产enterocin E5细菌素粪肠球菌发酵条件的优化

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响应面法优化产细菌素屎肠球菌BC-3发酵培养基

ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎＳＵｂＳｔａｎＣｅＳ
ＨＡＮＸｉ，ＺＨＵＫｕｎ，ＭＩＮＺｈｏｎｇ－ｍａｎ
（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＧｒａｉｎＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＳｈｅｎｙａｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００３４）
Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ，ｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｂｙＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃｉｕｍＢＣ一３ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｗａｓｃｏｍｐｏｓｅｄ
ｓｕｉｔａｂｌｅＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＣｕｌｔｕｒｅＭｅｄｉｕｍｏｆＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃｉｍｕＢＣ一３．ＴｈｅｏｐｔｉｍｕｍｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃｉｕｍＢＣ一３ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｍｅｄｉｕｍｒａｔｉｏｗａｓｏｐｔｉｍｉｚｅｄｂｙｔｈｅｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｍｅｔｈｏｄａｎｄｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｍｅｔｈｏｄ．

发酵食品中益生菌菌种的筛选和优化方法研究

发酵食品中益生菌菌种的筛选和优化方法研究发酵食品是一种通过微生物发酵作用来制造的食品，它具有多种益处，例如提高营养价值、改善食品口感和延长保质期等。

发酵食品中广泛存在着一种特殊类型的微生物，即益生菌。

这些益生菌，可以在人体内产生有益的生物活性物质，对维护肠道健康、增强免疫力等方面起到重要作用。

因此，对益生菌菌种的筛选和优化方法的研究具有很大的实际意义。

益生菌菌种的筛选是发酵食品中益生菌菌种的最初选择阶段。

要求所筛选出的菌种具有以下特点：1）对人体安全无毒。

2）能够在食品基质中良好地存活和繁殖。

3）对于食品材料具有优良的功能特性。

4）具有良好的抗性能力，能够在发酵过程中抵抗食品基质中的不良微生物的侵入。

目前，益生菌菌种的筛选方法主要有以下几种。

首先是传统的筛选方法。

这类方法主要是通过纸片对菌株的形态、生长特点等进行观察和鉴定。

但是，这种方法只能从表面上观察微生物型态，对于有些菌种来说，传统的方法很难有效区分。

第二种是生理和生化方法。

这类方法主要通过菌株的生理和生化特性来判断和筛选。

如菌株的耐受性能力、酶活性、细胞物质代谢能力等。

通过这些特性的判断，可以初步了解菌株的优异性。

第三种是遗传和分子生物学方法。

随着分子生物学技术的发展，逐渐应用到益生菌菌种的筛选中。

通过分析菌株的基因组、基因表达和代谢途径等，可以深入了解益生菌菌株的特点和功能。

特别是PCR技术的发展，可以快速准确地检测和筛选出具有益生菌功能的菌株。

优化方法是指通过改变发酵条件来提高益生菌发酵食品生产的效果。

目的是尽量减少有害微生物的生长，提高益生菌的生长速度和产酸能力，增强其功能特性。

具体优化方法如下：首先是调整发酵条件。

发酵条件包括温度、pH值、发酵时间等因素。

通过调整这些条件，可以改变微生物的生长环境，进而改变微生物的生理代谢过程，提高益生菌的生长速度和产酸能力。

第二种是添加培养基的改良剂。

培养基的改良剂主要是指添加有益菌株生长的微量元素、抗生素等。

重组大肠杆菌NXDX-BG16胞苷发酵条件优化及提取工艺研究

重组大肠杆菌NXDX-BG16胞苷发酵条件优化及提取工艺研究重组大肠杆菌NXDX-BG16胞苷发酵条件优化及提取工艺研究引言：随着生物制药产业的发展，利用基因工程技术重组合适的微生物株菌株，生产目标产物已成为一种常见的方法。

