵着耻骨联合轻轻按摩尿道后，用同男性相似的方法取材。

如有明显溃疡或疣状物，可取溃疡或挑破疣体取分泌物。

男性尿道样本采集前24小时内禁止尿道用药，2小时内不能小便。

4.1.2.2女性生殖道：取用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物，再用无菌棉拭子插入宫颈内约2-6cm，旋转10-20秒采集宫颈分泌物，将棉拭子置入无菌专用管，密闭送检。

女性生殖道样本采集需选择在非月经期，采样前24小时内应禁止阴道冲洗、阴道用药。

4.1.2.3样本的处理：将取样后的拭子放入1.0ml的无菌生理盐水中漂洗片刻。

吸取液体转移至1.5ml 离心管中用于检测。

待测样本在2-8℃保存2周，-20℃保存不超过3个月，-70℃以下长期保存，应避免反复冻融。

4.1.3痰液标本的采集:4.1.3.1患者清晨清水漱口后，深咳出气管深处第一口痰于清洁干燥无菌带盖的容器内。

新冠病毒核酸检测标本接收、扫码、拒收及保存操作程序1.目的：本程序是对分析前标本的质量管理，是与确保检验质量为临床提供准确有效结果密切相关，实验室工作人员必须重视标本的采集、处理、贮存、安全处置等全过程。

2.范围：PCR扩增的临床各类检测标本；3.职责：PCR检测实验室现有工作人员须熟知标本的采集、处理、接收、扫码、贮存、安全处置等全过程。

并有责任向临床医护人员进行宣传培训如PCR项目、标本采集、运用、处理等技术要求和注意事项。

4.标本的唯一性标识：标识由唯一条码组成。

5.标本的接收：5.1标本运送人员和接收人员对标本进行双签收。

标本接收人员按二级防护佩戴防护设备。

5.2接收标本前应检查标本运送箱外包装是否无破损，打开容器前后对标本运送箱用75%酒精喷洒消毒。

取出标本密封袋后对密封袋用75%酒精喷洒消毒，并检查是否密封好，立即将标本放入专用冰箱或冷藏箱加冰块冷藏保存。

5.3标本不能及时处理的应置于-20℃冰箱保存。

5.4所有标本均可能具有传染性，须严格遵守医院有关院内感染及医用垃圾的管理和处理规定，工作人员须注意保持并随时检查容器的完整和无标本外泄发生。

5.5接收标本时应核对标本与检验申请单的一致性。

工作人员有权拒收与检验申请单不一致的标本、标识不清的标本。

检验申请有不清晰情况时，应即时与临床科室或相关人员联系核实。

扫描打包码或者采集管条形码接收，核对信息是否正确，核对数量是否正确5.6标本接收人须检查标本状态.5.7标本合乎要求，须在可接收标本记录本上按内容记录，扫描打包码或者采集管条形码接收，核对信息是否正确，核对数量是否正确，接收后等待进一步处理，标本不合乎要求，须在记录本上记录拒收原因。

6.标本的拒收：标本在下列情况下，视为不合格，工作人员有权拒收标本；①无被检标本基本信息或与条码无法识别，无法扫码签收的。

②使用不适当的容器；③容器有破战；④标本外泄污染；⑤标本量不足⑥其它如后续处理过程中发现的不合格，应记录其状态并通知重新送检。

PCR实验室作业指导书文件编号:第1版编制:审核:批准:生效日期:2015年＊月＊日质管部PCR实验室公正性声明1、坚持公正立场认真对待每一例检测,不受任何对检测工作质量有不良影响得、来自实验室内部或外部得不正当得商业、财务与其她方面得压力与影响。

避免卷入任何可能会降低技术能力、公正性、判断或运作诚实性得信任得活动。

2、严格遵循实验室认可依据得国际标准,严格按标准得管理要素与技术要素得要求建立自我完善得管理体系与控制检测全过程各环节得机制,所有与检测有关得人员熟悉与之相关得质量文件,并在工作中执行这些政策与程序,真正把标准作为科学管理检测实验室得先进管理模式,尽可能把差错降到最低限度,确保检测数据准确可靠,检测结果与技术判断正确有效。

3、坚持以“客户为中心、质量第一”得服务宗旨,严格保护客户得机密与所有权,热忱提供优质服务,努力实现让上级放心、客户满意得服务标准。

4、主动开展实验室得比对实验与其她有效地检测质量监控方案,并通过日常检测得监督机制,持续改进、不断完善管理体系,从而保证其充分性与有效性、修订页目录前言 ............................................................................................................................................ 错误!未定义书签。

质量方针ﻩ错误!未定义书签。

质量管理体系组织结构图ﻩ错误!未定义书签。

一、工作制度............................................................................................................................. 错误!未定义书签。

PCR实验室得设置及管理规程ﻩ错误!未定义书签。

PCR核酸检测样本采集、送检、处理流
程学习资料
一、样本采集
* 样本采集前需洗手并佩戴口罩、手套等个人防护用品。

* 使用无菌棉签或吸管采集鼻腔或咽喉部分泌物样本。

对于深
部呼吸道样本，采用支气管肺泡灌洗液或痰液。

* 确保样本采集工具和无污染，且采集过程要避免空气污染。

* 将采集的样本及时放入适当的中，并密闭保存。

二、样本送检
* 样本采集完毕后，尽快送往PCR实验室进行检测。

* 在运输中需遵循安全规定，确保样本不泄漏、不变质。

* 样本上需标注采集时间、日期等信息，确保溯源和易于处理。

三、样本处理
* 样本到达实验室后，应尽快进行处理，以保持样本的可靠性。

* 样本处理前，检查样本是否完整，并对样本进行初步质检，
确保样本质量可靠。

* 样本处理过程中要确保操作环境无菌、无污染。

* 根据PCR实验方案，提取样本中的核酸。

* 根据真实样本的情况，可以进行一定的前处理，如样本离心、去除杂质等。

四、流程总结
PCR核酸检测的样本采集、送检、处理流程是一个关键的环节，对结果的准确性和可靠性具有重要影响。

在每个操作环节中都要严
格遵守操作规程，确保样本的采集、送检和处理过程都符合相关要求。

这样才能有效预防污染，提高检测水平。