保健食品中肉碱的测定

附件：一、保健食品中大蒜素的测定1 范围本方法适用于以大蒜及其制品为原料的保健食品中大蒜素（三硫二丙烯，C6H10S3）的含量测定。

本方法最低检出浓度为0.0430mg/mL；取100mg试样，提取定容5.0mL时，试样中大蒜素最低检出质量浓度为0.20g/100g。

本方法最佳线性范围： 0.320mg/mL～3.00 mg/mL。

2 原理：根据大蒜素为挥发性油成分，经有机溶剂提取，用气相色谱仪分析，采用外标法定量。

3 试剂除特殊说明，所用试剂均为分析纯。

3.1 无水乙醇3.2 正己烷3.3标准溶液：称取0.1000g标准品，置于10mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，该溶液中含大蒜素浓度为10.0mg/mL。

此溶液可在冰箱中保存七天。

取该溶液1.0mL，置于10mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，此溶液含大蒜素浓度为1.0mg/mL。

4 仪器4.1气相色谱仪：附氢火焰（FID）检测器4.2数据处理机或积分仪4.3分析天平：万分之一4.4超声清洗机4.5离心机：3000r/min5分析方法5.1试样提取5.1.1固体试样：称取试样适量（相当于含大蒜素5mg，精确至0.001g），加无水乙醇适量，密塞，超声70min，取出冷却，加正己烷定容（调节大蒜素含量约为1mg/mL），振摇，静置分层后，取上层溶液进样。

5.1.2液体试样吸取试样适量（相当于含大蒜素5mg，精确至0.001g），置于分液漏斗中，加5mL 正己烷振摇提取1min ，静置（或离心）分层后，取上层溶液进样。

5.2 气相色谱参考条件5.2.1 色谱柱：HP-5(30m×0.25mm)5.2.2 柱箱温度：100℃（3min ）min)10(℃200℃150℃/min 20℃/min 10−−−→−−−−→−5.2.3 进样口温度：220℃ 5.2.4 检测器温度：250℃ 5.2.5 载气：氮气（1mL/min ）5.2.6 氢气：40mL/min ；空气：400mL/min 5.2.7 进样量：1μL5.3 定性分析：在参考操作条件下，以对照品与试样比较保留时间定性。

婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱测定的方法验证作者：石永倩张天博来源：《企业科技与发展》2021年第12期【摘要】為了验证采用分光光度法测定婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱含量方法的准确性与可靠性，判断测定结果是否达到标准要求，文章采用《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》中的方法测定乳品中左旋肉碱的含量，并根据《合格评定化学分析方法确认和验证指南》中的相关规定对其线性、线性范围、检出限、定量限、精密度、回收率6个参数进行验证。

【关键词】左旋肉碱;脂肪代谢;方法验证;适用性【中图分类号】TS252.7 【文献标识码】A 【文章编号】1674-0688（2021）12-0025-03左旋肉碱，别名L-肉碱或维生素BT，分子式C7H15NO3，是一种白色晶体或者白色透明粉末，易溶于水、酒精和碱性溶液，200 ℃以上熔化分解。

左旋肉碱是由俄国科学家Gulewitsch和Krimberg在骨骼肌中发现的。

左旋肉碱是参与生物体新陈代谢的重要物质，具有多种生理功能。

奶粉中的左旋肉碱是促进奶粉中的脂肪分解、代谢和供能的重要营养素，同时能促进体内的脂肪转化为能量，属于一种类氨基酸类的营养物质[1]。

人体内的左旋肉碱主要来源于羊肉、牛肉、猪肉等红色肉类，奶粉中适量添加左旋肉碱对人体无害，可以促进体内脂肪代谢和利用。

婴幼儿饮食结构比较单一，主要饮食来源为各种乳制品，主要的能量来源为乳制品中的脂肪，宝宝体内缺乏左旋肉碱，导致脂肪的利用率下降，不利于宝宝体格发育，添加左旋肉碱可以提高宝宝对奶粉中脂肪的利用率[2]。