在该研究中，我们选取重组大肠杆菌NXDX-BG16株作为研究对象，探索其胞苷发酵条件优化及提取工艺，以实现产出高纯度胞苷的目标。

方法：首先，我们通过引物引导、反转录酶和PCR扩增等技术获得了重组大肠杆菌NXDX-BG16。

随后，将其接种到合适的培养基中，并通过单因素实验的方法，对温度、pH值、发酵时间、培养基成分等发酵条件进行优化。

结果：通过对不同温度下发酵过程中胞苷产量的测定，我们发现在37℃下，胞苷的产量最高。

进一步探索pH值对胞苷产量的影响，结果显示在pH 7下产量最高。

随后，我们研究了不同发酵时间对胞苷产量的影响，结果表明72小时是胞苷产量最大的时间点。

最后，我们优化了培养基成分，通过添加适量的氮源和碳源，显著提高了胞苷的产量。

讨论：本研究通过系统地优化发酵条件，成功提高了胞苷的产量。

通过控制温度、pH值和发酵时间，我们能够提高胞苷产量。

此外，适当调整培养基成分也对胞苷发酵起到积极的作用。

因此，在工业化生产中，我们可以通过调整这些因素，实现对胞苷产量的有效控制。

提取工艺的研究也是本研究的重点之一。

我们通过对胞苷提取工艺的优化，得到了高纯度的胞苷产物。

首先，我们选择了适当的提取剂，选择甲醇和水作为提取剂，在不同比例下进行提取实验。

通过比较不同比例下的胞苷提取率和纯度，我们发现甲醇和水1:1的比例可以获得最佳的提取效果。

接下来，采用过滤、浓缩、结晶等工艺对胞苷进行进一步纯化。

最终，通过液相色谱、红外光谱等方法对提取得到的胞苷进行了表征和确认。

结论：通过对重组大肠杆菌NXDX-BG16胞苷发酵条件的优化和提取工艺的研究，本研究实现了对胞苷产量的显著提高，以及对高纯度胞苷的获得。

大肠杆菌培养基的优化及发酵罐操作 ppt课件

时，乙酸开始产生。可以通过降低温度，调节酸碱度，
控制补料等方法来降低比生长速率。
2、透析培养：在大肠杆菌的培养过程中可以用透析
技术除去发酵液中的有害物质，降低乙酸含量从而实
现重组菌的高密度发酵和产物的表达。
3、控制葡萄糖的浓度：葡萄糖是大肠杆菌发酵过程
中重要的碳源之一，用其作碳源是要将其控制在一个
较低的水平上，以减少乙酸的产生。
灭菌121℃, 15min.
培养基配制
➢配制种子固体培养基100mL ，分装试管，
0.1MPa 灭菌20min，然后摆成斜面。
➢配制种子培养液600mL，分装50mL于一个
250mL三角瓶中（作一级种子瓶），余下
550mL平均分装于三个500mL三角瓶中（作
二级种子用），同上灭菌。
培养方式
微生物的培养方式主要有分批、连续和补料分批3种。
极、DO电极（75%酒精消毒、UV消毒）接
入发酵罐，连接各电极导线。
上罐前的准备及实罐灭菌
9、将流加碱的管线与泵和罐体连接，通过面
板操作开关选择碱泵，打开手动开关，使
胶管内充满液体，将输出上限设在15%，
下限设为“0”，待一切准备就绪，将“手
动”开关调节到“自动”状态。
10、设定搅拌转速为300r/min、空气流量
大肠杆菌培养基的优化及发酵罐操作
1
大肠杆菌高密度发酵
第二组
小组长：李青
小组成员：韩娇月、李洋、冯春红、胡建
贝、倪娜娜、常亚培、许志扬、李瑞兵、
郭荣欣
精品资料
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否会认为老师的教学方法需要改进？
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细菌素应用的理论与实践

