屎肠球菌
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屎肠球菌的检测1、设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下。
1.1恒温培养箱和恒温厌氧培养箱:37℃±1℃。
1.2冰箱:2℃~5℃。
1.3天平:感量为0.1g。
1.4均质器及无菌均质袋、均质杯。
1.5振荡器。
1.6无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。
1.7无菌锥形瓶:容量250mL、500mL。
1.8无菌培养皿:直径90mm。
1.9显微镜:10倍~100倍。
1.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。
2、培养基和试剂2.1 屎肠球菌选择性琼脂培养基2.1.1 屎肠球菌选择性琼脂培养基成分胰蛋白胨20.0g 酵母浸膏5.0g 葡萄糖2.0g 磷酸氢二钠4.0g 磷酸氢二钾4.0g 琼脂20.0g 溴甲酚紫0.015g 叠氮化钠0.4g 2,3,5-氯化三苯四氮唑 0.1g 蒸馏水1000mL2.1.2制法将上述成分加于蒸馏水中,煮沸溶解,补足蒸馏水至1000mL,于25℃时调节pH 至7.4±0.2,分装于适宜容器中,煮沸5min,冷至50℃左右,倾入无菌平皿,备用。
2.2肠球菌肉汤2.2.1肠球菌肉汤成分蛋白胨17.0g 牛肉浸膏3.0g 酵母浸膏5.0g 牛胆粉10.0g氯化钠5.0g 柠檬酸钠1.0g 七叶苷1.0g 柠檬酸铁铵0.5g叠氮化钠0.25g 蒸馏水1000mL2.2.2制法将上述成分加于蒸馏水中,煮沸溶解,补足蒸馏水至1000mL,于25℃时调节pH至7.1±0.2,分装于适宜容器中,121℃灭菌30min。
2.3无菌生理盐水2.3.1成分氯化钠8.5g 蒸馏水1000mL2.3.2制法称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15min。
2.4 革兰氏染色2.4.1结晶紫染色液2.4.1.1 成分结晶紫1g 95%乙醇20 mL 1%草酸铵水溶液80 mL2.4.1.2制法将结晶紫溶解于乙醇中,然后与草酸铵溶液混合。
屎肠球菌的背景与概述及多种应⽤!屎肠球菌的背景与概述及多种应⽤!⼀、背景及概述⼆、应⽤1、制备饲料添加剂CN201810511919.5提供⼀种新的单⼀型屎肠球菌饲料添加剂,该屎肠球菌饲料添加剂不但具有菌体稳定,菌体存活时间长,且所采⽤的辅助性材料具有⼀定的粘附性和吸附性,能使菌体较好与辅助性材料黏合于⼀体,同时,其辅助性添加料具有⼀定的酸性,对动物饲⾷后,不仅能提供丰富的营养物质,同时其酸性物质能保持胃内pH值相对恒定,进⼊⼩肠后继续达到酸化的功效。
其⽬的是提供⼀种更具稳定性和营养性的屎肠球菌饲料添加剂。
本发明的屎肠球菌饲料添加剂的特征是由屎肠球菌与⼀定量的沙棘粉、刺梨粉、酸浆粉、⿊加仑粉、仙⼈掌粉和发酵蛋壳粉均匀混合,得到⼀种新的屎肠球菌饲料添加剂,此添加剂的菌体稳定,菌体存活时间长,⽽且沙棘粉、刺梨粉、酸浆粉、⿊加仑粉含糖量⾼,特别是仙⼈掌粉都具有较好的黏附性能,发酵蛋壳粉还具有较好的吸附性。
其中沙棘、刺梨、酸浆、⿊加仑均是⾼含量维⽣素C的果类,其酸性极强,不仅给养殖动物提供丰富的维⽣素等营养物质,其饲⾷后的酸性物质起到了很好的促进消化的效果。
2、制备屎肠球菌菌粉a、将屎肠球菌菌种接种于MRS液体培养基,在25~40有氧或兼性条件下培养8~16⼩时,成为种⼦液;b、将步骤a所获得的种⼦液接种在发酵罐中进⾏发酵培养,采⽤改良的MRS液体培养基为发酵培养基,在25~40厌氧条件下,采⽤定时或连续补料分批发酵⽅式培养8~48⼩时;c、将b步骤所获得的发酵液加⼊质量分数为10%~40%的⼲燥保护剂和卵黄粉,添加⽅式为:发酵液1000ml中,加⼊质量分数为0.2%~0.5%的吐温60,然后缓缓加⼊⼲燥保护剂,边加边搅拌,直⾄混匀;然后在混合匀浆中加⼊质量分数为5~15%的卵黄粉,边加边搅拌,直⾄混匀制成菌液混合物,继续搅匀后进⾏喷雾⼲燥制成菌粉。
