HPLC法测定噻康唑的含量和有关物质

安徽医药Ａｎｈｕｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　２０１３　Ｆｅｂ；１７（２）　

ＨＰＬＣ法测定维生素Ｂ２片的含量及有关物质　

谢子立　（安徽省食品药品检验所，安徽合肥２３００５１）　摘要：目的建立高效液相色谱法测定维生素Ｂ　片的含量和有关物质。方法采用Ｃ．　色谱柱（２５０　ｉｎｎ×４．６　ｎｌｎｌ，５　ｍ）；以　甲醇一乙腈一１０　ｍｍｏｌ・Ｌ　庚烷磺酸钠溶液（含冰醋酸为０．５％）（５：ｌ０：８５）为流动相；检测波长：４４４　ｎｍ；流速：１．０　ｍ１　・ｒａｉｎ～’　结果在建立的色谱条件下，维生素Ｂ２能与杂质完全分离；维生素Ｂ２在０．１１１　７—０．８９３　８肛ｇ范围内线性关系良好，ｒ：１．０００；　平均回收率为１００．５％（ｎ＝９）；测定维生素Ｂ：的最小检出量为２．２　ｎｇ。结论该方法操作方便、准确，灵敏度高，专属性强，可　用于维生素Ｂ，片的质量控制。　关键词：维生素Ｂ　片；高效液相色谱法；含量测定；有关物质　ＨＰＬＣ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ．ｔａｂｌｅｔｓ　ＸＩＥ　Ｚｉ．１ｉ　（Ａｎｈｕｉ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒ　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｈｅｆｅｉ　２３００５１，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　ｆｏｒ　ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ２　ｔａｂｌｅｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｃｌ８　ｃｏｌｕｍｎ（２５０　ｍｍ×４．６ｍｍ，５　ｍ）ｗａｓ　ａｄｏｐｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｏｆ　ａ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｏｆ　ｍｅｔｈａｎｏｌ—ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ一１０　ｍｍｏｌ・Ｌ　ｓｏｄｉｕｍ　ｈｅｐｔａｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（０．５％ｇｌａｃｉａｌ　ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ）（５：１０：８５）．Ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１．０　ｍＬ・ｒａｉｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｅｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　４４４　ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ２　ｗａｓ　ｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｉｔｓ　ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ．Ａ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｂｅ—　ｔｗｅｅｎ　ｐｅａｋ　ａｒｅａ　ａｎｄ　ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ２　ｗａｓ　ａｃｈｉｅｖｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．１１１７～０．８９３８　Ｉｘｇ，ｗｉｔｈ　ｒ　ｏｆ　１．０００．Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ（ｎ＝９）ｗａｓ　１００．５％．Ｔｈｅ　ｌｏｗｅｓｔ　ｄｅｔｅｃｔａｂｌｅ　ａｍｏｕｎｔ　ｗａｓ　２．