细菌素应用的理论与实践尚雅婧;张日俊【摘要】细菌素是细菌在代谢过程中由核糖体合成基因编码的一类具有生物活性的多肽或蛋白质类物质,因其高效、无毒、耐高温、无残留、无抗药性及良好的生物相容性等优点,得到国内外学者青睐.细菌素在生物饲料添加剂、生物兽药及人类医药保健和食品生物防腐剂的研发中有着广泛的应用价值和广阔的应用前景.作者就细菌素的理论研究及其在畜牧业、水产养殖业、医药保健中的应用价值和应用现状进行了综述.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2010(037)005【总页数】5页(P26-30)【关键词】细菌素;应用;现状;前景【作者】尚雅婧;张日俊【作者单位】中国农业大学饲料生物技术实验室动物营养学国家重点实验室,北京,100193;中国农业大学饲料生物技术实验室动物营养学国家重点实验室,北京,100193【正文语种】中文【中图分类】S816.73近年来,食品安全的呼声日益提高,疾病防治和解决药物残留问题关系着人类和动物的健康与安全。

目前亟待开发出无毒、无残留、安全、高效的绿色生物饲料添加剂、微生态制剂、生物药品来替代传统的抗生素类药品。

由于细菌素独特的优点,使其成为替代抗生素的首要选择。

1 细菌素的理论研究1.1 细菌素的定义细菌素(bacteriocin)约在100年前首次被发现,是大肠杆菌V产生的一种可抑制大肠杆菌S生长的热不稳定物质,并命名为大肠杆菌素(Colicin)(Gratia,1925)。

目前公认为细菌素是由某些细菌在代谢过程中通过核糖体合成机制产生的一类具有生物活性的多肽或蛋白质类物质。

对于某些细菌产生的非确定性的蛋白质类抗菌物质,常用类细菌素(bacteriocin-like)的说法来代替,在这里也统称为细菌素。

细菌素对于产生菌相近的菌株有特异性(Kirkup等,2006)。

99%的细菌可以产生至少一种细菌素(Klaenhammer,1988)。

1.2 细菌素与抗生素、其他抗菌肽的区别1.2.1 细菌素与抗生素的区别细菌素与抗生素的最主要区别为细菌素是通过核糖体合成的即由基因编码,具有自身免疫性,选择性地抑制或杀伤敏感菌并且不产生耐药性。

粪肠球菌产伏尔加霉素E5的生物学特性研究

粪肠球菌产伏尔加霉素E5的生物学特性研究张永红;李焕荣;阮文科;鲍宇晖;陆彦;崔德凤【摘要】为了确定分离自健康猪胃肠道粪肠球菌产生的细菌素伏尔加霉素E5 (enterocin E5)的生物学特性,本研究检测了该细菌素对热、酸碱、酶类的耐受性及其抗菌谱,enterocin E5经过121℃高压处理10min对指示菌抑菌活性没有影响；细菌素于pH 2～12作用后,对大肠埃希菌仍有抑菌活性,最强的pH抑菌活性范围为pH 4～6；enterocin E5对胰蛋白酶和蛋白酶K处理敏感,过氧化氢酶、脂肪酶和淀粉酶对其抑菌活性没有影响；enterocin E5对21株动物源病原微生物具有抑制作用,革兰阴性病原菌包括大肠埃希菌、鸡白痢沙门菌、鸡伤寒沙门菌、多杀性巴氏杆菌等,特别对产生多重抗药性的3株鸡伤寒沙门菌具有明显的抑菌活性.抑制革兰阳性金黄色葡萄球菌、马腺疫链球菌、猪链球菌,对炭疽芽胞杆菌弱毒株和蜡样芽胞杆菌产生显著的抑菌活性.结果表明,enterocin E5对酸碱是比较稳定的,具有很宽泛的pH耐受范围,属于热稳定Ⅱa亚型细菌素,能够作为一种抗菌物质防控动物源细菌病.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2013(034)004【总页数】6页(P50-55)【关键词】肠球菌;伏尔加霉素E5;生物学特征;抑菌谱【作者】张永红;李焕荣;阮文科;鲍宇晖;陆彦;崔德凤【作者单位】北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京农学院动物科学技术学院,北京102206;兽医学(中医药)北京市重点实验室,北京102206【正文语种】中文【中图分类】S859.796很多微生物能够产生各种具有抗菌活性的物质。