本发明的优点在于:可调整猪肠道菌群,提⾼机体的免疫细胞⽔平,加固肠道屏障功能,加强机体对营养物质的消化吸收,促进畜禽⾼效增重,⽣产⼯艺简单,可提供成本低的屎肠球菌菌粉。
屎肠球菌形态特征
屎肠球菌是一种革兰氏阳性球菌,其形态特征包括:
1. 形状:屎肠球菌通常呈现为圆形或椭圆形的细菌细胞。
2. 大小:细胞的大小一般在0.5-1.5 微米之间。
3. 细胞壁:屎肠球菌的细胞壁具有一定的厚度,由革兰氏阳性菌特有的多层结构组成。
4. 染色特性:经过革兰氏染色后,屎肠球菌会呈现出紫色或深蓝色,这是革兰氏阳性菌的特征染色结果。
5. 排列方式:在显微镜下观察,屎肠球菌可以呈现出单个细胞存在、成双排列、链状排列或簇状排列等不同的形式。
6. 表面结构:屎肠球菌的表面可能具有一些特殊的结构,如荚膜、鞭毛等,但这些特征并非所有屎肠球菌都具备。
需要注意的是,屎肠球菌的形态特征可能会受到培养条件、生长阶段和检测方法等因素的影响。
此外,显微镜下的观察只是对屎肠球菌形态的初步描述,更详细的鉴定还需要结合其他生物学特性和分子生物学方法进行。
如果你对屎肠球菌的具体形态特征或其他相关信息有更深入的需求,建议参考微生物学教材、专业文献或咨询微生物学家以获取更准确和详细的信息。
同时,在进行微生物的鉴定和研究时,应遵循科学的方法和标准操作程序,以确保结果的准确性和可靠性。
产细菌素屎肠球菌的筛选鉴定及其抑菌特性张 明,罗 强,魏 婕,刘 巧,罗 璠*(西南民族大学生命科学与技术学院,青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室,四川 成都610041)摘 要:从采自四川红原的传统发酵酸乳中分离得到308 株疑似乳酸菌,通过96 孔板法初筛和平板打孔法复筛,筛选出1 株具有明显抑菌作用的菌株SC-Y112。
通过形态学观察、16S rDNA序列同源性分析和ropA管家基因序列同源性分析结合生理生化实验,鉴定该菌株为屎肠球菌(Enterococcus faecium)。
通过排酸及排除H2O2影响后,该菌株的发酵上清液仍具有明显抑菌活性,经蛋白酶处理后,抑菌效果明显消失或下降,说明发酵上清液中的抑菌成分具有蛋白质性质。
进一步探究该菌株所产细菌素的生物学特性、遗传稳定性及抑菌特性表明,该细菌素在菌株接种后6 h产生,12 h达到最高;菌株在连续传代86 代内,产细菌素能力较为稳定;细菌素在 pH 3.0~7.0的条件下稳定,在100 ℃处理30 min后仍具有抑菌活性;SC-Y112所产细菌素具有广谱抗菌性,对单核细胞性李斯特菌有明显的抑菌活性。
关键词:发酵酸乳;屎肠球菌;细菌素;抑菌Screening for and Identification for Bacteriocin-producing Enterococcus faecium and Its Antibacterial PropertiesZHANG Ming, LUO Qiang, WEI Jie, LIU Qiao, LUO Fan*(Key Laboratory of Qinghai-Tibet Plateau Animal Genetic Resource Reservation and Exploitation, Ministry of Education, College of Life Science and Technology, Southwest Minzu University, Chengdu610041, China)Abstract: A total of308 strains suspected of being Lactobacillus were isolated from traditional fermented yoghurt collected from Hongyuan, Sichuan