固相萃取-高效液相色谱法测定水质中16种多环芳烃

高效液相色谱法同时测定方便面中16种多环芳烃高慧;汪洋;王敏;王勤【摘要】建立一种快速、准确测定方便面中16种多环芳烃的高效液相色谱方法.方便面样品采用石油醚先进行油脂提取,再用乙腈:丙酮(1:1,体积比)混合溶剂提取,依次使用Waters的Oasis HLB和的Sep-Park Florsil固相萃取柱进行富集净化.经Waters PAH C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)分离,以乙腈和水的不同配比设置流动相梯度,在不同的激发波长和发射波长下用荧光检测器测定方便面中的15种多环芳烃.苊烯用紫外检测器以230 nm进行测定.结果表明,16种多环芳烃的加标回收率为75.8 %~95.3 %,RSD为2.87 %~5.23 %,检出限为0.010μg/kg~0.070 μg/kg.该方法稳定、快速、简便,能满足方便面中16中多环芳烃的含量测定.%A rapid and accurate method for determination of 16 kinds of polycyclic aromatic hydrocarbons in instant noodles by high performance liquid chromatography was established. Instant noodle samples were extracted by using petroleum ether first, reoccupied by acetonitrile and acetone(1 : 1,volume ratio)mixed solvent extraction,then used Waters Oasis HLB and Sep-Park Florsil column for enrichment and purification. 15 kinds of polycyclic aromatic hydrocarbons were separated by Waters PAH C18 chromatographic column(4.6 mm×250 mm,5 μm),and different mobile phase gradient were set up by acetonitrile and water under dif-ferent ratio,which were detected by different excitation wavelength and emission wavelength.Acenaphthylene was detected by ultraviolet detector at 230 nm.The results showed that the average recoveries of 16 kinds of polycyclic aromatic hydrocarbons were between 75.8 % and 95.3 %,whilethe relative standard deviations were between 2.87 % and 5.23 %,and the limits of detection were between 0.010 μg/kg-0.070 μg/kg.The method used in this study was stable,fast and easy,which can satisfy the determination of 16 kinds of polycyclic aromat-ic hydrocarbons in instant noodles.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2018(039)010【总页数】5页(P133-137)【关键词】高效液相色谱;方便面;多环芳烃【作者】高慧;汪洋;王敏;王勤【作者单位】淄博市疾病预防控制中心,山东淄博255026;淄博市疾病预防控制中心,山东淄博255026;淄博市疾病预防控制中心,山东淄博255026;淄博市疾病预防控制中心,山东淄博255026【正文语种】中文多环芳烃是（Polycyclic aromatic hydrocarbons，PAHs）指两个或两个以上苯环[1]以稠环形式相连的化合物有4个或少于4个苯环的属于轻质多环芳烃，多于4个苯环的属于重质多环芳烃[2]。

