免费第四章 实验

第四章微生物的实验室培养实验方案第一部分：实验目的1.了解微生物培养的基本原理。

2.掌握不同微生物的培养方法。

3.了解微生物培养条件对微生物生长的影响。

4.培养纯菌株以便进行后续实验。

第二部分：实验材料和方法2.1实验材料- 细菌培养基：琼脂、LB培养基、MacConkey培养基等。

-细菌菌种：如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。

-培养试管、平板及培养器具。

-高压蒸汽灭菌器。

-紫外线杀菌器。

-恒温箱。

2.2实验方法步骤一：准备工作1.清洗实验台面和培养器具，并进行高压蒸汽灭菌。

2.将培养基制备好并分装到培养试管、平板或培养瓶中。

步骤二：接种菌种1.将需要接种的微生物通过不同方法进行接种，如：刷菌法、滴菌法等。

2.在接种后的培养基表面涂布菌液，采用无菌的铁圈将接种液均匀涂布。

步骤三：培养条件调节1.根据所需培养的微生物的生长要求，将相应的培养基放入恒温箱中，调节适宜的温度和湿度。

2.可根据需要添加适当的有机物质或产生特定的气氛，如：CO2、O2、氮气等。

3.进行必要的pH调节。

步骤四：培养时间和观察1.根据不同微生物的生长特性，设置适宜的培养时间。

2.定期观察菌落生长情况，记录菌落数量、大小、形态等特征。

步骤五：菌种保存1.从培养基中挑选单个菌落，用无菌吸管或铁环取出并转移到新的培养基中。

2.将新培养基进行高压蒸汽灭菌，并在适当条件下保存。

第三部分：实验注意事项1.实验过程中要保证操作区域的无菌。

2.使用高压蒸汽灭菌器进行培养基、培养器具等的灭菌处理。

3.实验过程中不要将培养基长时间暴露在空气中以防止被空气中的微生物污染。

4.需要严格遵守实验室的垃圾分类和处理规定，防止有害微生物的传播。

第四部分：预期结果和讨论通过实验，我们能够观察到不同微生物在不同培养基和培养条件下的生长情况。

对于有特定生长要求的微生物来说，通过调节培养条件可以优化其生长情况，从而提高菌液的产量。

此外，通过纯化单个菌落，可以获得纯菌株用于后续实验，并且可以进行菌株的保存和保存。

第四章动物机能学实验实验 4. 1 神经干动作电位及其传导速度的测定【实验目的】1. 学习神经干复合动作电位（action potential）的记录方法和神经兴奋传导速度的测定方法；2. 了解蛙类坐骨神经干动作电位的基本波形（单相和双相动作电位）；3. 观察不同刺激强度对神经干动作电位的影响。

【实验原理】神经纤维的兴奋表现为动作电位的产生和传导，神经干动作电位是神经兴奋的客观标志。

处于兴奋部位的膜外电位负于未兴奋部位，呈现外负内正的反极化状态。

因此，兴奋部位与未兴奋部位产生电位差。

当神经冲动通过后，兴奋处的膜内外电位又恢复到静息时水平。

神经干兴奋过程所发生的这种膜电位变化称神经干动作电位。

用电生理学方法可引导出此电位差及其变化，并加以显示。

如果将两引导电极置于正常完整的神经干表面，当神经干一端兴奋后，兴奋波先后通过两个引导电极处，可记录到两个方向相反的电位偏转波形，称为双相动作电位。

如果两个引导电极之间的神经组织有损伤，兴奋波只通过第一个引导电极，不能传导到第二个引导电极，则记录到一个方向的电位偏转波形，称为单相动作电位。

由于神经干动作电位是由不同兴奋阈值、传导速度和幅值的动作电位总和而成，故又称为神经干复合动作电位，其幅度在一定范围内可随刺激强度的变化而变化。

动作电位在神经纤维上的传导具有一定的速度。

不同类型的神经纤维，其传导速度（V）各不相同，取决于神经纤维的直径、内阻、有无髓鞘、温度等因素。

类纤维为主，传导速度为35m/s ~40m/s。

测定神经冲动在蛙类坐骨神经干中以Aα神经干上传导的距离（d）与通过这些距离所需的时间（t），即可根据v= d/t，求出神经冲动的传导速度。

【实验对象】 蟾蜍或蛙【实验器材和药品】BL-420E 生物机能实验系统、蛙类手术器械一套、神经干标本屏蔽盒、动作电位引导输入线、电刺激输出线、棉球、任氏液(Ringer solution)。

【实验方法和步骤】1.制备坐骨神经-腓神经标本（sciatic nerve- peroneal nerve specimen ）(1) 破坏脑、脊髓 取蛙一只，用自来水冲洗干净。