province, and were screened by 96-well plate method and agar well diffusion method. Among these strains, SC-Y112 was selected for its obvious antibacterial effect. It was identified as Enterococcus faecium by morphological observation, 16S rDNA and ropA housekeeping gene sequencing analysis, and physiological and biochemical tests. After removing the influence of organic acid and hydrogen peroxide, the fermentation supernatant of the strain still had considerable antibacterial activity. The antibacterial effect decreased and even disappeared after being treated with protease, which indicated that the antibacterial components in the fermentation supernatant were proteins. Further, the biological characteristics, genetic stability and bacteriostatic characteristics of the bacteriocin produced by the strain were investigated, which showed that the bacteriocin was produced at 6 h and reached the maximum at 12 h after inoculation; the bacteriocin production ability was relatively stable within 86 consecutive generations; the bacteriocin was stable under the condition of pH 3.0-7.0 and heat-treatment at 100 ℃ for 30 min. The bacteriocin had a wide antibacterial spectrum, especially against Listeria monocytogenes.Keywords: fermented yogurt; Enterococcus faecium; bacteriocin; inhibitionDOI:10.7506/spkx1002-6630-20191213-147中图分类号:Q93.3 文献标志码:A 文章编号:1002-6630(2021)06-0171-07引文格式:张明, 罗强, 魏婕, 等. 产细菌素屎肠球菌的筛选鉴定及其抑菌特性[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 171-177. DOI:10.7506/ spkx1002-6630-20191213-147. ZHANG Ming, LUO Qiang, WEI Jie, et al. Screening for and identification for bacteriocin-producing Enterococcus faecium and its antibacterial properties[J]. Food Science, 2021, 42(6): 171-177. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/ spkx1002-6630-20191213-147. 收稿日期:2019-12-13基金项目:西南民族大学研究生“创新型科研项目”(CX2017SZ046)第一作者简介:张明(1993—)(ORCID: 0000-0003-4252-5342),男,硕士研究生,研究方向为饲料微生物。