生态毒理学报Asian Journal of Ecotoxicology第16卷第3期2021年6月V ol.16,No.3Jun.2021㊀㊀基金项目:国家水体污染控制与治理重大科技专项(2017ZX07107-004-001);中国科学院青年创新促进会(2018058);广东省重点领域研发计划资助项目(2019B110205002)㊀㊀第一作者:原盛广(1982 ),男,博士,研究方向为天然环境水体化学污染研究,E -mail:sgyuan@ ㊀㊀*通讯作者(Corresponding author ),E -mail:bqshan@㊀㊀#共同通讯作者(Co -corresponding author ),E -mail:jiali800214@DOI:10.7524/AJE.1673-5897.20201228001原盛广,郎爽,王颖,等.固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定污水中16种全氟和多氟烷基化合物[J].生态毒理学报,2021,16(3):239-251Yuan S G,Lang S,Wang Y ,et al.Determination of 16perfluoroalkyl and polyfluoroalkyl substances in wastewater by solid phase extraction -ultraperfor -mance liquid chromatography -tandem mass spectrometry [J].Asian Journal of Ecotoxicology,2021,16(3):239-251(in Chinese)固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定污水中16种全氟和多氟烷基化合物原盛广1,3,郎爽2,王颖2,李振涵1,3,张文强1,3,单保庆1,3,*,贾丽2,#1.中国科学院生态环境研究中心,北京1000852.北京市理化分析测试中心,北京1000893.中国科学院大学,北京100049收稿日期:2020-12-28㊀㊀录用日期:2021-02-22摘要:建立了以固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱同时测定污水中16种全氟和多氟烷基化合物(PFASs)的方法㊂样品经固相萃取柱富集浓缩,采用BEH -C 18色谱柱(2.1mm ˑ100mm ,1.7μm),以甲醇和5mmol ㊃L -1乙酸铵溶液(pH =9)为流动相梯度淋洗,负离子多反应监测模式进行定性和定量分析,内标法定量㊂16种PFASs 在0.1~40μg ㊃L -1范围内线性关系良好,相关系数(r 2)>0.99,目标物加标回收率为65.1%~129.0%,相对标准偏差(RSD)为0.8%~8.0%(n =6),方法检出限为0.012~4.00ng ㊃L -1㊂方法重现性好,灵敏度高㊂适用于污水中PFASs 的定量测定㊂关键词:全氟和多氟烷基化合物;固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱;污水文章编号:1673-5897(2021)3-239-13㊀㊀中图分类号:X171.5㊀㊀文献标识码:ADetermination of 16Perfluoroalkyl and Polyfluoroalkyl Substances in Wastewater by Solid Phase Extraction-Ultraperformance Liquid Chroma-tography-Tandem Mass SpectrometryY uan Shengguang 1,3,Lang Shuang 2,Wang Ying 2,Li Zhenhan 1,3,Zhang Wenqiang 1,3,Shan Bao -qing 1,3,*,Jia Li 2,#1.Research Center for Eco -Environmental Sciences,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100085,China2.Beijing Center for Physical and Chemical Analysis,Beijing 100089,China3.University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100049,ChinaReceived 28December 2020㊀㊀accepted 22February 2021Abstract :A method for the simultaneous determination of 16perfluoroalkyl and polyfluoroalkyl substances (PFASs)in wastewater by solid phase extraction -ultra performance liquid chromatography -tandem mass spectrome -try was established.The sample was enriched and concentrated on a solid -phase extraction column with a BEH . All Rights Reserved.240㊀生态毒理学报第16卷C18column(2.1mmˑ100mm,1.7μm),using methanol and5mmol㊃L-1ammonium acetate solution(pH=9)as mobile phases with gradient elution,and quantified in the negative ion multiple reaction monitoring mode with in-ternal standard method.The linear range of the16PFASs was0.1~40μg㊃L-1with the correlation coefficients(r2) greater than0.99,the spiked recoveries were65.1%~129.0%,the relative standard deviations(RSD)were0.8% ~8.0%(n=6),and the method limits of detection were0.012~4.00ng㊃L-1.The method has good reproducibility and high sensitivity.It is suitable for the quantitative determination of PFASs in wastewater. Keywords:perfluoroalkyl and polyfluoroalkyl substances;solid phase extraction-ultraperformance liquid chroma-tography-tandem mass spectrometry;wastewater㊀㊀全氟和多氟烷基化合物(perfluoroalkyl and poly-fluoroalkyl substances,PFASs)具有化学稳定性㊁表面活性和优良的耐温性,被大量应用于工业生产和生活消费领域[1-2],但它难以光解㊁水解和被生物降解,且具有持久性㊁生物积累性和难降解性等特点,其潜在毒性以及长距离迁移性等特性引起社会的广泛关注㊂近年来,PFASs污染已经逐渐成为全球性问题,国内外研究表明,各类环境介质[3-12]㊁生物体[13-14]和食品[15-18]中已普遍检测到PFASs,其对人体健康构成了潜在威胁[19-23]㊂PFASs的含量较低,通常为痕量水平,因此,需要开发灵敏有效的PFASs检测技术[24-37]㊂目前,国内外对PFASs的样品前处理方式和检测方法在不断发展中[38-43],美国环境保护局(US EPA)先后发布了Method537.1标准[44]和Method 8327标准[45],能够检测地表水㊁地下水和废水中24种全氟化合物,方法为外标法定量㊂对于基质复杂的污水样品,外标法定量,无法消除由于进样量㊁仪器响应值波动等带来的系统误差[46],因而US EPA 方法不适用于污水样品的检测;目前中国对于环境水体(地表水㊁地下水等)中全氟化合物的研究相对较多[5-9,29-33],但由于污水基质更为复杂,污水中全氟化合物的研究报告相对较少[35-37]㊂笔者采用内标法定量,同时测定污水中16种PFASs㊂通过对比2种固相萃取小柱的回收率㊁优化固相萃取小柱上样速度和选择最优样品复溶试剂,确定最佳样品前处理方法;通过6种流动相比对㊁15种梯度洗脱程序及对质谱条件的优化,确定超高效液相色谱-串联质谱仪器条件,建立了固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定污水中16种PFASs的检测分析方法,并应用于实际污水样品的分析㊂本方法的开发,可以为全面了解污水厂进出水中PFASs污染情况提供技术支撑,为污水厂污水治理工作提供科学依据,同时也可以为PFASs分析监测标准制定工作提供参考㊂1㊀材料与方法(Materials and methods)1.1㊀材料1.1.1㊀试剂㊁标准品和材料甲醇(色谱纯,美国Fisher公司);乙酸铵(优级纯,中国北京百灵威科技有限公司);氨水(分析纯,比利时Acros公司);乙腈(色谱纯,美国Fisher公司)㊂16种全氟化合物混合标准溶液(2000μg㊃L-1,加拿大Wellington公司),组分如下:全氟戊酸(per-fluorovaleric acid,PFPeA)㊁全氟丁烷磺酸(perfluoro-butane sulfonic acid,PFBS)㊁全氟己酸(perfluorohex-anoic acid,PFHxA)㊁全氟庚酸(perfluoroheptanoic acid,PFHpA)㊁全氟己烷磺酸(perfluorohexane sulfon-ic acid,PFHxS)㊁全氟辛酸(perfluorooctanoic acid, PFOA)㊁全氟壬酸(perfluorononanoic acid,PFNA)㊁全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonic acid,PFOS)㊁全氟癸酸(perfluorodecanoic acid,PFDA)㊁全氟十一酸(perfluoroundecanoic acid,PFUdA)㊁全氟癸烷磺酸(perfluorodecane sulfonic acid,PFDS)㊁全氟十二酸(perfluorododecanoic acid,PFDoA)㊁全氟十三酸(per-fluorotridecanoic acid,PFTrDA)㊁全氟十四酸(perfluo-rotetradecanoic acid,PFTeDA)㊁全氟十六酸(perflu-orohexadecanoic acid,PFHxDA)㊁全氟十八酸(perflu-orooctadecanoic acid,PFODA)㊂8种同位素内标混合标准溶液(2000μg㊃L-1,加拿大Wellington公司),组分如下:13C2-全氟己酸(perfluoro-n-[1,2-13C2]hex-anoicacid,MPFHxA)㊁18O2-全氟己烷磺酸(sodium perfluoro-1-hexane[18O2]sulfonate,MPFHxS)㊁13C4-全氟辛酸(perfluoro-n-[1,2,3,4-13C4]octanoicacid,MP-FOA)㊁13C5-全氟壬酸(perfluoro-n-[1,2,3,4,5-13C5]non-anoicacid,MPFNA)㊁13C4-全氟辛烷磺酸(sodium per-fluoro-1-[1,2,3,4-13C4]-octanesulfonate,MPFOS)㊁13C2-全氟癸酸(perfluoro-n-[1,2-13C2]decanoicacid,MPF-DA)㊁13C2-全氟十一酸(perfluoro-n-[1,2-13C2]unde-canoicacid,MPFUdA)㊁13C2-全氟十二酸(perfluoro-n-. All Rights Reserved.