在这些抗菌物质组成中包括由乳酸菌产生的一类物质，称之为细菌素（bacteriocins）。

产细菌素屎肠球菌E6的特性分析及发酵条件优化_饶瑜

收稿日期： 2012－09－13 * 通讯联系人作者简介：饶瑜( 1982－ ) ，女，博士，讲师，研究方向: 食品生物技术。基金项目: 西华大学重点科研基金项目( Z1120536) 。
为了进一步将该菌株进行实际应用，本研究探讨了屎肠球菌 E6 的抑菌特性，并采用了响应曲面法［8－9］对屎肠球菌 E6 的发酵条件进行了优化，并采用 Design Expert 统计分析软件分析了产细菌素的最佳条件，为该菌株的进一步开发利用奠定科学基础。
Box－Behnken design，was cultured at pH 5.1，temperature of 31.0℃ for 36.0h.Under this condition，the diameter of
inhibition zone reached up to 20.17mm，which increased by 27.2% than optimization before.
Key words: Enterococcus Faecium E6; bacteriocin; biological characteristics; response surface;
fermentative condition
中图分类号： TS201.3
文献标识码： A
文章编号： 1002－0306（ 2013） 07－0199－04
60 15.64 ± 0.20
80 13.82 ± 0.51
100 13.08 ± 0.63
121 10.24 ± 0.26
尺成都量具刃具总厂。
1.2 实验方法
1.2.1 发酵液的制备将冷冻保藏的屎肠球菌 E6 划线于 MRS 固体培养基中，37℃ 培养过夜；挑取单克隆于 5mL 液体培养基，30℃ 静置培养过夜。1% 接种于 20mL MRS 液体培养基（ pH6.0，50mL 锥形瓶）， 30℃ 静置培养 24h，10000r / min 离心 10min，取上清液，4℃ 保存备用。 1.2.2 抑菌实验采用牛津杯扩散法测定发酵液的抑菌能力。取 50μL 新鲜培养的指示菌（ 0D600nm = 0.5）涂布固体培养基，将菌液涂干后，用无菌镊子将已灭菌的牛津杯轻压放置于平板上。取制备好的发酵液，用 1mol / L HCl 或 1mol / L NaOH 调 pH 至 6.0，吸取 250μL 加入牛津杯中，37℃ 培养 24h 后，用游标卡尺测量抑菌圈（其中牛津杯外径为 8.00mm），测量三次取平均值。 1.2.3 细菌素特性分析本实验指示菌为枯草芽孢杆菌。分别配制 1mg / mL 的蛋白酶 K、胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶，将各种酶与等体积的发酵上清液混合，对照为无蛋白酶，置 37℃ 保温 1h，进行抑菌实验，测量抑菌直径；取等量的发酵上清液，用 1mol / L HCl 或 1mol / L NaOH 将 pH 分别调至 3.0、5.0、7.0、 9.0、11.0，对照分别为 pH3.0、5.0、7.0 的 MRS 液体培养基，进行抑菌实验，测量抑菌直径；分别将等量的发酵上清液在 60、80、100、121℃ 加热 20min 后，进行抑菌实验，测量抑菌直径。 1.2.4 响应面法优化屎肠球菌 E6 发酵条件在单因素实验结果的基础上，选取培养时间（ h），培养温度（ ℃ ）和培养基 pH 三个因素，运用 Design － Expert 7.1.6 软件，采用 Box － Behnken 设计，以抑菌圈直径（ mm）为响应值进行实验，所有实验点重复 3 次，实验设计如表 5 所示。根据实验结果拟合得到一个二阶经验方程，用以确定各因素对发酵上清液抑菌活性的影响，最终确定屎肠球菌 E6 产细菌素的最优培