本文研究的目的在于通过对方法的线性、线性范围、检出限、定量限、精密度、回收率6个指标进行验证，证明采用这种检测方法测定婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的可行性[3]。

1 试验方法——《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》（GB 29989—2013）1.1 原理概述将样品中的蛋白质用高氯酸溶液沉淀，过滤后的滤液用氢氧化钾溶液皂化，使左旋肉碱游离。

1 主题内容和适用范围1.1 本规范规定了保健食品和原料的卫生要求、功效成分和卫生指标的检验项目和方法。

1.2 本规范适用于保健食品的检验受理、项目的确定和方法的选择。

2 基本要求2.1 凡保健食品，必须符合"保健食品通用卫生要求"，该"要求"所列的各项目必须按规定执行。

附表1所列检测项目是对"保健食品通用卫生要求"补充规定。

2.2 保健食品中使用的添加剂必须符合＂GB2760食品添加剂使用卫生标准＂规定的品种名单。

检测机构根据产品配方检测合成色素、防腐剂、甜味剂及抗氧化剂的含量。

2.3 凡使用有机溶剂提取物为原料的产品，其使用的有机溶剂要符合GB2760附录D食品工业用加工助剂推荐名单要求。

2.4 保健食品应具有与产品配方和申报的保健功能相适应的功效成分或特征成分，申报时须检测配方中主要原料所含的功效成分或特征成分。

附表2所列原料为主的产品须检测表中规定的项目。

2.5 保健食品评审专家委员会可根据产品的具体配方、工艺等相关资料，要求申报单位检测指定的项目。

2.6 功效成分、特征成分、营养成分及卫生学指标的检测方法应根据其产品适用的方法学范围选择国家标准、卫生部部颁标准、行业标准以及国际上权威分析方法进行测定。

2.7 在没有相应的标准方法之前，其产品中所声称（具有）的功效成分或特征成分的检测方法及检测所需的标准品对照品及特殊试剂均由申报单位提供，并说明其产品中功效成分或特征成分分析方法的来源。

如属自主开发研究的分析方法，需提供方法学研究的相关资料，同时将方法学研究的资料报卫生部保健食品功效成分检测协作组（中国疾病预防控制中心营养与食品安全所）备案，必要时卫生部将组织方法学验证，其费用由申报单位承担。

2.8 检验机构受理保健食品检测时，申报单位应提供该产品的配方、工艺及企业标准等相关资料。

2.9卫生部对保健食品的功效成分的检测机构进行认定，检测机构的名单由卫生部门公布。

左旋肉碱的分析方法作者：杨晓惠郑侠夏玉来源：《粮食科技与经济》2018年第02期[摘要]左旋肉碱是参与生物体新陈代谢的重要物质，具有多种生理功能，而左旋肉碱的含量是衡量其品质的重要指标。

目前，各研究学者已经开发了多种分析方法对左旋肉碱的含量进行测定，主要包括酶技术法、高效液相色谱法（HPLC）、离子色谱法（IC）和质谱法（MS），但这些研究基本上都是实验性研究，缺少对于这些测定方法的归纳和总结。

基于此，为了便于检验人员操作及选择，文章对近年来左旋肉碱的分析方法进行归纳总结，也为其他学者的进一步研究提供参考。

[关键词]左旋肉碱；测定方法；酶技术法；高效液相色谱法中图分类号：Q55 文献标识码：A DOI：10.16465/431252ts.20180207左旋肉碱（L-carnitine），又称L-肉碱、左卡尼汀、L-肉毒碱或维生素BT，化学名为β-羟基γ-三甲铵丁酸，分子式为C7H15NO3。