第3期原盛广等:固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定污水中16种全氟和多氟烷基化合物241㊀[1,2-13C2]dodecanoicacid,MPFDoA)㊂WAX固相萃取小柱(150mg/6mL,美国Waters公司);尼龙滤膜(0.45mm,中国天津津腾公司)㊂1.1.2㊀仪器设备超高效液相色谱-串联质谱仪(美国Waters公司,Xevo TQ-S,配有电喷雾离子源);色谱柱为美国Waters公司BEH-C18(2.1mmˑ100mm,1.7μm);固相萃取装置(美国Agilent公司,10孔);超纯水仪(美国Millipore公司,Milli-Q)㊂1.2㊀方法1.2.1㊀标准溶液配制PFASs标准储备液:取购置的标准溶液作为储备液于4ħ冰箱中避光保存,PFASs标准储备液浓度为2000μg㊃L-1㊂同位素内标标准储备液:取购置的同位素内标标准溶液作为储备液于4ħ冰箱中避光保存,同位素内标标准储备液浓度为2000μg㊃L-1㊂PFASs混合标准中间液:吸取1000μL PFASs 标准储备液,置于10mL容量瓶中,充分混匀,加入甲醇定容至标线,混匀,保存于4ħ冰箱中,各目标物质量浓度均为200μg㊃L-1㊂同位素内标标准中间液:吸取500μL同位素内标标准储备液,置于10mL容量瓶中,充分混匀,加入甲醇定容至标线,混匀,保存于4ħ冰箱中,各同位素内标质量浓度均为100μg㊃L-1㊂PFASs混合标准工作溶液:用甲醇逐级稀释PFASs混合标准中间液,并加入同位素内标标准中间液100μL,加入等体积水,混匀后,得到各组分质量浓度为0.1~40μg㊃L-1的系列PFASs混合标准工作溶液(内标5μg㊃L-1)㊂1.2.2㊀前处理方法取经0.45μm尼龙滤膜过滤的水样0.5L,加入10ng同位素内标,混合均匀㊂WAX小柱依次用4 mL0.5%的氨水-甲醇溶液,4mL甲醇溶液和4mL 水活化,样品以<2mL㊃min-1的速度经过WAX小柱,用4mL25mmol㊃L-1乙酸铵溶液淋洗㊂将WAX 小柱抽干水分后,依次用4mL甲醇和8mL0.5%的氨水-甲醇溶液洗脱,洗脱液于40ħ条件下用氮气吹干,以甲醇为复溶试剂,用1.0mL复溶试剂将用氮气吹干的洗脱液复溶后过0.22μm滤膜㊂过滤后的样品加入等体积超纯水,混匀后上机,内标法定量㊂1.2.3㊀仪器条件1.2.3.1㊀色谱条件采用BEH-C18(2.1mmˑ100mm,1.7μm)色谱柱,流动相为甲醇(A)和5mmol㊃L-1乙酸铵溶液(pH =9)(B),采用梯度洗脱方式,洗脱条件如表1所示,柱温50ħ,流速0.3mL㊃min-1,进样体积5μL㊂1.2.3.2㊀质谱条件离子源为电喷雾离子源(ESI);扫描方式为负离子扫描;检测方式为多反应监测模式(MRM);毛细管电压为2.80kV;离子源温度为150ħ;脱溶剂气温度为500ħ;脱溶剂气流速为900L㊃h-1;保留时间及质谱参数如表2所示㊂1.2.4㊀污水样品监测过程的质量控制为保证污水样品监测结果的准确可靠,在样品监测过程中对各个环节进行质量控制㊂(1)使用不含聚四氟乙烯材料的容器和器具,同时做试剂空白试验,确保目标物测定结果小于方法检出限,防止试剂㊁耗材等可能引入的PFASs污染㊂(2)全程序空白试验[47]㊂采样现场向采样容器中加入超纯水,与污水样品一起送至实验室进行分析,全程序空白中各目标物测定结果应小于方法检出限,掌握全过程操作步骤和环境条件对样品的影响㊂(3)空白样品试验㊂用超纯水代替污水样品,每处理20个污水样品添加1个空白样品,空白样品与污水样品在同等条件下进行检测,目标物测定结果应小于方法检出限,排除由实验环境㊁实验操作等对实验结果造成的影响,保证检测过程样品不受污染㊂(4)核查工作曲线㊂连续进样分析时,每分析测试20个样品,测定一次工作曲线中间浓度点,确认分析仪器工作曲线是否发生显著变化,保证分析仪器稳定㊂综合考虑16种表1　液相色谱洗脱条件Table1㊀Elution conditions for liquid chromatography 时间/minTime/min流速/(mL㊃min-1)Velocity/(mL㊃min-1)A/%B/%0.00.325751.00.325752.00.350505.00.355456.50.355459.50.3100010.00.3100010.10.3257512.00.32575注:A为甲醇,B为5mmol㊃L-1乙酸铵溶液(pH=9)㊂Note:A represents methanol;B represents ammonium acetate solution (pH=9)with concentration of5mmol㊃L-1.. All Rights Reserved.242㊀生态毒理学报第16卷表2㊀16种全氟和多氟化合物(PFASs)及8种同位素内标物保留时间及质谱参数Table2㊀Retention time and mass spectrum parameters of16perfluoroalkyl and polyfluoroalkylsubstances(PFASs)and8isotopic internal standards序号No.目标物和内标物Target object andinternal standard保留时间/minRetention time/min离子对(m/z)Ion pair(m/z)锥孔电压/VTaper hole voltage/V碰撞能量/eVCollision energy/eV1PFPeA 2.98263.0>219.0*1082PFBS 3.10299.0>79.7*;299.0>98.71026;263PFHxA 3.71313.2>269.0*;313.2>118.885;244PFHpA 4.90363.1>168.9*;363.1>118.81016;205PFHxS 5.08399.1>79.7*;399.1>98.71042;316PFOA 6.66413.2>168.9*;413.2>219.0818;147PFNA8.26463.1>219.0*;463.1>168.9214;188PFOS8.31499.1>79.7*;499.1>98.71438;409PFDA8.69513.2>219.0*;513.2>269.0616;1810PFUdA8.96563.2>219.0*;563.2>169.11016;2411PFDS8.94599.1>79.7*;599.1>98.7848;3812PFDoA9.13613.2>168.9*;613.2>269.0228;2013PFTrDA9.27663.2>168.9*;663.2>219.01026;1814PFTeDA9.39713.3>168.9*;713.3>219.01430;2215PFHxDA9.60813.3>168.9*;813.3>219.03236;2416PFODA9.74913.4>168.9*;913.4>219.01040;2417MPFHxA 3.71315.0>270.08318MPFHxS 5.07403.1>83.7103219MPFOA 6.66417.2>171.9121820MPFNA8.27468.2>223.021421MPFOS8.31503.2>79.7104022MPFDA8.69515.2>169.262223MPFUdA8.94565.2>169.1122424MPFDoA9.13615.2>169.0628注:PFPeA表示全氟戊酸;PFBS表示全氟丁烷磺酸;PFHxA表示全氟己酸;PFHpA表示全氟庚酸;PFHxS表示全氟己烷磺酸;PFOA表示全氟辛酸;PFNA表示全氟壬酸;PFOS表示全氟辛烷磺酸;PFDA表示全氟癸酸;PFUdA表示全氟十一酸;PFDS表示全氟癸烷磺酸;PFDoA表示全氟十二酸;PFTrDA表示全氟十三酸;PFTeDA表示全氟十四酸;PFHxDA表示全氟十六酸;PFODA表示全氟十八酸;MPFHxA表示13C2-全氟己酸;MPFHxS表示18O2-全氟己烷磺酸;MPFOA表示13C4-全氟辛酸;MPFNA表示13C5-全氟壬酸;MPFOS表示13C4-全氟辛烷磺酸;MPFDA表示13C2-全氟癸酸;MPFUdA表示13C2-全氟十一酸;MPFDoA表示13C2-全氟十二酸;*为定量离子㊂Note:PFPeA stands for perfluorovaleric acid;PFBS stands for perfluorobutane sulfonic acid;PFHxA stands for perfluorohexanoic acid;PFHpA standsfor perfluoroheptanoic acid;PFHxS stands for perfluorohexane sulfonic acid;PFOA stands for perfluorooctanoic acid;PFNA stands for perfluorononanoicacid;PFOS stands for perfluorooctane sulfonic acid;PFDA stands for perfluorodecanoic acid;PFUdA stands for perfluoroundecanoic acid;PFDS standsfor perfluorodecane sulfonic acid;PFDoA stands for perfluorododecanoic acid;PFTrDA stands for perfluorotridecanoic acid;PFTeDA stands for perfluo-rotetradecanoic acid;PFHxDA stands for perfluorohexadecanoic acid;PFODA stands for perfluorooctadecanoic acid;MPFHxA stands for perfluoro-n-[1,2-13C2]hexanoicacid;MPFHxS stands for sodium perfluoro-1-hexane[18O2]sulfonate;MPFOA stands for perfluoro-n-[1,2,3,4-13C4]octanoicacid;MPFNAstands for perfluoro-n-[1,2,3,4,5-13C5]nonanoicacid;MPFOS stands for sodium perfluoro-1-[1,2,3,4-13C4]-octanesulfonate;MPFDA stands for perfluoro-n-[1,2-13C2]decanoicacid;MPFUdA stands for perfluoro-n-[1,2-13C2]undecanoicacid;MPFDoA stands for perfluoro-n-[1,2-13C2]dodecanoicacid;* quantitative ion.. All Rights Reserved.