一株猪源粪肠球菌DT_02的培养基优化

一株猪源粪肠球菌 DT － 02 的培养基优化尹望杜志琳李雪平北京好实沃生物技术有限公司，北京101399摘要在成功筛选到一株猪源粪肠球菌 DT －02 后，首先在 M ＲS 培养基的基础上对该菌进行培养基优化。

先进行单因素优化，后进行正交设计试验，最终得的最优培养基组合为葡萄糖 3. 0%、蛋白胨 3. 0% 、 MnSO 4 ·H 2 O 0. 07 g / L 、酵母粉 1% 、无水乙酸钠 1. 4% 、柠檬酸氢二铵 0. 5% 、MgSO 4 ·7H 2 O 0. 2% 、K 2 HPO 40. 2% 和吐温－80 0. 4% 。

优化后的 M ＲS 培养基使摇瓶发酵活菌数提升了 58. 79% 。

关键词粪肠球菌; 培养基优化; 单因素优化; 正交设计中图分类号: 文献标志码: 文章编号: 1002－ 2813 ( 2015) 01 － 00018 － 04 S816. 3 A10. 13557 / j . cnki. issn 1002 － 2813. 2015. 01. 005 DOI 编号: ml / L ，pH 6. 8。

肠球菌属是人和恒温脊椎动物肠道内的革兰阳性菌，有着非常重要的医学意义。

肠球菌广泛存在于各种乳制品和发酵食品中，不仅能够影响食品的风味和质地，还能产生乳酸、有机酸、乙醇、过氧化氢、双乙酰和细菌素等许多抑菌物质。

如一些肠球菌素具有广谱抗菌作用。

粪肠球菌作为肠球菌属最常见的一种，现已作为益生菌和发酵剂广泛用于微生态制剂、保健食品及发酵食品的工业生产中。

文章通过单因素优化及正交设计对一株猪源粪肠球菌进行了培养基优化，为该菌应用于微生态制剂提供理论基础。

温－ 80 1 M ＲS 固体培养基: 牛肉膏 10、酵母膏 5、葡萄糖20、无水乙酸钠 5、柠檬酸氢二铵 2、MnSO 4 · H 2 O 0. 05、K 2 HPO 4 2、Mg SO 4 ·7H 2 O 0. 2 和琼脂粉 g / L ，吐温－ 80 1 ml / L ，pH 6. 8。

实验四大肠杆菌发酵培养基的优化课件

实验四大肠杆菌发酵培养基的优化
5
v 2.基本工具——正交表 v 记号：Ln（tm）
™ L：正交表的符号 ™ n：表的行数（可安排试验的次数） ™ t：表中的字码数（水平数） ™ m：表的列数（最多可安排因素个数）
v L8(27) L9(34) L16(45)
实验四大肠杆菌发酵培养基的优化
6
实验四大肠杆菌发酵培养基的优化
™ 1）确定因素（A、B、C……） ™ 2）选择因素的变化范围 ™ 3）确定因素水平数 ™ 4）制定因素水平表
因素水平 A淀粉/% B黄豆饼粉 C蛋白胨
/%
/%
1
5
3
0.2
2
7
5
0.4
3
9
7 0.6 实验四大肠杆菌发酵培养基的优化
9
v （3）设计试验方案
™ 1）选择正交表 ™ 2）表头设计（不混杂） ™ 3）列出试验方案 ™ 4）进行实验
实验四大肠杆菌发酵培养基的优化
23
实验结果
v 填写正交实验表，分析数据，确定最优培养基配方
实验四大肠杆菌发酵培养基的优化
24
表3 正交表实验结果记录及分析
因素
实验1 实验2 实验3 实验4 实验5 实验6 实验7 实验8 实验9
k1
A酵母浸膏 /%
1(0.2) 1(0.2) 1(0.2) 2(0.5) 2(0.5) 2(0.5) 3(0.8) 3(0.8) 3(0.8)
k2 k3
(X4+X5+X6)/3 (X2+X5+X8)/3 (X2+X6+X7)/3
(X7+X8+X9)/3
(X3+X6+X9)/3

