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高压泵应具有以下性能
流量稳定,精度在1%左右 输出压力高,通常20~30MPa,最高50 MPa 流量范围宽,一般在0.01~10mL/min范围内 能抗溶剂腐蚀 压力波动小、更换溶剂方便、容易清洗、具梯度洗脱 操作方便、容易维修
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根据泵的操作原理不同,分为恒压泵和恒流泵
进样装置 (正面)
进样装置 (背面)
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图中a为进样阀处于“装样load”位置的情况,此时流动相直接进入色谱柱,
样品注入口与样品环连接,用微量进样针将一定体积的样品溶液从样品 注入口注入,装于样品管内。当将扳手扳至“进样inject”位时,进样阀的 流路发生了改变,流动相通过样品管,将注入的样品带入色谱柱进行分析。
的出峰顺序相反。
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2. 流动相类别
按流动相组成成分:单组分和多组分;
按极性分:极性、弱极性、非极性; 按使用方式分:固定组成淋洗和梯度淋洗。 常用溶剂: 正己烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙醇、 甲 醇、异丙醇、乙腈、水。 采用二元或多元组合溶剂作为流动相可以灵活调节流动 相的极性或增加选择性,以改进分离或调整出峰时间。
氰基(CN)的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基 团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即 极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱;正相色谱使用的流动相极性相 对比固定相低,如正已烷、氯仿 、二氯甲烷等。
反相柱:固定相通常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的
键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲 醇,乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被 冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。常用的反向填 料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。