第3期原盛广等:固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定污水中16种全氟和多氟烷基化合物243㊀PFASs方法检出限和污水样品中PFASs含量范围,确定核查浓度为4μg㊃L-1,目标物测定结果相对偏差控制在30%以内㊂(5)每20个污水样品,进行一次平行双样分析,单次平行样品测定结果相对偏差控制在30%以内,保证良好的重复性,减少随机误差㊂(6)采用空白加标的方式进行准确度控制,每20个污水样品,进行一次空白加标回收率试验,空白加标与污水样品在相同的前处理和测定条件下进行分析,目标物加标浓度为4ng㊃L-1和20ng㊃L-1,目标物加标回收率控制在60%~130%,减少系统误差㊂2㊀结果(Results)2.1㊀线性范围在0.1~40μg㊃L-1范围内,按照1.2.1准确配制一系列不同浓度的混合标准工作溶液,高效液相色谱-串联质谱法进行测定,结果如表3所示㊂16种目标物在0.1~40μg㊃L-1浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数(r2)均>0.99㊂2.2㊀方法回收率㊁相对标准偏差(RSD)㊁方法检出限及定量限在500mL不含目标物的空白样品中加入低㊁中㊁高3个浓度的PFASs,按照1.2.2进行前处理,每个浓度重复测定6次,计算方法回收率和RSD㊂在500mL不含目标物的空白样品中,分别加入适量尽可能低浓度的储备液,按上述前处理步骤处理样品㊂利用已知低浓度的目标物样品与空白样品的测量信号进行比较,3倍信噪比时对应的浓度为方法检出限,10倍信噪比时对应的浓度为方法定量限㊂计算结果如表4所示㊂2.3㊀污水样品测试结果及质量控制数据2.3.1㊀污水样品测试结果污水厂水样中检测出全氟化物的浓度范围为4.88~252.20ng㊃L-1,与中国沈阳(45~120ng㊃L-1)㊁中国天津(200~412ng㊃L-1)和德国(31~226ng㊃L-1)等地污水厂检测结果相比处于中等水平,远低于在西班牙(195~2157ng㊃L-1)㊁日本(9~575ng㊃L-1)和泰国(31~3312ng㊃L-1)的研究中所报道的污水厂进水全氟化合物浓度[48-52]㊂2.3.2㊀监测过程质量控制数据监测过程中的试剂空白㊁全程序空白和样品空白,均未检出目标物;工作曲线核查,目标物测定结果相对偏差0.6%~29.8%;平行样品测定结果相对偏差1.7%~27.9%;空白加标回收率67.0%~129%,污水样品监测过程达到质量控制预期需求㊂3㊀讨论(Discussion)3.1㊀标准品稀释试剂的选择尝试了用甲醇溶液,10%甲醇-水溶液,50%甲醇-水溶液稀释标准品㊂结果显示,标准品用甲醇稀释后,溶剂效应对目标物影响较大,出现明显前延峰;10%甲醇-水溶液稀释后的标准品,仪器响应降低;50%甲醇-水溶液稀释后的标准品,峰形对称,仪器响应高㊂综合考虑,选择50%甲醇-水溶液作为标准品稀释试剂㊂3.2㊀色谱条件优化3.2.1㊀色谱柱的选择在对水体PFASs检测的研究中,不同研究采用的色谱柱不尽相同[9,29,31-32,37],本文比较了HSS-T3 (2.1mmˑ50mm,1.7μm)和BEH-C18(2.1mmˑ100 mm,1.7μm)色谱柱㊂由于试验过程流动相体系pH 值较高,而HSS-T3色谱柱对于高pH值耐受性较差,因此,选择BEH-C18色谱柱㊂表3㊀16种PFASs混合标准工作液的线性回归方程及相关系数(r2)Table3㊀Linear regression equations and correlation coefficients of mixed standard workingfluids of16PFASs(r2)目标物Targetobject内标物Internalstandard线性回归方程Linear regressionequationr2 PFPeA MPFHxA y=1.042x+0.82290.9974 PFBS MPFHxA y=8.030x+0.81020.9930 PFHxA MPFHxA y=0.8022x+0.02210.9999 PFHpA MPFHxA y=0.6525x0.9999 PFHxS MPFHxS y=3.6838x+0.88390.9905 PFOA MPFOA y=1.0398x-0.09200.9972 PFNA MPFNA y=1.9452x-0.22540.9987 PFOS MPFOS y=0.9560x+0.03470.9992 PFDA MPFDA y=1.7719x-0.18370.9955 PFUdA MPFUdA y=1.2099x-0.00010.9990 PFDS MPFDoA y=19.5396x-1.06190.9997 PFDoA MPFDoA y=1.4007x+0.65230.9927 PFTrDA MPFDoA y=2.8385x-0.32540.9985 PFTeDA MPFDoA y=1.4035x+0.14720.9900 PFHxDA MPFDoA y=1.0223x+0.04130.9962 PFODA MPFDoA y=0.8026x-0.09660.9950. All Rights Reserved.244㊀生态毒理学报第16卷表4㊀16种PFASs回收率㊁相对标准偏差(RSD)㊁检出限及定量限Table4㊀Recovery,relative standard deviation(RSD),detection limit and quantitative limit of16PFASs目标物Target object添加浓度/(ng㊃L-1)Additive concentration/(ng㊃L-1)回收率/%Recovery rate/%RSD/%方法检出限/(ng㊃L-1)Method detection limit/(ng㊃L-1)方法定量限/(ng㊃L-1)Method quantitative limit/(ng㊃L-1)PFPeA 4128.0 5.010110.9 4.220111.8 4.70.40 1.32PFBS 4126.5 4.010110.37.820120.0 1.20.080.28PFHxA 467.0 5.610109.7 3.42086.4 4.60.240.80PFHpA 468.5 3.810104.50.82072.1 1.40.120.40PFHxS 4104.5 4.71097.0 4.82097.2 4.50.080.28PFOA 4125.5 5.710103.67.420108.2 2.00.120.40PFNA 4119.07.01084.3 5.82090.2 5.00.040.12PFOS 4111.5 3.51087.4 3.620105.4 4.30.0120.04PFDA 4129.0 3.91065.1 3.12088.1 3.80.240.80PFUdA 4102.0 6.21098.67.720102.67.00.40 1.32PFDS 4122.5 6.51076.1 1.620116.0 3.90.120.40PFDoA 4126.0 1.41083.9 2.420101.4 2.61.20 4.00PFTrDA 491.0 6.81081.5 4.12080.9 4.71.20 4.00PFTeDA 482.58.01097.27.32095.4 4.21.20 4.00PFHxDA 481.07.11086.8 5.820108.2 4.31.20 4.00PFODA 4122.07.91089.87.120119.4 4.14.0013.20. All Rights Reserved.第3期原盛广等:固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定污水中16种全氟和多氟烷基化合物245㊀3.2.2㊀流动相的选择有机相的选择:分别尝试了使用甲醇和乙腈做有机相,目标物在甲醇体系中的响应整体高于乙腈体系㊂水相的选择:尝试超纯水㊁0.1%氨水㊁2mmol ㊃L -1乙酸铵㊁5mmol ㊃L -1乙酸铵㊁2mmol ㊃L -1乙酸铵溶液(pH =9)和5mmol ㊃L -1乙酸铵溶液(pH =9)6种溶液做水相㊂结果表明,PFPeA ㊁PFHxA ㊁PFHpA ㊁PFOA ㊁PF -NA ㊁PFDA ㊁PFUdA ㊁PFDoA ㊁PFTrDA ㊁PFTeDA ㊁PFHx -DA 和PFODA 这12种全氟羧酸类目标物用0.1%氨水做水相的响应值最高,但出现前延峰和肩峰,PF -BS ㊁PFHxS ㊁PFOS 和PFDS 这4种全氟磺酸盐类目标物用超纯水做水相时响应最高,但产生前延峰㊂用5mmol ㊃L -1乙酸铵做水相时,16种PFASs 目标物峰形对称,但响应值变低㊂用2mmol ㊃L -1乙酸铵做水相时,峰形没有用5mmol ㊃L -1乙酸铵做水相时好,但仪器响应值变高㊂由此可见,乙酸铵起到了调整峰形的作用㊂因酸类物质响应值受溶液pH 影响较大,为提高目标物响应值,尝试在乙酸铵溶液中加入氨水调pH 值,对比了2mmol ㊃L -1乙酸铵溶液(pH =9)和5mmol ㊃L -1乙酸铵溶液(pH =9)做水相,发现加入氨水调节pH 后,提高了目标物的离子转化率,整体响应增加,且5mmol ㊃L -1乙酸铵溶液(pH =9)做水相时,仪器响应较高,且峰型较好㊂16种目标物在不同水相中的响应值对比如图1所示㊂综合考虑,用甲醇-5mmol ㊃L -1乙酸铵溶液(pH =9)体系作为流动相㊂3.2.3㊀色谱-质谱方法优化将16种PFASs 目标物及8种同位素内标物的200μg ㊃L -1标准溶液以10μL ㊃min -1的速度进入质谱,调节合适的毛细管电压㊁去溶剂气温度和去溶剂气流量㊂计算并找到每种物质的母离子,优化锥孔电压;找到合适的子离子,并优化碰撞能量㊂为降低检出限,增加准确度㊂用梯度洗脱的方式尝试分开16种PFASs 目标物,尝试了15种梯度方法,最终除PFUdA 和PFDS 这2个目标物保留时间重合,PFNA 和PFOS 相差0.03min 外,其余12种目标物的保留时间均可分开,16种PFASs 及8种同位素内标物的色谱图如图2所示㊂3.3㊀样品前处理方法优化3.3.1㊀固相萃取小柱的选择对HLB 和WAX 固相萃取小柱进行比对,结果表明,HLB 固相萃取小柱对C10及以下短链全氟烷基磺酸的回收率较低㊂HLB 固相萃取小柱吸附剂为亲脂性二乙烯苯和亲水性N -乙烯基吡咯烷酮2种单体按一定比例聚合成的大孔共聚物㊂其保留机理为非极性相互作用㊂研究表明,WAX 小柱以聚合物基质的弱阴离子交换固相萃取(SPE)吸附剂,具有弱阴离子交换和非极性疏水双重作用,含弱碱性的胺基功能基团,适用于从中性物质中分离纯化酸性物质[35,41]㊂而短链全氟烷基磺酸极性较强,故WAX 小柱回收率较好㊂综上所述,选用WAX 固相萃取小柱进行固相萃取㊂图1㊀16种PFASs 在不同水相中的响应值对比Fig.1㊀Comparison of response values of 16PFASs in different aqueous phases. All Rights Reserved.246㊀生态毒理学报第16卷. All Rights Reserved.