粪肠球菌的作用及功能主治粪肠球菌的介绍粪肠球菌(Fusobacterium nucleatum)是一种常见的肠道细菌,被广泛存在于人类的口腔和胃肠道中。
它属于厌氧菌,可以在缺氧环境中存活和繁殖。
粪肠球菌以其特殊的形态和功能,在人类身体中扮演着重要的角色。
粪肠球菌的主要功能粪肠球菌在人体内发挥以下主要功能:1.消化食物:粪肠球菌参与食物的消化,特别是对于纤维素的分解和吸收具有重要作用。
它可以分解纤维素和其他复杂多糖,产生有益的短链脂肪酸,如丙酸、丁酸和乳酸等,为人体提供能量和营养物质。
2.调节免疫系统:粪肠球菌参与调控人体的免疫系统,维持肠道免疫的平衡。
它能够与肠道黏膜上的免疫细胞相互作用,促进免疫细胞的成熟和功能的调节,增强肠道的抵抗力,预防炎症和感染。
3.保持肠道平衡:粪肠球菌与其他肠道菌群一起维持肠道的微生态平衡。
它可以抑制一些有害菌的生长,防止其过度繁殖,从而保护肠道健康。
此外,粪肠球菌还可以与其他益生菌相互作用,促进其生长和功能,进一步增强肠道的益菌群落。
4.抗肿瘤作用:最近的研究表明,粪肠球菌可能具有一定的抗肿瘤活性。
它可以诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞的增殖,对一些肿瘤类型具有一定的杀伤效果。
这一发现为粪肠球菌在肿瘤治疗中的潜在应用提供了新的思路。
粪肠球菌的功能主治粪肠球菌的多种功能使其具备一定的功能主治能力,主要包括以下方面:1.促进肠道健康:粪肠球菌可以促进肠道的蠕动,减少便秘和消化不良等症状。
它还能够减少肠道内有害菌的数量,预防肠道感染和炎症。
2.增强免疫力:粪肠球菌可以调节人体免疫系统的平衡,增强免疫力,预防感冒、流感和其他感染性疾病。
3.改善口腔健康:粪肠球菌存在于口腔中,与口腔健康密切相关。
它可以抑制一些致病菌的生长,减少口腔感染和龋齿的发生。
4.调节肠道菌群:粪肠球菌可以与其他肠道菌群相互作用,维持肠道微生态的平衡。
它能够促进有益菌的生长,减少有害菌的数量,预防肠道菌群失调导致的相关疾病。
屎肠球菌及粪肠球菌临床感染的分析研究在临床感染领域,屎肠球菌和粪肠球菌是常见的病原菌,给患者的健康带来了一定的威胁。
深入了解这两种细菌的感染特点、致病机制以及防治策略,对于提高临床诊疗水平具有重要意义。
屎肠球菌和粪肠球菌都属于肠球菌属,它们在形态、生理特性等方面有一定的相似性,但在临床感染中的表现却存在一些差异。
从感染部位来看,屎肠球菌和粪肠球菌均可引起泌尿系统感染、腹腔感染、败血症等。
然而,在泌尿系统感染中,粪肠球菌相对更为常见,而屎肠球菌则在腹腔感染和败血症中出现的频率较高。
这可能与它们对不同组织和环境的适应能力有关。
在致病机制方面,这两种肠球菌主要通过黏附、侵袭和产生毒素等方式导致感染。
它们能够黏附在宿主细胞表面,突破机体的防御屏障,进而侵入组织内部。
同时,它们还能分泌一些酶和毒素,破坏宿主细胞的正常功能,引发炎症反应。
屎肠球菌和粪肠球菌的耐药情况也是临床关注的重点。
随着抗生素的广泛使用,这两种细菌的耐药性逐渐增强。
例如,它们对青霉素、氨苄西林等传统抗生素的耐药率有所上升。
此外,耐万古霉素肠球菌(VRE)的出现更是给临床治疗带来了巨大挑战。
屎肠球菌对万古霉素的耐药率通常高于粪肠球菌,这使得屎肠球菌感染的治疗更加困难。
对于屎肠球菌和粪肠球菌感染的诊断,临床通常依靠细菌培养和药敏试验。
通过采集患者的血液、尿液、脓液等标本进行培养,可以明确是否存在肠球菌感染,并确定其具体种类。
药敏试验则能够帮助医生了解细菌对各种抗生素的敏感性,从而选择合适的治疗药物。
