HPLC法测定西洛他唑分散片有关物质

８９４　中国药事２００７年第２１卷第１１期　

ＨＰＬＣ法测定氟哌噻吨美利曲辛片的含量及有关物质　

宋　一，刘　艳　（辽宁省大连市药品检验所，大连１１６０２１；　大连第五人民医院）　

摘要：　建立氟哌噻吨美利曲辛片中氟哌噻吨与美利曲辛的含量测定及有关物质检查的ＨＰＬＣ方法。采　

用Ｅｃｌｉｐｓｅ　ＸＩ）Ｂ—ｃ　柱；流动相为０．６　磷酸二氢钠溶液一乙腈一甲醇一三乙胺（５０：３０：２０：０．１，混匀后　用磷酸调ｐＨ至４．０）；流速：１．０ｍＬ・ｍｉｎ；检测波长：２３０ｎｍ；柱温：４Ｏ。Ｃ。氟哌噻吨在２．５～１２．５　ｇ　

・ｍＩ　。范围内有良好的线性关系，ｒ一１．００００；平均回收率为９９．７９　，ＲＳＤ一０．１　（ｎ一９）；美利曲辛　

在５Ｏ～２５０ｇｇ・ｍＬ　范围内有良好的线性关系，ｒ一１．００００；平均回收率为１０１．２７　，ＲＳＤ＝０．１　（ｎ一　

９）。本法准确可靠，专属性强，能更好地控制其质量。　

关键词：ＨＰＩ　ｃ；氟哌噻吨美利曲辛片；含量测定；有关物质　

中图分类号：Ｒ９２７．２　文献标识码：Ａ　文章编号：１００２～７７７７（２００７）１１－０８９４～０３　

Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｒｅｌａｔｉｖｅ　Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　Ｔｅｓｔ　ｏｆ　Ｆｌｕｐｅｎｔｉｘｏｌ　ａｎｄ　Ｍｅｌｉｔｒａｃｅｎ　Ｔａｂｌｅｔｓ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　Ｓｏｎｇ　Ｙｉ　ａｎｄ　Ｌｉｕ　Ｙａｎ　（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｆｏｒ　Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｄａｌｉａｎ　Ｃｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ，１１６０２１；　Ｔｈｅ　５ｔｈ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　

ｏｆ　Ｄａｌｉａｎ　Ｃｉｔｙ）　ＡＢＳＴＲＡＣＴ　Ａ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｆｏｒ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　Ｏｆ　Ｆ１ｕＰｅｎｔｉｘｏｌ　ａｎｄ　Ｍｅｌｉｔｒａｃｅｎ　Ｔａｂｌｅｔｓ．Ｅｃｌｉｐｓｅ　ＸＤＢ－Ｃ１８　ｃｏｌｕｍｎ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｗｉｔｈ　ａ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｏｆ　０　６　ｓｏｄｉｕｍ　