屎肠球菌细菌素EnterocinE9SPE_HPLC分离纯化方法的建立

收稿日期：２０１４－０４－１５；网络出版时间：２０１４－０５－０７１６：４５基金项目：北京市教委面上项目（ＫＭ２０１１１００２０００５）作者简介：鲍宇晖（１９８８－）男，硕士研究生，研究方向为动物微生物学与免疫学，Ｅ－ｍａｉｌ：ｂａｏｙｕｈｕｉ１９８８＠ｑｑ．ｃｏｍ，
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅａｉｍｏｆｔｈｉｓｗｏｒｋｗａｓｔｏｏｂｔａｉｎｔｈｅｐｕｒｉｆｉｅｄＥｎｔｅｒｏｃｉｎＥ９ｗｉｔｈｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉ－ｔｙ．Ａｎｅｗｍｅｔｈｏｄｂａｓｅｄｏｎｏｎ－ｌｉｎｅｓｏｌｉｄ－ｐｈａｓｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＳＰＥ）ｃｏｕｐｌｉｎｇｔｏｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏ－ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）ｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＥｎｔｅｒｏｃｉｎＥ９，ｈａｓｂｅｅｎｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｓｗｅｒｅｆｉｎ－ｉｓｈｅｄｂｙｂａｃｔｅｒｉａｌｃｕｌｔｕｒｅ，ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎａｎｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｖａｌｉｄａｔｉｏｎｐａｒａｍｅｔｅｒｓｓｕｃｈａｓｔｈｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ，ｆｌｏｗｒａｔｅａｎｄｅｌｕｔｉｏｎｔｉｍｅｅｔａｌ，ｗｅｒｅｄｅｔｃｔｅｄｂｙＳｅｐｂｏｘ２Ｄ－２５０ａｕｔｏｍａｔｉｃｔｗｏ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｌｉｑｕｉｄｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ．ＴｈｅｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎａｎｄｖａｌｉｄａｔｉｏｎｏｆａＳＰＥ／ＨＰＬＣｆｏｒ
ｔｈｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＥｎｔｅｒｏｃｉｎＥ９ｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．Ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｈｏｍｏｇｅｎｅｉｔｙｗａｓａｓｍｕｃｈａｓ２．４ｔｉｍｅｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｔｈｏｓｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓａｍｐｌｅｓ．Ｉｎｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ｉｔｉｎｄｉｃａｔｅｄＴｈｉｓｎｅｗｍｅｔｈｏｄｉｓｒａｐｉｄ，ｓｉｍｐｌｅ，ａｎｄｓｅｎｓｉｔｉｖｅ．Ｉｔｃｏｕｌｄｂｅａｎｅｆｆｉｃｉｅｎｔｗａｙｆｏｒｆｕｒｔｈｅｒｓｔｕｄｙｉｎｇｔｈｅｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＥｎｔｅｒｏｃｉｎＥ９；ＳＰＥ／ＨＰＬＣ；ｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ａｎｔｉ－ｂａｃｔｅｒｉａ