２　ｎｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ．ａｃｃｕｒａｔｅ．ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｎｄ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ２　ｔａｂｌｅｔｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ，ｔａｂｌｅｔｓ；ＨＰＬＣ；ｃｏｎｔｅｎｔ；ｒｅｌａｔｅｄ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　维生素Ｂ：别名维他命Ｂ：、核黄素等，它是人体多种辅酶　的重要组成部分，临床用于治疗口角炎、眼结膜炎、脂溢性皮　炎以及阴囊炎等。维生素Ｂ　片的现行标准收载于２０１０年版　中国药典二部…，含量测定采用紫外一可见分光光度法。鉴　于维生素Ｂ：的广泛使用，目前对维生素Ｂ：涉及含量测定的　研究相对较多，报道的其他含量测定方法有多种，如荧光分光　光度法　和高效液相色谱法　等，未见其片剂有关物质测　定的报道。本文此次采用高效液相色谱法同时测定维生素　Ｂ：片的有关物质与含量，该方法简便易行，灵敏度高，具有准　确度高以及重复性好的特点。　１仪器和试药　岛津ＬＣ－２０Ａ系列高效液相色谱仪，梅特勒ＡＧ－１３５电子　天平。　维生素Ｂ２对照品（纯度：９８．７％，批号：１００３６９－２００５０２），　由中国食品药品检定研究院提供；乙腈、甲醇均为色谱纯，庚　烷磺酸钠为离子对色谱用试剂，水为超纯水；其它试剂均为分　析纯。维生素Ｂ　片（湖北华中药业有限公司，２００９０１０２；临汾　宝珠制药有限公司，０９０１０１；广东三才医药集团有限公司，　２００９０１２４）　２方法与结果　２．１色谱条件与系统适用性试验采用岛津ＬＣ－２０Ａ系列　高效液相色谱仪，色谱柱为岛津ＶＰ—ＯＤＳ　Ｃ　柱（２５０　ｍｍ×４．６　ｍｍ，５　ｍ），流动相为甲醇一乙腈一ｌＯ　ｍｍｏｌ・Ｌ　庚烷磺酸　钠溶液（含冰醋酸为０．５％）（５：１０：８５）；检测波长为４４４　ｎｍ；　流速为１．０　ｍＬ・ｍｉｎ～；柱温为３０￣Ｃ，进样量为２０　。理论　塔板数按维生素Ｂ　峰计应不低于２　０００，维生素Ｂ　峰与其他　杂质峰分离度应符合要求。　２．２专属性研究　２．２．１各种试验样品溶液配制　空白试验：精密称取４片量　空白辅料，置于２００　ｍＬ量瓶中，加盐酸溶液（１—２）１０　ｍＬ，振　摇使维生素Ｂ：溶解，加水１Ｏ　ｍＬ冲洗瓶壁上残存的粉末，继　续振摇１０　ｍｉｎ，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。　强酸破坏：精密称取维生素Ｂ：片粉末适量（约相当于维　生素Ｂ　２０　ｍｇ），置于２００　ｍＬ量瓶中，加入０．２　ｎｌｏ］・Ｌ　盐酸　溶液２　ｍＬ，室温放置２　ｈ，加０．２　ｔｏｏｌ・Ｉ　氢氧化钠溶液２　ｍＬ，加盐酸溶液（１—２）１０　ｍＬ，振摇使维生素　溶解，加水１０　ｍＬ冲洗瓶壁上残存的粉末，继续振摇１０　ｍｉｎ，用水稀释至刻　度，摇匀，作为供试品溶液。　强碱破坏：精密称取维生素Ｂ，片粉末适量（约相　于维　生素Ｂ２２０　ｍｇ），置于２００　ｍＬ量瓶中，加入０．２　ｍｏｌ・Ｌ　氢氧　化钠溶液２　ｍＬ，室温放置２　ｈ，加０．２　ｔｏｏｌ・Ｌ　盐酸溶液２　ｍＬ，加盐酸溶液（１—　）１０　ｍＬ，振摇使维生素Ｂ　溶解，加水１０　ｍＬ冲洗瓶壁上残存的粉末，继续振摇１０　ｍｉｎ，加水稀释至刻　度，摇匀，作为供试品溶液。　氧化破坏：精密称取维生素Ｂ，片粉末适量（约相当于维　生素Ｂ：２０　ｍｇ），置于２００　ｍＬ量瓶中，加入１０％过氧化氢溶液　２　ｍＬ使样品湿润，室温放置２　ｈ，加盐酸溶液（１—２）１０　ｍＩ　，振　摇使维生素Ｂ：溶解，用水１０　ｍＬ冲洗瓶壁上残存的粉末，继　续振摇１０　ｍｉｎ，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。　高温破坏：取维生素Ｂ：片粉末，置１２０℃加热２　ｈ，放冷，　精密称取适量（约相当于维生素Ｂ　２０　ｍｇ），置于２００　ｍＩ　量瓶　中，加入盐酸溶液（１—２）１０　ｍＬ，振摇使维生素　溶解，加水　１０　ｍＬ冲洗瓶壁上残存的粉末，继续振摇１０　ｒａｉｎ，用水稀释罕　刻度，摇匀，作为供试品溶液。