安徽医药Ａｎｈｕｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　２０１３　Ｆｅｂ；１７（２）　

ＨＰＬＣ法测定维生素Ｂ２片的含量及有关物质　

谢子立　（安徽省食品药品检验所，安徽合肥２３００５１）　摘要：目的建立高效液相色谱法测定维生素Ｂ　片的含量和有关物质。方法采用Ｃ．　色谱柱（２５０　ｉｎｎ×４．６　ｎｌｎｌ，５　ｍ）；以　甲醇一乙腈一１０　ｍｍｏｌ・Ｌ　庚烷磺酸钠溶液（含冰醋酸为０．５％）（５：ｌ０：８５）为流动相；检测波长：４４４　ｎｍ；流速：１．０　ｍ１　・ｒａｉｎ～’　结果在建立的色谱条件下，维生素Ｂ２能与杂质完全分离；维生素Ｂ２在０．１１１　７—０．８９３　８肛ｇ范围内线性关系良好，ｒ：１．０００；　平均回收率为１００．５％（ｎ＝９）；测定维生素Ｂ：的最小检出量为２．２　ｎｇ。结论该方法操作方便、准确，灵敏度高，专属性强，可　用于维生素Ｂ，片的质量控制。　关键词：维生素Ｂ　片；高效液相色谱法；含量测定；有关物质　ＨＰＬＣ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ．ｔａｂｌｅｔｓ　ＸＩＥ　Ｚｉ．１ｉ　（Ａｎｈｕｉ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒ　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｈｅｆｅｉ　２３００５１，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　ｆｏｒ　ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ２　ｔａｂｌｅｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｃｌ８　ｃｏｌｕｍｎ（２５０　ｍｍ×４．６ｍｍ，５　ｍ）ｗａｓ　ａｄｏｐｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｏｆ　ａ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｏｆ　ｍｅｔｈａｎｏｌ—ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ一１０　ｍｍｏｌ・Ｌ　ｓｏｄｉｕｍ　ｈｅｐｔａｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（０．５％ｇｌａｃｉａｌ　ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ）（５：１０：８５）．Ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１．０　ｍＬ・ｒａｉｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｅｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　４４４　ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ２　ｗａｓ　ｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｉｔｓ　ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ．Ａ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｂｅ—　ｔｗｅｅｎ　ｐｅａｋ　ａｒｅａ　ａｎｄ　ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ２　ｗａｓ　ａｃｈｉｅｖｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．１１１７～０．８９３８　Ｉｘｇ，ｗｉｔｈ　ｒ　ｏｆ　１．０００．Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ（ｎ＝９）ｗａｓ　１００．５％．Ｔｈｅ　ｌｏｗｅｓｔ　ｄｅｔｅｃｔａｂｌｅ　ａｍｏｕｎｔ　ｗａｓ　２．２　ｎｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ．ａｃｃｕｒａｔｅ．ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｎｄ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ２　ｔａｂｌｅｔｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ，ｔａｂｌｅｔｓ；ＨＰＬＣ；ｃｏｎｔｅｎｔ；ｒｅｌａｔｅｄ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　维生素Ｂ：别名维他命Ｂ：、核黄素等，它是人体多种辅酶　的重要组成部分，临床用于治疗口角炎、眼结膜炎、脂溢性皮　炎以及阴囊炎等。维生素Ｂ　片的现行标准收载于２０１０年版　中国药典二部…，含量测定采用紫外一可见分光光度法。鉴　于维生素Ｂ：的广泛使用，目前对维生素Ｂ：涉及含量测定的　研究相对较多，报道的其他含量测定方法有多种，如荧光分光　光度法　和高效液相色谱法　等，未见其片剂有关物质测　定的报道。本文此次采用高效液相色谱法同时测定维生素　Ｂ：片的有关物质与含量，该方法简便易行，灵敏度高，具有准　确度高以及重复性好的特点。　１仪器和试药　岛津ＬＣ－２０Ａ系列高效液相色谱仪，梅特勒ＡＧ－１３５电子　天平。　维生素Ｂ２对照品（纯度：９８．７％，批号：１００３６９－２００５０２），　由中国食品药品检定研究院提供；乙腈、甲醇均为色谱纯，庚　烷磺酸钠为离子对色谱用试剂，水为超纯水；其它试剂均为分　析纯。维生素Ｂ　片（湖北华中药业有限公司，２００９０１０２；临汾　宝珠制药有限公司，０９０１０１；广东三才医药集团有限公司，　２００９０１２４）　２方法与结果　２．１色谱条件与系统适用性试验采用岛津ＬＣ－２０Ａ系列　高效液相色谱仪，色谱柱为岛津ＶＰ—ＯＤＳ　Ｃ　柱（２５０　ｍｍ×４．６　ｍｍ，５　ｍ），流动相为甲醇一乙腈一ｌＯ　ｍｍｏｌ・Ｌ　庚烷磺酸　钠溶液（含冰醋酸为０．５％）（５：１０：８５）；检测波长为４４４　ｎｍ；　流速为１．０　ｍＬ・ｍｉｎ～；柱温为３０￣Ｃ，进样量为２０　。理论　塔板数按维生素Ｂ　峰计应不低于２　０００，维生素Ｂ　峰与其他　杂质峰分离度应符合要求。　２．２专属性研究　２．２．１各种试验样品溶液配制　空白试验：精密称取４片量　空白辅料，置于２００　ｍＬ量瓶中，加盐酸溶液（１—２）１０　ｍＬ，振　摇使维生素Ｂ：溶解，加水１Ｏ　ｍＬ冲洗瓶壁上残存的粉末，继　续振摇１０　ｍｉｎ，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。　强酸破坏：精密称取维生素Ｂ：片粉末适量（约相当于维　生素Ｂ　２０　ｍｇ），置于２００　ｍＬ量瓶中，加入０．２　ｎｌｏ］・Ｌ　盐酸　溶液２　ｍＬ，室温放置２　ｈ，加０．２　ｔｏｏｌ・Ｉ　氢氧化钠溶液２　ｍＬ，加盐酸溶液（１—２）１０　ｍＬ，振摇使维生素　溶解，加水１０　ｍＬ冲洗瓶壁上残存的粉末，继续振摇１０　ｍｉｎ，用水稀释至刻　度，摇匀，作为供试品溶液。　强碱破坏：精密称取维生素Ｂ，片粉末适量（约相　于维　生素Ｂ２２０　ｍｇ），置于２００　ｍＬ量瓶中，加入０．２　ｍｏｌ・Ｌ　氢氧　化钠溶液２　ｍＬ，室温放置２　ｈ，加０．２　ｔｏｏｌ・Ｌ　盐酸溶液２　ｍＬ，加盐酸溶液（１—　）１０　ｍＬ，振摇使维生素Ｂ　溶解，加水１０　ｍＬ冲洗瓶壁上残存的粉末，继续振摇１０　ｍｉｎ，加水稀释至刻　度，摇匀，作为供试品溶液。　氧化破坏：精密称取维生素Ｂ，片粉末适量（约相当于维　生素Ｂ：２０　ｍｇ），置于２００　ｍＬ量瓶中，加入１０％过氧化氢溶液　２　ｍＬ使样品湿润，室温放置２　ｈ，加盐酸溶液（１—２）１０　ｍＩ　，振　摇使维生素Ｂ：溶解，用水１０　ｍＬ冲洗瓶壁上残存的粉末，继　续振摇１０　ｍｉｎ，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。　高温破坏：取维生素Ｂ：片粉末，置１２０℃加热２　ｈ，放冷，　精密称取适量（约相当于维生素Ｂ　２０　ｍｇ），置于２００　ｍＩ　量瓶　中，加入盐酸溶液（１—２）１０　ｍＬ，振摇使维生素　溶解，加水　１０　ｍＬ冲洗瓶壁上残存的粉末，继续振摇１０　ｒａｉｎ，用水稀释罕　刻度，摇匀，作为供试品溶液。

