下载文档原格式
密度梯度离心法方法嘿，咱今儿来聊聊密度梯度离心法！这可是个厉害的手段呢！你想啊，就好比我们要在一堆混杂的东西里找出特别的那一部分。
密度梯度离心法就像是个神奇的魔法棒，能帮我们把不同密度的东西分离开来。
想象一下，有一堆大大小小、轻重不一的东西混在一起，我们要怎么把它们区分开呢？这时候密度梯度离心法就闪亮登场啦！它会弄出一个像楼梯一样的密度变化，从低到高。
然后把那堆东西放进去，哇塞，就看着它们根据自己的密度乖乖地跑到该去的地方啦。
这可不像随便乱分哦！它特别精准，就像一个经验老到的分拣员，绝不会把该分开的弄混。
而且啊，这个方法用途可广啦！在生物学里，能帮我们分离细胞、细胞器啥的。
比如那些小小的细胞，它们有着不同的密度，通过这个方法，就能把它们一个一个地挑出来，是不是很神奇？咱再打个比方，这就像是在一个大混乱的舞池里，根据每个人的体重和身材，把他们分到不同的区域跳舞，让一切都变得井井有条。
密度梯度离心法就是这么厉害，能在微观世界里把那些我们需要的东西精准地分离出来。
你说这得有多牛？它能让我们看到那些平时看不到的细微之处，为科学研究打开一扇扇新的大门。
它就像是一把钥匙，能解开那些复杂谜题的关键一环。
在实验室里，科学家们可喜欢用这个方法啦！他们精心地准备好各种条件，让密度梯度离心法发挥出最大的作用。
就像一个大厨精心烹饪一道美味佳肴一样，每一个步骤都不能马虎。
而且哦，它还不断在发展和进步呢！随着科技的不断进步，密度梯度离心法也变得越来越厉害，能分离的东西也越来越多，越来越精细。
哎呀呀，这密度梯度离心法可真是个宝贝呀！它让我们能更好地了解这个世界，探索那些未知的领域。
难道你不觉得它超级厉害吗？反正我是觉得它厉害得不得了呢！希望以后它能给我们带来更多的惊喜和发现呀！。
质粒DNA的提取（3）——密度梯度离⼼法提取质粒DNA
质粒DNA⼀般仅占细胞总DNA的1%-2%，⽽且其化学结构与寄主染⾊体DNA之间并没有太⼤差别，所以质粒DNA的纯化须从两者⾼级结构上的差异寻找依据。
在细菌细胞内，共价闭合质粒以超螺旋(即cccDNA分⼦)形式存在，如图4-3所⽰。
在细胞裂解及DNA分离的过程中，如果质粒DNA两条链中有⼀条发⽣⼀处或多处断裂，分⼦就能旋转⽽消除链的张⼒，形成松弛型环状分⼦，称开环DNA (ocDNA)。
如果质粒DNA的两条链在同⼀处断裂，则形成线状DNA (linear DNA. L-DNA)。
当提取的质粒DNA电泳分离时⼀，同⼀质粒DNA其超螺旋构象的泳动速度⽐开环和线状构象分⼦要快。
将含有EtBr(溴化⼄锭)的CsCI溶液加到⼤肠杆菌裂解液中，EtBr分⼦便会通过嵌⼊作⽤⽽结合到DNA链上，导致双螺旋结构发⽣解旋反应。
⼤肠杆菌染⾊体DNA⽚段具有游离的末端⽽易于解旋，从⽽会结合⼤量的EtBr分⼦。
共价闭合环状的DNA分⼦质粒，只能发⽣有限的解旋反应，限制了EtBr分⼦的结合数量，染⾊体DNA⽚段⽐质粒DNA结合更多的EtBr分⼦。
在DNA-EtBr复合物中，结合的EtBr分⼦数量越多，其密度也就越低。
因此，在EtBr达到饱和浓度的条件下，质粒DNA就要⽐线性的染⾊体DNA⽚段具有更⾼的密度。
通过氯化艳密度梯度离⼼之后，它们就会被平衡在不同的位置，从⽽达到纯化质粒DNA的⽬的。