图2㊀16种PFASs及8种同位素内标的多反应监测模式(MRM)谱图Fig.2㊀The multiple reaction monitoring(MRM)spectra of16PFASs and8isotope internal standards第3期原盛广等:固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定污水中16种全氟和多氟烷基化合物247㊀3.3.2㊀固相萃取小柱上样速度的优化为使前处理过程更加高效㊁稳定,对WAX小柱的上样速度进行了优化㊂尝试了2mL㊃min-1和4 mL㊃min-1的上样速度㊂由图3可知,当上样速度在4mL㊃min-1左右时,目标物回收率明显下降,除PF-PeA㊁PFBS㊁PFHxA㊁PFHpA㊁PFHxS和PFNA以外,其余目标物回收率均<40%;而上样速度<2mL㊃min-1时,除PFDA和PFDS外,回收率均在80%以上㊂因此,在上样过程中速度应控制在<2mL㊃min-1㊂3.3.3㊀复溶试剂的优化以甲醇为复溶试剂,将氮气吹干后的洗脱液用甲醇复溶后上机,溶剂效应导致出现前延峰;以50%甲醇-水溶液为复溶试剂,复溶氮气吹干后的洗脱液后上机,峰形得到明显改善,但回收率低于甲醇复溶样品㊂最终采用以甲醇为复溶试剂复溶氮气吹干后的洗脱液,上机前加入等体积的超纯水,使样品上机时溶剂为50%甲醇-水溶液,以达到改善峰形且提高回收率的目的㊂图3㊀过柱速度2mL㊃min-1和4mL㊃min-1目标物回收率对比图Fig.3㊀Comparison of target recovery at column passing velocity of2mL㊃min-1and4mL㊃min-1㊀㊀综上所述,本文通过对液相色谱-串联质谱仪器条件和实验前处理方法等进行优化,建立了污水中16种PFASs的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱分析方法,结果表明,该方法线性范围宽,RSD为0.8%~8.0%,加标回收率为65.1%~129.0%,方法检出限为0.012~4.00ng㊃L-1,可以满足污水样品全氟化合物分析需求㊂该方法已应用于实际污水样品分析,在分析过程中各项质量控制数据在可接受范围以内,得到的污水中16种PFASs数据准确可靠㊂通讯作者简介:单保庆(1969 ),男,博士,研究员,主要研究方向为流域水污染控制与水生态修复理论和技术㊂共同通讯作者简介:贾丽(1980 ),女,硕士,副研究员,主要研究方向为质量管理与检测技术开发㊂参考文献(References):[1]㊀郝薛文,李力,王杰,等.全氟和多氟烷基化合物的环境风险评估研究现状㊁不确定性与趋势分析[J].环境科学,2015,36(8):3106-3118Hao X W,Li L,Wang J,et al.Status quo,uncertaintiesand trends analysis of environmental risk assessment forPFASs[J].Environmental Science,2015,36(8):3106-3118(in Chinese)[2]㊀何鹏,何春兰,陈忠.食品接触材料中全氟/多氟烷基化合物的监管及对其替代品的思考[J].食品安全质量检测学报,2020,11(4):1033-1039He P,He C L,Chen Z.Regulatory requirements of per-and polyfluoroalkyl substances used in food contact mate-rials and insights on their alternatives[J].Journal of FoodSafety&Quality,2020,11(4):1033-1039(in Chinese) [3]㊀孔祥云,王华,陈虹,等.全氟化合物的环境污染与毒性研究[J].环境科学与技术,2015,38(S1):5-9Kong X Y,Wang H,Chen H,et al.Concentrations of per-fluorinated compounds in the environment and their toxic-ity[J].Environmental Science&Technology,2015,38(S1):5-9(in Chinese)[4]㊀宋涛,鲍佳,刘洋,等.市政污泥处理过程中全氟化合物浓度的变化趋势研究[J].环境与发展,2020,32(8): 207-209Song T,Bao J,Liu Y,et al.Study on the changing trend. All Rights Reserved.248㊀生态毒理学报第16卷of the concentration of perfluorinated compounds in theprocess of municipal sludge treatment[J].Environmentand Development,2020,32(8):207-209(in Chinese) [5]㊀张慧,王世亮,余杨.乐安河河流水体典型全氟化合物的浓度及其前体物的污染贡献[J].环境科学,2020,41(7):3204-3211Zhang H,Wang S L,Yu Y.Concentrations of typical per-fluoroalkyl acids and contributions of their precursors inthe water of the Le an River in China[J].EnvironmentalScience,2020,41(7):3204-3211(in Chinese)[6]㊀杨洪法,史斌,周云桥,等.中㊁韩滨海城市化区域水体全氟化合物的空间特征及生态风险[J].环境科学, 2020,41(4):1607-1618Yang H F,Shi B,Zhou Y Q,et al.Spatial characteristicsand ecological risks of perfluoroalkyl substances in coast-al urbanized areas of China and south Korea[J].Environ-mental Science,2020,41(4):1607-1618(in Chinese) [7]㊀杜国勇,蒋小萍,卓丽,等.长江流域重庆段水体中全氟化合物的污染特征及风险评价[J].生态环境学报, 2019,28(11):2266-2272Du G Y,Jiang X P,Zhuo L,et al.Distribution characteris-tics and risk assessment of perfluorinated compounds insurface water from Chongqing section of the Yangtze Riv-er[J].Ecology and Environmental Sciences,2019,28(11): 2266-2272(in Chinese)[8]㊀崔文杰,彭吉星,谭志军,等.全氟烷基物质在胶州湾海水㊁沉积物及生物中污染特征[J].环境科学,2019,40(9):3990-3999Cui W J,Peng J X,Tan Z J,et al.Pollution characteristicsof perfluorinated alkyl substances(PFASs)in seawater,sediments,and biological samples from Jiaozhou Bay,China[J].Environmental Science,2019,40(9):3990-3999(in Chinese)[9]㊀高杰,李文超,李广贺,等.北京部分地区地下水中全氟化合物的污染水平初探[J].生态毒理学报,2016,11(2):355-363Gao J,Li W C,Li G H,et al.Preliminary investigation onperfluorinated compounds in groundwater in some areasof Beijing,China[J].Asian Journal of Ecotoxicology, 2016,11(2):355-363(in Chinese)[10]㊀方淑红,朱和祥,叶芝祥,等.成都市道路积尘中全氟化合物的污染特征及暴露风险评估[J].环境科学, 2019,40(12):5265-5271Fang S H,Zhu H X,Ye Z X,et al.Pollution characteris-tics and exposure risk assessment of perfluoroalkyl sub-stances in road dust,Chengdu[J].Environmental Science, 2019,40(12):5265-5271(in Chinese)[11]㊀杨朔,陈辉伦,盖楠,等.北京市大气颗粒物中全氟烷基化合物的粒径分布特征[J].岩矿测试,2018,37(5):549-557Yang S,Chen H L,Gai N,et al.Particle size distributionof perfluoroalkyl substances in atmospheric particulatematter in Beijing[J].Rock and Mineral Analysis,2018,37(5):549-557(in Chinese)[12]㊀方祥光,赵祯,李军,等.中国典型城市和地区大气颗粒物中全氟烷基酸的污染分布特征[J].环境化学,2018,37(7):1445-1459Fang X G,Zhao Z,Li J,et al.Concentrations and distri-bution of perfluoroalkyl acids in the atmospheric particlesin typical cities and regions of China[J].EnvironmentalChemistry,2018,37(7):1445-1459(in Chinese)[13]㊀郭萌萌,崔文杰,刘晓玉,等.黄渤海区域水产品中全氟烷基物质的分布特征[J].中国环境科学,2020,40(8):3424-3432Guo M M,Cui W J,Liu X Y,et al.Distribution of perflu-oroalkyl substances in aquatic products in coastal and ad-jacent areas of the Yellow Sea and Bohai Sea,China[J].China Environmental Science,2020,40(8):3424-3432(inChinese)[14]㊀高艳飞,那广水,高会,等.全氟烷基磺酸和全氟烷基羧酸在水生动物体内富集及毒性研究进展[J].