・１５１２・　安徽医药Ａｎｈｕｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　２０１１　Ｄｅｃ；１５（１２）　ＨＰＬＣ法测定西他沙星的含量及有关物质　朱光宇　（安徽省马鞍山市中心医院药剂科，安徽马鞍山２４３０００）　摘要：目的建立测定西他沙星含量及有关物质的ＨＰＬＣ法。　方法采用Ｃ。　色谱柱，以０．０５　ｍｏｌ・Ｌ　磷酸二氢钾和０．０５　ｍｏｌ・Ｌ　乙酸铵（磷酸调ｐＨ２．２）－乙腈：３：１为流动相，西他　沙星含量采用等度洗脱，有关物质采用梯度洗脱，流速１．０　ｍｌ　・ｍｉｎ～，检测波长２８６　ｎｍ，柱温３Ｏ℃。结果西他沙星在　２２．６４—１１３．２０　ｍｇ・Ｌ　范围内呈良好线性关系（ｒ＝０．９９９　９）。有关物质检测限为０．５５　ｎｇ，各杂质峰与主峰分离良好。　结论该法简单方便，准确灵敏，可用于测定西他沙星含量及　有关物质。　关键词：西他沙星；高效液相色谱法；含量测定；有关物质检查　西他沙星（ｓｉｔａｆｌｏｘａｅｉｎ），２００８年６月２５日在日本上市，　由日本第一制药有限公司继左氧氟沙星后开发出的一种强力　广谱新氟喹诺酮类抗菌药，临床用其一水合物，用于严重的和　耐药菌引起的细菌感染的治疗…。目前，尚无对西他沙星的含量　及有关物质测定方法的报道。本实验通过对西他沙星含量及有　关物质的相关研究，建立了测定其含量和有关物质检查的方法。　１仪器和试药　色谱仪：为日本岛津ＬＣ一２０ＡＤ，检测器ＳＰＤ一２０Ａ；工作站：　ＣＢＭ—ＩＯＡＶＦ。色谱柱：Ｗｅｌｃｈ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ＸＢ—Ｃ１８（２５０　ｍｍ　ｘ　４．６　ｍｍ，５　ｍ），岛津公司产品。试药：西他沙星原料：由安徽中　医学院药化教研室提供，批号：２００８１１０４，２００８１１２０，　２００８１２０８。西他沙星对照品：由本品原料精制而得，批号为　２００８０９２２，按无水物计含西他沙星（ｃ，９　Ｈ　８　Ｃ１Ｆ　Ｎ３Ｏ３）为９９．　０　４　８　１２　１６　２０１３１ｉｎ　空白　７９％，水分６．５７％，最大杂质０．１０％，总杂质０．２１％，异构体　０．０８％。国外进口片：日本第一三共株式会社，５０　ｍｇ／片（批　号ＺＡＡ０００２）。乙腈为色谱纯（美国Ｔｅｄｉａ公司产品）；磷酸氢　二钾（国药集团化学试剂有限公司）；乙酸铵（国药集团化学　试剂有限公司）；纯化水（自制）。　２方法与结果　２．１色谱条件及系统适用性试验　流动相Ａ：乙腈．水相　（０．０５　ｍｏｌ・Ｌ　磷酸氢二钾和０．０５　ｍｏｌ・Ｌ　醋酸铵溶液，磷　酸调至ｐＨ２．２）＝２５：７５；流动相Ｂ：乙腈；含量测定采用流动　相Ａ进行等度洗脱，有关物质则采用梯度洗脱程序（表１），检　测波长２８６　ｎｍ，流速１．０　ｎｄ・ｒａｉｎ～。　表１　有关物质梯度洗脱程序　溶液制备：取本品适量，用流动相Ａ稀释成１　ｍｌ含西他　沙星样品４００　ｔｘｇ的溶液。　系统适用性试验：照高效液相色谱法（中国药典２００５年　版二部附录Ｖ　Ｄ）系统适用性方法下操作，量取上述西他沙星　溶液２０　ｌ，注入液相色谱仪，记录色谱图，可知理论塔板数大　于３　０００，主峰与杂质峰分离度大于１．５。　０　４　８　１２　１６　２０ｒａｉｎ　０　４　８　１２　ｌ６　２０　ｍｉｎ　对照品　样品　图１　ＨＰＬＣ色谱圈　２００５：１５２．　［３］　高雷，张平，程钢．ＨＰＬＣ法测定不同产地黄蜀葵花药材　中槲皮素的含量［Ｊ］．安徽医药，２００８，１２（５）：４１１—２．　［４］　胡弱，李启艳．ＲＰ—ＨＰＬＣ法测定垂盆草药材中槲皮素、山柰素　和异鼠李素的含量［Ｊ］．药物分析杂志，２０１０，３０（３）：１５８－６１．　［５］　王义恩．高效液相色谱法测定肾石通颗粒中槲皮素与山柰素含　量［Ｊ］．中国药业，２０１０，１９（７）：２７—８．　［６］　陈娟，师彦平．ＨＰＬＣ测定篇蓄中槲皮素和山柰素的含量［Ｊ］．　中国中药杂志，２００９，３４（４）：５６—６０．　（收稿日期：２０１１—０５—１９）