在治疗方面,应根据药敏试验结果选择敏感的抗生素。
对于敏感菌株感染,青霉素、氨苄西林等仍然是有效的治疗选择。
然而,对于耐药菌株感染,尤其是 VRE 感染,治疗方案则较为复杂。
可能需要联合使用多种抗生素,或者使用新型抗菌药物,如利奈唑胺、达托霉素等。
同时,在治疗过程中,还需要密切关注患者的病情变化,及时调整治疗方案。
预防屎肠球菌和粪肠球菌感染也至关重要。
屎肠球菌耐药基因
屎肠球菌是一种常见的细菌,它可以引起多种感染,如皮肤和软组织感染、泌尿道感染和呼吸道感染。
在过去的几十年里,屎肠球菌的耐药性已成为公共卫生问题。
屎肠球菌耐药基因是使细菌对抗药物的基因。
这些基因可以使屎肠球菌对一些常用的抗生素产生耐药性,包括青霉素、甲氧西林和万古霉素等。
由于耐药基因的存在,屎肠球菌感染可能更难治疗,因为通常使用的抗生素可能对这些细菌无效。
目前已经发现了多种屎肠球菌耐药基因,其中一些基因提供了对多种抗生素的耐药性。
其中一些耐药基因可以传递给其他细菌,从而导致多药耐药的细菌株的出现。
对屎肠球菌耐药基因的研究非常重要,以便开发新的抗生素来对抗这些细菌感染。
此外,加强卫生措施和正确使用抗生素也是减少细菌耐药性问题的关键措施。
屎肠球菌开放分类:健康生活细菌屎肠球菌属肠球菌属,是人及动物肠道中正常菌群的一部分,肠球菌为圆形或椭圆形、呈链状排列的革兰阳性球菌,无芽胞,无鞭毛,为需氧或兼性厌氧菌。
摘要目录1简介2耐药特征3耐药性分析4溶血素形成过程5生物学特性6对抗生素耐药性分析7应用研究8潜在危害性屎肠球菌- 简介屎肠球菌图册屎肠球菌是动物肠道正常菌群中的菌类,因其能产生乳酸,所以归属于乳酸菌类。
屎肠球菌是一种益生菌,对维持动物肠道菌群生态平衡起到重要作用,特别是在幼龄动物的肠道保健和疾病的防疫和治疗上有突出的表现。
许多企业将其制成微生态饲料添加剂,但是屎肠球菌的抗逆性较差,在生产加工中不能有效的保持其活性,对屎肠球菌的利用产生了很大的问题。
屎肠球菌,革兰氏阳性,椭圆形或球杆状,无芽孢,无鞭毛。
生长温度为30℃~40℃,适宜pH为5.0~7.5。
最适生长温度为35~38℃。
屎肠球菌是兼性厌氧的乳酸菌,和大多数的乳酸菌一样,其耐酸性耐高温性等抗逆性能差,但是相对于严格厌氧、培养和保存条件都苛刻的双歧杆菌、乳杆菌来说,屎肠球菌更是便于生产和使用的首选菌种。
常规的乳酸菌必须在动物肠道的特定部位才能产生功效,天然乳酸菌不耐饲料制粒时的高温、胃酸及胆盐的侵蚀。
经饲料制粒后大多数乳酸菌会死亡,在胃里大约30min后也会死亡殆尽,安全到达肠道发挥作用的活菌数非常低,也无法吸附在肠粘膜的适当位置,随着粪便排出体外。
屎肠球菌代谢可以产生有机酸、过氧化氢细菌素等物质,这些物质具有抑制病原菌和腐败菌,提高免疫力、改善畜产品品质等生理功效。
其中代谢产生的细菌素可有效治疗养殖场中常见的顽固疾病,如对葡萄球菌、梭状芽孢杆菌、沙门氏菌和志贺氏菌有拮抗作用,并且不留有药残。
代谢产生大量乳酸,可以显著降低动物肠道pH,保持肠道的酸性环境,抑制病原菌的生长,对致病菌痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、弯曲杆菌、葡萄球菌等致病菌有拮抗作用。
过氧化氢能抑制和杀死革兰氏阴性菌和过氧化氢阳性菌如假单胞菌属、大肠杆菌类、沙门氏菌属。
屎肠球菌- 耐药特征了解粪肠球菌和屎肠球菌在临床标本中的分布及对常用抗菌药物的耐药性,比较不同标本中两种肠球菌的耐药性,为临床治疗提供参考。
方法常规法进行菌种鉴定,纸片扩散法进行药物敏感试验。
结果420株肠球菌属,来源于尿液、脓液分泌物、痰液,分别占43%、20%、14%位居各类标本中的前3位,粪肠球菌对青霉素、氨苄西林和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别为23.0%、17.6%和21.2%,明显低于屎肠球菌对这3种抗菌药物的耐药率(90.0%、87.0%和87.7%),而屎肠球菌对氯霉素和四环素的耐药率分别为7.9%和24.6%,明显低于粪肠球菌对这两种抗菌药物的耐药率(43.8%和74.4%),两种肠球菌中,未发现万古霉素耐药株;尿液标本中粪肠球菌对呋喃妥因的耐药率明显低于屎肠球菌。