是1905年由两位俄国科学家Gulewitsch和Krimberg 在肌肉浸汁中发现的一种类维生素。

肉碱有左旋（L-广型）和右旋（D-型）两种异构体。

其中只有L-型具有生理活性，而D-型是人工合成物，自然界中不存在，不仅没有生物活性，而且还对L-肉碱有竞争性抑制作用。

通常肉碱所指都是左旋肉碱。

左旋肉碱的来源有两种：第一，体内合成（主要是肝脏和肾脏），第二，膳食摄取（主要是动物性食物）。

其主要生理功能是作为载体将长链脂肪酸从线粒体膜外输送到膜内促进脂肪酸的β-氧化，从而促进机体脂肪代谢。

此外，左旋肉碱还可以抗疲劳；缓解肾衰透析引起的急、慢性并发症；改善代谢综合征的腹部肥胖、血脂异常等临床症状；参与精子运动和成熟过程等。

根據上述生理功能，加之食用安全、性质稳定，近年来，左旋肉碱作为一种新型营养强化剂和功能食品原料在国内外得到了广泛的应用。

包括减肥、健美等保健食品；婴儿食品营养强化剂；运动员、中老年人的营养补充剂、化妆品，此外，左旋肉碱在饲料和医疗药物方面也有应用。

1 主题内容和适用范围本规范规定了保健食品和原料的卫生要求、功效成分和卫生指标的检验项目和方法。

本规范适用于保健食品的检验受理、项目的确定和方法的选择。

2 基本要求凡保健食品，必须符合"保健食品通用卫生要求"，该"要求"所列的各项目必须按规定执行。

附表1所列检测项目是对"保健食品通用卫生要求"补充规定。

保健食品中使用的添加剂必须符合＂GB2760食品添加剂使用卫生标准＂规定的品种名单。

检测机构根据产品配方检测合成色素、防腐剂、甜味剂及抗氧化剂的含量。

凡使用有机溶剂提取物为原料的产品，其使用的有机溶剂要符合GB2760附录D食品工业用加工助剂推荐名单要求。

保健食品应具有与产品配方和申报的保健功能相适应的功效成分或特征成分，申报时须检测配方中主要原料所含的功效成分或特征成分。

附表2所列原料为主的产品须检测表中规定的项目。

保健食品评审专家委员会可根据产品的具体配方、工艺等相关资料，要求申报单位检测指定的项目。

功效成分、特征成分、营养成分及卫生学指标的检测方法应根据其产品适用的方法学范围选择国家标准、卫生部部颁标准、行业标准以及国际上权威分析方法进行测定。

在没有相应的标准方法之前，其产品中所声称（具有）的功效成分或特征成分的检测方法及检测所需的标准品对照品及特殊试剂均由申报单位提供，并说明其产品中功效成分或特征成分分析方法的来源。

如属自主开发研究的分析方法，需提供方法学研究的相关资料，同时将方法学研究的资料报卫生部保健食品功效成分检测协作组（中国疾病预防控制中心营养与食品安全所）备案，必要时卫生部将组织方法学验证，其费用由申报单位承担。

检验机构受理保健食品检测时，申报单位应提供该产品的配方、工艺及企业标准等相关资料。

2.9卫生部对保健食品的功效成分的检测机构进行认定，检测机构的名单由卫生部门公布。

保健食品的功效成分检测工作应在卫生部认定的检测机构进行。

保健食品功效成分检测方法
保健食品功效成分检测方法主要包括以下几种：
1. 高效液相色谱（HPLC）：该方法通过溶解或提取食品样品中的成分，然后采用HPLC技术进行分离和定量分析。

该方法广泛应用于保健食品中活性成分（如维生素、矿物质、植物提取物等）的测定。

2. 气相色谱（GC）：该方法适用于分析保健食品中的挥发性成分，如芳香化合物、香味成分等。

样品经过适当的处理后，通过GC技术进行分离和定性、定量分析。

3. 质谱联用（MS）：质谱联用技术将质谱仪和色谱仪相结合，能够对复杂的成分进行鉴定和分析。

该方法在保健食品中的应用主要用于对活性成分的鉴定和测定。

4. 核磁共振（NMR）：该方法通过利用核磁共振原理，对保健食品样品中的成分进行结构鉴定和定量分析。

该方法在对复杂混合物的分析中具有很高的分辨率和准确性。

5. 荧光光谱：该方法通过激发保健食品样品中的荧光物质，测量其在不同波长下的荧光强度，从而分析和定量测定。

该方法适用于对荧光性成分（如叶绿素、类胡萝卜素等）的测定。

需要注意的是，不同的保健食品所含的成分和功效不同，因此具体的检测方法可能会有所差异。

在进行保健食品功效成分检测时，需要根据具体的分析目标选择适当的检测方法。

保健食品卫生学理化检验规范（征求意见稿）Standards for Hygienic Physical and Chemical Examination of Health Food目录第一部分总则.................................................. 错误!未定义书签。