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Ｅ５ｔｒｄｃｎｔｒｃｎＥ５ｒｎａｏｌｗｓｔｔｎ％，ｅｓｘｒｃｗｄｒ０．ｏｐｏｕｅｅｅｏｉａｓｆｌｏ：ｒｏｅ１ｙｐｙａｔｅｔａｔｐｏｅ５％，ｌｃｓ％，ｕｒｓ５％ｇｕｏｅ１ｓｃｏｅ０．
Ａｂｔａｃ：Ｔｏｎｅｔｇｔｔｅｅｍｅｔｔｏｃｎｄｔｎｆｒｒｗｔａｄｎｉａｔｒａｓｂｓａｃｐｏｕｔｎｙｓｒｔｉｖｓｉｏｇｏｈｎａｔｃｅｉｌｕｔｎｅｒｄｃｉｂｉｂｏ
）ｈｅｄ，ｔｅｓｅ
ａｅｏ１ｈｎｔｅｅｍｅｔｔｏｐｒｏｏ１ｈ．Ｔｈｓｇｆ４ａｄｈｆｒｎａｉｎｅｄｆｉ６ｉｗａｔｅｉｒｔｅｏｔｎｎｅｏｉＥ５ｒｄｕｅｂｓｈｆｓｒｐｒｏｅｔｒｃｎｐｏｃｄｙ
ｉｉａｐｖｌｅｗａ．ｗｈｌｅｂｓｔｍｐｒｔｒｓ７ｗｉｈｎｃｌｔｎａｕｔｆ％（ｎｔｌＨａｕｓ５，ｉｔｅｔｅｅａｕｅｗａ ℃ ｉ６ｅｈ３ｔｔｅｉｏｕａｉｍｏｎｈｏｏ２
ＥｔｒｃｃｕａｃｌＥｓｌｔｄｆｍｅｊｎｌｃｉｗｎ．ｎｅｏｏｃｓｆｅａ￣５ｉｏａｅｒＢｉｇｂａｋｓｘｓｉｅｏｉ
菌的首次报道。
［关键词］粪肠球菌；ｎｅｏｉ５发酵条件；菌活性ｅｔｒｃＥ；ｎ抗ＳｔｙｏｈｕｄｎｔｅＯｐｔｍｕｍｎｔｒｃｎＥ５ＰｒｄｔｏｎｄｔｏｉｅｅｏｉｏｕｃｉｎＣｏｉｉｎ
ＥｔｏｏｃｓａｃｌＥ，ｅａｔａｔａａｔｉｆｈｕｅｎｔｔｇｉｓＥｃｅｉｉｃｌＫ８ｗｓｔｓｄｗｔｎｅｃｃｕｆｅａ￣５ｔｎｉｃｅｌｃｉｔｏｔｅｓｐｒａｎａａｎｔｓｈｒｈａｏｉ８ａｅｔｉｒｈｂｒｖｙｉａｃｅｈ
ＭＲＳ培养基，最适温度为３￣最适起始ｐ值６５最佳接种量２，７Ｃ，Ｈ．，％种龄１，４ｈ发酵时间１，６ｈ最佳培养基组分氮源为１％胰蛋白胨、．％酵母浸粉，０５最佳碳源为１葡萄糖、．％蔗糖，．％％０５０１Ｔｅｎ一８ｗｅ０有利于ｅｔｏｉＥｎｅｃｎ５的产生。这是分离自北京优良商品猪黑六产ｅｔｏｉＥｒｎｒｃ５粪肠球ｅｎ
ａａｌｄｆｓｏｔｏ．ＴｅｒｓｌｈｗｅｈｔｔｅｏｔｍｅｍｅｔｔｎｃｎｉｏｓｆｒＥｎｅｏｏｃｓａｃｌｇｒｗｅｌｉｕｉｎｍｅｈｄｈｅｕｔｓｏｄｔａｈｐｉｆｓｍｕｆｒｎａｉｏｄｔｎｔｒｃｃｕｅａ￣ｏｉｏｆ
２１，５３：３～７崔德凤，０１４（）１１／等
中国兽药杂志
产ｅｔｏｉ５细菌素粪肠球菌发酵条件的优化ｎｅｃＥｒｎ
崔德凤周波杨桂梅李焕荣阮文科汪明，，，，，，张永红
（．京农学院动物科技学院，北京１北１２０；．０２６２中国农业大学动物医学院，京北１０９）０１３
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［收稿日期］００—１２［２１２— ９文献标识码］Ａ［文章编号］０２—１８２１）３— ０３—０［１０２０（０１００１５中图分类号］￥５．１８２６１
［摘要］采用琼脂扩散法测定粪肠球菌发酵上清液对大肠埃希菌Ｋ８的抑菌活性，而确定８从产ｅｔｒｃ５细菌素粪肠球菌的发酵条件。结果表明，ｎｅｏｉＥｎ粪肠球菌Ｅ５产细菌素的发酵培养基为