结论临床标本中,肠球菌属在尿液中的分布最高;粪肠球菌和屎肠球菌的耐药谱明显不同,在治疗时,应根据不同的菌种选择用药,由于肠球菌属对万古霉素的耐药率极低,在重症感染时,可选用万古霉素进行治疗。
屎肠球菌- 耐药性分析屎肠球菌图册一、材料和方法1、标本来源 2004年1月至2007年12月本院住院患者的临床标本中分离出的144株粪肠球菌和121株屎肠球菌(多次分离的重复株以第一次计算),其中尿80株、痰75株、分泌物27株、血25株、引流液17株、胆汁14株、脓液10株、导管9株、腹水8株。
2、医院感染的诊断标准按照卫生部医政司医院感染监控小组制定的医院感染的诊断标准。
3、细菌培养鉴定和药敏试验按常规的方法对住院患者的各种临床标本进行细菌的培养分离,用VITEK2全自动微生物鉴定仪及配套试剂进行细菌的鉴定及药敏试验;鉴定卡GP、药敏卡AST-353。
4、质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923、粪肠球菌A TCC29212。
5、统计学方法 WHONET5。
4软件统计彩χ2检验,检验水准α=0.05。
二、结果1、HLAR株的分布情况 265株中引起医院感染的HLAR主要分布在ICU占26.8%(71/265),其次肾内科17.0%(45/265)及神经内科8.3%(22/265),感染以泌尿系统感染为主占30.2%(80/265),其次呼吸道28.3%(75/265)、伤口10.2%(27/265)及血液9.4%(25/265)。
2、HLAR株对临床常用抗生素的耐药情况 265株 HLAR肠球菌中粪肠球菌占54.3%(144/265),屎肠球菌占45.7%(121/265),两者对临床常用的11种药物表现为多重耐药,且屎肠球菌对氨苄西林、阿莫西林/棒酸、亚安培南、环丙沙星、莫西沙星的耐药率明显高于粪肠球菌,但粪肠球菌对喹奴普汀/达福普汀的耐药率明显高于屎肠球菌(P<0.05),对万古霉素、替考拉宁均敏感,对力奈唑烷耐药率分别为0及4.1%。
三、讨论在临床上由肠球菌引起的感染中以粪肠球菌及屎肠球菌为主,近年来随着抗菌药物的广泛开发与应用,肠球菌对多种抗菌药物特别是对氨基糖甙类高水平耐药的增多,使肠球菌成为导致医院感染的重要致病菌,另由于粪肠球菌与屎肠球菌对抗生素的耐药有一定的差异,因此为临床治疗肠球菌的感染带来了挑战。
从结果可见,对氨基糖甙类高水平耐药粪肠球菌和屎肠球菌主要引起泌尿生殖道及呼吸系统的感染,分别为30.2%(80/265)、28.3%(75/265),与相关的报道基本相符,粪肠球菌与屎肠球菌的体外药敏结果显示其对V AN、TEC均敏感,而对LZD耐药率为0.0%及4.1%;说明V AN、TEC及LZD对粪肠球菌和屎肠球菌均有较强的体外抗菌活性,提示这三种药物可作为治疗由其引起的重症感染时的经验用药。
本次调查结果显示屎肠球菌对AMP、AMC、IMP等β-内酰胺类的耐药率均在90.0%以上,明显高于粪肠球菌的10.0%以下,对CIP、MFX等喹诺酮类抗生素的耐药率为88.4%、97.5%,明显高于粪肠球菌的56.30%及47.9%;而粪肠球菌对QD、TE的耐药率分别为95.8%、78.5%,高于屎肠球菌的41.3%、54.5%,结果与资料报道相近;两者对红霉素的耐药率均大于90.0%,比罗燕萍[3]所报道的偏高。
这可能与肠球菌属内各种之间的耐药机制不同有关,由此细菌室分离的肠球菌应准确鉴定到种的水平,以便指导临床合理选用抗生素。
因此,临床在治疗肠球菌引起的感染时一定要注意引起感染的肠球菌的类型而针对性的选用抗生素,同时注意其是否对高水平的庆大霉素或链霉素耐药,因高水平氨基糖甙类耐药会使得氨基糖甙类与作用于细胞壁的药物如青霉素类、糖肽类的联合作用消失。