环境与健康杂志,2015,32(10):930-934Gao Y F,Na G S,Gao H,et al.Research progress on en-richment and toxicity of PFOS and PFOA in aquatic ani-mals[J].Journal of Environment and Health,2015,32(10):930-934(in Chinese)[15]㊀孙玉珠,李建宇,武梦茹,等.动物性食品中全氟烷基物质的残留现状[J].中兽医医药杂志,2019,38(5):29-33Sun Y Z,Li J Y,Wu M R,et al.Residue status of perflu-oroalkyl substances in animal foods[J].Journal of Tradi-tional Chinese Veterinary Medicine,2019,38(5):29-33(in Chinese)[16]㊀曹民,邵俊娟,高晓明,等.北京市昌平区市售乳制品及水果蔬菜中全氟化合物的含量及暴露评估[J].环境与健康杂志,2018,35(4):337-339Cao M,Shao J J,Gao X M,et al.Perfluorochemicals indairy products,vegetables and fruits in Changping districtof Beijing and exposure evaluation[J].Journal of Envi-ronment and Health,2018,35(4):337-339(in Chinese) [17]㊀郑翌,冷桃花,潘煜辰,等.全氟化合物在食品中的污染情况及检测方法研究进展[J].食品工业科技,2019,40(10):314-319,333Zheng Y,Leng T H,Pan Y C,et al.Research progress oncontamination and determination methods of perfluorinat-ed compounds in food[J].Science and Technology of. All Rights Reserved.第3期原盛广等:固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定污水中16种全氟和多氟烷基化合物249㊀Food Industry,2019,40(10):314-319,333(in Chinese) [18]㊀丁林玉,雷素珍,曾红亮.全氟和多氟烷基化合物的危害及在食品中的污染研究进展[J].食品工业科技,2020,41(20):336-341,350Ding L Y,Lei S Z,Zeng H L.Research progress on theharm of perfluoroalkyl and polyfluoroalkyl substances andtheir contamination in food[J].Science and Technologyof Food Industry,2020,41(20):336-341,350(in Chinese) [19]㊀谢蕾,章涛,孙红文.全氟烷基化合物在人体肝脏中的富集特征及其与肝损伤的关系[J].环境化学,2020,39(6):1479-1487Xie L,Zhang T,Sun H W.Enrichment characteristics ofperfluoroalkyl substances(PFASs)in human liver and itsassociation with hepatocyte apoptosis[J].EnvironmentalChemistry,2020,39(6):1479-1487(in Chinese)[20]㊀侯沙沙,朱会卷,谢琳娜,等.人体内全氟化合物的暴露水平研究进展[J].环境卫生学杂志,2020,10(2):218-225Hou S S,Zhu H J,Xie L N,et al.Research advances inexposure level of perfluoroalkyl and polyfluoroalkyl sub-stances in human body[J].Journal of Environmental Hy-giene,2020,10(2):218-225(in Chinese)[21]㊀张美,楼巧婷,邵倩文,等.全氟化合物污染现状及风险评估的研究进展[J].生态毒理学报,2019,14(3):30-53Zhang M,Lou Q T,Shao Q W,et al.Research progress ofperfluorinated compounds pollution status and risk assess-ment[J].Asian Journal of Ecotoxicology,2019,14(3):30-53(in Chinese)[22]㊀赵之梦,张睿佳,周枝凤,等.广州市某综合医院0~7岁儿童血浆中14种全氟化合物的暴露水平分析[J].职业与健康,2019,35(6):752-756Zhao Z M,Zhang R J,Zhou Z F,et al.Analysis on plas-ma level of14perfluorinated compounds of children aged0-7years old in a general hospital in Guangzhou City[J].Occupation and Health,2019,35(6):752-756(in Chinese) [23]㊀杨帆,施致雄.全氟辛烷磺酸和全氟辛酸的人群暴露水平和毒性研究进展[J].环境与健康杂志,2014,31(8):730-734Yang F,Shi Z X.Human exposure and toxicity of perfluo-rooctyl sulfonate and perfluorooctanoic acid:A review ofrecent studies[J].Journal of Environment and Health,2014,31(8):730-734(in Chinese)[24]㊀李磊,周贻兵,李海畅,等.牛乳中16种全氟化合物及前体物质的改进型分散固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱快速测定法[J].环境与健康杂志,2020,37(1):76-79Li L,Zhou Y B,Li H C,et al.Determination of sixteenperfluorochemical compounds and perfluorochemical pre-cursors in milk by modified dispersion solid phase extrac-tion combined with ultra high performance liquid chroma-tography tandem mass spectrometry[J].Journal of Envi-ronment and Health,2020,37(1):76-79(in Chinese) [25]㊀宋小飞,施召才,马伟文,等.液相色谱-质谱联用法测定血液中全氟化合物[J].分析试验室,2020,39(1):53-56Song X F,Shi Z C,Ma W W,et al.Determination of per-fluorinated compounds in blood by liquid chromatographymass spectrometry[J].Chinese Journal of Analysis Labo-ratory,2020,39(1):53-56(in Chinese)[26]㊀谢琳娜,张海婧,侯沙沙,等.固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法分析土壤中15种全氟化合物[J].分析化学,2019,47(12):1967-1972Xie L N,Zhang H J,Hou S S,et al.Ultra performanceliquid chromatography-tandem mass spectrometry coupledwith solid phase extraction for determination of15kindsof perfluoroalkyl acid[J].Chinese Journal of AnalyticalChemistry,2019,47(12):1967-1972(in Chinese) [27]㊀王懿,孔德洋,单正军,等.加速溶剂萃取-固相萃取净化-超高效液相色谱串联质谱法测定土壤中11种全氟化合物[J].环境化学,2012,31(1):113-119Wang Y,Kong D Y,Shan Z J,et al.Analysis of perfluori-nated compounds in soil by accelerated solvent extractioncombined with ultra performance liquid chromatogra-phytandem mass spectrometry[J].Environmental Chemis-try,2012,31(1):113-119(in Chinese)[28]㊀张妮,胡煜钗,夏静芬,等.超声萃取-柱上衍生-GC/ECD法检测污泥中的PFOS[J].中国给水排水,2018, 34(10):110-114,118Zhang N,Hu Y C,Xia J F,et al.Determination of PFOSin sludge by ultrasonic extraction combined with in-portderivatization-GC/ECD method[J].China Water&Wastewater,2018,34(10):110-114,118(in Chinese) [29]㊀杨文宇,赵慧,钟琳,等.高效液相色谱-串联质谱法检测环境水体中18种全氟化合物[J].化学分析计量, 2020,29(1):61-66Yang W Y,Zhao H,Zhong L,et al.Determination of18perfluorinated alkyl substances in environmental water byhigh performance liquid chromatography-tandem massspectrometry[J].Chemical Analysis and Meterage,2020, 29(1):61-66(in Chinese)[30]㊀刘明睿,汪伶俐,陈亮.超高效液相色谱串联质谱法快速测定地下水和含水层介质中16种全氟烷基酸[J].地学前缘,2019,26(4):307-314Liu M R,Wang L L,Chen L.Quick analysis of sixteenPFAAs in groundwater and aquifer by ultra-performance. All Rights Reserved.。