HPLC法测定西洛他唑分散片有关物质

任萃文

【摘 要】To establish a method for cilostazol dispersible tablets relative

materials, the deter-minations were carried out on a C8 column (250 mm

×4.6 mm, 5 μm) with acetonitrile:water (flow phase A) 25:75-acetonitrile:water (flow phase B) 50:50 as mobile phase;gradient elution:0

min―6 min―10 min―40 min, the ratio of phase A:phase B was

100:0―50:50―0:100―0:100.The detection UV wavelength was 254 nm.The

results in-dicated that the developed method could be used for the

determination of cilostazol impurities and its metabilite with a good

resolution.The limit of detection and limit of quantification of cilostazol

were 0.1 ng and 0.2 ng, respectively.The method was proved to be simple,

accu-rate, reproducible and feasible, and can be used for the quality

control of cilostazol dispers-ible tablets.%建立西洛他唑分散片有关物质的检测方法.采用C8柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A为乙腈-水(25:75),流动相B为乙腈-水(50:50);梯度洗脱:0―6 min―10 min―40 min,流动相A:B的比例为100:0―50:50―0:100―0:100;检测波长254 nm.结果表明,西洛他唑与各已知杂质及降解产物均良好分离,最低检测限与最低定量限分别为0.1 ng与0.2 ng,精密度良好.本方法操作简单,对西洛他唑分散片有关物质检测快速,准确,专属性强,灵敏度高.