[1]屎肠球菌- 溶血素形成过程屎肠球菌图册其他毒力因子1、聚集物质AS (aggregation substance)聚集物质是肠球菌的表面蛋白。
最初研究表明,它是细菌质粒得以进行接合传递的蛋白。
以后发现该蛋白除了介导细菌细菌之间的接触外,也促进细菌与宿主细胞的粘附而与许多感染性疾病相关。
研究表明与健康人群来源的菌株相比,临床来源的菌株聚集物质基因Asa1呈高流行。
1998年Schlievert-PM等在研究肠球菌引起的心脏感染的小鼠模型时,发现给小鼠注射含有聚集物质AS及结合物质EBS (enterococcal binding substance, AS受体)的菌株AS+EBS+株,小鼠出现症状并死亡。
给予AS-EBS-株则均存活。
进一步在用导管插入术构造心内膜炎的小鼠模型中发现,AS+EBS+菌株产生的赘生物较大,脾肿大更严重,认为AS在心内膜炎中起重要作用。
AS聚集物质的致病机制主要是对真核细胞的黏附。
聚集物质C端含有LPXTG细胞壁锚着基序结合细菌,N末端含有两个Arg-Gly-Asp 基序即RGD,而相邻的N末端区可以被巨噬细胞结合,也可被真核细胞表面受体整合素CD11b/CD18(CR3)识别,通过整合素的介导间接提高细菌的黏附能力。
体外实验观察到AS有助于肠球菌黏附肠上皮细胞、肾小管细胞及心脏内皮细胞。
聚集物质还有助于肠球菌粘连至细胞外基质蛋白如:纤维蛋白、纤维连接蛋白、血小板凝血酶敏感蛋白、玻璃粘连蛋白、胶原Ⅰ型等,这种黏附是导致宿主细胞感染的第一步。
2、表面蛋白esp (enterococcus surface protein)esp基因最初是由shankar在临床分离的粪肠球菌E.faecalis中发现的,带有该基因的菌株引起多重感染,后来陆续在屎肠球菌E.faecium中也发现了esp基因。
研究表明含有esp基因的临床分离菌株普遍具有生物膜形成能力如: Esp有助于E.faecalis在膀胱中持续存在,从而提高感染能力。
Esp还可促进细菌对无生命物质的黏附并形成生物膜,如体外试验中esp蛋白可在聚苯乙烯或聚氯乙稀表面形成膜。
生物膜的形成可以使细菌的感染更加持久,呈慢性趋势[65-67]。
因此,肠球菌在尿路感染中的分离率较高。
E.faecalis的Esp蛋白是一种由1873个氨基酸组成的细胞壁相关蛋白。
esp蛋白与金黄色葡萄球菌的膜形成相关蛋白Bsp结构上具有相似性。
其N末端的氨基酸序列(50-743aa)与数据库的序列无相似性,中间核心区序列(744-1665aa)的球形结构同B型链球菌的Calpha 及Rib蛋白结构相似,C末端重复序列(1666-1873aa)含有膜形成疏水区及一个较小变异的LPXTGX基序,大多数革兰阳性菌的胞膜相关蛋白存在此基序。
3、心内膜炎抗原efaAefaA是一种分泌到血清中结合胞壁的蛋白,是肠球菌的又一表面黏附素蛋白,和口腔链球菌的黏附素有显著的同源性。
肠球菌是引起感染性心内膜炎的第三大原因,约导致5-20%自身心内膜炎,6-7%人工心内膜炎病例。
肠球菌通过efaA结合心脏组织基质,引起心内膜感染。
有报道E.faecalis的efaA 在小鼠腹膜炎模型中,也有致病性。
4、胶原结合蛋白ace (accessory colonization factor)胶原结合蛋白是肠球菌表面的黏附素,又称粘附聚集因子,属于MSCRAMM家族(microbial surface components recognizing adhesive matrix mole- cules),可以介导肠球菌黏附胶原I型和胶原IV型及层粘连蛋白等,是肠球菌的毒力因子[70]。
在不同类肠球菌中有不同的名称,在粪肠球菌中为Ace,在屎肠球菌中称Acm。
Ace在粪肠球菌E.faecalis中检出率比较低。
屎肠球菌Acm与金黄色葡萄球菌胶原黏附素Cna总体有62%的同源性,也是潜在的致病因子。
5、明胶酶gelE(gelatinase)据报道几乎一半的临床分离菌株中有明胶酶表达,而在健康个体中明胶酶分离率约为27%。