全自动固相萃取－串联四级杆质谱测定水中16种多环芳烃张广龙;曲明昕;高师昀;许凯【摘要】A method combining auto solid -phase extraction to purify and concentrate samples with gas chromatography-triple quadrupole mass spectrometry (GC -QQQ -MS /MS)to simultaneously determinate 16 polycyclic aromatic hy-drocarbons (PAHs)was proposed.Through optimizingthe sample pretreatment conditions and conditions of instrumental analysis,the limits of detection (LOD)for PAHs ranged from 0.06μg/L to 0.27μg/L.The limits of quantification (LOQ)for PAHs ranged from 0.21μg/L to 0.91μg/L in 1.0L of sample.Three groups of samples spiked with the con-centrations of 10μg/L,100μg/L,and 500μg/L were tested for six parallel determinations.The average recoverieswere between 79.84% and 108.43%.The relative standard deviations were between 3.17% and 9.27%.%建立了采用全自动固相萃取（SPE）净化，浓缩，气相色谱－串联四级杆质谱二级质谱监测（GC －QQQ －MS ／MS）同时测定水中16种多环芳烃的方法。

分析 检测液相色谱法测定水中16种多环芳烃的方法优化　应月 何苏 顾艳 南京市食品药品监督检验院实验测定过程及多环芳烃特性分析多环芳烃特性分析。

多环芳烃一般是由两个苯环组成的稠环氢化合物，结构类型有线状排列、角状排列、簇状排列。

多环芳烃具有较高的熔点、沸点、是一种有色的晶体物质，带有辛醇－水分配系数的性质，因为其较低的蒸汽性欲水溶性，广泛存在于水中与食物油中。

目前大多数情况下用来检测水中是否含有此类元素的方法一般有ＥＰＡ５５０、ＥＰＡ５５０．１、ＥＰＡ６１０。

这种测量实验方式检测出来的数据会有一些偏差，且在实验的过程中相关步骤不够严谨，所以现在采用液相色谱法测定水中的多环芳烃。

日常用水以及食用油中含有的多环芳烃一旦含量超标，则有可能导致使用者出现癌变现象，已经被发现切确认的５００多种致癌物中有多半以上是ＰＡＨｓ的衍生物，当然多环芳烃也是其衍生物，本身熟悉有致癌性、致畸性、致突变性。

所以优化检测方案，规范检测流程对于健康用水监管来说极为重要。

实验过程的优化。

固相萃取－高效液相色谱法作为当前最为合理且自动化程度高、节约溶剂、萃取效率高等特点于一体的检测方式来测定水中的１６种多环芳烃，得出的检测结果准确、科学合理、可信度高。

实验过程中首先需要按照要求配置标准储备液和标准工作液。

准备１０００ｍｇ／Ｌ的由１－甲基萘和２－甲基萘，甲醇组成的混合液，然后取少量的甲基萘－甲醇混合液，和多环芳烃混合物配置成标样溶液，将配好的混合液均分成１０ｍｌ／ｇ的标准储备溶液。

混合标准工作溶液用水稀释并定容之后，得到多组不同量的９个混合标准工作溶液。

接着准备样品：自来水、加标样品１，也就是向一定体积的自来水中加入适量的混合标准储备液２，控制多环芳烃组的浓度为５ｕｇ／Ｌ。

色谱条件为富集柱，流动相为纯水和乙腈，进样体积为１ｍｌ。

梯度见下表。

分离部分流速为０．６ｍｌ／ｍｉｎ。

温度：３０℃，ｕｖ检测为２５０ｎｍ，不同的被检测物相应的激发和发射波表数据见下表２。

高效液相色谱法对水中16种多环芳烃分析的研究罗显平【摘要】用高效液相色谱法从检测嚣、波长、多组分分离条件等选择优化,选出最佳条件.建立高效液相色谱法对16种多环芳烃的分析方法.结果显示方法的检出限为0.011 μg/mL,高、中、低不同浓度的精密度在0.12％～9.09％之间,高、中、低不同浓度的准确度在84.34％～110.63％之间,曲线相关系数在0.99934以上.结论:此方法简单、准确、是测定水中16种多环芳烃的方法.【期刊名称】《四川环境》【年(卷),期】2015(034)002【总页数】6页(P46-51)【关键词】温度;多环芳烃;高效液相色谱【作者】罗显平【作者单位】攀钢集团钒钛资源股份有限公司劳动卫生防护研究所,四川攀枝花617067【正文语种】中文【中图分类】X832· 环境监测·多环芳烃是分子中含有两个以上苯环的碳氢化合物，包括萘、蒽、菲、芘等150余种化合物。

有些多环芳烃还含有氮、硫和环戊烷，常见的具有致癌作用的多环芳烃多为四到六环的稠环化合物。

共有超过100种、具有10000个不同的多环芳烃化合物。

16种常见的多环芳香烃为：萘Naphthalene、苊烯Acenaphthylene、苊Acenaphthene、芴Fluorene、菲Phenanthrene、蒽Anthracene、荧蒽Fluoranthene、芘 Pyrene、苯并(a)蒽Benzo(a)anthracene、屈Chrysene、苯并(b)荧蒽Benzo(b)fluoranthene、苯并(k)荧蒽Benzo(k)fluoranthene、苯并(a)芘Benzo(a)pyrene、二苯并(a,h)蒽Dibenzo(a,h)anthracene、苯并(ghi)苝Benzo(g,hi)perylene、茚苯(1,2,3-cd)芘Indeno(1,2,3-cd)pyrene。

目前国内大都采用气-质联用仪或高效液相色谱仪技术对其进行分析检测[1～6]。

HJ 中华人民共和国国家环境保护标准HJ 478－2009代替GB 13198—91水质多环芳烃的测定液液萃取和固相萃取高效液相色谱法Water quality—Determination of polycyclic aromatic hydrocarbons—Liquid-liquid extraction and solid-phase extraction followed by highperformance liquid chromatographic method2009-09-27发布 2009-11-01实施环境保护部发布HJ478—2009中华人民共和国环境保护部公告2009年第47号为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，保护环境，保障人体健康，现批准《水质多环芳烃的测定液液萃取和固相萃取高效液相色谱法》等十八项标准为国家环境保护标准，并予发布。