一、主题内容和适用范围 ...................................... 错误!未定义书签。

二、基本要求................................................. 错误!未定义书签。

第二部分二十五种功效成分和标志性成分检验方法.................. 错误!未定义书签。

一、保健食品中红景天苷的测定.................................. 错误!未定义书签。

二、保健食品中大蒜素的测定 ................................... 错误!未定义书签。

三、保健食品中芦荟苷的测定 ................................... 错误!未定义书签。

四、保健食品中肉碱的测定 ..................................... 错误!未定义书签。

五、保健食品中α-亚麻酸、γ-亚麻酸的测定...................... 错误!未定义书签。

六、保健食品中人参皂苷的测定.................................. 错误!未定义书签。

七、保健食品中原花青素的测定.................................. 错误!未定义书签。

八、保健食品中核苷酸的测定 ................................... 错误!未定义书签。

九、保健食品中洛伐他汀的含量测定.............................. 错误!未定义书签。

一、实验目的1. 了解肉碱的化学性质和检测方法。

2. 掌握高效液相色谱法（HPLC）在肉碱含量测定中的应用。

3. 通过实验，学会样品前处理、色谱条件优化、数据处理等实验技能。

二、实验原理肉碱（L-carnitine）是一种含氮有机化合物，具有促进脂肪代谢、增强免疫力等生理功能。

本实验采用高效液相色谱法测定肉碱含量，其原理是利用肉碱在特定色谱条件下的保留时间，通过比较标准品和样品的峰面积，计算出样品中肉碱的含量。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：高效液相色谱仪、超声波清洗器、电子天平、样品处理装置等。

2. 试剂：肉碱标准品、甲醇、乙腈、水等。

四、实验步骤1. 样品前处理（1）准确称取一定量的样品，加入适量的甲醇溶液，超声提取30分钟。

（2）将提取液离心，取上清液过0.45μm滤膜，备用。

2. 色谱条件（1）流动相：甲醇-水（80:20，V/V）。

（2）流速：1.0 mL/min。

（3）柱温：30℃。

（4）检测波长：215 nm。

3. 标准曲线绘制（1）准确称取肉碱标准品，用甲醇溶液配制成浓度为1.0 mg/mL的标准溶液。

（2）分别取0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL标准溶液，依次加入流动相稀释至1.0 mL，制备成不同浓度的标准溶液。

（3）按照色谱条件进行色谱分析，记录峰面积，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

4. 样品测定（1）取0.1 mL样品溶液，加入流动相稀释至1.0 mL。

（2）按照色谱条件进行色谱分析，记录峰面积。

（3）根据标准曲线，计算样品中肉碱的含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线线性范围：经实验验证，本实验的标准曲线线性范围为0.1～0.5mg/mL，相关系数R²=0.999。

2. 重复性实验：对同一批样品进行6次测定，相对标准偏差为1.2%，说明实验具有良好的重复性。

3. 准确度实验：对已知含量的样品进行测定，测定值与理论值之间的相对误差为1.5%，说明实验具有较高的准确度。

婴幼儿配方食品和乳粉L-肉碱的测定编制说明1、引言L-肉碱又称肉毒瘤碱或维生素BT,化学式为C7H15O3N,分子量为162.2，化学名L-β-羟基—γ-三甲胺丁酸盐，英文名为L-β-hydroxy-γ-butyrobetaine。