国际医药卫生导报２０１２年第１８卷第１２期ＩＭＨＧＮ，Ｊｕｎｅ　２０１２，Ｖｏ１．１８　Ｎｏ．１２　

环境后，视细胞的发育仍可以恢复到正常状态１　。如果　早期发现和及时治疗，可以使患儿视力提高或恢复到　

正常水平；若不能及时发现和治疗，可造成终生视力　

低下和缺少完善的立体视功能。弱视与视觉发育有密　

切关系，在６～８岁以前发生弱视的几率较高，人们把　从出生到６～８岁这一阶段视觉发育期视为发育期或弱　

视敏感期，这一时期如果未得到及时的发现和适当的　

治疗，将会失去最佳的治疗时间，在治疗时，单一的　

治疗方法很难取得理想的疗效，只有采取综合方案才　

能得以互补而达到理想的效果。因此，早发现和早治　疗是预防儿童弱视危害的关键。　

本研究结果表明，弱视儿童通过医院集中规范综　

合治疗后，轻度弱视总有效率为９６．９７％，中度弱视总　有效率为８８．４６％，重度弱视总有效率为７３．０８％（Ｐ＜０．０５　

屈光不正性弱视总有效率为９６．４７％，屈光参差性弱视　

总有效率为８０％，斜视性弱视总有效率为７９．３　１％（　０．　

０５１。所以在治疗期间，我们不断地向患儿和家长讲解　弱视的相关知识和它对视功能的危害，讲解各种治疗　

方法的具体要求，使其理解治疗的目的和意义，主动　

配合和接受现在和将来的治疗方案，患儿之间在治疗　

弱视方面也相互交流。还要对学校老师进行相关知识　

的宣教，让老师也参与治疗。发放治疗处方和戴镜、遮　眼监督登记表，充分调动弱视儿童成长环境中关系密　

切群体的力量，充分提高治愈率。我们认为提高弱视　

患儿的治疗效果，要注意从年龄、家庭支持、学校支　持、社会关注等方面提高患儿的依从性，树立提高弱　

视儿童的治疗信心。　

参考文献　

［１］赵堪兴，杨培增．眼科学［Ｍ】　Ｅ京：人民卫生出版社，２００８：　２６３—２６６．　［２］何红涛．影ｎｌ￣ＪＬ童弱视治疗效果的因素分析［Ｊ］＿实用医技杂　志，２０１１，１８（８　８６４—８６５．　【３］苏艳，赵鸿玉，张兰华．综合疗法治疗儿童弱视疗效分析ｆＪ］．　中国实用医药，２０１１，６（１９）８７～８８．　［４］严宏．弱视【Ｍ］．北京：科学出版社，２００７：２－３，１６８．　［５】刘家琦，李凤鸣．实用眼科学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，　

HPLC法测定呋塞米中有关物质的含量

作者：wangyu 科研信息来源：文献资料 点击数： 228 更新时间：2007-12-3

[关键词]：呋塞米,高效液相色谱法,利尿药,托拉塞米,布美他尼

健康网讯：

呋塞米(Furosemide)是一种强效利尿药，应用于临床已 30余年，其标准已被2005年版《中国药典》（二部）收载。近 20年来除了托拉塞米和布美他尼，注射剂利尿药很少有新的品种产生、呋塞米注射液是一个比较成熟的品种，临床用量非常大）从呋塞米化学结构来看，呋塞米具有酰胺基，易被氧化分解，注射液的稳定性不够理想，而注射用吠塞米却能很好的解决这个问题。由于现有《中国药典》标准中还未见注射用呋塞米中有关物质的含量控制项，故笔者建立了测定注射用呋塞米中有关物质含量的高效液相色谱法。

1 仪器与试药

Shimadzu 10-VP高效液相色谱仪及CLASS-VP色谱工几作站（日本岛津公司）。

呋塞米原料药（江苏亚邦药业有限公司，纯度：99.7%，批号：030801）；注射用呋塞米（湖南中南科伦药业有限公司，规格：20mg，批号：20050220、20050221、20050222）；呋塞米注射液（山西省某药厂、安徽省某药厂、黑龙江省某药厂、海南省某药厂、河南省某药厂，规格均为每支20mg，批号：200609201、 061201、20060821、061101、060901）：四氢呋喃为色谱纯，冰醋酸为分析纯，水为超纯水

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Hypersil-ODS（150mm×4.6mm，5μm）；流动相：水-四氢呋喃-冰醋酸（70;30:1）；检测波长：254nm；流速：1.OmL·min-1；进样量：20μL。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液：精密称取呋塞米原料药适量，加流动相溶解并稀释制成浓度为1mg·mL-1的溶液，作为对照品溶液。 2.2.2

HPLC法测定噻康唑的含量和有关物质

【摘要】 目的 采用高效液相色谱法测定噻康唑的含量及有关物质。 方法 采用ODS C18色谱柱：Spherisob C18(×250mm，5μm)；保护柱(4mm×10cm)，以［甲醇∶乙腈(70∶30)］∶/L含有/L 硫辛酸的磷酸三乙胺缓冲液(58∶42，V/V)为流动相(用磷酸调pH至)，流速/min，紫外检测波长260nm。结果 HPLC法测定的线性范围为～/ml，r=，最低检测限为20ng；样品溶液在24h内稳定，日内精密度和日间精密度良好(%)。回收率为%。结论 采用HPLC法测定噻康唑的含量及有关物质的方法简便，结果可靠。

【关键词】 噻康唑 有关物质 含量测定

HPLC

Determination of the content and the

related substances of tioconazole by

HPLC

ABSTRACT Objective To determine the

content and the related substances of tioconazole by HPLC. Method The

column:ODS C18 column (Spherisob C18

(×250mm, 5μm); protect column

(4mm×10cm); the mobile phase:

［methanol∶acetonitrile (70∶30)］

triethyamine phosphate buffer (/L)

and adjusted to pH4 with phosphoric acid

(58∶42, V/V); the flow rate: /min; the

content of tioconazole and its related

substances were detected at 260nm under