标准名称、编号如下：一、《水质多环芳烃的测定液液萃取和固相萃取高效液相色谱法》（HJ 478—2009）；二、《环境空气氮氧化物（一氧化氮和二氧化氮）的测定盐酸萘乙二胺分光光度法》（HJ 479—2009）；三、《环境空气氟化物的测定滤膜采样氟离子选择电极法》（HJ 480—2009）；四、《环境空气氟化物的测定石灰滤纸采样氟离子选择电极法》（HJ 481—2009）；五、《环境空气二氧化硫的测定甲醛吸收-副玫瑰苯胺分光光度法》（HJ 482—2009）；六、《环境空气二氧化硫的测定四氯汞盐吸收-副玫瑰苯胺分光光度法》（HJ 483—2009）；七、《水质氰化物的测定容量法和分光光度法》（HJ 484—2009）；八、《水质铜的测定二乙基二硫代氨基甲酸钠分光光度法》（HJ 485—2009）；九、《水质铜的测定 2,9-二甲基-1,10菲啰啉分光光度法》（HJ 486—2009）；十、《水质氟化物的测定茜素磺酸锆目视比色法》（HJ 487—2009）；十一、《水质氟化物的测定氟试剂分光光度法》（HJ 488—2009）；十二、《水质银的测定 3,5-Br2-PADAP分光光度法》（HJ 489—2009）；十三、《水质银的测定镉试剂2B分光光度法》（HJ 490—2009）；十四、《土壤总铬的测定火焰原子吸收分光光度法》（HJ 491—2009）；十五、《空气质量词汇》（HJ 492—2009）；十六、《水质样品的保存和管理技术规定》（HJ 493—2009）；十七、《水质采样技术指导》（HJ 494—2009）；十八、《水质采样方案设计技术指导》（HJ 495—2009）。

2010，19（2）高效液相色谱荧光法测定土壤中16种多环芳烃罗世榕(福州市高新技术产业创业服务中心，福建福州350002)摘要：本文介绍了采用高效液相色谱、荧光检测器测定土壤中16种多环芳烃。

通过对液相色谱柱的选择、色谱条件、荧光激发和发射波长等条件的优化，实现16种多环芳烃完全分离。

特别是对16种多环芳烃的激发和发射波长进行选择，进一步提高检测灵敏度、选择性，降低了干扰。

在优化的实验条件下，荧光检测器的检出限为0.09～1.57ng/mL ，样品加标回收率为86%-108%。

关键词：高效液相色谱；荧光检测；多环芳烃；土壤中图分类号：O657.72文献标识码：A 文章编号：1009-8143(2010)02-0069-04Determination of 16Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Soil by HPLC withFluorescence DetectionLuo Shi-rong（Fuzhou High-Tech Innovation Service Center,Fuzhou,Fujian350002,China ）Abstract ：High performance liquid chromatographic with fluorescence detection method was applied the determination of 16polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs)in soil.The method realized the complete separation of 16PAHs and high sensitive fluorescence determination after optimizing analysis conditions,including liquid chromatographic conditions,excitation and emission wavelength.The accuracy for the determination may be improved with fluorescence detection.Especially for 16PAHs in excitation and emission wavelengths to make your selection,further improved the detection sensitivity,selective,and reduced interference.Under optimizing conditions,The detection limits of the fluorescence detection was 0.09～1.57ng ／mL,and the recoveries of standard addition were 86%-108%.Keywords ：High performance liquid chromatography ;fluorescence detection;polycyclic aromatic hydrocarbons;soil.收稿日期：2009-11-27作者简介：罗世榕(1961～)，男，高级工程师，从事有机化学分析。

Heteropore covalent organic framework for solid phase extraction of 16PAHs from waterLU Qiuyu 1,2,LI Mingtang 1,HE Peiqiao 2,ZHANG Danyang 2,JIANG Hongxin 2*,LIU Xiaowei 2*（1.School of Resources and Environment,Jilin Agricultural University,Changchun 130012,China;2.Key Laboratory of Environmental Factor Control for Agro-product Safety,Ministry of Agriculture and Rural Affairs /Agro-Environmental Protection Institute,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Tianjin 300191,China ）Abstract ：To provide a simple and efficient method to adsorb trace polycyclic aromatic hydrocarbons （PAHs ）from complex,real samples,heteropore covalent organic frameworks （HCOFs ）crystalline porous material with two different kinds of pores was prepared through a solvothermal method.The HCOFs structure and morphologies were characterized by scanning electron microscopy,powder X-ray diffraction analysis,Fourier transform-infrared spectroscopy,and Brunauer-Emmett-Teller analysis.The ability of the HCOFs as a solidadsorbent for 16PAHs from real water samples was investigated.Based on gas chromatography-mass spectrometry analysis,the contents of 16PAHs were detected after treatment with HCOFs.The experimental results indicated that the prepared HCOFs displayed intriguing properties such as high crystallinity,large surface area,and high porosity,bearing both micro-pores （hexagonal ）and mesopores （trigonal ）.This HCOFs can be used as an adsorbent for the rapid adsorption of 16PAHs in environmental water samples.The absorption equilibrium was achieved after only 15min oscillation,while that of the enrichment factor can be up to 40times more.The method presented suitablelinearity in the range of 0.25~50μg·L -1for the 16PAHs with a satisfactory regression coefficient （R 2>0.99）.The detection limits for the method based on a signal-to-noise ratio of 3were in the range of 0.04~0.08μg·L -1.For the actual water samples,the recoveries of 16PAHs ranged from 82.3%to 110.1%.These results demonstrated this method has advantages such as its simplicity,speed,cost-双孔COF 材料用于固相萃取水体中16种多环芳烃鲁秋玉1，2，李明堂1，何沛桥2，张丹阳2，姜红新2*，刘潇威2*（1.吉林农业大学资源与环境学院，长春130012；2.农业农村部农产品质量安全环境因子控制重点实验室/农业农村部环境保护科研监测所，天津300191）收稿日期：2021-01-12录用日期：2021-03-19作者简介：鲁秋玉（1996—），女，吉林长春人，硕士研究生，从事纳米材料的开发及其在污染物吸附富集方面的应用研究。

Advances in Environmental Protection 环境保护前沿, 2023, 13(5), 1124-1133Published Online October 2023 in Hans. https:///journal/aephttps:///10.12677/aep.2023.135134高效液相色谱法测定水中16种多环芳烃的方法比对陆文灵*，陈凤松，沈柳君，李亚，邵菠昌#云南省生态环境厅驻文山州生态环境监测站，云南文山收稿日期：2023年9月5日；录用日期：2023年10月5日；发布日期：2023年10月16日摘要本文对高效液相色谱法测定水中16种多环芳烃的国家标准方法(GB/T 5750.8-2023)和环境标准方法(HJ 478-2009)在适用范围、样品采集、样品前处理、色谱条件、检出限、精密度和准确度进行了比对分析，并采集实际样品进行测试比对，探讨两种方法的优缺点，提出应用过程中的一些建议，为检测实验室在选择方法和分析过程中提供参考。

关键词高效液相色谱，多环芳烃，方法比对Comparison of High-Performance LiquidChromatography Methods for theDetermination of 16 PolycyclicAromatic Hydrocarbons in WaterWenling Lu*, Fengsong Chen, Liujun Shen, Ya Li, Bochang Shao#The Ecological and Environmental Monitoring Station of DEEY in Wenshan, Wenshan YunnanReceived: Sep. 5th, 2023; accepted: Oct. 5th, 2023; published: Oct. 16th, 2023AbstractIn this paper, the national standard method (GB/T 5750.8-2023) and the environmental standard method (HJ 478-2009) for the determination of 16 kinds of polycyclic aromatic hydrocarbons in *第一作者，陆文灵，男，工程师，主要从事生态环境监测有机物分析工作。