类似胆碱和甜菜碱的结构。

L-型具有生命活性，作为婴幼儿配方乳粉的成分之一，已在婴幼儿配方食品和乳粉中广泛使用。

目前，L-肉碱的检测方法有很多种，有生物法、化学法、酶法、荧光法、HPLC法NMR法和放射酶法。

其中以酶法、荧光法和HPLC法较为常用。

存在于产品中L-肉碱主要有两种形态：游离态与结合态，它们具有同等的生理作用。

所以测定L-肉碱的含量必须包括这两种形态。

通过试验认为酶比色法测定婴幼儿配方奶粉中的L-肉碱，具有方法灵敏度高，特异性强等特点。

测定结果能反映出样品中L-肉碱的真实状况，所以，在制定本标准时，采用酶比色法。

目前GB10765-1997、GB10766-1997、GB10767-1997、GB10769-1997等婴幼儿配方奶粉的国家标准中尚未规定L-肉碱的的含量。

根据目前此类产品的状况，婴幼儿配方乳粉的配方中，有80%企业都将L-肉碱作为重要指标进行强化，并制定为企业标准。

一般强化后样品中的L-肉碱含量在5~50mg/100g范围内。

为了适应新形势的发展，我中心与上海英特营养乳品有限公司共同起草了L-肉碱的检验标准。

1、任务来源任务来源：国家标准化制修订委员会任务编号：200794444—T—4692、制定标准的必要性和意义L-肉碱有两种光学异构体，即左旋肉碱（L-型）和右旋肉碱（D型）。

L-型具有生命活性，而（D型）则是其竞争性抑制剂。

而通常所指都是L-肉碱。

L-肉碱作为一种功能性营养物质，广泛的存在于自然界中。

大多数动物具有合成L-肉碱的能力。

L-肉碱主要存在于动物的肝、肾、脑中。

L-肉碱的主要功能是参与动物体内的脂肪代谢。

它作为载体将长链脂肪酸从腺粒体膜外输送到膜内，促进脂肪酸的β-氧化，从而促进脂肪的代谢。

保健食品功效成分检测方法保健食品对人体的健康有着积极的促进作用，但市场上的保健食品种类繁多，品质良莠不齐。

因此，对保健食品功效成分进行准确的检测至关重要。

本文将介绍几种常用的保健食品功效成分检测方法。

1.高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是一种常用的检测方法，适用于维生素、矿物质和一些草药成分的分离和定量。

该方法的原理是利用样品溶液在色谱柱中与流动的移液相相互作用，根据样品成分在流动相中的亲和性差异来实现分离。

通过检测各组分在检测器上的峰面积或峰高，再进行定量计算。

例如，可以使用HPLC方法检测保健食品中的维生素C、维生素E等成分。

2.气相色谱法（GC）气相色谱法是一种基于样品中成分在固态载体上发生相互作用，分离出不同成分的方法。

该方法适用于脂肪酸、氨基酸和其他易于挥发的有机物的检测。

气相色谱法的原理是通过样品的蒸发和升温使其插入毛细管柱，然后利用样品成分在柱中固定相和流动相之间的分布系数的差异来实现分离并进行定量分析。

例如，通过GC方法可以检测保健食品中的脂肪酸、氨基酸等成分。

3. 紫外分光光度法（UV-Vis）紫外分光光度法是一种利用物质吸收紫外或可见光来确定物质浓度的方法。

该方法适用于测定含有具有吸收紫外光或可见光波长的化合物的保健食品。

紫外分光光度法的原理是将样品溶液通过光束，根据样品溶液对光束的吸收程度来确定物质的浓度。

例如，通过紫外分光光度法可以检测保健食品中的多酚类、黄酮类等成分。

4.核磁共振技术（NMR）核磁共振技术是一种利用样品原子核的磁性来研究样品结构和成分的方法。

该方法适用于复杂的有机分子的结构和成分分析。

核磁共振技术的原理是将样品置于强磁场中，然后通过外加的射频脉冲来激发样品中的原子核磁矩，根据样品的不同成分的核磁共振信号来确定物质的存在和结构。

例如，可以使用核磁共振技术对保健食品中的复杂成分进行定性和定量分析。

综上所述，保健食品功效成分检测方法有许多种，其中包括了高效液相色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法和核磁共振技术等。